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基于线粒体损伤探讨双酚A诱导小鼠睾丸间质细胞凋亡的研究: 1; 作者杨文哲刘克祥 +4 位作者王诗睿赵彤潘飞龙赵树臣赵立佳《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期3739-3751,共13页; 【目的】从线粒体损伤角度探究双酚A(BPA)暴露引起小鼠睾丸间质细胞(TM3)凋亡的作用机制。【方法】利用不同浓度BPA(0、10、30、60、90、120、150μmol/L)处理TM3细胞24 h后,采用CCK-8法筛选出引起细胞凋亡的最低BPA浓度。将TM3细胞随... 展开更多; 关键词双酚A 氧化应激线粒体损伤凋亡小鼠睾丸间质细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

菟丝子黄酮对BPA致小鼠睾丸间质细胞分泌雄性激素异常的保护作用被引量：13: 2; 作者陶金良王霄 +4 位作者魏媛媛秦姣姣钟秀会包永占史万玉《动物医学进展》北大核心 2019年第5期71-75,共5页; 为研究菟丝子黄酮对双酚A(BPA)干扰小鼠睾丸间质细胞激素分泌的缓解作用,以TM3小鼠睾丸间质细胞为对象,采用1μg/mL～500μg/mL的菟丝子黄酮与TM3(小鼠睾丸间质细胞)细胞共同培养24 h,以MTT法检测细胞增殖,确定菟丝子黄酮对TM3细胞的安... 展开更多; 关键词菟丝子黄酮双酚A 小鼠睾丸间质细胞睾酮黄体生成素; 在线阅读下载PDF 职称材料

弓形虫感染对小鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的影响及机制研究被引量：1: 3; 作者王海论黄晓宇 +4 位作者余春辰殷光文王登峰王磊黄志坚《动物医学进展》北大核心 2022年第10期50-55,共6页; 为探究弓形虫RH株速殖子体外感染对小鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的影响,构建了弓形虫与小鼠睾丸间质细胞共培养试验模型。将纯化后的弓形虫虫体与细胞按照0∶1、1∶5、1∶1、5∶1、10∶1、20∶1的比例共培养6 h,筛选最佳的弓形虫和细胞共... 展开更多; 关键词弓形虫小鼠睾丸间质细胞睾酮类固醇激素合成酶共培养; 在线阅读下载PDF 职称材料

双酚A通过上调Apoa 1基因的表达抑制TM3细胞睾酮合成: 4; 作者赵彤杨文哲 +4 位作者潘飞龙赵树臣刘克祥吕占军赵立佳《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3516-3525,共10页; 旨在从脂质代谢的角度探讨载脂蛋白A1(apolipoprotein A1,Apoa 1)是否介导了双酚A(bisphenol A,BPA)暴露所致小鼠睾丸间质细胞株(TM3)睾酮合成的降低。将TM3细胞随机分为不同浓度的BPA暴露剂量(0、5、10、20、40、60、80μmol·L^(-... 展开更多; 关键词双酚A(BPA) 载脂蛋白A1(Apoa 1) 小鼠睾丸间质细胞(TM3) 睾酮(T); 在线阅读下载PDF 职称材料

鹿尾蛋白与多肽制备工艺优化及其对TM3细胞增殖活性研究被引量：5: 5; 作者郭鑫吴梦阳 +4 位作者郭子奕时坤李建明宗颖杜锐《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第22期181-186,共6页; 以梅花鹿尾为研究对象,采用正交试验优化超声水提蛋白工艺及水酶法提取多肽工艺,比较两种最佳工艺所得物对小鼠睾丸间质细胞(TM3)增殖活性的影响。结果表明,超声水提蛋白工艺最佳条件为料液比1∶5 g/mL、超声功率200 W、提取时间1 h、... 展开更多; 关键词鹿尾蛋白多肽酶解产物 CCK-8法小鼠睾丸间质细胞(TM3) 增殖活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于线粒体损伤探讨双酚A诱导小鼠睾丸间质细胞凋亡的研究: 1; 作者杨文哲刘克祥王诗睿赵彤潘飞龙赵树臣赵立佳; 机构东北农业大学动物医学学院黑龙江省教育厅普通疾病防治重点实验室; 出处《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期3739-3751,共13页; 基金黑龙江省自然科学基金优秀青年基金项目(YQ2022C018)。; 文摘【目的】从线粒体损伤角度探究双酚A(BPA)暴露引起小鼠睾丸间质细胞(TM3)凋亡的作用机制。【方法】利用不同浓度BPA(0、10、30、60、90、120、150μmol/L)处理TM3细胞24 h后,采用CCK-8法筛选出引起细胞凋亡的最低BPA浓度。将TM3细胞随机分为对照组(0μmol/L BPA)和BPA组(60μmol/L BPA),每组3个重复,各处理24 h。通过倒置光学显微镜观察细胞状态,TUNEL染色观察细胞凋亡。再将TM3细胞随机分为对照组(0μmol/L BPA)、BPA组(60μmol/L BPA)、BPA和N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)共处理组(60μmol/L BPA+5 mmol/L NAC),每组3个重复,各处理24 h。ELISA法检测细胞培养上清中丙二醛(MDA)含量和总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性,试剂盒检测细胞内活性氧(ROS)水平,JC-1染色观察细胞线粒体膜电位,实时定量PCR检测细胞中谷胱甘肽过氧化物酶1(Gpx1)、谷氨酸-半胱氨酸连接酶修饰剂亚基(Gclm)、过氧化氢酶(Cat)、谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基(Gclc)、线粒体融合蛋白2(Mfn2)、NAD依赖性蛋白脱乙酰酶Sirtuin3(Sirt3)、半胱天冬酶3(Casp3)、细胞色素C(Cycs)、B淋巴细胞瘤-2(BCL-2)相关X蛋白(Bax)基因mRNA表达水平,Western blotting检测BAX和细胞凋亡调节因子BCL-2蛋白的相对表达量,流式细胞仪检测细胞凋亡率。【结果】TM3细胞在60μmol/L BPA处理24 h后,细胞相对存活率开始出现极显著下降(P<0.01),细胞凋亡率极显著增高(P<0.01),细胞数量明显减少。与对照组相比,60μmol/L BPA处理24 h后,TM3细胞中MDA含量极显著增加(P<0.01),T-SOD活性极显著下降(P<0.01),抗氧化相关基因(Gpx 1、Cat、Gclm、Gclc基因)mRNA表达水平显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01),ROS生成极显著增加(P<0.01);细胞中红/绿荧光强度比值极显著下降(P<0.01),线粒体功能相关基因(Mfn 2、Sirt 3基因)mRNA表达水平极显著降低(P<0.01),线粒体凋亡通路相关基因(Casp 3、Cycs、Bax基因)mRNA表达水平极显著升高(P<0.01),BAX蛋白表达量极显著升高(P<0.01),BCL-2蛋白的相对表达量极显著降低(P<0.01),细胞凋亡率极显著升高(P<0.01)。与BPA处理组相比,BPA+NAC处理组TM3细胞中MDA含量显著降低(P<0.05),T-SOD活性显著升高(P<0.05),抗氧化相关基因(Gpx 1、Cat、Gclm、Gclc基因)mRNA表达水平显著升高(P<0.05),ROS生成极显著减少(P<0.01),细胞中绿色荧光极显著减弱,红色荧光极显著增强,红/绿荧光强度比值显著升高(P<0.05),线粒体功能相关基因(Mfn 2、Sirt 3基因)mRNA表达水平显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),线粒体凋亡通路相关基因(Casp 3、Cycs、Bax基因)mRNA表达水平极显著降低(P<0.01),BAX蛋白表达量极显著降低(P<0.01),BCL-2蛋白相对表达量极显著升高(P<0.01),细胞凋亡率极显著下降(P<0.01)。【结论】BPA暴露可导致TM3细胞发生氧化应激,引起线粒体功能受损,从而诱导细胞凋亡。; 关键词双酚A 氧化应激线粒体损伤凋亡小鼠睾丸间质细胞; Keywords bisphenol A oxidative stress mitochondrial damage apoptosis mouse Leydig cells; 分类号 S852.21 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名菟丝子黄酮对BPA致小鼠睾丸间质细胞分泌雄性激素异常的保护作用被引量：13: 2; 作者陶金良王霄魏媛媛秦姣姣钟秀会包永占史万玉; 机构河北农业大学中兽医学院; 出处《动物医学进展》北大核心 2019年第5期71-75,共5页; 基金国家自然科学基金(31872506); 文摘为研究菟丝子黄酮对双酚A(BPA)干扰小鼠睾丸间质细胞激素分泌的缓解作用,以TM3小鼠睾丸间质细胞为对象,采用1μg/mL～500μg/mL的菟丝子黄酮与TM3(小鼠睾丸间质细胞)细胞共同培养24 h,以MTT法检测细胞增殖,确定菟丝子黄酮对TM3细胞的安全剂量。然后采用1μmol/mL～200μmol/mL的双酚A干扰TM3细胞24 h,以MTT法检测细胞增殖,通过TM3细胞的相对存活率,确定BPA最适染毒剂量;最后先用菟丝子黄酮和TM3细胞共同培养4 h后,再用BPA干扰TM3细胞24 h。通过ELISA检测细胞上清液睾酮(T)和黄体生成素(LH)的含量,并分析菟丝子黄酮对BPA干扰小鼠睾丸间质细胞激素分泌的缓解作用。结果表明,250μg/mL～400μg/mL的菟丝子黄酮(等差法)对TM3细胞作用24 h后,有极显著的增殖效果(P<0.01);80μmol/mL的BPA对TM3细胞作用24 h后,细胞存活率为81%,可作为最适染毒剂量;菟丝子黄酮保护4 h后,再用BPA干扰12 h、24 h后,不同浓度的菟丝子黄酮可显著升高TM3细胞睾酮和黄体生成素的水平(P<0.05)。说明菟丝子黄酮对BPA致小鼠睾丸间质细胞睾酮和黄体生成素的分泌异常具有明显的保护作用。; 关键词菟丝子黄酮双酚A 小鼠睾丸间质细胞睾酮黄体生成素; Keywords Cuscuta chinensis flavonoids bisphenol A (BPA) mouse testicular interstitial cell testosterone Luteinizing hormone(LH); 分类号 S852.2 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名弓形虫感染对小鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的影响及机制研究被引量：1: 3; 作者王海论黄晓宇余春辰殷光文王登峰王磊黄志坚; 机构福建农林大学动物科学学院(蜂学学院)/福建省动物药物工程实验室; 出处《动物医学进展》北大核心 2022年第10期50-55,共6页; 基金福建省中青年教师教育科研项目(JAT190123) 福建省自然科学基金项目(2020J05024)。; 文摘为探究弓形虫RH株速殖子体外感染对小鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的影响,构建了弓形虫与小鼠睾丸间质细胞共培养试验模型。将纯化后的弓形虫虫体与细胞按照0∶1、1∶5、1∶1、5∶1、10∶1、20∶1的比例共培养6 h,筛选最佳的弓形虫和细胞共培养比例。在弓形虫与细胞比例为20∶1条件下,共培养3 h、6 h、9 h和12 h,筛选最佳共培养时间。同时,使用瑞氏-吉姆萨染色液对细胞进行染色,观察共培养情况下细胞状态。培养结束,ELISA检测细胞上清的睾酮浓度,Western blot检测细胞内睾酮分泌相关蛋白StAR、CYP11A1、3β-HSD和CYP17A1的表达水平。结果表明,弓形虫与细胞共培养6 h,当弓形虫与细胞比例高于5∶1时,睾酮分泌量显著增加(P<0.05)。弓形虫与细胞比例为20∶1时,睾酮分泌量随培养时间的延长而增加,且感染组明显高于对照组(P<0.05)。染色结果发现,弓形虫1 h内即可进入MLTC-1细胞,12 h细胞内出现大量空泡,60 h左右细胞大量破裂。Western blot结果显示,共培养12 h时,感染组CYP11A1、3β-HSD和CYP17A1的蛋白表达量较对照组显著降低(P<0.05)。说明弓形虫可在短时间内进入MLTC-1细胞并通过影响类固醇激素合成酶的表达来刺激睾酮的分泌,但随着时间的延长,弓形虫会抑制相关酶的表达,抑制细胞的正常功能。; 关键词弓形虫小鼠睾丸间质细胞睾酮类固醇激素合成酶共培养; Keywords Toxoplasma gondii mouse Leydig cell testosterone steroid synthase co-culture; 分类号 S852.729 [农业科学—基础兽医学] S865.13 [农业科学—野生动物驯养]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名双酚A通过上调Apoa 1基因的表达抑制TM3细胞睾酮合成: 4; 作者赵彤杨文哲潘飞龙赵树臣刘克祥吕占军赵立佳; 机构东北农业大学动物医学学院黑龙江省教育厅普通疾病防治重点实验室; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3516-3525,共10页; 基金黑龙江省自然科学基金优秀青年基金项目(YQ2022C018)。; 文摘旨在从脂质代谢的角度探讨载脂蛋白A1(apolipoprotein A1,Apoa 1)是否介导了双酚A(bisphenol A,BPA)暴露所致小鼠睾丸间质细胞株(TM3)睾酮合成的降低。将TM3细胞随机分为不同浓度的BPA暴露剂量(0、5、10、20、40、60、80μmol·L^(-1))组,0μmol·L^(-1)BPA为对照组(CON)。给予相应剂量处理24 h后,运用CCK-8法检测TM3细胞活力,确定BPA最适染毒剂量;通过ELISA检测TM3细胞培养上清液睾酮(testosterone,T)含量;利用RT-qPCR检测TM3细胞脂质代谢相关基因Apoa1、Apoa 2(apolipoprotein A2)、Apoc 3(apolipoprotein C3)的mRNA表达水平;运用Western blot和免疫荧光方法检测APOA1蛋白表达水平;采用油红O染色观察细胞内脂滴累积情况。结果表明,20μmol·L^(-1)BPA处理24 h对TM3细胞活力无显著影响,40μmol·L^(-1)BPA处理24 h后,TM3细胞活力受到极显著抑制(P<0.01);此外,20μmol·L^(-1)BPA处理TM3细胞24 h后,培养上清液中睾酮含量极显著低于对照组(P<0.01),Apoa 1基因的mRNA表达水平及蛋白表达量极显著升高(P<0.001),但Apoa 2和Apoc 3基因的mRNA表达水平无显著变化;与对照组相比,20μmol·L^(-1)BPA处理24 h,TM3细胞的脂滴累积量极显著降低(P<0.0001)。综上,BPA可通过上调Apoa 1基因的表达水平,增强胆固醇逆向转运(reverse cholesterol transport,RCT),引起TM3细胞内的脂滴含量减少,导致TM3细胞的睾酮合成分泌降低。; 关键词双酚A(BPA) 载脂蛋白A1(Apoa 1) 小鼠睾丸间质细胞(TM3) 睾酮(T); Keywords bisphenol A(BPA) apolipoprotein A1(Apoa 1) mouse Leydig cells(TM3) testosterone(T); 分类号 S814 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鹿尾蛋白与多肽制备工艺优化及其对TM3细胞增殖活性研究被引量：5: 5; 作者郭鑫吴梦阳郭子奕时坤李建明宗颖杜锐; 机构吉林农业大学中药材学院教育部动物生产及产品质量安全重点实验室; 出处《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第22期181-186,共6页; 基金国家重点研发计划资助(2018YFC1706603) 吉林省科技厅科技支撑计划(20160209006YY); 文摘以梅花鹿尾为研究对象,采用正交试验优化超声水提蛋白工艺及水酶法提取多肽工艺,比较两种最佳工艺所得物对小鼠睾丸间质细胞(TM3)增殖活性的影响。结果表明,超声水提蛋白工艺最佳条件为料液比1∶5 g/mL、超声功率200 W、提取时间1 h、提取温度40℃,在此条件下蛋白含量为60.72%±0.56%;水酶法提取多肽工艺中最佳蛋白酶为胰蛋白酶,酶解最佳条件为pH8、加酶量1500 U/g、酶解时间4 h、提取温度50℃,在此条件下水解度为22.85%±0.35%。水酶法提取鹿尾多肽对小鼠睾丸间质细胞(TM3)增殖活性优于超声水提鹿尾蛋白。; 关键词鹿尾蛋白多肽酶解产物 CCK-8法小鼠睾丸间质细胞(TM3) 增殖活性; Keywords Cauda Cervi peptide enzymatic hydrolysis CCK-8 method TM3 cells proliferation activity; 分类号 TS255.1 [轻工技术与工程—农产品加工及贮藏工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	基于线粒体损伤探讨双酚A诱导小鼠睾丸间质细胞凋亡的研究	杨文哲刘克祥王诗睿赵彤潘飞龙赵树臣赵立佳	《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心	2024	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	菟丝子黄酮对BPA致小鼠睾丸间质细胞分泌雄性激素异常的保护作用	陶金良王霄魏媛媛秦姣姣钟秀会包永占史万玉	《动物医学进展》北大核心	2019	13	在线阅读下载PDF 职称材料
3	弓形虫感染对小鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的影响及机制研究	王海论黄晓宇余春辰殷光文王登峰王磊黄志坚	《动物医学进展》北大核心	2022	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	双酚A通过上调Apoa 1基因的表达抑制TM3细胞睾酮合成	赵彤杨文哲潘飞龙赵树臣刘克祥吕占军赵立佳	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2024	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	鹿尾蛋白与多肽制备工艺优化及其对TM3细胞增殖活性研究	郭鑫吴梦阳郭子奕时坤李建明宗颖杜锐	《食品工业科技》 CAS 北大核心	2019	5	在线阅读下载PDF 职称材料