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RSV感染小胶质细胞活化Toll样受体3、7介导炎性反应的初步研究
被引量:
1
1
作者
李振兴
云云
+3 位作者
邱欢
朱童娜
吴璇
黄升海
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2013年第8期858-863,共6页
目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染小鼠小胶质细胞(BV2)后,Toll样受体3(TLR3)和Toll样受体7(TLR7)的活化及其介导的炎性反应。方法①RSV体外感染BV2,利用免疫荧光技术分别在12、24和36 h检测细胞内RSV-F蛋白。②分别于感染4、8、12、16...
目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染小鼠小胶质细胞(BV2)后,Toll样受体3(TLR3)和Toll样受体7(TLR7)的活化及其介导的炎性反应。方法①RSV体外感染BV2,利用免疫荧光技术分别在12、24和36 h检测细胞内RSV-F蛋白。②分别于感染4、8、12、16、24和36 h收集细胞,以未感染细胞作为正常组。用TRIzol提取细胞总RNA,通过半定量RT-PCR法检测TLR3、TLR7的mRNA转录水平的变化。③Western blot法分别检测感染4、8、12、16、24和36 h后的细胞内核转录因子(NF-κB)蛋白水平的变化。④ELISA法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量的变化。结果①荧光显微镜下可以见到FITC标记RSV-F蛋白的绿色荧光随感染时间的延长而增强。②TLR3、TLR7在感染RSV后mRNA水平在观察的时间内表达均升高并呈时间依赖性关系。③各感染时间点NF-κB蛋白水平表达均升高并呈时间依赖性关系。④感染RSV后,细胞上清液中TNF-α含量均升高并呈时间依赖性关系。结论 RSV感染BV2后可以上调TLR3、TLR7,从而使下游细胞炎性因子TNF-α分泌升高,过度的炎性作用可能与神经系统症状的发生相关。
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关键词
呼吸道合胞病毒
TOLL样受体3
TOLL样受体7
核转
录因子
小鼠小胶质细胞
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职称材料
TLR4介导的BV-2细胞抗HCV固有免疫应答机制初步研究
被引量:
2
2
作者
刘强
赵春梅
王振海
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期426-429,共4页
目的:观察BV-2细胞感染HCV后IFN-β、IL-6分泌和TLR4表达相关性,初步探讨TLR4是否介导参与中枢神经系统抗HCV固有免疫应答及其可能机制。方法:将BV-2细胞接种于24孔培养板,贴壁后换用含20%HCV阳性血清的培养液感染细胞,为HCV实验组,同...
目的:观察BV-2细胞感染HCV后IFN-β、IL-6分泌和TLR4表达相关性,初步探讨TLR4是否介导参与中枢神经系统抗HCV固有免疫应答及其可能机制。方法:将BV-2细胞接种于24孔培养板,贴壁后换用含20%HCV阳性血清的培养液感染细胞,为HCV实验组,同时设正常血清组和空白对照组。应用流式细胞术检测各组BV-2细胞TLR4蛋白水平的表达;用RT-PCR观察阻断TLR4后各组BV-2细胞TLR4mRNA表达变化;用ELISA检测阻断TLR4后各组BV-2细胞IFN-β、IL-6分泌变化。结果:HCV实验组TLR4表达和IFN-β、IL-6分泌均高于正常血清组及空白对照组(P<0.01);阻断TLR4的HCV实验组TLR4mRNA表达及IFN-β、IL-6分泌明显低于非阻断组(P<0.01)。结论:HCV感染中枢神经系统后,TLR4可通过启动下游细胞因子IL-6、IFN-β等的转录和翻译,介导参与宿主抗HCV固有免疫应答过程。
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关键词
TOLL样受体4
小鼠小胶质细胞
BV2
丙型肝炎病毒
IL-6
IFN-Β
固有免疫
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职称材料
题名
RSV感染小胶质细胞活化Toll样受体3、7介导炎性反应的初步研究
被引量:
1
1
作者
李振兴
云云
邱欢
朱童娜
吴璇
黄升海
机构
安徽医科大学微生物学教研室
安徽中医学院中西医结合临床学院
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2013年第8期858-863,共6页
基金
安徽高校省级自然科学研究重点项目资助(编号:KJ2012A152)
文摘
目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染小鼠小胶质细胞(BV2)后,Toll样受体3(TLR3)和Toll样受体7(TLR7)的活化及其介导的炎性反应。方法①RSV体外感染BV2,利用免疫荧光技术分别在12、24和36 h检测细胞内RSV-F蛋白。②分别于感染4、8、12、16、24和36 h收集细胞,以未感染细胞作为正常组。用TRIzol提取细胞总RNA,通过半定量RT-PCR法检测TLR3、TLR7的mRNA转录水平的变化。③Western blot法分别检测感染4、8、12、16、24和36 h后的细胞内核转录因子(NF-κB)蛋白水平的变化。④ELISA法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量的变化。结果①荧光显微镜下可以见到FITC标记RSV-F蛋白的绿色荧光随感染时间的延长而增强。②TLR3、TLR7在感染RSV后mRNA水平在观察的时间内表达均升高并呈时间依赖性关系。③各感染时间点NF-κB蛋白水平表达均升高并呈时间依赖性关系。④感染RSV后,细胞上清液中TNF-α含量均升高并呈时间依赖性关系。结论 RSV感染BV2后可以上调TLR3、TLR7,从而使下游细胞炎性因子TNF-α分泌升高,过度的炎性作用可能与神经系统症状的发生相关。
关键词
呼吸道合胞病毒
TOLL样受体3
TOLL样受体7
核转
录因子
小鼠小胶质细胞
Keywords
respiratory syncytial virus
Toll-like receptor 3
Toll-like receptor 7
nuclear factor-kappa B
BV2
分类号
R373.14 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
TLR4介导的BV-2细胞抗HCV固有免疫应答机制初步研究
被引量:
2
2
作者
刘强
赵春梅
王振海
机构
宁夏医科大学总医院神经内科宁夏颅脑疾病重点实验室
宁夏医科大学
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期426-429,共4页
基金
国家自然科学基金(30760067)
宁夏自然科学基金项目(NZ0790)
+1 种基金
教育部春晖计划资助项目(Z-2008-1-75002)
宁夏医科大学"博士学位建设学科"开放课题(KF2010-34)资助
文摘
目的:观察BV-2细胞感染HCV后IFN-β、IL-6分泌和TLR4表达相关性,初步探讨TLR4是否介导参与中枢神经系统抗HCV固有免疫应答及其可能机制。方法:将BV-2细胞接种于24孔培养板,贴壁后换用含20%HCV阳性血清的培养液感染细胞,为HCV实验组,同时设正常血清组和空白对照组。应用流式细胞术检测各组BV-2细胞TLR4蛋白水平的表达;用RT-PCR观察阻断TLR4后各组BV-2细胞TLR4mRNA表达变化;用ELISA检测阻断TLR4后各组BV-2细胞IFN-β、IL-6分泌变化。结果:HCV实验组TLR4表达和IFN-β、IL-6分泌均高于正常血清组及空白对照组(P<0.01);阻断TLR4的HCV实验组TLR4mRNA表达及IFN-β、IL-6分泌明显低于非阻断组(P<0.01)。结论:HCV感染中枢神经系统后,TLR4可通过启动下游细胞因子IL-6、IFN-β等的转录和翻译,介导参与宿主抗HCV固有免疫应答过程。
关键词
TOLL样受体4
小鼠小胶质细胞
BV2
丙型肝炎病毒
IL-6
IFN-Β
固有免疫
Keywords
Toll-like receptor 4; Mouse microglia BV-2; Hepatitis C virus; IFN-β; IL-6; Innate immune;
分类号
R74 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
RSV感染小胶质细胞活化Toll样受体3、7介导炎性反应的初步研究
李振兴
云云
邱欢
朱童娜
吴璇
黄升海
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2013
1
在线阅读
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职称材料
2
TLR4介导的BV-2细胞抗HCV固有免疫应答机制初步研究
刘强
赵春梅
王振海
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011
2
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