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RSV感染小胶质细胞活化Toll样受体3、7介导炎性反应的初步研究 被引量:1
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作者 李振兴 云云 +3 位作者 邱欢 朱童娜 吴璇 黄升海 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第8期858-863,共6页
目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染小鼠小胶质细胞(BV2)后,Toll样受体3(TLR3)和Toll样受体7(TLR7)的活化及其介导的炎性反应。方法①RSV体外感染BV2,利用免疫荧光技术分别在12、24和36 h检测细胞内RSV-F蛋白。②分别于感染4、8、12、16... 目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染小鼠小胶质细胞(BV2)后,Toll样受体3(TLR3)和Toll样受体7(TLR7)的活化及其介导的炎性反应。方法①RSV体外感染BV2,利用免疫荧光技术分别在12、24和36 h检测细胞内RSV-F蛋白。②分别于感染4、8、12、16、24和36 h收集细胞,以未感染细胞作为正常组。用TRIzol提取细胞总RNA,通过半定量RT-PCR法检测TLR3、TLR7的mRNA转录水平的变化。③Western blot法分别检测感染4、8、12、16、24和36 h后的细胞内核转录因子(NF-κB)蛋白水平的变化。④ELISA法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量的变化。结果①荧光显微镜下可以见到FITC标记RSV-F蛋白的绿色荧光随感染时间的延长而增强。②TLR3、TLR7在感染RSV后mRNA水平在观察的时间内表达均升高并呈时间依赖性关系。③各感染时间点NF-κB蛋白水平表达均升高并呈时间依赖性关系。④感染RSV后,细胞上清液中TNF-α含量均升高并呈时间依赖性关系。结论 RSV感染BV2后可以上调TLR3、TLR7,从而使下游细胞炎性因子TNF-α分泌升高,过度的炎性作用可能与神经系统症状的发生相关。 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 TOLL样受体3 TOLL样受体7 核转 录因子 小鼠小胶质细胞
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TLR4介导的BV-2细胞抗HCV固有免疫应答机制初步研究 被引量:2
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作者 刘强 赵春梅 王振海 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期426-429,共4页
目的:观察BV-2细胞感染HCV后IFN-β、IL-6分泌和TLR4表达相关性,初步探讨TLR4是否介导参与中枢神经系统抗HCV固有免疫应答及其可能机制。方法:将BV-2细胞接种于24孔培养板,贴壁后换用含20%HCV阳性血清的培养液感染细胞,为HCV实验组,同... 目的:观察BV-2细胞感染HCV后IFN-β、IL-6分泌和TLR4表达相关性,初步探讨TLR4是否介导参与中枢神经系统抗HCV固有免疫应答及其可能机制。方法:将BV-2细胞接种于24孔培养板,贴壁后换用含20%HCV阳性血清的培养液感染细胞,为HCV实验组,同时设正常血清组和空白对照组。应用流式细胞术检测各组BV-2细胞TLR4蛋白水平的表达;用RT-PCR观察阻断TLR4后各组BV-2细胞TLR4mRNA表达变化;用ELISA检测阻断TLR4后各组BV-2细胞IFN-β、IL-6分泌变化。结果:HCV实验组TLR4表达和IFN-β、IL-6分泌均高于正常血清组及空白对照组(P<0.01);阻断TLR4的HCV实验组TLR4mRNA表达及IFN-β、IL-6分泌明显低于非阻断组(P<0.01)。结论:HCV感染中枢神经系统后,TLR4可通过启动下游细胞因子IL-6、IFN-β等的转录和翻译,介导参与宿主抗HCV固有免疫应答过程。 展开更多
关键词 TOLL样受体4 小鼠小胶质细胞BV2 丙型肝炎病毒 IL-6 IFN-Β 固有免疫
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