小鼠原始生殖细胞迁移过程中macroH2A的表达 被引量：4

1

作者 时小艳 于建宁 +2 位作者 吴宝江 马雪山 刘红林 《江苏农业科学》 北大核心 2013年第4期193-196,共4页

通过单细胞及组织石蜡切片的免疫荧光方法,探讨了小鼠原始生殖细胞(PGCs)性别分化与macroH2A的关系。结果表明:PGCs在迁移过程中,macroH2A在细胞核中的表达越来越弱,而在细胞质中的表达越来越强;到达生殖嵴性别分化结束后,雄性PGCs中mac... 通过单细胞及组织石蜡切片的免疫荧光方法,探讨了小鼠原始生殖细胞(PGCs)性别分化与macroH2A的关系。结果表明:PGCs在迁移过程中,macroH2A在细胞核中的表达越来越弱,而在细胞质中的表达越来越强;到达生殖嵴性别分化结束后,雄性PGCs中macroH2A在细胞核和细胞质中基本不表达,而在雌性PGCs细胞质中发现mac-roH2A大量表达。据此推断,macroH2A可能与后期的DNA印记快速擦除及性别分化后细胞分裂相关。 展开更多

关键词 小鼠原始生殖细胞(pgcs) macroH2A 免疫荧光

在线阅读 下载PDF 职称材料

自原始生殖细胞分离克隆小鼠ES细胞研究初报 被引量：7

2

作者 华进联 窦忠英 +2 位作者 李松 雷安民 杨春荣 《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第1期22-24,29,共4页

自交配后 9.5～ 13.5 d小鼠胎儿生殖嵴 /腺或其类似物及周围组织 ,采用与其同源胎儿成纤维细胞共培养的方式分离克隆到具小鼠 ES细胞诸多特征的胚胎生殖细胞 ( EG细胞 )系。即具有连续传代的能力 ( 1例来自交配后 11.5 d胎儿类 ES细胞传... 自交配后 9.5～ 13.5 d小鼠胎儿生殖嵴 /腺或其类似物及周围组织 ,采用与其同源胎儿成纤维细胞共培养的方式分离克隆到具小鼠 ES细胞诸多特征的胚胎生殖细胞 ( EG细胞 )系。即具有连续传代的能力 ( 1例来自交配后 11.5 d胎儿类 ES细胞传至 10代 ) ,部分细胞集落呈典型鸟巢状结构 ,AP染色呈阳性 ,体外分化或延迟传代、堆叠培养具有分化形成类胚体、上皮细胞、成纤维细胞或神经细胞等的能力。同样培养交配后 7.5～ 8.5 d和14.5～ 15 .5 d的小鼠胎儿 ,原代观察到类 ES细胞集落 ,继代培养未观察到类 ES细胞集落 ,16 .5～ 18.5 d小鼠胎儿原代培养未观察到 展开更多

关键词 原始生殖细胞 胚胎生殖细胞 ES细胞 小鼠 哺乳动物

在线阅读 下载PDF 职称材料

小鼠早期胚胎原始生殖细胞的组织化学研究 被引量：4

3

作者 诸定寿 刘英琴 +1 位作者 史小林 路欣 《首都医学院学报》 1989年第3期188-192,共5页

对妊娠12.5～16.5d小鼠胚胎的原始性腺做恒冷箱切片与胶原酶分离标本进行组织化学研究。结果证明,原始生殖细胞含有丰富的碱性磷酸酶(AKP)和亮氨酸氨基肽酶(LNAse),后者为作者第一次发现。酸性磷酸酶(ACP),非特异性酯酶(NSE),葡萄糖-6-... 对妊娠12.5～16.5d小鼠胚胎的原始性腺做恒冷箱切片与胶原酶分离标本进行组织化学研究。结果证明,原始生殖细胞含有丰富的碱性磷酸酶(AKP)和亮氨酸氨基肽酶(LNAse),后者为作者第一次发现。酸性磷酸酶(ACP),非特异性酯酶(NSE),葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase),琥珀酸脱氢酶(SDH),3-磷酸腺苷酶(ATPase),糖原及脂类含量极少。用AKP染色可把原始生殖细胞分为大、中和小3类,后者与体细胞很难区别。 展开更多

关键词 原始生殖细胞 组织化学 小鼠 胚胎

在线阅读 下载PDF 职称材料

小鼠原始生殖细胞定向分化为神经样细胞的研究 被引量：1

4

作者 孙燕 《海南医学院学报》 CAS 2009年第7期705-707,共3页

目的:探讨微囊对原始生殖细胞(PGCs)定向分化为神经样细胞的诱导效果。方法:用原代PGCs经悬浮培养获取类胚体(EBs);将孕13d胎鼠的大脑半球取出,将其中的神经干细胞(NSCs)作为包在微囊里的成分。待EBs贴壁后将含有NSCs的微囊放入其中,同... 目的:探讨微囊对原始生殖细胞(PGCs)定向分化为神经样细胞的诱导效果。方法:用原代PGCs经悬浮培养获取类胚体(EBs);将孕13d胎鼠的大脑半球取出,将其中的神经干细胞(NSCs)作为包在微囊里的成分。待EBs贴壁后将含有NSCs的微囊放入其中,同时另外孔板中放入等量的EBs让其自然分化。将微囊诱导分化出的细胞进行NESTIN、NSE和GFAP免疫染色鉴定。结果:用微囊诱导定向分化为神经样细胞的比例显著高于自然分化的比例。结论:悬浮培养可使PGCs形成EBs,将EBs贴壁培养可自发分化形成内、中和外三个胚层的细胞,即上皮样细胞、成纤维样细胞和神经样细胞。通过微囊的诱导方法可以使EGs定向分化为神经样细胞。 展开更多

关键词 原始生殖细胞 细胞分化 Western免疫印迹 神经干细胞 小鼠

在线阅读 下载PDF 职称材料

小鼠胚胎原始生殖细胞的体外培养

5

作者 马小蕊 诸定寿 +1 位作者 史小林 路欣 《首都医学院学报》 1991年第3期180-183,共4页

采用细胞生物学方法和组织培养技术研究小鼠胚胎原始生殖细胞(PGCs)的一般形态学特征及生物学特点.在体外培养条件下,PGCs 按体积大小可分大、中、小3类。本研究发现,中、小型原始生殖细胞在培养的第2、3 d 增多,形态似大型原始生殖细... 采用细胞生物学方法和组织培养技术研究小鼠胚胎原始生殖细胞(PGCs)的一般形态学特征及生物学特点.在体外培养条件下,PGCs 按体积大小可分大、中、小3类。本研究发现,中、小型原始生殖细胞在培养的第2、3 d 增多,形态似大型原始生殖细胞。培养中的 PGCs 不贴壁而悬浮生长于培养液中,培养到第6～7 d时开始死亡。体细胞(间充质细胞或间皮细胞)贴壁生长,生长旺盛,与PGCs 同时死亡。 展开更多

关键词 原始生殖细胞 体外培养 胚胎 小鼠

在线阅读 下载PDF 职称材料

不同时期鸡胚原始生殖细胞的分离及存活时间的研究 被引量：3

6

作者 肖小珺 秦洁 李碧春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期623-624,共2页

采用Ficoll密度梯度离心,提取第14期(孵化53h)血液、第19期(孵化72h)和第28期(孵化132h)性腺中的PGCs,以比较这3个时期的PGCs在相同的体外培养条件下存活时间的差别。培养基为TCM 199,添加10%的小牛血清,不添加其他的细胞因子,培养后采... 采用Ficoll密度梯度离心,提取第14期(孵化53h)血液、第19期(孵化72h)和第28期(孵化132h)性腺中的PGCs,以比较这3个时期的PGCs在相同的体外培养条件下存活时间的差别。培养基为TCM 199,添加10%的小牛血清,不添加其他的细胞因子,培养后采用台盼蓝染色,以比较其在这种培养液中存活时间的差别。结果发现,第14期提取的PGCs存活时间最短,第19期的最长,第28期的介于两者之间。 展开更多

关键词 鸡胚 原始生殖细胞 分离 存活时间 pgcs 体外培养 血液

在线阅读 下载PDF 职称材料

小鼠生殖细胞的胚胎发育 被引量：4

7

作者 韩嵘 尚克刚 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期77-81,共5页

本文综述了近年来小鼠胚胎发育过程中生殖细胞的起源、迁移与增殖、性别分化及其基因组修饰等方面的研究进展。小鼠生殖细胞在 7～ 7.5dpc时由原始生殖细胞 (PGC)演变而来 ,至 12 .5dpc时PGC全部迁移进入生殖嵴 ,到 13.5dpc时停止分裂。... 本文综述了近年来小鼠胚胎发育过程中生殖细胞的起源、迁移与增殖、性别分化及其基因组修饰等方面的研究进展。小鼠生殖细胞在 7～ 7.5dpc时由原始生殖细胞 (PGC)演变而来 ,至 12 .5dpc时PGC全部迁移进入生殖嵴 ,到 13.5dpc时停止分裂。Steel/c -kit信号途径在PGC迁移过程中起重要作用。生殖细胞的性别主要是由生殖腺中体细胞的微环境决定的。Y染色体上存在精子形成所必需的基因。生殖细胞的全基因组范围的重新甲基化晚于胚胎体细胞的重新甲基化 ,到 18.5dpc时才完成。雌性生殖细胞的X染色体重新活化在 14.5～ 15 .5dpc时完成 ,并且与生殖嵴的性别分化无关。 展开更多

关键词 原始生殖细胞 小鼠 胚胎发育 基因组

在线阅读 下载PDF 职称材料

鱼类原始生殖细胞与鱼类性别分化的关系 被引量：2

8

作者 詹冰津 池丽影 +1 位作者 张军玲 张会会 《安徽农业科学》 CAS 2013年第2期622-624,共3页

在鱼类的性别分化中,原始生殖细胞在雌雄二性中的增殖方式不同,而且在部分鱼类中原始生殖细胞的缺失能导致其发育为单一雄性表型。在此过程中,生殖细胞的特有基因vasa的剪接变体的二态性分布与鱼类原始生殖细胞的分化关系密切。

关键词 原始生殖细胞(pgcs) 性别分化 VASA

在线阅读 下载PDF 职称材料

禽类原始生殖细胞的研究进展 被引量：1

9

作者 丁海雷 刘莉 +3 位作者 丁志丽 张易祥 王杏龙 采克俊 《上海畜牧兽医通讯》 2008年第1期13-15,共3页

关键词 原始生殖细胞 禽类 pgcs 特性鉴定 国内外 生殖腺 性细胞 鸡胚

在线阅读 下载PDF 职称材料

利用iCaspase9特异性诱导鸡原始生殖细胞消除的研究

10

作者 孙玲玲 黄振文 +4 位作者 田奎 张嘉乐 郑基坛 濮黎萍 陆阳清 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期3340-3348,共9页

【目的】制备在生殖细胞特异表达iCaspase9的鸡原始生殖细胞系(PGCs),提升外源性PGCs的生殖传递效率,为生产诱导不育的雄性或雌性受体鸡胚打下基础。【方法】利用piggyBac转座子将iCaspase9片段整合到鸡基因组中,构建稳定转染iCaspase9... 【目的】制备在生殖细胞特异表达iCaspase9的鸡原始生殖细胞系(PGCs),提升外源性PGCs的生殖传递效率,为生产诱导不育的雄性或雌性受体鸡胚打下基础。【方法】利用piggyBac转座子将iCaspase9片段整合到鸡基因组中,构建稳定转染iCaspase9片段的CAG-iCaspase9-mCherry DF-1细胞系,通过荧光微显镜观察鉴定其在iCaspase9系统诱导底物B/B二聚化配体作用下的细胞消除效果;再利用CRISPR/Cas9技术将iCaspase9片段定点插入DAZL基因第11外显子之后构建Dazl-iCaspase9-EGFP PGCs,经iCaspase9片段插入鉴定和PGCs生殖特性鉴定后,通过荧光微显镜观察鉴定其在B/B二聚化配体诱导下的消除效果。【结果】成功建立的CAG-iCaspase9-mCherry DF-1细胞系与野生型DF-1细胞(WT DF-1)的生长增殖无显著差异(P>0.05,下同);CCK-8法测定发现,0.25~5.00 nmol/L B/B二聚化配体对WT DF-1细胞生长数量无显著影响,但CAG-iCaspase9-mCherry DF-1细胞在添加B/B二聚化配体后,细胞数量较空白对照组极显著降低(P<0.01,下同),且失去正常的细胞形态,逐渐变圆甚至凋亡。成功建立的DAZL-iCaspase9-EGFP PGCs仍特异性高表达Cvh、Nanog、PouV、DAZL、Cdh和Ddx4等生殖细胞相关基因,在蛋白水平上也能鉴定出DAZL、SSEA1和CVH等蛋白,说明插入iCaspse9片段后并没有改变生PGCs的殖细胞特异性;在0.25 nmol/L B/B二聚化配体诱导作用下,DAZL-iCaspae9-EGFP PGCs数量显著减少,几乎全部消除,说明iCaspase9系统可诱导细胞凋亡而有效消除内源性PGCs。【结论】利用i Caspase9系统构建获得的DAZL-iCaspase9-EGFP PGCs在不改变其生殖细胞特性的同时,可在B/B二聚化配体诱导下有效消除内源性PGCs,为建立高效鸡种质资源恢复和基因编辑鸡制备等研究提供无内源性PGCs的受体鸡胚。 展开更多

关键词 鸡 原始生殖细胞(pgcs) iCaspase9 基因编辑 细胞消除

在线阅读 下载PDF 职称材料

滑液支原体不会垂直感染鸡原始生殖细胞

11

作者 朱云芬(编译) 《中国家禽》 北大核心 2011年第15期71-71,共1页

日本研究人员评价了滑液支原体垂直传染鸡原始生殖细胞（PGCs）的概率。PGCs来源于54只滑液支原体阳性鸡所产鸡蛋。收集的PGCs细胞与Frey氏培养基混合，于37℃孵育2周后提取DNA，作为PCR模板用于检测滑液支原体。

关键词 原始生殖细胞 滑液支原体 鸡蛋 垂直感染 pgcs PCR模板 垂直传染 研究人员

在线阅读 下载PDF 职称材料

鸡胚胎原始生殖细胞对不同冷冻体系适合性的研究

12

作者 李碧春 肖小珺 陈国宏 《中国家禽》 北大核心 2006年第19期102-102,共1页

目的：研究鸡胚胎原始生殖细胞（EPGCs）对不同冷冻体系的适合性。方法：对发育至第19期和第28期胚胎性腺PGCs，采用二甲基亚砜（DMSO）、乙二醇、聚乙二醇为冷冻保护液，在不同组合、不同浓度、不同的冷冻程序下进行超低温冷冻保存。... 目的：研究鸡胚胎原始生殖细胞（EPGCs）对不同冷冻体系的适合性。方法：对发育至第19期和第28期胚胎性腺PGCs，采用二甲基亚砜（DMSO）、乙二醇、聚乙二醇为冷冻保护液，在不同组合、不同浓度、不同的冷冻程序下进行超低温冷冻保存。结果：①采用同一种冷冻保护液，10%浓度与15％浓度之间，除DMSO＋乙二醇（冷冻保护液Ⅳ）外，其他类型的冷冻液对EPGCs保存后存活率的影响差异不显著（P〉0．05）；20%浓度的各种冷冻保护液对EPGCs保存后的存活率最低，且与10%和15％浓度相比差异显著（P〈0．05）或极显著（P〈0．01）；②采用同一种冷冻保护液，浓度为10%时， 展开更多

关键词 冷冻保护液 原始生殖细胞 鸡胚胎 超低温冷冻保存 聚乙二醇 二甲基亚砜 pgcs 冷冻程序

在线阅读 下载PDF 职称材料

基因编辑鸡制备方法及应用

13

作者 吴可欣 谷钰洲 +2 位作者 孙从佼 杨宁 邵丽娃 《中国家禽》 北大核心 2025年第2期143-150,共8页

鸡是研究发育生物学、免疫学以及传染病学的优良模型,同时是满足人们对肉、蛋需求的重要农业经济动物。近年来,随着全球鸡肉产量与消耗量的不断增长,养禽业对禽病防控、保种育种的需求也随之增加。为此,研究人员结合基因编辑技术制备了... 鸡是研究发育生物学、免疫学以及传染病学的优良模型,同时是满足人们对肉、蛋需求的重要农业经济动物。近年来,随着全球鸡肉产量与消耗量的不断增长,养禽业对禽病防控、保种育种的需求也随之增加。为此,研究人员结合基因编辑技术制备了转基因鸡或基因编辑鸡,从而更加深入地了解鸡生长发育、免疫抗病机制,为产业实践提供了坚实的理论基础。由于鸡独特的生殖生理特点,无法获取单细胞卵子,难以应用哺乳动物的基因编辑方法。文章综述了现有制备基因编辑鸡的方法及优缺点,并指出了基因编辑鸡制备过程存在的问题,为基因编辑鸡的制备提供参考。 展开更多

关键词 基因编辑鸡 原始生殖细胞 生物反应器 pgc基因编辑

在线阅读 下载PDF 职称材料

动物胚胎干细胞的研究与应用

14

作者 吕丽华 岳文斌 《山西农业大学学报（自然科学版）》 CAS 2004年第1期13-17,共5页

胚胎干细胞(Embryonicstemcells,ES细胞)是从早期胚胎内细胞团(innercellmassICM)或原始生殖细胞(Primordialgermcells,PGCs)经体外分化抑制培养分离克隆的。ES细胞在动物克隆、转基因动物生产、细胞工程、组织工程、临床克隆治疗和发... 胚胎干细胞(Embryonicstemcells,ES细胞)是从早期胚胎内细胞团(innercellmassICM)或原始生殖细胞(Primordialgermcells,PGCs)经体外分化抑制培养分离克隆的。ES细胞在动物克隆、转基因动物生产、细胞工程、组织工程、临床克隆治疗和发育生物学等的研究应用中起着重要的作用。本文介绍了胚胎干细胞的生物学特性,国内外研究进展和研究动态。阐明了建立ES细胞系的技术要点以及ES细胞的应用及发展前景。 展开更多

关键词 动物 胚胎干细胞 ES细胞 胚胎内细胞团 pgcs 原始生殖细胞 生物学特性

在线阅读 下载PDF 职称材料

鸡CCDC174基因生物信息学分析及其相关载体构建

15

作者 周静 夏钱 +6 位作者 孙国兴 靳锴 牛英杰 孙红艳 左其生 张亚妮 李碧春 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期42-50,79,共10页

CCDC174被发现是鸡原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGCs)关键调控基因C2EIP的互作基因,在PGCs起源、发育和分化中发挥重要作用。试验克隆CCDC174基因全长并对其进行生物信息学分析,构建过表达和干扰载体进行检测。结果表明,CCDC17... CCDC174被发现是鸡原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGCs)关键调控基因C2EIP的互作基因,在PGCs起源、发育和分化中发挥重要作用。试验克隆CCDC174基因全长并对其进行生物信息学分析,构建过表达和干扰载体进行检测。结果表明,CCDC174主要定位于细胞核中,有DUF4078、PTZ00121和PABP 3个功能域,存在磷酸化修饰位点且该基因在鸟类中保守性较高;酶切结果表明CCDC174载体构建成功,q RT-PCR和Western blot结果进一步表明构建的载体可有效干扰和过表达CCDC174,为后期对CCDC174功能验证和机制探究提供参考依据和技术手段。 展开更多

关键词 鸡 生物信息学分析 CCDC174基因 原始生殖细胞(pgcs)

在线阅读 下载PDF 职称材料

胚胎学

16

《中国医学文摘(基础医学)》 CSCD 1992年第1期12-13,共2页

体外培养小鼠胚胎原始生殖细胞(PGCs),按体积大小可分为大、中、小三类,形态相似,AKP阳性。培养1~3d后PGCs呈串珠状悬浮于培养液中,一端附着瓶壁,另一端游离,中、小型细胞数量增多。培养3~1d后细胞分裂增殖与死亡处于动态平衡。

关键词 胚胎学 原始生殖细胞 体外培养 小鼠胚胎

在线阅读 下载PDF 职称材料

不同品种的杂交技术可用于珍稀鱼类繁育

17

作者 张平远 《水产科技情报》 北大核心 2005年第2期96-96,共1页

关键词 繁育 珍稀鱼类 杂交技术 品种 大马哈鱼 原始生殖细胞 日本东京大学 虹鳟鱼 自然条件 pgc 生活 后代 授精 鱼卵

在线阅读 下载PDF 职称材料