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基于光学相干断层成像分析单核细胞/高密度脂蛋白胆固醇比值与冠状动脉巨噬细胞簇的相关性
1
作者 刘春伟 杨凡 +4 位作者 王乐 胡越成 张敬霞 李曦铭 丛洪良 《中国心血管杂志》 北大核心 2025年第3期235-242,共8页
目的通过测量光学相干断层成像(OCT)影像中巨噬细胞簇弧度对巨噬细胞进行定量分析,并研究单核细胞/高密度脂蛋白胆固醇比值(MHR)与巨噬细胞簇间相关性。方法回顾性分析2020年1月至2023年1月就诊于天津市胸科医院的急性冠脉综合征患者,其... 目的通过测量光学相干断层成像(OCT)影像中巨噬细胞簇弧度对巨噬细胞进行定量分析,并研究单核细胞/高密度脂蛋白胆固醇比值(MHR)与巨噬细胞簇间相关性。方法回顾性分析2020年1月至2023年1月就诊于天津市胸科医院的急性冠脉综合征患者,其中412例接受冠状动脉OCT检查的患者纳入研究,男性307例,占比74.5%。依据巨噬细胞簇弧度将患者分为3组:无巨噬细胞簇组(187例)、小巨噬细胞簇(50°~73°)组(113例)和大巨噬细胞簇(>73°)组(112例)。比较不同组患者间炎症指标和斑块特点差异。结果225例(54.6%)患者存在巨噬细胞簇,其单核细胞、MHR、高敏C反应蛋白等炎症指标和冠状动脉Gensini积分较无巨噬细胞簇患者更高,且具有更多的不稳定斑块特征:纤维帽厚度更薄、斑块破裂、愈合斑块、薄纤维帽粥样硬化斑块、胆固醇结晶和微通道的比例更高(均为P<0.05)。受试者工作特征曲线分析显示,MHR预测巨噬细胞簇的曲线下面积为0.71,特异度为0.65,敏感度为0.71。多因素logistic回归分析发现,MHR(OR=131.472,95%CI:15.900~1087.081)、冠状动脉Gensini积分(OR=16.715,95%CI:5.680~49.195)和微通道(OR=2.742,95%CI:1.617~4.648)是巨噬细胞簇的独立危险因素(均为P<0.001)。DeLong检测显示,上述3个联合指标的曲线下面积显著大于MHR、Gensini积分和微通道的单个指标(0.77比0.68、0.67、0.63,均为P<0.001)。此外,巨噬细胞簇弧度与单核细胞(r=0.136,P=0.042)和MHR(r=0.222,P=0.001)呈正相关,与高密度脂蛋白胆固醇(r=-0.262,P<0.001)呈负相关,并且巨噬细胞簇弧度与MHR间相关性较单核细胞更加显著(Z=2.455,P=0.014)。依据MHR截点值分组,高MHR组巨噬细胞簇弧度显著高于低MHR组(89例:86.9°±26.4°比136例:75.7°±23.0°,t=-3.352,P=0.001)。结论MHR、Gensini积分和微通道是冠状动脉巨噬细胞簇的独立危险因素,且上述危险因素的联合指标对巨噬细胞簇的预测能力更佳。巨噬细胞簇弧度与MHR水平呈正相关。 展开更多
关键词 单核细胞 高密度脂蛋白胆固醇 单核细胞/高密度脂蛋白胆固醇比值 巨噬细胞簇 光学相干断层成像 炎症
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小鼠骨髓源性巨噬细胞诱导及冻存方法的优化 被引量：1
2
作者 魏琼 赵梦竹 +2 位作者 程序 刘梦华 张冬梅 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第3期611-618,共8页
目的:探讨小鼠骨髓源性巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMDMs)诱导及冻存的适宜方法。方法:将小鼠成纤维细胞(L929细胞)于不同温度、接种密度、血清浓度培养条件下培养,ELISA法检测细胞上清中巨噬细胞集落刺激因子(macrophag... 目的:探讨小鼠骨髓源性巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMDMs)诱导及冻存的适宜方法。方法:将小鼠成纤维细胞(L929细胞)于不同温度、接种密度、血清浓度培养条件下培养,ELISA法检测细胞上清中巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony-stimulating factor,M-CSF)浓度;提取小鼠骨髓细胞,细胞差速贴壁法将骨髓细胞预培养4 h,流式细胞术检测骨髓原驻留巨噬细胞比例;使用L929细胞上清或重组M-CSF诱导细胞7 d,倒置显微镜下观察细胞形态变化,流式细胞术检测诱导后细胞F4/80及CD11b双阳性占比;中性红法及ELISA法检测C57BL/6N和C57BL/6J两种亚型来源BMDMs吞噬能力和炎症反应水平;将提取的骨髓细胞即刻冻存后复苏再诱导,或将已成功诱导的BMDMs冻存后复苏,倒置显微镜下观察细胞形态,CCK-8法检测细胞活力,中性红法检测吞噬能力。结果:33℃、10%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)培养7 d条件下的L929细胞上清中富集高浓度M-CSF;骨髓细胞经预培养4 h,贴壁细胞中F4/80+占比显著高于悬浮细胞(P<0.01);经L929上清或重组M-CSF诱导7 d后细胞F4/80+CD11b+占比无显著差异(P>0.05);与C57BL/6J亚型来源BMDMs相比,C57BL/6N亚型来源BMDMs具有更强的吞噬能力(P<0.01),释放较低水平TNF-α(P<0.01)和IL-6(P<0.05),以及较高水平IL-1β(P<0.05);相较于将已成功诱导的BMDMs冻存后复苏,骨髓细胞提取后即刻冻存、复苏再诱导的BMDMs具有更好的巨噬细胞形态,更高的细胞活力(P<0.01)和更强的吞噬能力(P<0.01)。结论:通过33℃、10%FBS培养7 d的L929细胞上清富含更高浓度M-CSF,可成功诱导骨髓细胞分化为小鼠骨髓源性巨噬细胞,细胞差速贴壁法预培养可去除原骨髓驻留巨噬细胞,C57BL/6N和C57BL/6J两种亚型来源BMDMs吞噬能力和炎症反应水平不同,将提取的骨髓细胞即刻冻存后复苏再诱导是较好的BMDMs冻存方法。 展开更多
关键词 小鼠骨髓源性巨噬细胞 原代细胞 成纤维细胞 巨噬细胞集落刺激因子
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小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)的培养及其在诱导破骨细胞中的应用 被引量：24
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作者 许丹 律颖 +4 位作者 朱小语 陈晓文 冯金秋 范爱琴 许雅君 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1355-1360,共6页
小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)是通过Abelson鼠白血病病毒诱导BALB/c小鼠产生肿瘤后得到的细胞株。RAW264.7细胞在医学研究中应用十分普遍:它是许多白血病相关研究模型的常用细胞株;在微生物学、免疫学等研究中也十分常用;同时... 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)是通过Abelson鼠白血病病毒诱导BALB/c小鼠产生肿瘤后得到的细胞株。RAW264.7细胞在医学研究中应用十分普遍:它是许多白血病相关研究模型的常用细胞株;在微生物学、免疫学等研究中也十分常用;同时也是小鼠源性破骨前体细胞,可通过特定细胞因子的诱导在体外获得成熟破骨细胞,因此也成为许多骨骼疾病研究的体外模型。但RAW264.7细胞形态和分化状态多变,在实际培养中较难把握,给科研工作带来了一定困难。科研工作者在RAW264.7细胞的培养方法、细胞的形态及分化状态等方面始终观点不一,对于用RAW264.7细胞在体外诱导获得破骨细胞的方法也有许多差别。本文结合文献资料及实践,探索了RAW264.7细胞的培养条件,冻存、复苏、传代方法,以及用核因子κB受体活化因子配基(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)诱导其成为成熟破骨细胞的技术关键;旨在总结RAW264.7细胞的培养及诱导其分化为破骨细胞的经验教训,探讨RAW264.7细胞的培养和在体外用RANKL诱导RAW264.7细胞分化为破骨细胞的方法、技巧,供广大科研工作者借鉴。 展开更多
关键词 RAW264.7 单核巨噬细胞 破骨细胞 RANKL 细胞分化
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中性粒细胞和巨噬细胞在嗜酸性胃肠炎小鼠各组织中的浸润情况分析
4
作者 徐龙薇 王亚丹 +1 位作者 周敏思 吴静 《首都医科大学学报》 北大核心 2025年第2期306-313,共8页
目的研究中性粒细胞和巨噬细胞在嗜酸性胃肠炎小鼠各组织中的浸润情况。方法选取6~8周龄雌性C57BL/6小鼠30只,应用腹腔注射鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏和灌胃给予OVA的方式诱导野生型小鼠建立嗜酸性胃肠炎模型。通过测量小鼠体质量... 目的研究中性粒细胞和巨噬细胞在嗜酸性胃肠炎小鼠各组织中的浸润情况。方法选取6~8周龄雌性C57BL/6小鼠30只,应用腹腔注射鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏和灌胃给予OVA的方式诱导野生型小鼠建立嗜酸性胃肠炎模型。通过测量小鼠体质量变化、应用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测小鼠外周血OVA特异性免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)和免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)水平、应用流式细胞术检测小鼠肠道嗜酸性粒细胞计数等方法验证小鼠嗜酸性胃肠炎是否造模成功。通过流式细胞术检测小鼠外周血中性粒细胞、单核细胞比例,检测脾脏、肠系膜淋巴结、小肠和结肠组织中的中性粒细胞和巨噬细胞比例。结果OVA腹腔致敏和灌胃激发可成功诱导小鼠嗜酸性胃肠炎模型。嗜酸性胃肠炎小鼠外周血单核细胞及脾脏、肠系膜淋巴结和小肠、结肠组织中的巨噬细胞浸润增多,中性粒细胞在嗜酸性胃肠炎小鼠的外周血及小肠、结肠组织中浸润比例增加。结论巨噬细胞在酸性胃肠炎小鼠外周血、肠道引流淋巴结及肠组织中浸润增多,中性粒细胞在嗜酸性胃肠炎小鼠外周血和肠组织中浸润也增多。 展开更多
关键词 小鼠 嗜酸性胃肠炎 嗜酸性粒细胞 中性粒细胞 巨噬细胞
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丹寿汤对复发性流产小鼠蜕膜巨噬细胞外泌体miRNA表达谱的影响
5
作者 徐广立 田超 +4 位作者 郭晶晶 郭婧 景竹青 李思梦 陈萍 《郑州大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第1期33-37,共5页
目的:探讨丹寿汤对复发性流产小鼠蜕膜巨噬细胞外泌体miRNA表达谱的影响。方法:将12只CBA/J雌鼠随机分为2组,每组6只,丹寿汤组灌胃丹寿汤1 mL/次,2次/d,模型组则灌胃等体积蒸馏水,连续7 d。停药3 d后,将雌鼠与DBA/2雄鼠合笼交配,诱导复... 目的:探讨丹寿汤对复发性流产小鼠蜕膜巨噬细胞外泌体miRNA表达谱的影响。方法:将12只CBA/J雌鼠随机分为2组,每组6只,丹寿汤组灌胃丹寿汤1 mL/次,2次/d,模型组则灌胃等体积蒸馏水,连续7 d。停药3 d后,将雌鼠与DBA/2雄鼠合笼交配,诱导复发性流产,雌鼠继续灌胃蒸馏水或丹寿汤。于受孕第15天安乐处死孕鼠,称重胚胎并计算胚胎吸收率。收集蜕膜组织,免疫磁珠法分选蜕膜巨噬细胞,超速离心法提取外泌体,透射电镜下观察外泌体形态,Western blot法检测CD63表达。采用高通量测序技术检测外泌体miRNA表达情况,筛选差异miRNA,并与miRanda、miRWalk和miRDB数据库进行比对,筛选差异miRNA靶基因,对靶基因进行GO和KEGG富集分析。结果:丹寿汤组小鼠胚胎质量大于模型组,胚胎吸收率小于模型组(P<0.05)。共筛选出14个蜕膜巨噬细胞外泌体差异miRNA,其中5个(miR-466m-3p、miR-497a-3p、miR-7015-3p、miR-744-3p和miR-7679-5p)在丹寿汤组表达上调,9个(miR-222-5p、miR-541-5p、miR-3963、miR-669o-5p、miR-3062-5p、miR-34c-3p、miR-6976-5p、miR-3473g和miR-434-5p)表达下调。预测的靶基因有1 490个,GO和KEGG富集分析结果显示,靶基因功能主要为参与蜕膜巨噬细胞的细胞过程及组成等,主要涉及PI3K-Akt和MAPK等信号通路。结论:丹寿汤可能通过调控蜕膜巨噬细胞外泌体miRNA的表达,发挥治疗复发性流产的作用。 展开更多
关键词 复发性流产 丹寿汤 蜕膜巨噬细胞 外泌体 MIRNA 小鼠
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SOCE调控亚临床低钙血症奶牛单核巨噬细胞吞噬和黏附功能的研究
6
作者 李思瑶 季子崴 +6 位作者 李蕾 张靖淇 岳柏晨 尹玉凤 徐闯 杨威 张冰冰 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第8期3907-3917,共11页
[目的]探究钙池操控的钙内流(store operated Ca^(2+) entry,SOCE)对奶牛单核巨噬细胞吞噬和黏附功能的影响。[方法]采集健康奶牛(对照,Con)及亚临床低钙血症奶牛(hypocalcemia,Hyp)外周血液,利用磁珠法分离并体外培养CD14~+单核巨噬细... [目的]探究钙池操控的钙内流(store operated Ca^(2+) entry,SOCE)对奶牛单核巨噬细胞吞噬和黏附功能的影响。[方法]采集健康奶牛(对照,Con)及亚临床低钙血症奶牛(hypocalcemia,Hyp)外周血液,利用磁珠法分离并体外培养CD14~+单核巨噬细胞。取亚临床低钙血症奶牛单核巨噬细胞分为3组,分别为Hyp、毒胡萝卜素(thapsigarsin,TG)处理组(Hyp+TG)和2-氨基乙基联苯基硼酸酯(2-aminoethyl diphenylborinate,2-APB)处理组(Hyp+2-APB组)。通过流式细胞术检测细胞内Ca^(2+)水平,利用实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测SOCE相关因子mRNA和蛋白表达量;通过激光共聚焦和免疫荧光检测单核巨噬细胞吞噬和黏附情况,并检测单核巨噬细胞吞噬和黏附因子的表达。[结果]流式细胞术检测结果显示,与Con组相比,Hyp组单核巨噬细胞内Ca^(2+)水平极显著降低(P<0.01)。实时荧光定量PCR结果显示,与Con组相比,Hyp组单核巨噬细胞中钙离子释放激活的钙通道蛋白1 (calcium release activated calcium modulator 1,ORAI1)、基质相互作用分子1(stromal interaction molecule 1,STIM1)、STIM2、选择素L(selectin L,SELL)、ORA I2、ORAI3以及吞噬因子髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)基因表达量均极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05)。Western blotting结果显示,与Con组相比,Hyp组单核巨噬细胞中ORAI2、ORAI3、STIM2、ORAI1和STIM1蛋白表达量极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05)。同时,与Con组相比,Hyp组单核巨噬细胞吞噬和黏附能力显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01)。TG处理后,与Hyp组相比,亚临床低钙血症奶牛单核巨噬细胞中ORAI1、ORAI2、MPO、ORAI3、STIM1、STIM2和SELL基因表达量显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),ORAI1、ORAI3、STIM1、STIM2和ORAI2蛋白表达水平显著或极显著上调(P<0.05;P<0.01);细胞吞噬、黏附能力均显著或极显著增强(P<0.05;P<0.01)。2-APB处理后,与Hyp组相比,亚临床低钙血症奶牛单核巨噬细胞中ORAI1、ORAI2、MPO、ORAI3、STIM1、STIM2和SELL基因表达量显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01),ORAI2、STIM2、ORAI1、ORAI3和STIM1蛋白表达量显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01);细胞吞噬、黏附能力极显著或显著减弱(P<0.01;P<0.05)。[结论]TG激活SOCE后,亚临床低钙血症奶牛单核巨噬细胞内Ca^(2+)水平升高,细胞吞噬和黏附能力增强;2-APB抑制SOCE后,亚临床低钙血症奶牛单核巨噬细胞内Ca^(2+)水平降低,细胞的吞噬和黏附功能减弱,表明SOCE参与调控单核巨噬细胞的吞噬和黏附作用。 展开更多
关键词 钙池操控的钙内流(SOCE) 单核巨噬细胞 吞噬 黏附
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CFSE荧光负染法检测RAW264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞摄取超顺磁性氧化铁纳米粒子
7
作者 何向锋 杨俐萍 +5 位作者 陈宝安 王建红 文颂 施文 徐薇薇 凌国杰 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期1168-1172,共5页
目的:探讨CFSE荧光负染法用于检测RAW264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞吞噬超顺磁性氧化铁纳米粒子(super paramaganetic iron oxide nanoparticles,SPIO)的可行性及其荧光特征。方法:体外对RAW264.7细胞进行SPIO的标记,然后分别采用普... 目的:探讨CFSE荧光负染法用于检测RAW264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞吞噬超顺磁性氧化铁纳米粒子(super paramaganetic iron oxide nanoparticles,SPIO)的可行性及其荧光特征。方法:体外对RAW264.7细胞进行SPIO的标记,然后分别采用普鲁士蓝染色方法和CFSE荧光负染法检测RAW264.7细胞对SPIO的摄取情况;用台盼蓝染色法检测CFSE荧光负染细胞的活力;应用激光扫描共聚焦显微镜进行荧光负染法检测RAW264.7细胞对SPIO的摄取。结果:普鲁士蓝将RAW264.7细胞内吞噬的SPIO标记为醒目的蓝色,核固红将细胞核标记为红色,在荧光图像上表现为荧光负染区,呈筛孔状。CFSE荧光负染法与普鲁士蓝染色法的检测结果具有很好的对应性。RAW264.7细胞经过SPIO和CFSE双重标记后,对细胞活力的影响较小,死细胞比例较低。结论:CFSE荧光负染法可用于RAW264.7活细胞吞噬SPIO的检测,同普鲁士蓝染色法具有很好的对应性,两者的检测结果可相互印证。 展开更多
关键词 CFSE荧光负染法 RAW264.7小鼠 单核巨噬细胞 白血病细胞 超顺磁性氧化铁纳米粒子
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猪骨髓源单核巨噬细胞诱导培养方法建立及应用
8
作者 张伟 李俊辉 +4 位作者 潘晓梅 曹剑 唐慧芬 毛丽萍 贺笋 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第1期50-59,共10页
选择不同细胞因子和培养基,比较4种培养基和细胞因子对猪骨髓细胞分化为单核巨噬细胞数量和增殖能力的影响,筛选出猪骨髓细胞诱导单核巨噬细胞的最佳培养条件。结果显示,在含10%胎牛血清的DME/F12培养基中添加粒细胞-巨噬细胞集落刺激因... 选择不同细胞因子和培养基,比较4种培养基和细胞因子对猪骨髓细胞分化为单核巨噬细胞数量和增殖能力的影响,筛选出猪骨髓细胞诱导单核巨噬细胞的最佳培养条件。结果显示,在含10%胎牛血清的DME/F12培养基中添加粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)(40 ng/mL)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)(50 ng/mL)能够诱导骨髓细胞诱分化成大量单核巨噬细胞,细胞数量与对照组差异显著(P<0.05),并且诱导细胞中有针对单核巨噬细胞的特异性抗原(CD64)表达,单核巨噬细胞纯度为77.57%左右。诱导后的细胞中检测到针对单核巨噬细胞的特异性Nramp1基因。猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)能够在细胞中大量增殖,与未诱导的骨髓细胞差异显著(P<0.05)。以上结果表明,DME-F12培养基添加GM-CSF和L929细胞上清液能够显著增强猪骨髓细胞诱导分化成单核巨噬细胞的能力,并且能够获得高纯度、高密度、高活率的单核巨噬细胞。 展开更多
关键词 猪 骨髓 单核巨噬细胞 体外培养
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Chrm3通过MAPK/ERK途径调节LPS诱导的Lbp^(-/-)小鼠腹腔巨噬细胞炎症
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作者 陈志达 付彬 +4 位作者 李思迪 刘赛 郭中坤 张悦 王可洲 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第4期69-78,共10页
目的基于LBP敲除小鼠(Lbp^(-/-)小鼠)探讨LBP缺失后Chrm3在LPS诱导的腹腔巨噬细胞炎症中的作用。方法提取WT型、Lbp^(-/-)型小鼠腹腔巨噬细胞,构建LPS诱导的腹腔巨噬细胞炎症模型。分别采取加入抑制剂4-damp、转染siRNA两种方法抑制Lbp^... 目的基于LBP敲除小鼠(Lbp^(-/-)小鼠)探讨LBP缺失后Chrm3在LPS诱导的腹腔巨噬细胞炎症中的作用。方法提取WT型、Lbp^(-/-)型小鼠腹腔巨噬细胞,构建LPS诱导的腹腔巨噬细胞炎症模型。分别采取加入抑制剂4-damp、转染siRNA两种方法抑制Lbp^(-/-)小鼠腹腔巨噬细胞中Chrm3的表达;通过转染慢病毒的方法使Lbp^(-/-)小鼠腹腔巨噬细胞中的Chrm3过表达;抑制剂法将细胞分为对照组A、LPS组A、抑制剂组,转染siRNA法将细胞分为对照组B、LPS组B、si-NC组、si-Chrm3组,过表达法将细胞分为对照组C、LPS组C、阴性对照组、过表达组。本研究以WT型、Lbp^(-/-)型小鼠腹腔巨噬细胞为研究对象利用Western blot方法验证Chrm3在LPS刺激下的变化情况,采用CCK-8、RT-PCR、Western blot等实验方法探讨4-damp、si-Chrm3及过表达慢病毒对Lbp^(-/-)小鼠腹腔巨噬细胞的存活率及炎症的影响。结果在LPS刺激下Lbp^(-/-)小鼠的腹腔巨噬细胞Chrm3蛋白表达显著升高(P<0.001),而野生型变化并不明显;抑制剂组及si-Chrm3组的细胞存活率显著升高(P<0.05,P<0.01)、过表达组细胞存活率显著下降(P<0.01);抑制剂组及si-Chrm3组的TNF-α、IL-1β、IL-6炎症因子表达情况显著降低(P<0.01,P<0.001),与细胞损伤及炎症相关的蛋白p-ERK的表达量也显著降低(P<0.01,P<0.001),而过表达组则与之相反,其炎症因子(P<0.001)和p-ERK蛋白的磷酸化水平显著升高(P<0.001)。结论LPS刺激Lbp^(-/-)小鼠腹腔巨噬细胞后Chrm3的表达上调、炎症因子表达上调,使用4-damp与si-Chrm3特异性降低Chrm3表达后使LPS导致的相关的Lbp^(-/-)小鼠细胞炎症因子明显下降,使用过表达慢病毒上调Chrm3后使相关炎症因子显著升高。由此可验证敲除LBP后Chrm3调控LPS诱导的炎症反应。 展开更多
关键词 毒蕈碱受体 Lbp^(-/-)小鼠 腹腔巨噬细胞 4-damp 干扰RNA 过表达 MAPK信号通路
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柴胡疏肝散含药血清的制备及对脂多糖联合干扰素诱导巨噬细胞的抗炎作用 被引量：2
10
作者 胡海 张珊 +1 位作者 卢宇佳 赵静洁 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第3期136-140,I0003,共6页
目的规范化制备柴胡疏肝散(Chaihu Shugan San,CSS)含药血清,并观察CSS含药血清对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)联合干扰素(interferon-γ,IFN-γ)诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7炎症反应的作用,为其抗炎机制的研究提供实验依据。方... 目的规范化制备柴胡疏肝散(Chaihu Shugan San,CSS)含药血清,并观察CSS含药血清对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)联合干扰素(interferon-γ,IFN-γ)诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7炎症反应的作用,为其抗炎机制的研究提供实验依据。方法SD雄性大鼠灌胃CSS制备含药血清,使用高效液相色谱-质谱联用法检测含药血清中代表性化合物浓度。体外构建LPS联合IFN-γ诱导的巨噬细胞炎症模型,分别加入CSS含药血清或空白大鼠血清,检测巨噬细胞白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、精氨酸酶1(arginase 1,ARG1)的mRNA水平,观察CSS含药血清的抗炎作用。结果CSS含药血清中α-香附酮、芍药苷等化合物含量较高。与空白大鼠血清组比较,CSS组可抑制巨噬细胞促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达,提高抑炎细胞因子IL-10及ARG1的mRNA表达。结论CSS含药血清对LPS联合IFN-γ诱导的巨噬细胞具有一定的抗炎作用。 展开更多
关键词 柴胡疏肝散 含药血清 单核巨噬细胞 抗炎
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白血病瘤苗对小鼠巨噬细胞作用的研究 被引量：1
11
作者 赵万红 何爱丽 +4 位作者 张王刚 王一理 耿宜萍 田玮 宋长琐 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期487-489,共3页
目的 :探讨自制的一种白血病瘤苗对C5 7BL 6小鼠Mφ杀伤功能的影响。 方法 :建立白血病荷瘤小鼠模型 ,用自制的 3种不同的白血病瘤苗进行预防或主动免疫治疗 ,用MTT比色法检测预防或治疗 2周、4周后小鼠Mφ杀伤活性 ,并与对照组比较。结... 目的 :探讨自制的一种白血病瘤苗对C5 7BL 6小鼠Mφ杀伤功能的影响。 方法 :建立白血病荷瘤小鼠模型 ,用自制的 3种不同的白血病瘤苗进行预防或主动免疫治疗 ,用MTT比色法检测预防或治疗 2周、4周后小鼠Mφ杀伤活性 ,并与对照组比较。结果 :(1)随着白血病细胞在小鼠体内的生长 ,小鼠的Mφ免疫功能受到严重抑制。 (2 )灭活肿瘤细胞 +IFA +细胞因子 (rGM CSF +rIL 2 +rIL 6 )的肿瘤疫苗在提高小鼠的Mφ免疫功能方面 ,优于灭活肿瘤细胞 +IFA肿瘤疫苗 ,而仅含灭活肿瘤细胞的疫苗作用不明显。结论 :灭活肿瘤细胞 +IFA +细胞因子 (rGM CSF +rIL 2 +rIL 6 )的肿瘤疫苗可以激活以Mφ为代表的非特异性细胞免疫功能 ,如非特异性细胞毒、免疫监视、抗原递呈等功能 ,为进一步活化T淋巴细胞打下基础 ,此种疫苗在血液恶性肿瘤的特异性主动免疫治疗中很有潜力。 展开更多
关键词 白血病 小鼠 巨噬细胞 肿瘤疫苗 免疫治疗
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慢性淋巴细胞白血病中的单核/巨噬细胞研究进展 被引量：1
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作者 马小雯 杨林花 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期292-296,共5页
慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia, CLL)作为一种疾病,其进展差异性较大,其中三分之二的患者发展缓慢,另三分之一患者疾病进展较快。常规治疗效果欠佳、常出现药物耐药。近年来研究发现,肿瘤微环境在CLL疾病进展中起到... 慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia, CLL)作为一种疾病,其进展差异性较大,其中三分之二的患者发展缓慢,另三分之一患者疾病进展较快。常规治疗效果欠佳、常出现药物耐药。近年来研究发现,肿瘤微环境在CLL疾病进展中起到重要作用,单核/巨噬细胞(monocyte/macrophage)作为肿瘤微环境的组成部分,可以通过细胞间相互作用、分泌细胞因子、抑制机体抗肿瘤免疫反应等在CLL中发挥着促肿瘤细胞生长、促耐药等作用。因此,研究单核/巨噬细胞与CLL的关系,可为靶向治疗CLL提供理论依据。本文就单核/巨噬细胞在CLL疾病发展中的作用及相关治疗研究进展作一综述。 展开更多
关键词 慢性淋巴细胞白血病 单核细胞 巨噬细胞 肿瘤微环境
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源于细菌CpG基序的寡核苷酸激活单核/巨噬细胞抗白血病效应的研究
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作者 陈春燕 王红艳 +4 位作者 曹倩 肖颖 王琳琳 张荣梅 贾继辉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期982-985,共4页
目的:研究源于细菌CpG基序的寡核苷酸激活单核/巨噬细胞抗白血病细胞的作用。方法:用血细胞分离机从健康人外周血分离并诱导出单核-巨噬细胞,流式细胞仪检测细胞表面CD14分子和CD16分子表达状况。设计合成含CpG基序的寡核苷酸(CpG-ODN)... 目的:研究源于细菌CpG基序的寡核苷酸激活单核/巨噬细胞抗白血病细胞的作用。方法:用血细胞分离机从健康人外周血分离并诱导出单核-巨噬细胞,流式细胞仪检测细胞表面CD14分子和CD16分子表达状况。设计合成含CpG基序的寡核苷酸(CpG-ODN)和不含CpG基序的寡核苷酸(nonCpG-ODN)分别作用于单核/巨噬细胞,MTT法检测经寡核苷酸作用后,单核/巨噬细胞抗白血病K562细胞的效应,用ELISA法检测其分泌细胞因子IL-12、TNF-α的表达。结果:从健康人外周血分离并成功诱导出单核/巨噬细胞,证实CpG-ODN作用于单核/巨噬细胞,可显著增强单核/巨噬细胞体外抗白血病细胞的作用,同时能促进单核/巨噬细胞分泌细胞因子IL-12、TNF-α。结论:源于细菌CpG-ODN可增强单核/巨噬细胞介导的抗白血病细胞作用,此为白血病免疫治疗提供了新的途径。 展开更多
关键词 寡核苷酸类 单核细胞 巨噬细胞 白血病 K562细胞
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感染LM小鼠巨噬细胞外泌体的转录组测序及差异表达miRNA特征分析 被引量：2
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作者 李能秀 焦健 +5 位作者 左雨霏 马忠梅 常意行 孟庆玲 才学鹏 乔军 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第7期1611-1621,共11页
[目的]分离和鉴定感染单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)小鼠巨噬细胞外泌体(Exosomes,Exos)并分析其miRNA表达谱,为揭示巨噬细胞Exos miRNA在LM感染中的调控机制奠定研究基础。[方法]以未感染LM的巨噬细胞为对照组,感... [目的]分离和鉴定感染单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)小鼠巨噬细胞外泌体(Exosomes,Exos)并分析其miRNA表达谱,为揭示巨噬细胞Exos miRNA在LM感染中的调控机制奠定研究基础。[方法]以未感染LM的巨噬细胞为对照组,感染LM的巨噬细胞为试验组,采用超速离心法分离提取巨噬细胞上清中的Exos,通过透射电镜、纳米颗粒追踪技术和Western blot对Exos形态、大小及表面标志分子特征进行鉴定。利用Illumina SE50测序平台对2组巨噬细胞Exos miRNA进行Small RNA-seq测序,筛选出显著差异表达的miRNA。使用Targetscan、miRDB和miRWalk数据库对差异表达miRNA靶基因进行预测,并对差异miRNA靶基因进行GO和KEGG-Pathway功能富集分析。利用Cytoscape软件绘制前20位Hub基因的miRNA-mRNA调控网络图。[结果]Exos直径为30~150 nm,具有典型的双层膜结构,Exos表面标志分子CD9、CD63和TSG101呈阳性表达。高通量测序结果显示,与对照组相比,试验组Exos中共筛选出9个显著差异表达的miRNA,其中显著下调基因8个(mmu-miR-7a-5p、mmu-miR-365-2-5p、mmu-miR-122-5p、mmu-miR-122b-3p、mmu-let-7i-5p、mmu-miR-151-3p、mmu-miR-182-5p和mmu-miR-1198-5p),显著上调基因1个(mmu-miR-192-5p),共预测miRNA调控靶基因1064个。GO富集分析结果显示,差异miRNA靶基因主要富集在轴突形成、细胞连接组装、肌动蛋白结合和金属离子跨膜转运等过程;KEGG分析显示,靶基因显著富集在cGMP-PKG信号通路和FcγR介导的吞噬作用通路。[结论]感染LM的小鼠巨噬细胞Exos miRNA表达谱发生了显著改变,其调控的潜在靶基因主要参与感染和免疫反应等信号通路。 展开更多
关键词 单核细胞增生性李斯特菌 巨噬细胞 外泌体 MIRNA 靶基因
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转录因子PU.1通过调节M2型肺巨噬细胞极化加重肺纤维化
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作者 闫屹 陈碧 +1 位作者 蒋宇 张灿堂 《科学技术与工程》 北大核心 2025年第24期10175-10181,共7页
为了探讨转录因子PU.1在肺纤维化小鼠体内的表达情况及其对肺纤维化的影响。通过对C57BL/6小鼠建立肺纤维化模型,将小鼠随机分为对照组(生理盐水干预)10只、模型组(博来霉素干预)10只、治疗组(博来霉素+DB1976干预)10只,造模后第21天处... 为了探讨转录因子PU.1在肺纤维化小鼠体内的表达情况及其对肺纤维化的影响。通过对C57BL/6小鼠建立肺纤维化模型,将小鼠随机分为对照组(生理盐水干预)10只、模型组(博来霉素干预)10只、治疗组(博来霉素+DB1976干预)10只,造模后第21天处死小鼠并取材。采用苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining, HE)、Masson染色方法观察小鼠肺组织的病理改变并进行肺泡炎和肺纤维化评分;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)方法检测肺泡灌洗液PU.1、血清羟脯氨酸(hydroxyproline, HYP)的表达;qPCR方法检测肺组织中PU.1的表达以及巨噬细胞标志物Fizz-1、IL-10、CD86、IL-6的表达情况。实验结果使用SPSS 26.0进行统计分析。结果表明:与对照组相比,模型组和治疗组小鼠肺组织出现明显纤维化改变,胶原沉积更为明显,纤维化评分更高;模型组小鼠肺泡灌洗液PU.1、血清HYP的表达相比对照组明显升高(P<0.05),治疗组的PU.1、HYP相比模型组表达下降(P<0.05),并且肺泡炎评分、纤维化评分较模型组下降(P<0.05);与对照组相比,模型组体内M1、M2型巨噬细胞标志物Fizz-1、IL-10、CD86、IL-6均出现增高;治疗组相比模型组肺组织内M2型巨噬细胞标记物Fizz-1、IL-10明显下降(P<0.05),M1型巨噬细胞标记物CD86、IL-6虽然有所下降,但差异无统计学意义。可见转录因子PU.1可能通过调控M2型巨噬细胞极化参与肺纤维化的加重,PU.1抑制剂DB1976可以通过抑制肺内PU.1的表达,从而抑制M2型巨噬细胞的极化延缓肺纤维化的进程。 展开更多
关键词 肺纤维化 小鼠 PU.1 DB1976 巨噬细胞极化
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P2X家族受体在急性T淋巴细胞白血病小鼠腹腔巨噬细胞中的表达 被引量：5
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作者 陈莎燕 冯文利 +5 位作者 杨骁 廖金凤 王丽娜 林永敏 任倩 郑国光 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期623-628,共6页
本研究旨在探讨Notch1诱导的小鼠急性T淋巴细胞白血病模型中,腹腔巨噬细胞P2X家族受体的表达变化规律及其与巨噬细胞活化状态的相关性。建立小鼠急性T淋巴细胞白血病模型后,根据F4/80和CD206两个表面标记,用流式细胞术分别分选腹腔巨噬... 本研究旨在探讨Notch1诱导的小鼠急性T淋巴细胞白血病模型中,腹腔巨噬细胞P2X家族受体的表达变化规律及其与巨噬细胞活化状态的相关性。建立小鼠急性T淋巴细胞白血病模型后,根据F4/80和CD206两个表面标记,用流式细胞术分别分选腹腔巨噬细胞以及CD206+的M2样和CD206-的M1样腹腔巨噬细胞;用实时定量PCR法研究各亚群细胞中P2X家族受体的表达变化规律。结果表明:腹腔巨噬细胞、M2样和M1样腹腔巨噬细胞均表达除P2X5受体外的其他P2X家族受体,且表达强度中等。各受体的表达随白血病发展变化而有所不同,其中腹腔巨噬细胞中P2X1和P2X7受体的表达逐渐提高,P2X2和P2X3受体表达在白血病晚期显著降低,P2X4受体表达仅在中期有所降低,P2X6受体表达无显著变化。在白血病发展中期M2样和M1样腹腔巨噬细胞间P2X家族受体表达亦存在差异,其中M2样巨噬细胞P2X1受体的表达水平显著低于M1样巨噬细胞,而M2样巨噬细胞P2X7受体表达水平显著高于M1样巨噬细胞,提示P2X家族受体表达与腹腔巨噬细胞活化状态相关。结论:白血病小鼠腹腔巨噬细胞P2X家族受体表达与白血病进程和巨噬细胞活化状态相关。本研究为深入探究巨噬细胞在白血病发展中的作用机制奠定基础。 展开更多
关键词 急性T淋巴细胞白血病 腹腔巨噬细胞 P2X家族受体 活化状态 NOTCH1
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核糖体蛋白RPS2对刚地弓形虫体外侵入小鼠巨噬细胞Ana-1功能的影响 被引量：1
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作者 杨晨晨 齐玮瑜 +3 位作者 王晓娟 姜宇宸 李相辰 张莉 《中国预防兽医学报》 CSCD 北大核心 2024年第11期1174-1182,共9页
为研究刚地弓形虫核糖体蛋白RPS2(TgRPS2)对弓形虫侵入小鼠巨噬细胞Ana-1功能的影响,本研究采用系列分子生物学软件分析TgRPS2的生物信息学,通过PCR从弓形虫中扩增TgRPS2基因构建重组表达质粒pET32a-TgRPS2,经双酶切和测序鉴定正确后与p... 为研究刚地弓形虫核糖体蛋白RPS2(TgRPS2)对弓形虫侵入小鼠巨噬细胞Ana-1功能的影响,本研究采用系列分子生物学软件分析TgRPS2的生物信息学,通过PCR从弓形虫中扩增TgRPS2基因构建重组表达质粒pET32a-TgRPS2,经双酶切和测序鉴定正确后与pET-32a分别转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导后采用镍柱亲和层析法纯化表达的重组TgRPS2蛋白(r TgRPS2)和空载体蛋白,采用SDS-PAGE检测两种蛋白的表达及纯化效果并经BCA法测定两种纯化蛋白的浓度。将r TgRPS2以300μg的剂量免疫小鼠6次,制备TgRPS2多克隆抗体(PAb),采用western blot鉴定r TgRPS2与弓形虫抗体、弓形虫可溶性蛋白与rTgRPS2 PAb的反应性。结果显示,分别在47.3 ku及18 ku处出现目的蛋白和空载体蛋白条带,且目的蛋白主要以包涵体的形式表达,空载体蛋白以上清形式表达,纯化后二者在相应位置均出现单一目的条带,测得rTgRPS2及空载体蛋白的浓度分别为1 949.54μg/mL和2 827.15μg/mL。Western blot结果显示,rTgRPS2能够与兔源弓形虫PAb反应,rTgRPS2 PAb也可以与弓形虫可溶性蛋白反应。将20μg/mL及不同浓度的rTgRPS2分别与小鼠巨噬细胞Ana-1共培养后,采用间接免疫荧光试验(IFA)检测rTgRPS2与小鼠巨噬细胞Ana-1的结合;利用CCK-8试剂盒及流式细胞术分别检测不同浓度rTgRPS2对巨噬细胞增殖能力、吞噬能力及凋亡的影响,利用ELISA检测各组巨噬细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6、IL-10和转化生长因子β1(TGF-β1)的分泌水平,利用试剂盒检测各组巨噬细胞NO的含量。结果显示,rTgRPS2能够与小鼠巨噬细胞紧密结合,在细胞质中出现红色荧光,而阴性对照及Mock组细胞均无红色荧光。不同浓度的rTgRPS2对巨噬细胞的增殖均无影响。与空载蛋白对照组相比,不同浓度rTgRPS2作用后巨噬细胞Ana-1的吞噬能力均极显著增强(P<0.001);10μg/mL~40μg/mL的rTgRPS2作用后,巨噬细胞Ana-1的凋亡率均极显著升高(P<0.01、P<0.001);不同浓度的r TgRPS2作用后巨噬细胞中促炎细胞因子TNF-α的分泌水平显著和极显著升高(P<0.05、P<0.001),但促炎细胞因子IL-6的分泌水平无显著变化;5μg/mL和10μg/mL的rTgRPS2作用后巨噬细胞中抑炎细胞因子TGF-β1的分泌水平显著和极显著下降(P<0.05、P<0.01);40μg/mL和80μg/mL的rTgRPS2作用后巨噬细胞中抑炎细胞因子IL-10的分泌水平极显著升高(P<0.001);40μg/mL和80μg/mL的rTgRPS2作用后巨噬细胞中总NO的含量显著和极显著升高(P<0.05、P<0.01)。上述研究结果首次证实rTgRPS2有较强的反应原性,能够与巨噬细胞结合,促进巨噬细胞的吞噬能力与凋亡,并通过多种方式双向调节巨噬细胞的炎症反应及免疫应答方式。本研究为探究弓形虫体内感染巨噬细胞的免疫反应机制奠定基础,也为弓形虫疫苗抗原的筛选、亚单位疫苗的研制提供参考依据。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 核糖体RPS2蛋白 原核表达 小鼠巨噬细胞 免疫功能
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绞股蓝多糖提高小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能 被引量：2
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作者 王欣雨 金鑫 +4 位作者 杜倩笙 唐非台 刘可可 董胤余 王晓丽 《湖北农业科学》 2024年第6期151-155,共5页
研究不同浓度(12.5、25.0、50.0、100.0、200.0μg/mL)绞股蓝[Gynostemma pentaphyllum(Thunb.)Makino]多糖(GPP)对小鼠腹腔巨噬细胞的影响,探讨GPP对机体免疫功能的调节作用及其可能的作用机制。采用中性红法、Griess法、CCK8法、ELIS... 研究不同浓度(12.5、25.0、50.0、100.0、200.0μg/mL)绞股蓝[Gynostemma pentaphyllum(Thunb.)Makino]多糖(GPP)对小鼠腹腔巨噬细胞的影响,探讨GPP对机体免疫功能的调节作用及其可能的作用机制。采用中性红法、Griess法、CCK8法、ELISA法和荧光定量PCR法检测小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力、增殖、细胞因子(NO、LDH、TNF-α、IL-1β)的分泌量、CaM和GSα基因的表达水平。结果表明,GPP激活小鼠腹腔巨噬细胞,随着GPP浓度的增加小鼠腹腔巨噬细胞增殖能力增强,当GPP浓度为50.0、100.0、200.0μg/mL时,吸光度与空白对照处理相比差异显著;GPP刺激小鼠腹腔巨噬细胞后,吞噬能力强于空白对照处理,GPP浓度为200.0μg/mL时,小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力最强;GPP促进小鼠腹腔巨噬细胞NO、LDH、TNF-α和IL-1β的分泌;GPP上调CaM和GSα基因的表达,GPP浓度为100.0、25.0μg/mL时CaM、GSα基因表达量分别达到最高。 展开更多
关键词 绞股蓝[Gynostemma pentaphyllum(Thunb.)Makino]多糖(GPP) 巨噬细胞 吞噬作用 免疫功能 小鼠 腹腔
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金黄色葡萄球菌PV杀白细胞素S组分体外诱导单核白血病细胞株THP-1巨噬细胞的研究 被引量：1
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作者 强雅雯 马筱玲 周馨 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2019年第12期1243-1247,共5页
目的目前关于金黄色葡萄球菌PV杀白细胞素S组分(LukS-PV)体外诱导人源单核白血病细胞株THP-1巨噬细胞研究较少。文中主要探讨LukS-PV能否体外诱导人源THP-1巨噬细胞极化。方法佛波酯体外诱导THP-1为THP-1巨噬细胞,THP-1经佛波酯刺激48 h... 目的目前关于金黄色葡萄球菌PV杀白细胞素S组分(LukS-PV)体外诱导人源单核白血病细胞株THP-1巨噬细胞研究较少。文中主要探讨LukS-PV能否体外诱导人源THP-1巨噬细胞极化。方法佛波酯体外诱导THP-1为THP-1巨噬细胞,THP-1经佛波酯刺激48 h、72 h后,流式检测细胞表面标志物CD11b、CD14。采用0.1、0.2、0.4μmol/L的LukS-PV作用THP-1巨噬细胞,分别为0.1μmol/LLukS-PV组、0.2μmol/LLukS-PV组和0.4μmol/LLukS-PV组,另采用佛波酯诱导THP-1巨噬细胞为对照组。流式细胞术检测各组24 h、48 h CD80、CD206的表达,qRT-PCR检测细胞IL-12、TNF-α、TGF-β的mRNA表达水平。结果0.1μmol/LLukS-PV组、0.2μmol/LLukS-PV组、0.4μmol/LLukS-PV组细胞表面CD80表达量较对照组明显增高(P<0.01),0.2μmol/L LukS-PV组表达量最高(P<0.01)。0.2μmol/L LukS-PV组24h IL-12、TNF-αmRNA表达水平(7.32±0.91、5.29±0.51)较对照组(0.71±0.11、0.73±0.14)明显升高(P<0.01),48 h时IL-12、TNF-αmRNA表达水平(11.16±0.78、6.70±0.68)较对照组亦明显升高(P<0.01)。0.2μmol/L LukS-PV组24h、48h细胞表面CD80的表达较对照组明显升高(P<0.000)。结论LukS-PV能够刺激人源THP-1巨噬细胞向M1极化。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌PV杀白细胞素S组分 巨噬细胞 单核白血病细胞株THP-1 流式细胞术 体外诱导
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一种简单的分离、培养及鉴定小鼠外周血单核巨噬细胞方法的建立 被引量：3
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作者 杨琳 田蕾 +1 位作者 谢杰施 李丽英 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第4期610-613,共4页
目的在L929条件培养基的作用下体外分离、培养小鼠外周血单核巨噬细胞,并进行鉴定。方法密度梯度离心法分离小鼠外周血单核巨噬细胞,用L929条件培养基培养7 d。采用免疫荧光的方法检测F4/80的表达以及细胞的吞噬作用,用流式细胞术进一... 目的在L929条件培养基的作用下体外分离、培养小鼠外周血单核巨噬细胞,并进行鉴定。方法密度梯度离心法分离小鼠外周血单核巨噬细胞,用L929条件培养基培养7 d。采用免疫荧光的方法检测F4/80的表达以及细胞的吞噬作用,用流式细胞术进一步检测细胞吞噬率。结果用L929条件培养基诱导培养7 d后小鼠外周血单核细胞表达F4/80,加入细胞吞噬珠之后,在不同时间点用荧光显微镜可以看到红色荧光颗粒聚集在小鼠外周血单核巨噬细胞核周围,用流式细胞仪检测细胞的吞噬率为24.8%±0.79%。结论该方法是一种简单、易操作的体外分离培养和鉴定小鼠外周血单核巨噬细胞的方法。 展开更多
关键词 小鼠 外周血单核巨噬细胞 分离培养 鉴定
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