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优化的SD大鼠小胶质细胞原代培养、纯化及采用高内涵细胞成像分析技术进行的细胞鉴定被引量：4: 1; 作者刘检王宇红 +3 位作者凌佳刘林孟盼杨蕙《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期968-973,共6页; 目的建立一种优化的大鼠小胶质细胞(microglia,MG)原代培养及纯化方法,采用高内涵细胞成像分析技术(high content analysis,HCA)对其进行细胞鉴定。方法取1 d的新生SD大鼠,解剖显微镜下分离大脑皮质,机械剪碎成1 mm^3组织块,加入质量分... 展开更多; 关键词小胶质细胞原代培养纯化鉴定小胶质细胞特异性抗体(iba-1) 高内涵细胞成像分析技术(HCA); 在线阅读下载PDF 职称材料

电针对脊髓损伤大鼠星形胶质细胞的影响及机制被引量：20: 2; 作者何娟王忠华《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期253-257,共5页; 目的观察电针治疗脊髓损伤大鼠的行为功能及脊髓损伤部位胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和阶段性特异性胚胎抗原-1(SSEA-1)的表达,阐明电针对脊髓损伤后反应性星形胶质细胞增生及分化的影响及其机制。方法将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型... 展开更多; 关键词大鼠脊髓损伤星形胶质细胞阶段性特异性胚胎抗原-1(SSEA-1) 胶质纤维酸性蛋白(GFAP) 电针; 在线阅读下载PDF 职称材料

口蹄疫病毒VP1基因C末端串连表达及其抗体ELISA方法的初步建立被引量：1: 3; 作者彭贵青陈焕春 +3 位作者钱平李祥敏洪琦顾贫《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期670-674,共5页; 口蹄疫病毒主要免疫原性基因VP1的B细胞和T细胞抗原表位位于其C末端,参照Taiwanse97(AJ294928)设计了1对特异性引物,扩增出VP1基因C末端。序列分析表明:其C末端长285bp,编码74个氨基酸,与O/HKN/12/91、O/PEN/TAW/99核苷酸和氨基酸同源... 展开更多; 关键词抗体表达产物末端 ELISA方法 VP1基因 T细胞抗原表位口蹄疫病毒 O型口蹄疫特异性引物; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白抗原表位多肽的预测、鉴定及免疫效果的初步研究被引量：5: 4; 作者范文胜朱丹 +5 位作者张愉廖健淇王露雍璐韦平磨美兰《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期2257-2264,共8页; 旨在对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H120株S1蛋白的B细胞及T细胞可能的表位进行预测并合成相应的多肽,然后免疫小鼠,并分析其免疫效果,以验证候选表位多肽的免疫原性。利用表位预测软件筛选并化学合成针对IBV H120株S1蛋白的5条表位多肽,... 展开更多; 关键词鸡传染性支气管炎病毒 H120株 S1蛋白表位多肽特异性抗体中和抗体 T淋巴细胞亚群; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名优化的SD大鼠小胶质细胞原代培养、纯化及采用高内涵细胞成像分析技术进行的细胞鉴定被引量：4: 1; 作者刘检王宇红凌佳刘林孟盼杨蕙; 机构湖南中医药大学第一附属医院湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地; 出处《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期968-973,共6页; 基金国家自然科学基金资助项目(81403379 81573965 +2 种基金 81603604) 湖南省教育厅科学研究一般项目(17C1229); 文摘目的建立一种优化的大鼠小胶质细胞(microglia,MG)原代培养及纯化方法,采用高内涵细胞成像分析技术(high content analysis,HCA)对其进行细胞鉴定。方法取1 d的新生SD大鼠,解剖显微镜下分离大脑皮质,机械剪碎成1 mm^3组织块,加入质量分数为0. 125%的胰蛋白酶和质量分数为0. 1%的胶原酶(体积比为1∶1)消化10 min后进行体外培养,分别观察接种5、7 d后小胶质细胞基本形态结构;采用低速震摇+温和消化+差速贴壁的三联法纯化细胞,分别观察纯化1、3、6 d后小胶质细胞基本形态结构;采用HCA技术对小胶质细胞进行其特异性抗体(ionized calcium binding adapter molecule 1,Iba-1)免疫细胞化学染色鉴定。结果经优化法培养的小胶质细胞,数量多、纯度高、活性好,细胞胞体狭长,突起形状不规则,呈单极、双极、蜘蛛状或其它分枝状,且分别可见静息态与活化态的细胞,并呈现典型的小胶质细胞特征和良好的生长状态;经优化法培养的小胶质细胞,采用HCA进行Iba-1免疫细胞化学染色鉴定,MG纯度质量分数达98%以上。结论建立了一种小胶质细胞原代培养及纯化方法,同时采用HCA技术成功对其进行细胞鉴定,为后续小胶质细胞相关体外研究奠定了良好的实验基础。; 关键词小胶质细胞原代培养纯化鉴定小胶质细胞特异性抗体(iba-1) 高内涵细胞成像分析技术(HCA); Keywords microglias primary culture purification identification ionized calcium binding adapter molecule 1（iba-1） HCA; 分类号 R96 [医药卫生—药理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名电针对脊髓损伤大鼠星形胶质细胞的影响及机制被引量：20: 2; 作者何娟王忠华; 机构西安交通大学医学院第一附属医院康复医学科; 出处《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期253-257,共5页; 文摘目的观察电针治疗脊髓损伤大鼠的行为功能及脊髓损伤部位胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和阶段性特异性胚胎抗原-1(SSEA-1)的表达,阐明电针对脊髓损伤后反应性星形胶质细胞增生及分化的影响及其机制。方法将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和电针治疗组,每组20只。分别于脊髓损伤造模后第3、7、14、28天时进行BBB评分(Basso-Beaie-Bresnehan scale),并用免疫组化方法检测大鼠脊髓损伤部位GFAP和SSEA-1变化并与对照组比较。结果电针组与模型组在3d和7d时,GFAP和SSEA-1阳性细胞数有差异(P<0.01),7d时阳性细胞数达到峰值,在14d时电针组和模型组的阳性细胞数有差异(P<0.05),而在28d时,电针组和模型组GFAP阳性细胞无明显差异(P>0.05),但SSEA-1阳性细胞有统计学差异(P<0.05)。结论电针治疗能够增加脊髓损伤模型大鼠星形胶质细胞逆分化,激发星形胶质细胞的干细胞潜能,从而促进损伤后脊髓功能的恢复;损伤后的脊髓GFAP和SSEA-1阳性表达的高峰期都在7d,提示脊髓损伤后7d内可能为电针治疗介入的黄金期。; 关键词大鼠脊髓损伤星形胶质细胞阶段性特异性胚胎抗原-1(SSEA-1) 胶质纤维酸性蛋白(GFAP) 电针; Keywords rat spinal cord injury astrocyte stage-specific embryonic antigen-1 （SSEA-1） glial fibrillaryacidic protein （GFAP） electro-acupuncture; 分类号 R493 [医药卫生—康复医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名口蹄疫病毒VP1基因C末端串连表达及其抗体ELISA方法的初步建立被引量：1: 3; 作者彭贵青陈焕春钱平李祥敏洪琦顾贫; 机构华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒室; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期670-674,共5页; 基金国家高技术研究发展计划"863"(2001AA213051) 武汉科技攻关计划(20026002082); 文摘口蹄疫病毒主要免疫原性基因VP1的B细胞和T细胞抗原表位位于其C末端,参照Taiwanse97(AJ294928)设计了1对特异性引物,扩增出VP1基因C末端。序列分析表明:其C末端长285bp,编码74个氨基酸,与O/HKN/12/91、O/PEN/TAW/99核苷酸和氨基酸同源性分别为95%、93%和96%、93%;利用同尾酶Xho 、Sal 将VP1基因C末端串连起来;再将单拷贝和双拷贝C末端基因插入到原核表达载体pGEX-KG后,转化BL21(DE3),在IPTG诱导下获得表达,经Westernblot检测证实表达产物具有活性。以表达产物包被ELISA板,初步建立了特异、敏感的ELISA诊断方法。同时用表达产物免疫Balb/c小鼠,能产生一定的抗O型口蹄疫病毒的抗体。; 关键词抗体表达产物末端 ELISA方法 VP1基因 T细胞抗原表位口蹄疫病毒 O型口蹄疫特异性引物; Keywords FMDV antigen site expression immunity; 分类号 S852 [农业科学—基础兽医学] R657.2 [医药卫生—外科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白抗原表位多肽的预测、鉴定及免疫效果的初步研究被引量：5: 4; 作者范文胜朱丹张愉廖健淇王露雍璐韦平磨美兰; 机构广西大学动物科学技术学院; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期2257-2264,共8页; 基金广西科技重大专项(桂科AA17204057) 国家自然科学基金项目(31860715) +1 种基金广西研究生教育创新计划项目(YCBZ2018003)。; 文摘旨在对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H120株S1蛋白的B细胞及T细胞可能的表位进行预测并合成相应的多肽,然后免疫小鼠,并分析其免疫效果,以验证候选表位多肽的免疫原性。利用表位预测软件筛选并化学合成针对IBV H120株S1蛋白的5条表位多肽,然后免疫小鼠,通过间接ELISA、中和试验和流式细胞技术检测各表位多肽诱导的特异性抗体、中和抗体和外周血T细胞亚群。ELISA检测结果显示,5条表位多肽均具有良好的反应原性,免疫小鼠的血清效价高低顺序依次为Pep76-106>Pep240-257>Pep511-537>Pep403-421>Pep135-172;中和试验结果表明,5条多肽免疫小鼠的血清中和滴度均高于空白对照组,其高低顺序依次为Pep240-257=Pep403-421=Pep511-537>Pep76-106=Pep135-172;流式检测结果表明,5条多肽免疫小鼠在CD3^+、CD4^+CD8-、CD8^+CD4-T淋巴细胞水平上均极显著高于空白对照组(P<0.01),CD3^+T及CD4^+CD8-T淋巴细胞数大小顺序依次为Pep403-421>Pep240-257>Pep76-106>Pep511-537>Pep135-172,CD8^+CD4-T淋巴细胞数大小顺序依次为Pep403-421>Pep76-106>Pep511-537>Pep240-257>Pep135-172。合成的5条表位多肽中,Pep240-257、Pep76-106和Pep403-421可以诱导体液免疫,Pep403-421可以诱导细胞免疫,其中,Pep403-421可以同时诱导细胞免疫及体液免疫。本研究结果为深入了解S1蛋白的免疫学特性以及研发诊断试剂和有效表位疫苗奠定了基础。; 关键词鸡传染性支气管炎病毒 H120株 S1蛋白表位多肽特异性抗体中和抗体 T淋巴细胞亚群; Keywords avian infectious bronchitis virus H120 strain S1 protein epitope-polypeptide specificity antibody neutralizing antibody T lymphocyte subsets; 分类号 S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	优化的SD大鼠小胶质细胞原代培养、纯化及采用高内涵细胞成像分析技术进行的细胞鉴定	刘检王宇红凌佳刘林孟盼杨蕙	《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2018	4	在线阅读下载PDF 职称材料
2	电针对脊髓损伤大鼠星形胶质细胞的影响及机制	何娟王忠华	《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2013	20	在线阅读下载PDF 职称材料
3	口蹄疫病毒VP1基因C末端串连表达及其抗体ELISA方法的初步建立	彭贵青陈焕春钱平李祥敏洪琦顾贫	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2004	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白抗原表位多肽的预测、鉴定及免疫效果的初步研究	范文胜朱丹张愉廖健淇王露雍璐韦平磨美兰	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2020	5	在线阅读下载PDF 职称材料