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志苓胶囊对小细胞肺癌细胞株NCI-H446细胞凋亡及h-TERT、CD44表达的影响 被引量：4
1
作者 陈英玉 潘云苓 +3 位作者 郑志宏 潘明继 胡建达 刘庭波 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1382-1386,共5页
目的研究志苓胶囊(抗癌复方Ⅱ号)对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446诱导凋亡作用机制以及对细胞黏附分子表达的影响。方法将志苓胶囊按其不同的中西药成份配制成相应的中药组、西药组和复方组,与NCI-H446共培养后,倒置显微镜观察、Hochest33... 目的研究志苓胶囊(抗癌复方Ⅱ号)对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446诱导凋亡作用机制以及对细胞黏附分子表达的影响。方法将志苓胶囊按其不同的中西药成份配制成相应的中药组、西药组和复方组,与NCI-H446共培养后,倒置显微镜观察、Hochest33258荧光染色法检测凋亡细胞,RT-PCR、Western blot、流式细胞仪分别检测bcl-2、bax、hTERT基因mRNA和相应蛋白表达水平变化以及黏附分子CD44的表达变化。结果NCI-H446经不同的药物组处理后,倒置显微镜、Hochest33258荧光染色可观察到细胞凋亡形态学改变,bcl-2基因mRNA和蛋白表达水平均有不同程度下降,bax基因表达水平则有不同程度增强,复方组改变最明显,各药物组与对照组比较差异具有显著性(P<0.01)。中药组和西药组hTERT基因和蛋白表达水平未见明显改变,复方组表达水平下调,与对照组比较差异具有显著性(P<0.01)。各药物组CD44表达水平降低,其中复方组降低水平最明显(P<0.01)。结论志苓胶囊可能通过下调NCI-H446细胞bcl-2、hTERT基因和CD44分子表达,增强bax基因表达,从而诱导NCI-H446细胞凋亡,抑制细胞黏附、转移。 展开更多
关键词 小细胞肺癌细胞株nci-h446 志苓胶囊 凋亡 HTERT CD44
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反义bcl-2硫代磷酸寡脱氧核苷酸对小细胞肺癌细胞株NCI-H446的抑制作用及诱导细胞凋亡的研究 被引量：5
2
作者 陈鑫基 胡建达 +1 位作者 战榕 吕联煌 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期374-378,共5页
目的 :观察反义bcl- 2硫代磷酸寡脱氧核苷酸 (AS -PS -ODN)对小细胞肺癌细胞株NCI-H44 6mRNA、蛋白以及增殖、活力和凋亡的影响。方法 :合成bcl- 2AS -PS -ODN作用于小细胞肺癌细胞株NCI-H44 6,半定量RT -PCR检测bcl- 2mRNA表达 ;免疫... 目的 :观察反义bcl- 2硫代磷酸寡脱氧核苷酸 (AS -PS -ODN)对小细胞肺癌细胞株NCI-H44 6mRNA、蛋白以及增殖、活力和凋亡的影响。方法 :合成bcl- 2AS -PS -ODN作用于小细胞肺癌细胞株NCI-H44 6,半定量RT -PCR检测bcl- 2mRNA表达 ;免疫细胞化学染色和流式细胞仪检测Bcl- 2蛋白表达 ;通过克隆形成率、细胞计数、流式细胞仪DNA倍体分析、TUNEL等指标观察bcl- 2AS -PS -ODN对细胞增殖、活力和凋亡的影响。结果 :①bcl- 2AS -PS -ODN能特异性地降低NCI-H44 6细胞bcl- 2mRNA和Bcl- 2蛋白的表达。 1μmol/LAS -PS-ODN作用 2 4h后bcl- 2mRNA表达量下降 69 5 % ,48h后Bcl- 2蛋白下降 62 7%。②bcl- 2AS -PS -ODN能够抑制细胞增殖和活力 ,诱导细胞凋亡 ,1μmol/LAS -PS -ODN作用 2 4h后 ,细胞凋亡率约为 2 2 3 % - 3 2 7%。 结论 :bcl- 2AS -PS -ODN能够特异性降低bcl- 2mRNA、蛋白表达 ,抑制NCI-H44 6细胞的增殖和活力 。 展开更多
关键词 硫代磷酸寡脱氧核苷酸 小细胞 肺癌细胞株 nci-h446 BCL-2 细胞凋亡
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澳洲茄碱诱导肺癌细胞株H446凋亡及其机制探讨 被引量：12
3
作者 黄文斯 王颖 +3 位作者 朱海涛 吴荧荧 谢晓东 王冬青 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期416-421,共6页
背景与目的肺癌的发病率和病死率都急剧上升,小细胞肺癌首选化疗而不能手术,而中医药副作用小,有研究表明中药澳洲茄碱具有抗肿瘤活性作用。本研究旨在探讨澳洲茄碱对肺癌细胞株H446凋亡作用的影响。方法用CCK8试剂盒筛选药物作用的合... 背景与目的肺癌的发病率和病死率都急剧上升,小细胞肺癌首选化疗而不能手术,而中医药副作用小,有研究表明中药澳洲茄碱具有抗肿瘤活性作用。本研究旨在探讨澳洲茄碱对肺癌细胞株H446凋亡作用的影响。方法用CCK8试剂盒筛选药物作用的合适浓度和时间,以药物浓度为0μmol/L、3.4μmol/L、6.8μmol/L、13.6μmol/L分4组,作用于H446细胞24 h后,倒置显微镜观察细胞形态的变化,DAPI核染观察细胞核变化,流式细胞术检测药物对细胞凋亡的影响,Western blot检测凋亡相关蛋白BCL2、BAX、CASP3表达的变化。结果澳洲茄碱可降低H446细胞的存活率,抑制其增殖,具有剂量相关性,存活率可降低至16.77%(P<0.001),最高凋亡率为44.62%(P<0.001);H446有明显的细胞凋亡形态学变化;Western blot显示凋亡相关蛋白BAX、CASP3表达上调(P<0.05),凋亡抑制基因蛋白BCL2表达下调(P<0.05)。结论澳洲茄碱可抑制H446细胞的增殖,上调促凋亡相关蛋白表达,下调抑凋亡蛋白表达,从而促进细胞的凋亡。 展开更多
关键词 澳洲茄碱 凋亡 肺癌细胞株H446
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基于蛋白组学分析旋毛虫原肌球蛋白过表达对小细胞肺癌NCI-H446细胞蛋白组分的影响 被引量：2
4
作者 王灏轩 朱莹莹 +2 位作者 程露阳 郭文平 杜娈英 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期758-765,共8页
目的研究旋毛虫原肌球蛋白(tropomyosin,Tm)过表达对人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)NCI-H446细胞蛋白组分的影响。方法本研究通过串联质谱标记(Tandem mass tags,TMT)技术结合生物信息学分析旋毛虫Tm过表达对NCI-H446细胞... 目的研究旋毛虫原肌球蛋白(tropomyosin,Tm)过表达对人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)NCI-H446细胞蛋白组分的影响。方法本研究通过串联质谱标记(Tandem mass tags,TMT)技术结合生物信息学分析旋毛虫Tm过表达对NCI-H446细胞蛋白组分的影响。比较旋毛虫Tm(Tm-pcDNA3.1)过表达和转染空载体(pcDNA3.1)48 h后NCI-H446细胞的蛋白组分,利用Uniprot数据库检索差异表达蛋白(Differentially expressed protein,DEPs)并对所得DEPs进行基因本体论(GO)富集分析。从STRING数据库获得DEPs相互作用数据,利用Cytoscape 3.9.0软件构建蛋白互作网络并筛选中心节点蛋白。通过Western blot对随机选取的中心节点蛋白NDRG1进行验证。结果旋毛虫Tm转染NCI-H446细胞48 h后,筛选出DEPs 70个,其中34个上调,36个下调;GO功能富集分析显示,DEPs主要涉及转录后的调控、免疫应答的调节等生物学功能;分析蛋白互作网络获得5个下调的中心节点蛋白:细胞周期蛋白G相关激酶(GAK)、组蛋白H3-7(H3-7)、辛普勒金Symplekin(SYMPK)、N-myc下游调节因子1(NDRG1)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶N2(PKN2);Westrne blot结果显示旋毛虫Tm降低NCI-H446细胞中NDRG1的表达。结论旋毛虫TM能引起NCI-H446细胞蛋白组分的显著变化;旋毛虫Tm可能通过下调NCI-H446细胞中GAK、H3-7、SYMPK、NDRG1、PKN2的表达发挥其生物学作用。 展开更多
关键词 旋毛虫 原肌球蛋白 小细胞肺癌nci-h446细胞 蛋白组学
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小细胞肺癌组织显著低表达的SPIDR通过降低血清依赖促进NCI-H446细胞增殖 被引量：1
5
作者 张泽忠 贾玉琳 +7 位作者 其力格尔 方一 李春晖 厉建蕾 顾晔 邓子新 张海平 马伟 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1026-1033,共8页
目的:探讨同源重组修复途径关键调控蛋白SPIDR在小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)中的作用与机制。方法:收集2013年1月至2015年1月上海肺科医院进行肿瘤手术切除、气管镜穿刺的SCLC患者癌组织标本60例及正常人群肺组织标本44例,... 目的:探讨同源重组修复途径关键调控蛋白SPIDR在小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)中的作用与机制。方法:收集2013年1月至2015年1月上海肺科医院进行肿瘤手术切除、气管镜穿刺的SCLC患者癌组织标本60例及正常人群肺组织标本44例,qRT-PCR检测临床组织样本SPIDR mRNA表达水平;经稳定过表达SPIDR改变NCI-H446细胞表达水平后,采用MTT、小鼠荷瘤实验等实验方法,在体内、体外探究SPIDR表达水平对SCLC细胞增殖等影响。结果:吸烟与患者SCLC的发生显著有关(P<0.01);SPIDR m RNA在SCLC组织样本中的表达显著低于正常肺组织(P<0.01)。人肺胚成纤维细胞株MRC-5中SPIDR mRNA和蛋白表达水平明显高于SCLC细胞株NCI-H446(均P<0.05)。在10%胎牛血清常规培养体系中,过表达SPIDR对NCI-H446细胞增值和化疗药物敏感性无明显影响(均P>0.05),但小鼠荷瘤实验从第9天开始,过表达SPIDR组(pMSCV-SPIDR)的瘤体积与原始NCI-H446组和空载体组(pMSCV)开始出现明显差异,第27天pMSCV-SPIDR组移植瘤平均体积分别比原始NCI-H446组与空载体组缩小58.99%和61.84%(均P<0.01)。在含1%～3%胎牛血清的非常规培养体系中,过表达SPIDR的NCI-H446细胞增殖速度显著低于原始NCI-H446组和空载体组(P<0.05或P<0.01)。结论:SCLC组织中SPIDR表达水平明显低于正常肺组织,过表达SPIDR的NCI-H446细胞体内及体外低血清含量培养(<3%)生长速度显著低于对照组,表明SPIDR以低血清浓度依赖方式影响SCLC细胞增殖。 展开更多
关键词 小细胞肺癌 nci-h446细胞 同源重组修复 SPIDR 血清依赖
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千金苇茎汤调控人肺小细胞癌H446细胞凋亡的分子机制研究 被引量：8
6
作者 蒋凤荣 蒋日磊 +1 位作者 张旭 黄玉芳 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2009年第10期1633-1635,共3页
目的:研究千金苇茎汤对人肺小细胞癌H446增殖与凋亡的影响。方法:将千金苇茎汤通过化学分离法制得水提部位;分为不同药物浓度,与H446共同培养,流式细胞仪细胞周期检测以及荧光显微镜线检测凋亡结果;AgNOR染色观察以及免疫组织化学检测P... 目的:研究千金苇茎汤对人肺小细胞癌H446增殖与凋亡的影响。方法:将千金苇茎汤通过化学分离法制得水提部位;分为不同药物浓度,与H446共同培养,流式细胞仪细胞周期检测以及荧光显微镜线检测凋亡结果;AgNOR染色观察以及免疫组织化学检测PCNA、caspase-3蛋白的变化。结果:不同浓度的千金苇茎汤水提部位与H446培养后,细胞凋亡率明显升高、AgNOR数目减少以及PCNA、caspase-3蛋白明显的改变(P<0.01),并有一定的浓度依赖性。结论:千金苇茎汤水提部位可以有效抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 千金苇茎汤 人肺细胞株(H446) 肺癌
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放射耐受性人小细胞肺癌亚株的建立 被引量：1
7
作者 刘静 田海梅 +3 位作者 李艳芬 李茉 王小兵 张伟 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第10期51-54,I0007,共5页
目的建立肺癌NCI-H446细胞放射抗拒性亚株,为小细胞肺癌放射抗拒和逆转研究提供配对的细胞研究工具。方法通过梯度照射NCI-H446细胞株诱导其耐放射性(共7500c Gy),并通过检测细胞总的ATP含量的方法来监测细胞倍增时间,流式细胞仪检测细... 目的建立肺癌NCI-H446细胞放射抗拒性亚株,为小细胞肺癌放射抗拒和逆转研究提供配对的细胞研究工具。方法通过梯度照射NCI-H446细胞株诱导其耐放射性(共7500c Gy),并通过检测细胞总的ATP含量的方法来监测细胞倍增时间,流式细胞仪检测细胞周期分布,以及应用多靶单击模型SF=1-(1-e-D/D0)N拟合细胞存活曲线分析其放射敏感参数的变化。结果比较亲本与耐放射株的差异,放射生物学参数值分别为D0(1.9673,2.2756)、N(1.0016,2.6008)、Dq(0.6783,1.6860)、SF2(0.3623,0.7134),耐放射株SF2值为亲本的1.97倍,G2/M期细胞所占比由18.52%下降到7.84%。耐放射株的细胞形态发生变化,倍增时间比敏感株延长。结论通过梯度照射建立了小细胞肺癌NCI-H446的耐放射亚株NCI-H446-R,与亲本细胞相比放射生物学参数有显著差异(P<0.05),本研究成果为研究小细胞肺癌放射抗拒及耐放射逆转提供了新的细胞模型。 展开更多
关键词 放射抗拒 小细胞肺癌 nci-h446细胞株 细胞周期
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肉色香蘑子实体提取物的体外抗氧化与抗肿瘤活性研究 被引量：4
8
作者 陈颖 孙红 +1 位作者 张树斌 王立安 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第23期214-217,共4页
以肉色香蘑子实体为材料,采用不同有机溶剂萃取子实体干粉,除多糖外,各有机相提取物的得率为:乙醇相>石油醚相>乙酸乙酯相。以叔丁基羟基茴香醚(BHA)为阳性对照,通过抑制1,1-二苯代苦味肼基(DPPH)自由基实验和清除超氧阴离子自由... 以肉色香蘑子实体为材料,采用不同有机溶剂萃取子实体干粉,除多糖外,各有机相提取物的得率为:乙醇相>石油醚相>乙酸乙酯相。以叔丁基羟基茴香醚(BHA)为阳性对照,通过抑制1,1-二苯代苦味肼基(DPPH)自由基实验和清除超氧阴离子自由基实验,对各提取物的体外抗氧化活性进行测定,结果显示:各有机相提取物和多糖均具有不同程度的抗氧化活性,以乙酸乙酯相、乙醇相提取物的抗氧化活性最强。以抗肿瘤药物顺铂为阳性对照,采用MTT法对各提取物的体外抗肿瘤活性进行检测,结果表明:各相提取物均具不同程度的抗肿瘤活性,其中乙酸乙酯相的抗肿瘤活性最强,达到82.7%,显著(P<0.05)高于阳性对照;其次为多糖,同浓度下与顺铂较接近。综上所述,肉色香蘑子实体含丰富的抗氧化、抗肿瘤活性成分。 展开更多
关键词 叔丁基羟基茴香醚 1 1-二苯代苦味肼基自由基 顺铂 MTT法 H446肺癌细胞株
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