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siRNA干扰NF-E2相关因子2对喉鳞状细胞癌化疗敏感性的影响 被引量:2
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作者 徐吉 周争 李吉平 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期381-385,共5页
目的探讨小片段干扰RNA(siRNA)干扰NF-E2相关因子2(NF-E2-related factor 2,Nrf2)对人喉癌Hep2细胞化疗敏感性的影响及凋亡的差异。方法体外培养人喉癌细胞系Hep2,设立实验组和对照组,实验组(Hep2/siRNA组)采用脂质体转染法,转染siRNA至... 目的探讨小片段干扰RNA(siRNA)干扰NF-E2相关因子2(NF-E2-related factor 2,Nrf2)对人喉癌Hep2细胞化疗敏感性的影响及凋亡的差异。方法体外培养人喉癌细胞系Hep2,设立实验组和对照组,实验组(Hep2/siRNA组)采用脂质体转染法,转染siRNA至Hep2细胞系,对照组(Hep2/siRNA-control组)转染空质粒siRNA-control。经Western Blot验证其转染效果后,采用CCK-8法检测计算Hep2/siRNA与Hep2/siRNA-control经不同浓度梯度顺铂(分别为1、2、4、8、16μg/ml)处理后的细胞增殖抑制率及IC50值。通过凋亡试剂盒分别染色Hep2/siRNA与Hep2/siRNA-control细胞系,采用流式细胞仪检测两组细胞的凋亡率。结果实验组的Nrf2蛋白表达比对照组发生下调,经不同浓度梯度顺铂处理24h后,Hep2/siRNA细胞系增殖抑制率相对Hep2/siRNA-control逐渐升高,顺铂浓度为4μg/ml时,对照组细胞增殖率为35.55%±6.14%,而实验组细胞增殖率为46.07%±5.21%,IC50值下调,细胞凋亡率由17.1%(对照组)升高至26.6%(实验组)。结论 siRNA干扰Nrf2基因可增强Hep2细胞系对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 喉癌 NF-E2相关因子2 小片段干扰rna 化疗敏感性 顺铂
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siRNAs在RNA干扰中的作用 被引量:2
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作者 沈波 鞠桂芝 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期816-818,共3页
由siRNAs介导的RNAi是低等生物体内的一种基因调控方式。siRNAs诱导RNAi发生的效率有赖于其结构、序列及末端碱基修饰情况。本文作者简略论述了能在体内诱导高效RNAi现象的siRNAs结构组成的特征及其可能影响siRNAs作用效率的因素。
关键词 rna干扰 小片段干扰rna
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肝素酶siRNA联合亚砷酸抑制胰腺癌侵袭性的实验研究 被引量:3
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作者 郑家平 杨建民 茹清静 《中华中医药学刊》 CAS 2011年第12期2657-2661,I0021,共6页
目的:观察Hpa小干扰RNA(small-interfering RNA,siRNA)联合亚砷酸对胰腺癌侵袭力的影响,为Hpa-siRNA联合亚砷酸治疗胰腺癌提供实验依据。方法:将3条Hpa干扰靶序列Hpa1-siRNA,Hpa2-siRNA,Hpa3-siRNA稀释退火,分别与线性化pGenesil-1.1质... 目的:观察Hpa小干扰RNA(small-interfering RNA,siRNA)联合亚砷酸对胰腺癌侵袭力的影响,为Hpa-siRNA联合亚砷酸治疗胰腺癌提供实验依据。方法:将3条Hpa干扰靶序列Hpa1-siRNA,Hpa2-siRNA,Hpa3-siRNA稀释退火,分别与线性化pGenesil-1.1质粒表达载体的连接制成pGenesil1.1/Hpa1-siRNA、pGen-esil1.1/Hpa2-siRNA、pGenesil1.1/Hpa3-siRNA等重组质粒。然后将上述目的基因转染SW1990胰腺癌细胞,并设空白对照和阴性对照组。RT-PCR检测转染后Hpa-mRNA表达,Western blot检测转染后Hpa蛋白表达。采用Transwell小室试验检测转染后Hpa-siRNA和经亚砷酸处理SW1990细胞体外侵袭能力。结果:Hpa-mR-NA和Hpa蛋白在基因转染前后的表达,NC和HK组无明显差别,Hpa1-siRNA,Hpa2-siRNA,Hpa3-siRNA三组均明显下降,Hpa2-siRNA抑制效率优于Hpa1-siRNA和Hpa3-siRNA(P<0.05)。随着亚砷酸浓度从0.5、1.0、2.0mg/ml递增,侵袭抑制率也随之升高,分别为7.78%、46.8%及76.8%,差异有统计学意义(χ2=71.633,P<0.05)。Hpa2-siRNA联合亚砷酸后均能显著抑制SW1990胰腺癌细胞侵袭力,抑制率均达100%。结论:Hpa-siRNA和亚砷酸对SW1990胰腺癌细胞侵袭力具有协同抑制作用。 展开更多
关键词 乙酰肝素酶 小片段干扰rna 亚砷酸 胰腺癌 侵袭力
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MDR1、GSTπ特异性siRNA真核表达载体的构建及表达 被引量:2
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作者 冯敏华 张弢 +1 位作者 顾静文 林果为 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期29-32,38,共5页
目的构建多药耐药基因(MDR1)、谷胱甘肽S-转移酶(GSTπ)特异性小干扰RNA(siRNA)真核表达载体并检测其表达。方法参照siRNA模板设计原则,设计并化学合成2条siRNA模板序列,退火后将其插入质粒pSilencer2.1-U6,限制性酶切和基因测序进行鉴... 目的构建多药耐药基因(MDR1)、谷胱甘肽S-转移酶(GSTπ)特异性小干扰RNA(siRNA)真核表达载体并检测其表达。方法参照siRNA模板设计原则,设计并化学合成2条siRNA模板序列,退火后将其插入质粒pSilencer2.1-U6,限制性酶切和基因测序进行鉴定。脂质体介导下转染K562/Adr细胞,实时荧光定量PCR分析MDR1、GSTπmRNA的表达,荧光免疫组化检测Pgp、GSTπ蛋白的表达。结果重组质粒pSilenc-er2.1-MDR1、GSTπ经酶切、测序分析表明siRNA模板序列成功插入预计位点,并且序列正确。用pSilencer-mdr1、pSilencer2.1-GSTπ分别转染K562/Adr细胞株,mdr1mRNA表达量下降了71.5%,GSTπmRNA表达量下降了39.8%,荧光免疫组化显示Pgp、GSTπ表达均显著减少(P<0.01)。结论成功构建了MDR1、GSTπ特异性siRNA真核表达载体,该载体可不同程度逆转K562/Adr细胞的多药耐药。 展开更多
关键词 小片段干扰rna 多药耐药 谷胱甘肽S-转移酶 多药耐药基因
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内源小RNAs在植物胁迫反应中的作用 被引量:3
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作者 谢兆辉 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期809-817,共9页
世界范围内,农作物的产量都容易受到各种生物和非生物因素的影响,对植物逆境适应性反应机制的深入研究有助于我们采取新的措施,以提高作物的逆境适应性。以前通常认为植物适应逆境胁迫的机制主要涉及相关基因在转录水平的调节,然而,近... 世界范围内,农作物的产量都容易受到各种生物和非生物因素的影响,对植物逆境适应性反应机制的深入研究有助于我们采取新的措施,以提高作物的逆境适应性。以前通常认为植物适应逆境胁迫的机制主要涉及相关基因在转录水平的调节,然而,近来发现部分内源小RNAs(siRNAs),如miRNAs、nat-siRNAs和lsiRNAs不仅可以调节植物的生长发育,而且在植物逆境反应中具有重要作用。文章就这些内源小RNAs在氧、矿质元素、干旱、低温、脱落酸、机械、重金属、生物及其他环境因素胁迫中的作用机制做一概述。 展开更多
关键词 微小rnaS 天然反义转录小干扰rnas 小片段干扰rna 胁迫
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植物小RNAs的研究进展
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作者 谢兆辉 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期11-17,共7页
小RNAs(长度小于40nt)是nc-RNAs重要的一部分,现在植物中已发现了多种小RNAs,如小干扰RNAs(siRNAs)、微小RNAs(miRNAs)、反式作用的小干扰RNAs、天然反义转录小干扰RNAs、异染色质小干扰RNAs、长小片段小干扰RNAs、天然反义转录的微小R... 小RNAs(长度小于40nt)是nc-RNAs重要的一部分,现在植物中已发现了多种小RNAs,如小干扰RNAs(siRNAs)、微小RNAs(miRNAs)、反式作用的小干扰RNAs、天然反义转录小干扰RNAs、异染色质小干扰RNAs、长小片段小干扰RNAs、天然反义转录的微小RNAs及其一些未命名的小RNAs。成熟的小RNAs聚集相关的蛋白质因子,可以抑制转录,导致转录水平的基因沉默(TGS);或介导目标mRNA的剪切,抑制翻译,导致转录后水平基因沉默(PTGS)。 展开更多
关键词 干扰rnas微小rnas反式作用的小干扰rnas 天然反义转录小干扰rnas 异染色体小干扰rnas 小片段干扰rnas
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