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SUMO化修饰对高糖诱导的大鼠肾系膜细胞IKKγ/NF-κB信号的影响 被引量：2
1
作者 黄炜 徐玲 +1 位作者 周雪琴 徐勇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期538-542,共5页
目的:探讨小泛素相关修饰物(SUMO)化修饰对高糖诱导的肾系膜细胞IκB激酶γ(IKKγ)/NF-κB信号的影响。方法:体外培养大鼠肾小球系膜细胞,设正常对照组、高糖干预组和渗透压对照组:用免疫印迹和RT-PCR法检测各组细胞SUMO1、SUMO2/3、IK... 目的:探讨小泛素相关修饰物(SUMO)化修饰对高糖诱导的肾系膜细胞IκB激酶γ(IKKγ)/NF-κB信号的影响。方法:体外培养大鼠肾小球系膜细胞,设正常对照组、高糖干预组和渗透压对照组:用免疫印迹和RT-PCR法检测各组细胞SUMO1、SUMO2/3、IKKγ和NF-κB p65的表达;用免疫共沉淀检测SUMO与IKKγ蛋白间的相互作用。结果:高糖呈浓度和时间依赖性上调系膜细胞SUMO和NF-κB p65表达(均P<0.01)。各组细胞IKKγ的蛋白与mRNA表达差异无统计学意义(均P<0.05);高糖组SUMO与IKKγ蛋白间的相互作用减弱(均P<0.01)。结论:高糖影响IKKγ的SUMO化修饰,可能参与了高糖诱导的肾系膜细胞NF-κB信号激活的调控。 展开更多
关键词 小泛素相关修饰物 IKB激酶r NF-KB 糖尿病肾病
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SUMO化修饰与血液系统疾病 被引量：3
2
作者 黄禾菁 侯健 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期218-221,共4页
小泛素相关修饰物(SUMO)修饰为继泛素化修饰后又一种主要的蛋白翻译后修饰,参与调控多种细胞生命活动,如蛋白质间相互作用、胞内定位、DNA修复、转录因子的活化,以及细胞周期和转录的调控等,并与多种疾病的发病密切相关。近年来的研究表... 小泛素相关修饰物(SUMO)修饰为继泛素化修饰后又一种主要的蛋白翻译后修饰,参与调控多种细胞生命活动,如蛋白质间相互作用、胞内定位、DNA修复、转录因子的活化,以及细胞周期和转录的调控等,并与多种疾病的发病密切相关。近年来的研究表明,SUMO化修饰也参与了多种血液系统疾病的发病。本文综述了SUMO化修饰对血液系统疾病发病及治疗的影响。 展开更多
关键词 小泛素相关修饰物 SUMO化修饰 血液系统疾病
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K33位乙酰化修饰SUMO蛋白的化学合成 被引量：1
3
作者 王业海 孔一夫 +1 位作者 陈晨晨 李宜明 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1987-1992,共6页
采用高温辅助固相合成技术及基于多肽酰肼的自然化学连接技术,高效获得了小泛素相关修饰物(SUMO)蛋白及33位赖氨酸(K33)乙酰化SUMO蛋白.聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和圆二色光谱分析结果表明,与生物表达蛋白相比,化学合成蛋白具有较... 采用高温辅助固相合成技术及基于多肽酰肼的自然化学连接技术,高效获得了小泛素相关修饰物(SUMO)蛋白及33位赖氨酸(K33)乙酰化SUMO蛋白.聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和圆二色光谱分析结果表明,与生物表达蛋白相比,化学合成蛋白具有较好的纯度和类似的二级结构. 展开更多
关键词 小泛素相关修饰物 乙酰化 高温辅助固相合成 多肽酰肼 自然化学连接
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同种异体异位气管移植物排斥反应的动态变化及SUMO1表达
4
作者 何莹 马俊磊 +1 位作者 宫念樵 赵波 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期489-493,共5页
目的 探讨同种异体异位气管移植物排斥反应的动态变化,并分析小泛素相关修饰物1 （SUMO1）在此过程中的表达特点.方法 在小鼠背部异位气管移植模型中,分别建立同系移植组（C57 BL/6-C57 BL/6）和同种异体移植组（BALB/c-C57 BL/6）.在... 目的 探讨同种异体异位气管移植物排斥反应的动态变化,并分析小泛素相关修饰物1 （SUMO1）在此过程中的表达特点.方法 在小鼠背部异位气管移植模型中,分别建立同系移植组（C57 BL/6-C57 BL/6）和同种异体移植组（BALB/c-C57 BL/6）.在术后第7、14、30天,每组取6只动物获取移植物,动态检测排斥反应病理学变化、移植气管管腔阻塞率、有核细胞计数和SUMO1阳性细胞表达及计数.结果 同系移植组气管仅有轻微损伤并于术后14d修复;同种异体移植组术后7d气道上皮严重损伤伴大量的单核细胞浸润,术后14 d上皮坏死伴纤维增生,术后30 d,上皮细胞完全消失,管腔填塞.同系移植物术后管腔阻塞率为2.8％～4.3％,同种异体移植物在3个时间点分别为（3.5±0.4）％、（29.8±3.5）％和（92.5±3.1）％.同系移植组SUMO1主要在黏膜上皮细胞中表达;同种异体移植组SUMO1第7.天在黏膜下层浸润的淋巴细胞和巨噬细胞中表达,第14天在浸润的单核细胞和增生的纤维母细胞中高表达,第30天表达更为明显.术后第7天,同系移植组和同种异体移植组每组织切面有核细胞计数分别为（294.5±83.1）、（299.5±64.2）,差异无统计学意义,SUMO1阳性细胞数分别为（151.8±59.2）、（237.3±57.2）,差异有统计学意义（P＜0.05）;术后第14天,同系移植组和同种异体移植组有核细胞计数分别为（617.3±70.1）、（774.6±197.4）,差异无统计学意义,SUMO1阳性细胞数分别为（220.0±33.9）、（489.0±145.3）,差异有统计学意义（P＜0.05）;术后第30天,同系移植组和同种异体移植组有核细胞计数分别为（276.3±119.0）、（875.0±113.6）,差异有统计学意义（P＜0.05）,SU-MO1阳性细胞数分别为（105.6±92.1）、（781.0±73.5）,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 小鼠同种异体异位气管移植物经历了典型的急排期、过渡期和慢排期的动态过程,是研究急性排斥和慢性排斥反应动态过程的优良模型.在此过程中,SUMO1在新生有核细胞中的高表达,可能与急性排斥反应和气管纤维化的形成有关. 展开更多
关键词 气管移植物 急性排斥 纤维化 小泛素相关修饰物1
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融合表达载体pET22b-SUMO-FGFR4的构建及其在大肠杆菌中表达条件的优化 被引量：5
5
作者 刘微 姚杨 +4 位作者 马萧萧 邓裕宣 梅迪 刘磊 王会岩 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期642-647,共6页
目的:设计合成小泛素修饰物-成纤维细胞生长因子受体4(SUMO-FGFR4)基因,构建pET22bSUMO-FGFR4表达载体,并对其表达条件进行优化。方法:采用Overlap PCR方法制备SUMO-FGFR4融合基因,并连接到原核表达载体pET22b中,获得pET22b-SUMO-FGFR4... 目的:设计合成小泛素修饰物-成纤维细胞生长因子受体4(SUMO-FGFR4)基因,构建pET22bSUMO-FGFR4表达载体,并对其表达条件进行优化。方法:采用Overlap PCR方法制备SUMO-FGFR4融合基因,并连接到原核表达载体pET22b中,获得pET22b-SUMO-FGFR4重组表达载体。以乳糖为诱导剂,观察乳糖浓度、诱导时机、诱导温度、诱导时间和乳糖的添加方式等因素对SUMO-FGFR4蛋白表达量的影响,确定最佳诱导条件,并进行重组蛋白的可溶性分析。结果:pET22b-SUMO-FGFR4表达的融合蛋白在相对分子质量40 000处显示目标条带,并与FGFR4抗体特异性结合。融合蛋白在乳糖终浓度为1.0g·L-1、诱导时间为3h、诱导时机A(600)值为0.8、诱导温度为37℃时表达量最高,乳糖的添加方式对SUMO-FGFR4融合蛋白的表达量无明显影响。乳糖作为诱导剂比传统诱导剂IPTG诱导SUMO-FGFR4融合蛋白的表达量高7.5%,融合蛋白以包涵体形式为主。结论:以乳糖作为诱导剂,成功表达了SUMO-FGFR4融合蛋白,确定了融合蛋白的最佳表达条件。 展开更多
关键词 小泛素相关修饰物 成纤维细胞生长因子受体4 重组融合蛋白类
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大黄鱼ubc9基因的克隆和组织表达 被引量：6
6
作者 周鹏 张子平 +2 位作者 王艺磊 谢芳靖 邹志华 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期76-82,共7页
类泛素化(sumoylation)是一种重要的转录后修饰过程。激活的SUMO(small ubiquitin-related modifer)和E2结合酶结合稳定后共价结合到底物上,从而完成对底物的类泛素化。UBC9(ubiquitin-conjugating enzyme)作为惟一的E2结合酶,在完成类... 类泛素化(sumoylation)是一种重要的转录后修饰过程。激活的SUMO(small ubiquitin-related modifer)和E2结合酶结合稳定后共价结合到底物上,从而完成对底物的类泛素化。UBC9(ubiquitin-conjugating enzyme)作为惟一的E2结合酶,在完成类泛素化中起着重要作用。从已构建的大黄鱼性腺线性化cDNA文库中筛选出ubc9同源片段,用SMART-RACE方法克隆得到了846bp的全长cDNA序列。该序列编码一个由158个氨基酸组成的蛋白。该蛋白序列与已知的UBC9高度同源,含UBC保守结构域和UBC9激活位点区域。实时定量PCR分析ubc9基因在各组织器官的表达,结果发现,ubc9基因在大黄鱼的性腺中大量表达。推测UBC9在大黄鱼性腺发育中起重要的生物学作用。 展开更多
关键词 ubc9基因 小泛素相关修饰物 RT-PCR 大黄鱼
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利用SUMO技术表达可溶性的拟南芥AtRD22蛋白 被引量：6
7
作者 唐玉林 米子岚 +1 位作者 钟活权 江年琼 《深圳大学学报（理工版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第6期610-616,共7页
为了体外获得可溶性的拟南芥AtRD22蛋白,以拟南芥叶片提取的总核糖核酸(ribonucleic acid,RNA)为模版,反转录获得AtRD22的全长互补脱氧核糖核酸(complementary deoxyribonucleic acid,c DNA),分别构建AtRD22的原核重组表达载体p ET32a-R... 为了体外获得可溶性的拟南芥AtRD22蛋白,以拟南芥叶片提取的总核糖核酸(ribonucleic acid,RNA)为模版,反转录获得AtRD22的全长互补脱氧核糖核酸(complementary deoxyribonucleic acid,c DNA),分别构建AtRD22的原核重组表达载体p ET32a-RD22和p SUMO-RD22,并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行AtRD22蛋白的表达.在0.3 mmol/L的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-dithiogalactopyranoside,IPTG)诱导下,探索不同培养温度和诱导时间对可溶性蛋白表达的影响.结果表明,在实验条件下,转化p ET32a-RD22的重组菌表达AtRD22蛋白的总量高于转化p SUMO-RD22的重组菌,但后者的可溶性AtRD22蛋白表达量明显高于前者.当诱导温度为28或16℃,时间分别为6.0或8.0 h以上时,转化p SUMO-RD22的重组菌中可溶性目的蛋白的表达量相对较大.为进一步在体外研究AtRD22蛋白质的结构和功能奠定了基础. 展开更多
关键词 蛋白质工程 拟南芥AtRD22 融合标签 小泛素相关修饰物 基因克隆 原核表达
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SUMO蛋白在体外培养的人晶状体上皮细胞内的表达及对氧化应激的调控作用 被引量：2
8
作者 韩笑 王欣玲 +2 位作者 吴迪 张劲松 阎启昌 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期193-198,共6页
目的：观察小泛素相关修饰物（SUMO）在体外正常培养的人晶状体上皮细胞系（SRA01/04）内的表达以及由高糖诱导的氧化应激条件下SUMO的变化，探讨其对氧化应激的调控作用。方法通过免疫细胞化学染色法，检测SUMO1，2/3，4蛋白在正常培养... 目的：观察小泛素相关修饰物（SUMO）在体外正常培养的人晶状体上皮细胞系（SRA01/04）内的表达以及由高糖诱导的氧化应激条件下SUMO的变化，探讨其对氧化应激的调控作用。方法通过免疫细胞化学染色法，检测SUMO1，2/3，4蛋白在正常培养的SRA01/04内的表达及分布；通过RT-PCR法，观察不同浓度和时间高糖处理时SUMO 1-4 mRNA的表达变化。按浓度实验分组：葡萄糖浓度分别为5.5、12.5、25、50 mmol/L作用24 h。按时间实验分组：葡萄糖浓度50 mmol/L作用0、6、12、24 h。将GFP-SUMO2质粒转入细胞后通过CCK8检测法和AV/PI双染流式细胞仪检测高糖（50 mmol/L）处理后，转染与非转染组的细胞存活率和细胞凋亡率。结果免疫细胞化学染色结果，SUMO 1-4蛋白在SRA01/04细胞内主要分布于细胞核，SUMO 2/3同时少量分布于胞质；RT-PCR结果可见，与低糖组比较，高糖组随着糖浓度增加SUMO1-SUMO4 mRNA表达增加（P〈0.05）；与50 mmol/L高糖处理0 h比较，随着处理时间增加SUMO1-SUMO4 mRNA表达增加（P〈0.05）。与非转染组比较，转染GFP-SUMO2的SRA01/04经高糖处理后存活率增加，凋亡率降低（P〈0.05）。结论 SUMO蛋白在SRA01/04内阳性表达，一定程度高糖诱导的氧化应激影响SUMO mRNA表达。 展开更多
关键词 小泛素相关修饰物 人晶状体上皮细胞 白内障 高糖 氧化应激
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SUMO对NF-κB信号通路的调控作用 被引量：5
9
作者 杨春华 洪永德 伍会健 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期154-157,共4页
核转录因子NF-κB是一种广泛存在于真核细胞内的,具有多向性、多功能的重要调节蛋白,与机体免疫应答、炎症反应,以及肿瘤的发生发展等多种生理病理过程相关。蛋白质翻译后修饰对NF-κB信号通路能起调控作用,而小泛素相关修饰物(small ub... 核转录因子NF-κB是一种广泛存在于真核细胞内的,具有多向性、多功能的重要调节蛋白,与机体免疫应答、炎症反应,以及肿瘤的发生发展等多种生理病理过程相关。蛋白质翻译后修饰对NF-κB信号通路能起调控作用,而小泛素相关修饰物(small ubiquitin-related modifier,SUMO)是近年报道的参与调控NF-κB信号通路的一种非常重要的小分子蛋白,本文就SUMO对NF-κB信号通路的调节作用做一介绍。 展开更多
关键词 小泛素相关修饰物 SUMO化修饰 NF-ΚB信号通路
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