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小反刍兽疫病毒疫苗株N和M基因的克隆、序列分析及原核表达
被引量：
4
1
作者
何亚鹏
鲍长磊
+2 位作者
张琪
付明哲
许信刚
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期179-184,共6页
根据GenBank已登录的PPRV基因组序列,设计并合成2对特异性引物,以PPRV疫苗株基因组为模板,经RT-PCR扩增获得N和M基因并进行序列分析,再将2个基因插入到原核表达载体pET-28a中,经鉴定正确后转化BL21感受态细胞进行IPTG诱导表达,并进行SDS...
根据GenBank已登录的PPRV基因组序列,设计并合成2对特异性引物,以PPRV疫苗株基因组为模板,经RT-PCR扩增获得N和M基因并进行序列分析,再将2个基因插入到原核表达载体pET-28a中,经鉴定正确后转化BL21感受态细胞进行IPTG诱导表达,并进行SDS-PAGE和Western blot检测。成功克隆PPRV疫苗株N和M基因,重组菌经IPTG诱导后表达分子质量为57.7ku N蛋白(核衣壳蛋白)和38.1ku的M蛋白(基质蛋白),2个蛋白均能与小反刍兽疫阳性血清特异性结合,具有良好的反应原性。
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关键词
小反刍兽疫毒
N基因
M基因
克隆
序列分析
原核表达
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题名
小反刍兽疫病毒疫苗株N和M基因的克隆、序列分析及原核表达
被引量：
4
1
作者
何亚鹏
鲍长磊
张琪
付明哲
许信刚
机构
西北农林科技大学动物医学院
出处
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期179-184,共6页
基金
陕西省科技攻关(2015NY162)
西北农林科技大学试验示范站(基地)科技成果推广(TGZX2015-32)
陕西省科技统筹创新工程计划(2016KTZDNY02-05)~~
文摘
根据GenBank已登录的PPRV基因组序列,设计并合成2对特异性引物,以PPRV疫苗株基因组为模板,经RT-PCR扩增获得N和M基因并进行序列分析,再将2个基因插入到原核表达载体pET-28a中,经鉴定正确后转化BL21感受态细胞进行IPTG诱导表达,并进行SDS-PAGE和Western blot检测。成功克隆PPRV疫苗株N和M基因,重组菌经IPTG诱导后表达分子质量为57.7ku N蛋白(核衣壳蛋白)和38.1ku的M蛋白(基质蛋白),2个蛋白均能与小反刍兽疫阳性血清特异性结合,具有良好的反应原性。
关键词
小反刍兽疫毒
N基因
M基因
克隆
序列分析
原核表达
Keywords
PPRV
N gene
M gene
Clone
Sequence analysis
Prokaryotic expression
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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出处
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被引量
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1
小反刍兽疫病毒疫苗株N和M基因的克隆、序列分析及原核表达
何亚鹏
鲍长磊
张琪
付明哲
许信刚
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
4
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