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一种制备酶标记抗体的新技术及在血痕种属鉴定的应用 被引量:2
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作者 周大鹏 吴文庆 周月琴 《法医学杂志》 CAS CSCD 1995年第2期55-56,共2页
本实验建立了一种过碘酸钠氧化法为基础、制备HRP标记的免抗人IgG抗体的新技术。首先以己二酰二肼作为肼化剂,在IgG分子上接上肼基,然后以过碘酸钠作为氧化剂,使HRP分子上的糖基氧化为醛基,进而使醛基与联结在IgG分... 本实验建立了一种过碘酸钠氧化法为基础、制备HRP标记的免抗人IgG抗体的新技术。首先以己二酰二肼作为肼化剂,在IgG分子上接上肼基,然后以过碘酸钠作为氧化剂,使HRP分子上的糖基氧化为醛基,进而使醛基与联结在IgG分子上的肼基形成Sciff氏碱而达到酶与抗体的联接。在用斑点ELISA方法鉴别血痕种属的研究中,该法制各的酶标记抗体具有高效价,高敏感度,高特异性等优点。 展开更多
关键词 标记抗体 血痕种属 制备 抗人IgG抗体 ELISA方法 IgG分子 鉴定 过碘酸钠 高特异性 HRP 氧化法 氧化剂 高效价 敏感度 醛基
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携量子点靶向高分子微泡造影剂制备及体外细胞实验研究 被引量:2
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作者 郝兰 王志刚 +2 位作者 骆杰 张群霞 郑元义 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期24-27,共4页
目的:制备一种量子点(quantum dots,QDs)标记单抗赫赛汀修饰的靶向高分子微泡MBQDs/PLGA/Her,并考察其在人乳腺癌细胞MCF-7靶向性实验中的应用。方法:双乳化法(W1/O/W2)联合共价偶联法(EDC/NHS)制备MBQDs/PLGA/Her,TEM表征QDs装载标记,... 目的:制备一种量子点(quantum dots,QDs)标记单抗赫赛汀修饰的靶向高分子微泡MBQDs/PLGA/Her,并考察其在人乳腺癌细胞MCF-7靶向性实验中的应用。方法:双乳化法(W1/O/W2)联合共价偶联法(EDC/NHS)制备MBQDs/PLGA/Her,TEM表征QDs装载标记,MTT法比较细胞毒性,傅里叶变换红外光谱(Fourier transform infrared spectrum,FT-IR)检测MBQDs/PLGA/Her与抗体的连接情况,荧光显微镜观察QDs荧光标记性能。结果:MBQDs/PLGA/Her平均粒径为(584.7±20.2)nm,TEM显示QDs在聚乳酸-羟基乙酰共聚物(poly lactic-glycolic acid,PLGA)微粒包埋,FT-IR表明赫赛汀氨基与PLGA羧基的共价偶联。MBQDs/PLGA/Her细胞毒性小于QDs试剂(P<0.05)。细胞识别实验表明QDs标记的红色微泡MBQDs/PLGA/Her紧密黏附在人乳腺癌细胞MCF-7周围。结论:成功制备MBQDs/PLGA/Her,QDs包裹在高分子微气泡核内既改善其细胞毒性且保持QDs荧光标记性能。 展开更多
关键词 量子点 分子微气泡 抗体 标记
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血清抗p53抗体在喉癌患者中的诊断意义 被引量:2
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作者 杨旋 周建荣 +2 位作者 冯明亮 张耀东 薛莲 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期524-526,共3页
目的:检测喉癌患者血清中抗p53抗体的阳性率,探讨抗p53抗体在喉癌中的诊断作用。方法:应用ELISA法检测4组共计99例血清样本中的抗p53抗体,即术前31例,术后第10天样本25例,术后第17天样本23例。术后10 d及17 d样本均来自于术前组术后患... 目的:检测喉癌患者血清中抗p53抗体的阳性率,探讨抗p53抗体在喉癌中的诊断作用。方法:应用ELISA法检测4组共计99例血清样本中的抗p53抗体,即术前31例,术后第10天样本25例,术后第17天样本23例。术后10 d及17 d样本均来自于术前组术后患者。正常对照组20例。结果:在31例喉癌患者血清中14例高表达抗p53抗体,阳性率为45.2%;在手术治疗后10 d样本中4例高表达抗p53抗体,阳性率为16%;在手术后17 d及正常对照组中,无阳性表达。结论:抗p53抗体不仅可以成为一种新的喉癌标记分子,也可以作为判断喉癌患者预后的有效指标之一。 展开更多
关键词 抗p53抗体 喉癌 酶联免疫吸附双抗体夹心法 肿瘤标记分子
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检测β-CTX和N-MID水平的双标记时间分辨免疫荧光分析方法的建立和评价 被引量:4
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作者 毛骞 陈翠翠 +3 位作者 梁焕坤 刘鹏娥 钟树海 李来庆 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期770-776,共7页
目的:研制一种检测β胶联降解产物(β-CTX)和骨钙素N端中分子片段(N-MID)水平的双标记时间分辨免疫荧光分析方法(TRFIA)并评价其检测性能。方法:将抗β-CTX和N-MID的4E5和2B7单克隆抗体(MAb)作为包被抗体包被在96孔培养板,采用铕离子(Eu... 目的:研制一种检测β胶联降解产物(β-CTX)和骨钙素N端中分子片段(N-MID)水平的双标记时间分辨免疫荧光分析方法(TRFIA)并评价其检测性能。方法:将抗β-CTX和N-MID的4E5和2B7单克隆抗体(MAb)作为包被抗体包被在96孔培养板,采用铕离子(Eu^(3+))和钐离子(Sm^(3+))分别标记2G6和5A3 MAb作为检测抗体,建立双抗体夹心TRFIA分析法并制备成试剂盒。通过试剂盒的灵敏度、准确度(稀释回收率)、特异性、精密度、稳定性和临床样本比对等实验评价其检测性能。结果:制备的双标记TRFIA试剂盒对β-CTX的检测灵敏度为0.025μg·L^(-1),线性范围为0.025~5.000μg·L^(-1),对N-MID的检测灵敏度为0.5μg·L^(-1),线性范围为0.5~200.0μg·L^(-1)。β-CTX平均稀释回收率为102.13%,N-MID平均稀释回收率为103.02%,与其他常见骨检测指标无明显交叉反应,特异性较强。β-CTX批内变异系数(CV)为5.81%~7.82%,批间CV为5.97%~8.02%;N-MID批内CV为6.05%~8.32%,批间CV为6.14%~8.56%;TRFIA试剂盒可在4℃稳定保存6个月,37℃稳定保存7 d。结论:建立的双标记TRFIA方法具有高灵敏度、高特异度、高准确率和方便快捷等优点,适用于大批量临床样品的检测。 展开更多
关键词 β胶联降解产物 N端中分子片段 骨质疏松症 抗体夹心 标记时间分辨免疫荧光分析
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用双功能螫合法连接放射性金属元素于单克隆抗体上
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作者 邓敬兰 唐荔 唐晓燕 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1996年第1期49-50,共2页
本文报道用DTPA环酐(CDTPAA)连接113m于单克隆抗体(McAb)上的初步结果,并试验了不同比值的CDTPAA/McAb对标记率的影响。当此比值由1:20增至1:200时。标记率由61%升至68%。经与CDT... 本文报道用DTPA环酐(CDTPAA)连接113m于单克隆抗体(McAb)上的初步结果,并试验了不同比值的CDTPAA/McAb对标记率的影响。当此比值由1:20增至1:200时。标记率由61%升至68%。经与CDTPAA水解对照组比较,对照组的标记率仅为25%。本结果提示,CDTPAA与McAb的结合是以未水解的CDTPAA连接放射性金属元素于McAb上为基础的。作者还讨论了反应环境中的pH值、反应时间及蛋白质浓度对连接效率的影响。本文对放射免疫治疗有意义的金属元素的标记法做了有益探索。 展开更多
关键词 双功能螯合剂 单克隆抗体 标记
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一步法胶体金快速诊断法与ELISA检测猪瘟抗体的比较 被引量:1
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作者 顾健 张燕 陆义超 《上海畜牧兽医通讯》 2010年第1期64-64,共1页
关键词 免疫胶体金技术 ELISA检测 快速诊断法 猪瘟抗体 一步法 蛋白质分子 静电作用 标记技术
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猪葡萄球菌感染BALB/c小鼠血清中细胞因子表达的抗体芯片分析
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作者 李艳 王磊 +5 位作者 蔡汝健 蒋智勇 勾红潮 楚品品 宋帅 李春玲 《广东农业科学》 CAS 2018年第8期113-117,174,共6页
为分析猪葡萄球菌感染BALB/c小鼠不同时间点血清中炎性细胞因子表达的变化,收集猪葡萄球菌感染BALB/c小鼠不同感染时段(24、48 h)的血清,采用细胞因子抗体芯片技术检测32种细胞因子水平。结果显示,猪葡萄球菌感染小鼠后血清细胞因子表... 为分析猪葡萄球菌感染BALB/c小鼠不同时间点血清中炎性细胞因子表达的变化,收集猪葡萄球菌感染BALB/c小鼠不同感染时段(24、48 h)的血清,采用细胞因子抗体芯片技术检测32种细胞因子水平。结果显示,猪葡萄球菌感染小鼠后血清细胞因子表达水平发生了明显变化:与对照相比,感染后24 h,血清细胞因子中有5种细胞因子表达出现了显著性变化,其中表达升高2倍以上的细胞因子有4种(G-CSF、IL-6、KC、MCP-5);感染后48 h,血清细胞因子中共有4种细胞因子表达出现了显著性变化,其中表达升高2倍以上的细胞因子有3种(G-CSF、KC、MCP-5);感染24 h和48 h后IL-12的表达均显著低于对照。炎性细胞因子在猪葡萄球菌感染中发挥重要作用,利用细胞因子抗体芯片从血清中筛选猪葡萄球菌相关蛋白分子标记物是可行的。 展开更多
关键词 抗体芯片 猪葡萄球菌 炎性细胞因子 分子标记
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用14-3-3蛋白诊断牛海绵样脑病
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作者 李秉鸿 《畜牧兽医科技信息》 1997年第13期7-7,共1页
牛海绵样脑病(BSE)的诊断必须在屠宰后取脑组织进行,因此寻找一种简单的BSE分子标记是十分有用的。更重要的是这种标记在牛群中得以鉴别后,就可开发出一种BSE检验手段。在人类CJD病(克雅氏症)患者的大脑脊髓液(CSF)中检测到丙种蛋白,该... 牛海绵样脑病(BSE)的诊断必须在屠宰后取脑组织进行,因此寻找一种简单的BSE分子标记是十分有用的。更重要的是这种标记在牛群中得以鉴别后,就可开发出一种BSE检验手段。在人类CJD病(克雅氏症)患者的大脑脊髓液(CSF)中检测到丙种蛋白,该蛋白是正常人和其他疯病患者所没有的,该蛋白有可能是该病导致中枢神经组织损伤的根源。部分氨基酸序列分析鉴定这种蛋白为14-3-3蛋白家族。英国学者进行14-3-3免疫测定对CJD患者的诊断具有很高预见性。 展开更多
关键词 14-3-3蛋白 牛海绵样脑病 免疫测定 分子标记 中枢神经组织 氨基酸序列 克雅氏症 分析鉴定 多克隆抗体 预见性
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时间分辨荧光免疫层析法检测新型冠状病毒抗原
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作者 常宇 刘作家 +2 位作者 叶育鑫 刘思奇 潘利华 《吉林大学学报(理学版)》 2025年第6期1795-1802,共8页
利用稀土小分子螯合剂制备新型冠状病毒抗体标记物,并用时间分辨荧光免疫层析法检测新型冠状病毒抗原.实验结果表明:该方法线性范围为0.04~100 ng/mL,线性方程为y=0.0072x+0.0332,相关系数R^(2)=0.9995,检出限为0.028 ng/mL,批内和批间... 利用稀土小分子螯合剂制备新型冠状病毒抗体标记物,并用时间分辨荧光免疫层析法检测新型冠状病毒抗原.实验结果表明:该方法线性范围为0.04~100 ng/mL,线性方程为y=0.0072x+0.0332,相关系数R^(2)=0.9995,检出限为0.028 ng/mL,批内和批间变异系数小于6.72%,回收率为94.35%~103.00%.该方法具有精准、快速(小于20 min)、成本低和操作简单等优点. 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫层析法 新型冠状病毒抗原 小分子螯合剂标记抗体 即时检测
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