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抗体技术研究进展(2):小分子抗体及功能复合化抗体 被引量:1
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作者 向军俭 童吉宇 王宏 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期556-563,共8页
随着分子生物学的发展,基因工程小分子抗体以及纳米抗体由于其分子质量小、结构简单、异源性低、组织穿透能力强及易于大量生产等优点而越来越受到人们的关注,并且其与毒素、酶、细胞因子等生物活性物质融合可产生功能复合化抗体——抗... 随着分子生物学的发展,基因工程小分子抗体以及纳米抗体由于其分子质量小、结构简单、异源性低、组织穿透能力强及易于大量生产等优点而越来越受到人们的关注,并且其与毒素、酶、细胞因子等生物活性物质融合可产生功能复合化抗体——抗体融合蛋白,在肿瘤的诊断和治疗中具有广阔的应用前景.本研究主要就小分子抗体、功能复合化抗体以及纳米抗体近几年的发展与应用进行综述. 展开更多
关键词 小分子抗体 抗体融合蛋白 功能复合化抗体 纳米抗体
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犬冠状病毒S1蛋白特异性小分子抗体Fab的制备 被引量:1
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作者 薛姣雄 赵婷芳 +9 位作者 张倩 唐青海 高翠翠 赵铖 张妍 全飞杨 刘婷 杨灿 杨海 王文秀 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2023年第11期2568-2583,共16页
为表达犬冠状病毒(canine coronavirus,CCV)S1蛋白,制备其特异性小分子抗体Fab,为CCV的防治提供新材料。采用PCR扩增CCV S 1基因全长及其截短片段,分别克隆到原核表达载体pET28a或pGEX4T-1中,转到BL21(DE3)或Rosetta(DE3)感受态细胞构... 为表达犬冠状病毒(canine coronavirus,CCV)S1蛋白,制备其特异性小分子抗体Fab,为CCV的防治提供新材料。采用PCR扩增CCV S 1基因全长及其截短片段,分别克隆到原核表达载体pET28a或pGEX4T-1中,转到BL21(DE3)或Rosetta(DE3)感受态细胞构建重组表达菌株;用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的蛋白表达,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blot鉴定分析重组蛋白;纯化蛋白分别与ISA71AVG或ISA201VG佐剂配伍乳化后制备免疫原,免疫蛋鸡,用聚乙二醇(PEG)沉淀法提取得到CCV S1蛋白的卵黄抗体,通过Western blot检测抗体滴度,用胃蛋白酶水解卵黄抗体制备小分子抗体Fab。结果显示,S1蛋白全长无表达,CCV S1-a和CCV S1-b分子量分别为79 ku和68 ku。在免疫后第35天2种佐剂组的卵黄抗体滴度可达1∶128000。制备小分子抗体Fab最佳酶切条件为卵黄抗体与胃蛋白酶混合质量比20∶1、pH值4.1、37℃酶切8 h。完整的IgY可以与CCV呈特异性反应,胃蛋白酶处理后制备的小分子抗体Fab可以有效阻断CCV的感染性。综上,本研究成功表达了CCV S1的2个截短片段蛋白,制备了卵黄抗体及其小分子抗体Fab,为进一步开展犬冠状病毒病的诊断和防治技术研究奠定了基础。 展开更多
关键词 犬冠状病毒 原核表达 佐剂 卵黄抗体 小分子抗体Fab
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基因工程小分子抗体及其在动物疾病研究中的应用 被引量:2
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作者 赵蕾 林源 +1 位作者 李本强 朱建国 《中国兽药杂志》 2011年第2期41-46,共6页
利用基因工程方法构建的小分子抗体,不仅具备亲本抗体可与抗原特异性结合的特征,更因其分子量小、组织穿透性强、免疫源性低、血液清除快、可经济方便地生产等优点在疾病的诊断和治疗中凸显出重要价值。文章对基因工程小分子抗体结构、... 利用基因工程方法构建的小分子抗体,不仅具备亲本抗体可与抗原特异性结合的特征,更因其分子量小、组织穿透性强、免疫源性低、血液清除快、可经济方便地生产等优点在疾病的诊断和治疗中凸显出重要价值。文章对基因工程小分子抗体结构、抗体功能、在动物疾病研究中的应用等方面的进展情况进行了简要综述。 展开更多
关键词 基因工程小分子抗体 抗体结构 抗体功能 应用
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基因工程抗体研究进展 被引量:20
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作者 李菁 林彤 +5 位作者 宋帅 高闪电 邵军军 丛国政 独军政 常惠芸 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期40-44,共5页
随着对分子生物学研究和抗体分子结构功能的深入研究,利用细胞工程和遗传工程对抗体分子进行改建并赋予其新的功能,进而开发了新的抗体应用领域,使单克隆抗体技术又向前发展了一步。基因工程抗体是按人类设计所重新组装的新型抗体分子,... 随着对分子生物学研究和抗体分子结构功能的深入研究,利用细胞工程和遗传工程对抗体分子进行改建并赋予其新的功能,进而开发了新的抗体应用领域,使单克隆抗体技术又向前发展了一步。基因工程抗体是按人类设计所重新组装的新型抗体分子,可保留或增加天然抗体的特异性和主要生物学活性,去除或减少无关结构,从而可克服单克隆抗体在临床应用方面的缺陷。 展开更多
关键词 基因工程抗体 人源化抗体 小分子抗体 核糖体展示
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应用毕赤酵母分泌表达筛选人抗狂犬病毒抗体scFv-Fc 被引量:5
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作者 王丁丁 许天敏 +5 位作者 余丽江 苏曼曼 黄树林 宿晓云 陈磊 颜炜群 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期963-967,共5页
目的:利用毕赤酵母人抗狂犬病毒抗体分泌表达文库获得具特异性狂犬病毒抗原结合活性的分泌型小分子抗体(scFv-Fc)。方法:RT-PCR方法扩增获得一组轻链和重链可变区基因。利用重叠延伸PCR方法组装scFv基因后克隆入毕赤酵母scFv-Fc抗体库... 目的:利用毕赤酵母人抗狂犬病毒抗体分泌表达文库获得具特异性狂犬病毒抗原结合活性的分泌型小分子抗体(scFv-Fc)。方法:RT-PCR方法扩增获得一组轻链和重链可变区基因。利用重叠延伸PCR方法组装scFv基因后克隆入毕赤酵母scFv-Fc抗体库通用表达质粒pPICZα/Fc后,电转化X33酵母菌,甲醇诱导表达后进行ELISA筛选、基因序列分析及免疫印迹分析。结果:构建了抗狂犬病毒毕赤酵母分泌型scFv-Fc库,获得了12株阳性菌株。对其中2株阳性克隆进行了序列分析证实为新的抗体可变区基因。ELISA、Western blotting分析,证实该scFv-Fc具有特异性狂犬病毒抗原结合活性,相对分子质量为56 000。结论:通过毕赤酵母人抗狂犬病毒抗体scFv-Fc分泌表达文库筛选获得具较高亲和力的新scFv-Fc抗体。 展开更多
关键词 人分泌型小分子抗体 毕赤酵母 狂犬病病毒 分泌表达 筛选
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基因工程抗体的研究进展 被引量:4
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作者 苗向阳 《中国畜牧兽医》 CAS 2003年第4期29-31,共3页
抗体在疾病诊断、治疗和预防中发挥着重要作用 ,随着分子生物学、分子免疫学的飞速发展 ,抗体技术发展到了第 3代抗体—基因工程抗体 ,尤其是噬菌体展示技术的建立 ,使抗体的制备更加简单有效 ,且大大拓宽了抗体的应用范围 。
关键词 基因工程抗体 噬菌体展示技术 单克隆抗体人源化 小分子抗体 抗体融合蛋白 制备
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抗体技术研究进展(1):人源抗体技术 被引量:5
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作者 向军俭 童吉宇 王宏 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期524-530,共7页
100年来,抗体的发现为人类疾病诊断、治疗和有害物质的分析检测发挥了巨大的作用.特别是1975年发明了单克隆抗体技术以及1986年发明基因工程抗体技术,为研制特异性高、大量均一并大量生产抗体成为了现实,也使嵌合抗体、全人源抗体造福... 100年来,抗体的发现为人类疾病诊断、治疗和有害物质的分析检测发挥了巨大的作用.特别是1975年发明了单克隆抗体技术以及1986年发明基因工程抗体技术,为研制特异性高、大量均一并大量生产抗体成为了现实,也使嵌合抗体、全人源抗体造福人类并产生巨大的经济效益.为了克服鼠源性单抗可诱发人抗鼠抗体(HA-MA),通过嵌合抗体、改构抗体、小分子抗体等技术和改良抗体与抗原结合的特异性,已成为抗体技术研究的主要发展方向,本文主要就抗体人源化及抗体分子小型化,抗体功能复合化两个部分的进展进行综述. 展开更多
关键词 抗体 人源化抗体 基因工程抗体 抗体库技术 小分子抗体
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抗A型产气荚膜梭菌α毒素单链抗体基因的克隆、表达及其生物学活性(英文) 被引量:7
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作者 赵宝华 许崇波 +2 位作者 边艳青 段相林 朱平 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期690-697,共8页
应用RT PCR技术 ,从分泌具有中和活性的抗A型产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体 (McAb)的杂交瘤细胞株 1A8中 ,分别扩增出抗体VH 和VL 基因 ,用linker (Gly4Ser) 3 基因 ,将VH 和VL 基因连接成单链抗体 (ScFv)基因 ,并将其克隆至pGEM T载体... 应用RT PCR技术 ,从分泌具有中和活性的抗A型产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体 (McAb)的杂交瘤细胞株 1A8中 ,分别扩增出抗体VH 和VL 基因 ,用linker (Gly4Ser) 3 基因 ,将VH 和VL 基因连接成单链抗体 (ScFv)基因 ,并将其克隆至pGEM T载体中 .经核苷酸序列分析证实 ,VH 和VL 基因及linker基因拼接正确 ,ScFv 1A8基因全长为 72 6bp ,编码2 4 2个氨基酸 ,VH 和VL 基因符合功能性重排的鼠抗体可变区基因特征 ,分别属于鼠免疫球蛋白重链Ⅱ (A)和轻链κⅣ家簇 .将ScFv 1A8基因克隆至表达载体pHOG2 1中 ,构建了重组质粒pHOG 1A8,然后转化至受体菌XL1 BLUE中 ,得到重组菌株XL1 BLUE (pHOG 1A8) .ELISA检测和SDS PAGE分析表明 :经IPTG诱导后所表达的目的蛋白存在于重组菌株XL1 BLUE (pHOG 1A8)的胞周质中 .经薄层扫描分析 :重组菌株XL1 BLUE(pHOG 1A8)的蛋白表达产物占菌体可溶性蛋白的 1 2 % ,其相对分子量约为 31kD .ScFv的生物学活性研究表明 ,ScFv蛋白不但具有中和磷脂酶C的活性 。 展开更多
关键词 单链抗体小分子 基因克隆 表达 生物学活性 Α毒素 A型产气荚膜梭菌
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