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深海沉积物宏基因组中新型对羟基苯丙酮酸双加氧酶基因的鉴定
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作者 张欢 吴科锋 +1 位作者 刘景川 汤熙翔 《应用海洋学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期442-450,共9页
为采用不依赖培养的方法获取深海沉积物微生物遗传资源,利用深海沉积物DNA构建了2个宏基因组文库,对对羟基苯丙酮酸双加氧酶(4HPPD)活性进行了筛选,并分离出3个克隆子。体外转座子突变和全长测序发现了两个新的4 HPPD基因和一个新的尿黑... 为采用不依赖培养的方法获取深海沉积物微生物遗传资源,利用深海沉积物DNA构建了2个宏基因组文库,对对羟基苯丙酮酸双加氧酶(4HPPD)活性进行了筛选,并分离出3个克隆子。体外转座子突变和全长测序发现了两个新的4 HPPD基因和一个新的尿黑酸(HGA)代谢基因簇。克隆到pMD18-T载体中的3个新的4 HPPD基因能够在大肠杆菌中产生水溶性棕色素。该色素被鉴定为黑色素,并与HGA相关。结果表明,深海沉积物宏基因组含有多样性丰富的4 HPPD功能基因,可用于发现新的黑色素生物合成基因。 展开更多
关键词 海洋生物学 对羟基苯丙酮酸双加氧酶基因 尿黑 宏基因组文库 深海
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荧光猝灭法测定对羟基苯丙酮酸 被引量:8
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作者 吴芳英 付敏恭 +3 位作者 魏晓山 杨伟平 胡润根 郭兰 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2001年第3期359-361,共3页
对羟基苯丙酮酸在一定条件下对色氨酸的自体荧光有显著的猝灭作用。在pH为 11 0 1的NH4 Cl NH3 缓冲介质中 ,对羟基苯丙酮酸的含量在 0~ 15 μg·mL-1范围内与荧光强度的猝灭程度呈良好的线性关系 ,方法检测限为 0 37μg·mL... 对羟基苯丙酮酸在一定条件下对色氨酸的自体荧光有显著的猝灭作用。在pH为 11 0 1的NH4 Cl NH3 缓冲介质中 ,对羟基苯丙酮酸的含量在 0~ 15 μg·mL-1范围内与荧光强度的猝灭程度呈良好的线性关系 ,方法检测限为 0 37μg·mL-1,平行测定含 10 μg·mL-1的对羟基苯丙酮酸 2 0次 ,方法的相对标准偏差为 1 2 %。本方法有较高的灵敏度和较好的选择性 ,可用于血清中的对羟基苯丙酮酸含量的测定 。 展开更多
关键词 荧光猝灭法 对羟基苯丙酮酸 色氨 血清 测定 医学检查
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新型吡唑-喹唑啉二酮类对羟基苯丙酮酸双加氧酶抑制剂的设计、合成及生物活性 被引量:4
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作者 严耀超 王亚楠 +4 位作者 何波 曲仁渝 南甲戌 林红艳 杨光富 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期1139-1151,共13页
对羟基苯丙酮酸双加氧酶(HPPD)抑制剂近年来因其高活性和低抗性风险成为了除草剂领域的研究热点。喹唑啉二酮被证明是一类具有潜力的骨架结构,为了继续发挥该骨架的优势,在前期工作的基础上,结合已有的构效关系研究结果,设计并合成了30... 对羟基苯丙酮酸双加氧酶(HPPD)抑制剂近年来因其高活性和低抗性风险成为了除草剂领域的研究热点。喹唑啉二酮被证明是一类具有潜力的骨架结构,为了继续发挥该骨架的优势,在前期工作的基础上,结合已有的构效关系研究结果,设计并合成了30个新型含喹唑啉二酮结构的吡唑类HPPD抑制剂,其结构均经过了高分辨质谱(HRMS)、核磁共振氢谱(^(1)H NMR)和碳谱(^(13)C NMR)的表征。酶水平和活体活性测试结果表明,大部分目标化合物展现出了与对照药剂喹草酮相当甚至更优异的酶抑制活性。温室除草活性测试结果表明,目标化合物对6种供试杂草均有一定的生长抑制作用,特别是化合物9-28,在有效成分150 g/hm^(2)剂量下,对6种杂草的防治效果均在80%以上,其中对稗草和马唐的防治效果达100%。最后,培养了代表性化合物9-28与拟南芥HPPD的复合物晶体结构,从分子层面说明了该类抑制剂与靶标的结合模式,也为后续该类抑制剂的开发提供了一定的分子基础和设计思路。 展开更多
关键词 对羟基苯丙酮酸双加氧酶 喹唑啉二酮 吡唑类 除草活性 晶体结构
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对羟基杏仁酸合成酶三维结构模建及其与底物的分子对接研究 被引量:2
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作者 刘海春 邹建卫 +3 位作者 张兵 庄树林 蒋勇军 俞庆森 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第8期852-856,共5页
以对羟基苯丙酮酸双氧化酶(HPPD)的晶体结构为模板,利用同源模建方法构建了与其高度同源、底物相同但催化功能存在明显差别的对羟基杏仁酸合成酶(HMS)的三维结构,并对模建结构的合理性进行了分析.在模建结果的基础上,对HPPD和HMS分别与... 以对羟基苯丙酮酸双氧化酶(HPPD)的晶体结构为模板,利用同源模建方法构建了与其高度同源、底物相同但催化功能存在明显差别的对羟基杏仁酸合成酶(HMS)的三维结构,并对模建结构的合理性进行了分析.在模建结果的基础上,对HPPD和HMS分别与底物羟苯基丙酮酸(HPP)进行分子对接计算,比较了二者结合模式的异同,为两种同源酶在催化方面差异性的合理阐释提供了一些有益的信息. 展开更多
关键词 羟基杏仁合成酶 对羟基苯丙酮酸双氧化酶 同源模建 分子对接
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