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NF-κB寡核苷酸诱骗策略构建胶原诱导性关节炎大鼠耐受性DC 被引量:2
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作者 田娅玲 宁丽常 +1 位作者 岳萍 蒋红梅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期906-911,共6页
目的:探讨NF-κB寡核苷酸诱骗剂(NF-κB ODN Decoy)策略构建胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠脾脏来源的稳定的耐受性树突状细胞(DC),并对其成熟状态进行评估。方法:取CIA大鼠脾脏细胞,运用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素(I... 目的:探讨NF-κB寡核苷酸诱骗剂(NF-κB ODN Decoy)策略构建胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠脾脏来源的稳定的耐受性树突状细胞(DC),并对其成熟状态进行评估。方法:取CIA大鼠脾脏细胞,运用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素(IL)-4两种细胞因子诱导培养DC,并分为4组:单纯DC组、Decoy-DC组、LPS刺激DC组、LPS刺激Decoy-DC组。对4组细胞进行形态学观察、活力评价、表型鉴定及耐受性评估。结果:各组DC活力均>90%。OX-62表达率>55%。Decoy-DC组表面共刺激分子CD80和CD86阳性率和平均荧光强度、刺激淋巴细胞增殖能力及IFN-γ分泌能力均显著低于Control-DC组(P<0. 05),而IL-10分泌能力显著高于Control-DC组(P<0. 05)。LPS刺激Decoy-DC组CD80和CD86阳性率和平均荧光强度、刺激淋巴细胞增殖能力及IFN-γ分泌能力均显著低于LPS-DC组(P<0. 05),而IL-10分泌能力显著高于LPS-DC组(P<0. 05)。LPS-Decoy-DC组CD80和CD86阳性率和平均荧光强度、刺激淋巴细胞增殖能力与Decoy-DC组比,无显著性差异(P>0. 05)。结论:CIA大鼠脾脏细胞经NF-κB ODN Decoy策略成功构建出形态、表型及功能稳定的耐受性DC。 展开更多
关键词 树突状细胞 寡核苷酸诱骗剂 CIA大鼠 免疫耐受
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胶原蛋白诱导性关节炎(CIA)大鼠耐受性树突状细胞制备技术的优化 被引量:5
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作者 谭艳 田娅玲 +1 位作者 宁丽常 蒋红梅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1076-1081,共6页
目的改良胶原蛋白诱导性关节炎(CIA)大鼠脾脏来源耐受性树突状细胞(DC)的制备技术,以获取高质量的实验细胞。方法在提取脾脏单个核细胞过程中,对制备单细胞悬液流程以及单个核细胞铺板后孵育时间进行改进,培养初期加入核因子κB(NF-κB... 目的改良胶原蛋白诱导性关节炎(CIA)大鼠脾脏来源耐受性树突状细胞(DC)的制备技术,以获取高质量的实验细胞。方法在提取脾脏单个核细胞过程中,对制备单细胞悬液流程以及单个核细胞铺板后孵育时间进行改进,培养初期加入核因子κB(NF-κB)寡核苷酸诱骗剂诱导为耐受性DC。显微镜观察细胞形态,台盼蓝染色观察细胞活力,流式细胞术检测细胞CD103(OX62)、CD80和CD86表达,噻唑蓝(MTT)法检测该DC刺激淋巴细胞的增殖能力。结果DC的细胞活力>90%,OX62表达率>87.4%;共刺激分子低表达,DC刺激淋巴细胞增殖能力低。结论将CIA大鼠脾脏单个核细胞的制备方法进行改良,经NF-κB寡核苷酸诱骗剂诱导可获得高活力、高稳定性的耐受性DC,且细胞纯度明显提高。 展开更多
关键词 树突状细胞(DC) 胶原蛋白诱导性关节炎(CIA) 核因子κB(NF-κB) 寡核苷酸诱骗剂 免疫耐受
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