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猪流行性腹泻病毒N蛋白核仁定位信号对宿主细胞周期的影响
被引量：
6
1
作者
刘随新
石达
+6 位作者
陈建飞
张鑫
时洪艳
刘孝珍
张莎
王璐
冯力
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第3期173-176,共4页
为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)核衣壳蛋白(N)与宿主细胞相互作用,本研究根据前期已经鉴定的PEDV N蛋白核仁定位信号序列,利用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法扩增出核仁定位信号序列缺失的PEDV N基因(dN),并将其与真核表达载体pAc-GFP-C1连接...
为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)核衣壳蛋白(N)与宿主细胞相互作用,本研究根据前期已经鉴定的PEDV N蛋白核仁定位信号序列,利用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法扩增出核仁定位信号序列缺失的PEDV N基因(dN),并将其与真核表达载体pAc-GFP-C1连接,构建重组质粒pAc-GFP-dN。将pAc-GFP-dN转染于Vero E6细胞中,利用激光共聚焦显微镜分析重组质粒pAc-GFP-dN表达蛋白的定位情况,并利用流式细胞仪检测转染细胞的周期变化。实验结果表明:与完整的N蛋白相比,缺失核仁定位信号的N蛋白不能定位于细胞核仁,同时丧失了使宿主细胞周期在G2/M期停滞的能力,从而揭示了N蛋白核仁定位信号对宿主细胞具有重要的影响。
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关键词
猪流行性腹泻病毒
核衣壳蛋白
核仁定位信号
流式
细胞
术
宿主细胞周期
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题名
猪流行性腹泻病毒N蛋白核仁定位信号对宿主细胞周期的影响
被引量：
6
1
作者
刘随新
石达
陈建飞
张鑫
时洪艳
刘孝珍
张莎
王璐
冯力
机构
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室
东北农业大学
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第3期173-176,共4页
基金
国家自然科学基金(31172350)
黑龙江省杰出青年基金(JC201118)
文摘
为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)核衣壳蛋白(N)与宿主细胞相互作用,本研究根据前期已经鉴定的PEDV N蛋白核仁定位信号序列,利用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法扩增出核仁定位信号序列缺失的PEDV N基因(dN),并将其与真核表达载体pAc-GFP-C1连接,构建重组质粒pAc-GFP-dN。将pAc-GFP-dN转染于Vero E6细胞中,利用激光共聚焦显微镜分析重组质粒pAc-GFP-dN表达蛋白的定位情况,并利用流式细胞仪检测转染细胞的周期变化。实验结果表明:与完整的N蛋白相比,缺失核仁定位信号的N蛋白不能定位于细胞核仁,同时丧失了使宿主细胞周期在G2/M期停滞的能力,从而揭示了N蛋白核仁定位信号对宿主细胞具有重要的影响。
关键词
猪流行性腹泻病毒
核衣壳蛋白
核仁定位信号
流式
细胞
术
宿主细胞周期
Keywords
porcine epidemic diarrhea virus
nucleocapsid protein
nucleoli localization signal
flow cytometry
cell cycle
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪流行性腹泻病毒N蛋白核仁定位信号对宿主细胞周期的影响
刘随新
石达
陈建飞
张鑫
时洪艳
刘孝珍
张莎
王璐
冯力
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
6
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