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家蝇抗菌肽的提取及其对凡纳滨对虾抗病力的影响 被引量:11
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作者 李林 孙育平 +5 位作者 黄燕华 陈冰 曹俊明 王国霞 李永娟 马永萍 《广东农业科学》 CAS 2015年第9期120-125,共6页
采用超声波诱导的方式筛选出生长状况良好的蝇蛆,通过组织匀浆、乙酸铵浸提、热处理、冻融处理、盐析、透析、蒸馏浓缩等方法提取家蝇抗菌肽,应用分光光度法测定其浓度和提取率,比浊法测定其抗菌活性。在基础饲料中分别添加0、40、80、1... 采用超声波诱导的方式筛选出生长状况良好的蝇蛆,通过组织匀浆、乙酸铵浸提、热处理、冻融处理、盐析、透析、蒸馏浓缩等方法提取家蝇抗菌肽,应用分光光度法测定其浓度和提取率,比浊法测定其抗菌活性。在基础饲料中分别添加0、40、80、120 mg/kg家蝇抗菌肽制成4组试验饲料,饲养凡纳滨对虾6周后采用注射法进行白斑综合征病毒攻毒试验,攻毒期为52 h。结果显示,4日龄家蝇繁育的蝇蛆经刺激后生长状况良好,产量最高;提取的家蝇抗菌肽浓度为25.05 mg/m L,提取率为2.36%;提取液稀释11倍后,其对铜绿假单胞菌的抑菌率为21.05%,抗菌活力为24.58 U。与未添加组相比,40、80 mg/kg组累积死亡率显著降低,各添加组的相对保护率分别为42.42%、33.33%和9.09%。结果表明,该提取工艺可保证抗菌肽的提取率,保持其稳定性和抗菌活性;在饲料中添加该抗菌肽,可提高凡纳滨对虾抗白斑综合征病毒的能力。 展开更多
关键词 家蝇抗菌肽 提取率 活性 病力
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家蝇抗菌肽分子结构及抗菌谱研究 被引量:1
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作者 周义文 申萍 +7 位作者 涂植光 尹一兵 陈辉 孟江萍 王小中 陈如山 卢亮 陈正庚 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期653-656,共4页
目的研究家蝇抗菌肽的分子结构和抗菌谱,寻找广谱高效天然抗菌肽。方法家蝇被损伤感染诱导免疫后制成组织匀浆,用蛋白质纯化技术分离纯化抗菌肽,测定抗菌活性及抗菌谱,纳升电喷雾飞行时间质谱测定氨基酸序列。结果家蝇组织提取液经蛋白... 目的研究家蝇抗菌肽的分子结构和抗菌谱,寻找广谱高效天然抗菌肽。方法家蝇被损伤感染诱导免疫后制成组织匀浆,用蛋白质纯化技术分离纯化抗菌肽,测定抗菌活性及抗菌谱,纳升电喷雾飞行时间质谱测定氨基酸序列。结果家蝇组织提取液经蛋白质纯化,得到一纯化的抗菌活性成份,纳升电喷雾飞行时间质谱测序,得到两个肽段的氨基酸序列:肽段1.QPNLYYNK和肽段2.PNNVYYTK。通过NCBInr蛋白质数据库检索,未发现有与之序列相匹配的蛋白质。该抗菌肽对11种临床标本分离菌株铜绿色假单胞菌、大肠埃希菌、伤寒沙门菌、普通变形菌、异形柠檬酸杆菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、福氏痢疾杆菌、表葡菌、耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和白念珠菌的MIC分别为:3.89、2.22、4.44、6.67、3.33、6.67、5.0、6.67、4.44、4.44和13.33μmol/L。结论本文得到的抗菌肽是一个新型抗菌肽,有广谱抗菌活性,对革兰阴性菌和革兰阳性菌均有一定的抑制作用。 展开更多
关键词 家蝇抗菌肽 分子结构 氨基酸测序
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家蝇抗菌肽祛痘功效性评价及其产品开发 被引量:3
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作者 张悦 蒋林 +2 位作者 王德友 周立武 常志英 《日用化学工业》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期438-440,共3页
采用肉汤稀释法测得家蝇抗菌肽对痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes)的最低抑菌浓度(MIC)为0.078 mg/mL。根据GB 15979—2002《一次性使用卫生用品卫生标准》中附录C 4"溶出性抗(抑)菌产品抑菌性能试验方法",测得家蝇抗... 采用肉汤稀释法测得家蝇抗菌肽对痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes)的最低抑菌浓度(MIC)为0.078 mg/mL。根据GB 15979—2002《一次性使用卫生用品卫生标准》中附录C 4"溶出性抗(抑)菌产品抑菌性能试验方法",测得家蝇抗菌肽在添加质量分数为1%,2%,3%和5%时的抑菌率分别为34.21%,42.42%,99.99%和99.99%。根据QB/T1857—2004中润肤膏霜的卫生指标及感官、理化指标的试验方法及检验标准对该祛痘产品进行检测,结果表明各项指标均符合标准中的要求,且进一步的加速稳定性试验表明,产品的稳定性较好,未见分层、变色、变质和变味等现象的发生。 展开更多
关键词 化妆品添加剂 家蝇抗菌肽 祛痘功效 痤疮丙酸杆 活性
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家蝇抗菌肽MDC协同庆大霉素抗普通变形杆菌作用研究 被引量:4
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作者 陈晴汝 桂水清 卢雪梅 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期85-93,共9页
以普通变形杆菌(Bacillus proteus vulgaris)为研究对象,探讨家蝇抗菌肽(Musca domestical cecropin,MDC)和庆大霉素(Gentamicin)的体外联合抗菌效果及协同抗菌机制。采用微量肉汤稀释法、棋盘法、结晶紫染色等方法研究两药的协同抗菌... 以普通变形杆菌(Bacillus proteus vulgaris)为研究对象,探讨家蝇抗菌肽(Musca domestical cecropin,MDC)和庆大霉素(Gentamicin)的体外联合抗菌效果及协同抗菌机制。采用微量肉汤稀释法、棋盘法、结晶紫染色等方法研究两药的协同抗菌作用和抗生物膜作用;通过荧光染色、流式细胞术(FCM)、透射电子显微镜(TEM)观察两药联用的抗菌机制。家蝇抗菌肽MDC与庆大霉素的FIC为0.313,表明两者具有较好的协同抗菌作用;结晶紫染色结果显示两药对细菌初始生物膜、成熟生物膜和胞外蛋白质的影响也有一定的协同作用;荧光和流式细胞术结果显示药物可以有效杀伤细菌,使细菌死亡数目上升;透射电镜观察到给药后大部分细菌细胞壁破损,细胞膜不完整,胞质内容物坏死溶解导致细胞肿胀破裂。家蝇抗菌肽MDC和庆大霉素具有协同抗普通变形杆菌作用,且两药的作用机制相辅相成。 展开更多
关键词 普通变形杆 家蝇抗菌肽 庆大霉素 协同
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家蝇抗菌肽MDC对鼠伤寒沙门氏菌的抑菌稳定性研究 被引量:1
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作者 王子琰 王建 +2 位作者 张伦 桂水清 卢雪梅 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期149-156,共8页
以鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)作为研究对象,探讨家蝇抗菌肽(Musca domestica cecropin,MDC)在不同条件下的抑菌稳定性。采用牛津杯法研究pH值、温度、光照、蛋白酶、金属离子、表面活性剂及有机试剂对MDC抑菌活性(抑菌圈大... 以鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)作为研究对象,探讨家蝇抗菌肽(Musca domestica cecropin,MDC)在不同条件下的抑菌稳定性。采用牛津杯法研究pH值、温度、光照、蛋白酶、金属离子、表面活性剂及有机试剂对MDC抑菌活性(抑菌圈大小)的影响。在酸性条件下MDC的抑菌活性稍有下降,保持在85%左右,但在碱性条件下的抑菌活性无明显改变,稳定性较好。经低温和高温处理后,抑菌活性无显著差异。MDC在黑暗、正常光及紫外线照射处理30 min,其抑菌活性仍保持稳定。MDC对胰蛋白酶敏感,抑菌活性完全消失,而对胃蛋白酶具有良好的稳定性。MDC对Ca^(2+)、K^(+)有良好的稳定性,但对Mg^(2+)敏感,在Fe^(3+)作用下其抑菌活性较对照组有所升高(P<0.05)。表面活性剂和有机试剂处理MDC后,其抑菌活性均明显降低。家蝇抗菌肽MDC能显著抑制鼠伤寒沙门氏菌生长繁殖,其活性几乎不受pH值,温度和光照变化、胃蛋白酶和某些金属离子的影响,且Fe^(3+)能够协同增强MDC的抑菌活性,但Mg^(2+)、表面活性剂、有机试剂以及胰蛋白酶水解作用可分别使其抑菌活性部分或完全丧失。 展开更多
关键词 家蝇抗菌肽 稳定性 鼠伤寒沙门氏 活性
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一种新型家蝇幼虫抗菌肽基因(MDAP-2)的真核表达及抑菌活性检测 被引量:1
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作者 李文婷 闫恕 +6 位作者 张丹丹 贾博岩 唐艳 孔令聪 裴志花 刘树明 马红霞 《中国兽药杂志》 北大核心 2015年第11期11-16,共6页
利用毕赤酵母表达系统表达新型家蝇抗菌肽MDAP-2基因(Musca domestica antimicrobial peptide,MDAP-2),为其作为新型抗菌物质应用于临床提供实验依据。根据已有的MDAP-2的氨基酸序列,采用PCR技术扩增获得MDAP-2基因,构建真核重组表达质... 利用毕赤酵母表达系统表达新型家蝇抗菌肽MDAP-2基因(Musca domestica antimicrobial peptide,MDAP-2),为其作为新型抗菌物质应用于临床提供实验依据。根据已有的MDAP-2的氨基酸序列,采用PCR技术扩增获得MDAP-2基因,构建真核重组表达质粒pPIC9K-MDAP-2,将线性化的重组质粒电击转入毕赤酵母(P.pastoris)感受态GS115细胞内,将PCR鉴定为阳性的重组酵母菌进行甲醇诱导表达,并采用Tricine-SDS-PGAE检测表达产物的大小,经镍柱亲和层析纯化获得纯度较高的重组蛋白,采用管碟法检测重组蛋白的生物学活性。结果显示,重组质粒pPIC9K-MDAP-2获得高效表达,蛋白分子量为7.8 kD,管碟法检测重组蛋白对大肠杆菌与沙门氏菌均具有体外抑菌活性。MDAP-2基因的成功表达为进一步研究表达产物的生物学及免疫学活性奠定基础。 展开更多
关键词 家蝇抗菌肽(MDAP-2) 毕赤酵母 分泌表达 活性
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不同微生物诱导家蝇幼虫表达抗菌肽的特性 被引量:11
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作者 翟培 侯丽霞 +3 位作者 乐国伟 施用晖 韩晋辉 代卉 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期41-45,共5页
研究不同微生物诱导家蝇幼虫表达的抗菌肽特性。用3种不同的病源菌通过针刺感染的方法诱导家蝇幼虫表达抗菌肽,通过Sephadex G25分离,用Hult mark改进法和抑菌圈测定法作抑菌试验,用毛细管电泳(CE)分析不同微生物诱导得到的抗菌肽样品差... 研究不同微生物诱导家蝇幼虫表达的抗菌肽特性。用3种不同的病源菌通过针刺感染的方法诱导家蝇幼虫表达抗菌肽,通过Sephadex G25分离,用Hult mark改进法和抑菌圈测定法作抑菌试验,用毛细管电泳(CE)分析不同微生物诱导得到的抗菌肽样品差异,检测抗菌肽的热稳定性和酸碱耐受性。发现不同微生物诱导产生的家蝇抗菌肽具有广谱抑菌性,但不同样品对不同病源菌抑菌活性有差异,不同测定抑菌效果的方法对抑菌结果有影响,各种抗菌肽样品CE蛋白谱具有明显不同。抗菌肽样品都具有热稳定性和酸碱耐受性。说明不同微生物诱导产生的家蝇抗菌肽类型以及抗菌肽含量与诱导源有关,抗菌肽为家蝇幼虫体内固有成分,诱导增加了抗菌肽的表达量同时刺激新抗菌肽的产生。用志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌诱导家蝇幼虫可产生较多含量高活性好的抗菌肽。 展开更多
关键词 家蝇幼虫 活性 CE蛋白谱 热稳定性 酸碱耐受性
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家蝇幼虫抗菌肽MDL-1的荧光特性分析 被引量:1
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作者 宫霞 施用晖 乐国伟 《分析科学学报》 CAS CSCD 2005年第4期426-428,共3页
本文研究了家蝇幼虫抗菌肽MDL-1的荧光光谱和淬灭剂对内源性荧光的影响。家蝇幼虫抗菌肽MDL-1在激发波长280nm时,其荧光光谱为酪氨酸(Tyr)残基和色氨酸(Trp)残基共同提供。结果表明,KI不能淬灭抗菌肽MDL-1的Trp残基的荧光,而丙烯酰胺(A... 本文研究了家蝇幼虫抗菌肽MDL-1的荧光光谱和淬灭剂对内源性荧光的影响。家蝇幼虫抗菌肽MDL-1在激发波长280nm时,其荧光光谱为酪氨酸(Tyr)残基和色氨酸(Trp)残基共同提供。结果表明,KI不能淬灭抗菌肽MDL-1的Trp残基的荧光,而丙烯酰胺(Acr)能淬灭几乎所有的Trp残基的荧光(f=0.92);这说明,Trp残基不是位于抗菌肽分子的表面,而是位于分子的内部。 展开更多
关键词 家蝇幼虫 色氨酸残基 荧光光谱 荧光淬灭
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