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家蚕细小病毒样病毒(BmPLV-Z) VD1 ORF4的原核表达
被引量：
2
1
作者
李国辉
唐琦
+3 位作者
张俊红
郭旭丽
胡朝阳
姚勤
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2011年第3期35-40,共6页
对家蚕细小病毒样病毒(BmPLV-Z)VD1 ORF4理论上编码的氨基酸序列进行Blast搜索,结果表明其与DNA聚合酶B家族同源。通过PCR扩增其DNA聚合酶同源区(1 077 bp),将扩增的目的DNA片段与原核表达载体pET30a进行连接,通过不同浓度的IPTG对捕获p...
对家蚕细小病毒样病毒(BmPLV-Z)VD1 ORF4理论上编码的氨基酸序列进行Blast搜索,结果表明其与DNA聚合酶B家族同源。通过PCR扩增其DNA聚合酶同源区(1 077 bp),将扩增的目的DNA片段与原核表达载体pET30a进行连接,通过不同浓度的IPTG对捕获pET30a-1 077 bp重组质粒的大肠埃希菌进行诱导,对诱导产物进行SDS-PAGE电泳,结果表明其聚合酶同源区获得了表达;Western blot分析进一步确证诱导蛋白为带有6个组氨酸的融合蛋白。将割胶获得的目的蛋白免疫昆明小鼠制备其多抗,以纯化后的抗血清对VD1 ORF4全长序列和部分序列在原核中的漏扫描表达情况进行研究,SDS-PAGE和Western blot结果表明VD1 ORF4全长序列和部分序列的原核表达产物均一,都只有一条特异的目的蛋白带,说明了VD1 ORF4序列在原核表达系统中没有漏扫描表达的蛋白。
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关键词
家蚕细小病毒样病毒
VD1
原核表达
抗体制备
漏扫描
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职称材料
题名
家蚕细小病毒样病毒(BmPLV-Z) VD1 ORF4的原核表达
被引量：
2
1
作者
李国辉
唐琦
张俊红
郭旭丽
胡朝阳
姚勤
机构
江苏大学生命科学研究院
出处
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2011年第3期35-40,共6页
基金
国家自然科学基金(31000080
30871826)
校科研启动基金(09JDG057)
文摘
对家蚕细小病毒样病毒(BmPLV-Z)VD1 ORF4理论上编码的氨基酸序列进行Blast搜索,结果表明其与DNA聚合酶B家族同源。通过PCR扩增其DNA聚合酶同源区(1 077 bp),将扩增的目的DNA片段与原核表达载体pET30a进行连接,通过不同浓度的IPTG对捕获pET30a-1 077 bp重组质粒的大肠埃希菌进行诱导,对诱导产物进行SDS-PAGE电泳,结果表明其聚合酶同源区获得了表达;Western blot分析进一步确证诱导蛋白为带有6个组氨酸的融合蛋白。将割胶获得的目的蛋白免疫昆明小鼠制备其多抗,以纯化后的抗血清对VD1 ORF4全长序列和部分序列在原核中的漏扫描表达情况进行研究,SDS-PAGE和Western blot结果表明VD1 ORF4全长序列和部分序列的原核表达产物均一,都只有一条特异的目的蛋白带,说明了VD1 ORF4序列在原核表达系统中没有漏扫描表达的蛋白。
关键词
家蚕细小病毒样病毒
VD1
原核表达
抗体制备
漏扫描
Keywords
Bombyx mori parvo-like virus
VD1
prokaryotic expression
antibody preparation
leaky scanning
分类号
Q939.4 [生物学—微生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
家蚕细小病毒样病毒(BmPLV-Z) VD1 ORF4的原核表达
李国辉
唐琦
张俊红
郭旭丽
胡朝阳
姚勤
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2011
2
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