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6×His-猪生长激素融合基因在家蚕生物反应器中的表达 被引量:3
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作者 朱江 姜秀英 +5 位作者 曹广力 朱艳 彭建明 李新平 沈颂东 贡成良 《蚕业科学》 CAS CSCD 2004年第4期376-381,共6页
将通过PCR技术改建并去除了信号肽的猪生长激素cDNA基因克隆入转移载体pBacPAK His1,构建了重组转移载体pPGH0 30 ,进而将pPGH0 30与线性化病毒Bm BacPAK6共转染BmN细胞 ,成功获得了猪生长激素重组杆状病毒Bm BacPAK6 pgh。感染重组病... 将通过PCR技术改建并去除了信号肽的猪生长激素cDNA基因克隆入转移载体pBacPAK His1,构建了重组转移载体pPGH0 30 ,进而将pPGH0 30与线性化病毒Bm BacPAK6共转染BmN细胞 ,成功获得了猪生长激素重组杆状病毒Bm BacPAK6 pgh。感染重组病毒的细胞可溶性蛋白SDS PAGE和Western blot分析结果显示 ,感染细胞蛋白电泳带的 2 5kD处有 1条猪生长激素特异带。Bm BacPAK6 pgh的BmN细胞培养液接种家蚕 5龄幼虫和蛹 ,感病幼虫与蛹血淋巴的SDS PAGE和Western blot分析结果表明 ,6×His 猪生长激素融合基因在家蚕体内得到了表达 ,特异性条带大小约为 2 5kD。 展开更多
关键词 猪生长激素 融合基因 家蚕生物反应器 表达
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利用家蚕生物反应器生产基因工程疫苗的研究 被引量:2
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作者 魏克强 许梓荣 《中国兽药杂志》 2004年第5期35-37,共3页
 本文就家蚕核型多角体病毒BmNPV的生物学特性及其作为表达载体的优点、家蚕生物反应器的原理、生产程序、特点、优化表达策略以及在基因工程疫苗生产中的应用作了较为详细的阐述。
关键词 家蚕生物反应器 基因工程疫苗 生产程序 生物学特性
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家蚕生物反应器生产的植酸酶appA
3
作者 王福海 《中国农村科技》 2005年第11期31-31,共1页
关键词 家蚕生物反应器 APPA 植酸酶 生产 饲养转化率 饲料添加剂 增重比 排泄量 肉鸡 粪便
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家蚕生物反应器研究进展(Ⅰ) 国外重要学术期刊发表论文简介
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《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期367-371,共5页
1重组蛋白表达系统及其优化1.1 Ai-chun Zhao,Tian-Fu Zhao,Yuan-Song Zhang,Qing-You Xia,Cheng Lu,Ze-Yang Zhou,Zhong-Huai Xiang,M.Nakagaki.New and highly efficient expression systems for expressing selectively foreign prot... 1重组蛋白表达系统及其优化1.1 Ai-chun Zhao,Tian-Fu Zhao,Yuan-Song Zhang,Qing-You Xia,Cheng Lu,Ze-Yang Zhou,Zhong-Huai Xiang,M.Nakagaki.New and highly efficient expression systems for expressing selectively foreign protein in the silk glandsof transgenic silkworm.Transgenic Research,2010。 展开更多
关键词 家蚕生物反应器 学术期刊 EXPRESSION SYSTEMS 论文 国外 表达系统 重组蛋白
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家蚕生物反应器研究进展(Ⅱ) 国外重要学术期刊发表论文简介
5
《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期586-590,共5页
1.1 Takahiro Adachi,Xiaobiao Wang,Tomoko Murata,Masanobu Obara,Hidenori Akutsu,Masakazu Machida,Akirihiro Umezawa,Masahiro Tomita.Production of a non-triple helical collagenαchain in transgenic silkworms andits evalu... 1.1 Takahiro Adachi,Xiaobiao Wang,Tomoko Murata,Masanobu Obara,Hidenori Akutsu,Masakazu Machida,Akirihiro Umezawa,Masahiro Tomita.Production of a non-triple helical collagenαchain in transgenic silkworms andits evaluation as a gelatin substitute for cell culture.Biotechnology and Bioengineering,2010。 展开更多
关键词 家蚕生物反应器 学术期刊 论文 国外 CELL
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家蚕生物反应器共表达猪α+γ干扰素的生产研究
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作者 丁农 张金卫 +4 位作者 李江涛 鱼南洋 冯世民 沈建华 徐森华 《安徽农业科学》 CAS 2016年第1期220-222,共3页
[目的] 研究家蚕生物反应器规模化共表达基因工程产品猪α+γ干扰素的关键技术,为家蚕生物反应器规模化共表达猪α+γ干扰素的生产提供技术支持。[方法]采用α干扰素ELISA检测试剂盒检测蚕品种、接种方式、蚕蛹冷藏对共表达干扰... [目的] 研究家蚕生物反应器规模化共表达基因工程产品猪α+γ干扰素的关键技术,为家蚕生物反应器规模化共表达猪α+γ干扰素的生产提供技术支持。[方法]采用α干扰素ELISA检测试剂盒检测蚕品种、接种方式、蚕蛹冷藏对共表达干扰素重组杆状病毒rBmNPV(BmIFNα+γ)表达量的影响。 [结果]不同蚕品种对重组杆状病毒的表达效率差异较大,春用品种选择皓月×菁松,夏秋用品种选择白玉×秋丰。机械注射接种效率比手工注射提高了3倍以上,检测产品表达量相差不大。蚕在上蔟后25 ℃保护,第5~9天是注射适期,以第6~8天为最佳。蚕茧冷藏于4~5 ℃ 10 d以内,对重组杆状病毒在蚕蛹中的表达效率影响不大。[结论]采用高表达效率的蚕品种以及结合机械的使用和规范操作可以确保规模化生产的成功。 展开更多
关键词 家蚕生物反应器 共表达 α+γ干扰素
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家蚕生物反应器家族再添新成员
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《中国畜牧业》 2019年第5期14-14,共1页
近日,农业农村部向中国农业科学院生物技术研究所颁发了重组杆状病毒/rBmNPV表达的鸡γ-干扰素和猫3-ω干扰素两项生产应用安全证书,标志着利用家蚕生物反应器生产动物用基因工程制品范围得到进一步拓宽。生物所微生物蛋白质工程创新团... 近日,农业农村部向中国农业科学院生物技术研究所颁发了重组杆状病毒/rBmNPV表达的鸡γ-干扰素和猫3-ω干扰素两项生产应用安全证书,标志着利用家蚕生物反应器生产动物用基因工程制品范围得到进一步拓宽。生物所微生物蛋白质工程创新团队通过多年研究,成功实现了鸡γ-干扰素在家蚕生物反应器中的重组表达。 展开更多
关键词 家蚕生物反应器 中国农业科学院 Γ-干扰素 重组杆状病毒 蛋白质工程 安全证书 生物技术 基因工程
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表达小黄鱼生长激素的转基因家蚕品系构建
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作者 翁宏飚 王红芬 +2 位作者 沈卫锋 牛宝龙 楼宝 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期312-316,共5页
构建转小黄鱼生长激素基因的家蚕新品系,外源表达鱼生长激素。通过检索小黄鱼转录组序列,获得小黄鱼生长激素和转铁蛋白的编码序列,设计并合成以接头序列连接,N端为生长激素、C端为转铁蛋白的融合蛋白编码框。利用piggyBac转座子介导的... 构建转小黄鱼生长激素基因的家蚕新品系,外源表达鱼生长激素。通过检索小黄鱼转录组序列,获得小黄鱼生长激素和转铁蛋白的编码序列,设计并合成以接头序列连接,N端为生长激素、C端为转铁蛋白的融合蛋白编码框。利用piggyBac转座子介导的转基因方法,将融合基因转入家蚕基因组中,转育得到可表达小黄鱼生长激素且人工饲料摄食性较好的转基因家蚕品系皓月-Fc,蛹体中小黄鱼生长激素表达量最高约为0.27 ng/mg,蚁蚕24 h疏毛率约为85%。构建的转基因家蚕品系为下一步小黄鱼功能性饲料添加剂的研发打下基础。 展开更多
关键词 家蚕生物反应器 小黄鱼 生长激素 转基因
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利用家蚕-HyNPV表达系统表达鼠抗人CD28分子单链抗体 被引量:2
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作者 黄光镁 邱玉华 +4 位作者 陈永井 郑小坚 吴小锋 胡静平 朱江 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期638-641,共4页
人CD28分子是T细胞表面的最重要的协同刺激分子。将抗人CD28的鼠源单链抗体基因(mouse anti-human CD28-ScFv)亚克隆至杂交病毒HyNPV Bac-to-Bac系统供体质粒pFastBacHTa中,获得重组转移载体pFast-BacHTa CD28-ScFv,并转化大肠杆菌(E.co... 人CD28分子是T细胞表面的最重要的协同刺激分子。将抗人CD28的鼠源单链抗体基因(mouse anti-human CD28-ScFv)亚克隆至杂交病毒HyNPV Bac-to-Bac系统供体质粒pFastBacHTa中,获得重组转移载体pFast-BacHTa CD28-ScFv,并转化大肠杆菌(E.coli)DH10Bac获得重组杆粒rBacmid CD28-ScFv,脂质体介导转染Sf9昆虫细胞后获得重组杆状病毒rBV CD28-ScFv。该重组杆状病毒注射接种于家蚕5龄起蚕,经SDS-PAGE和Westernblotting分析表明,CD28-ScFv在家蚕体内得到了表达,即:人CD28单链抗体通过HyNPV这一宿主范围扩大的新型杂交杆状病毒表达载体在家蚕中获得了表达。 展开更多
关键词 家蚕生物反应器 杂交杆状病毒HyNPV 人CD28分子 单链抗体 表达
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西南大学家蚕功能基因组研究团队在家蚕基因组编辑领域的研究又获新突破
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《蚕学通讯》 2013年第3期37-37,共1页
人工核酸酶介导的基因组编辑(genome editing with engineered nucleases )技术是近几年发展起来的一种技术手段,被《Nature M ethods》杂志评为2011年的年度技术。家蚕的基因组编辑在研究家蚕功能基因、培育家蚕新型素材、家蚕生物... 人工核酸酶介导的基因组编辑(genome editing with engineered nucleases )技术是近几年发展起来的一种技术手段,被《Nature M ethods》杂志评为2011年的年度技术。家蚕的基因组编辑在研究家蚕功能基因、培育家蚕新型素材、家蚕生物反应器开发领域有着巨大的应用潜力。西南大学家蚕功能基因组研究团队紧跟国际上基因组编辑技术的最新发展趋势,迅速在家蚕基因组编辑研究领域开展相关研究工作。2012年9月,该团队在《PLoS ONE》杂志上公布了其利用近期发展起来的基因组编辑工具- TALE核酸酶技术(TALEN)实现对家蚕内源靶基因的可遗传敲除的研究成果,该论文发表以后受到国内外众多媒体的转载与评论,发表之后的短短一年时间内即被包括《Nat Rev Mol Cell Biol》、《Genome Res》等高水平杂志在内的论文引用28次。随后,研究团队又围绕着建立高效的家蚕基因组编辑技术平台开展研究工作,建立了适用于家蚕基因组编辑的 TALEN 高效组装技术体系和活性检测平台。通过组装平台,研究人员可以高效的对人工设计的 TALEN 打靶载体进行组装。通过活性检测平台,研究人员可以便利地对组装的 TALEN 打靶载体的打靶效率进行评估,筛选高活性的TALEN 打靶载体,这对提高对家蚕功能基因敲除,尤其是可遗传敲除的成功率有着重大意义。该体系的建立标志着家蚕基因组编辑技术平台的完善和成熟,为实现家蚕功能基因的大规模敲除打下了坚实基础。相关研究论文“High-efficiency system for construction and evaluation of customized TALENs for silkworm genome editing”于2013年9月28号在国家权威杂志《Molecular Genetics and Genomics》上在线发表(http ://link .springer .com/article/10.1007/s00438-013-0782-4)。 西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室博士研究生王峰、马三垣为论文的共同第一作者,西南大学长江学者特聘教授夏庆友是论文的通讯作者。该研究得到了国家973计划,863计划的支持。 展开更多
关键词 家蚕生物反应器 功能基因组 编辑技术 大学 西南 SILKWORM 国家重点实验室 人工核酸酶
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从测序到编辑:家蚕基因组研究再获突破
11
《蚕学通讯》 2012年第4期47-47,共1页
家蚕是一种重要的经济昆虫、文化载体和模式生物,其不但在蚕丝产业的发展和丝绸之路的文化传播中做出了卓越的贡献,在蚕丝纤维新材料、生物反应器和模式生物中也逐渐凸显出广阔的应用前景。为了对家蚕进行更深入的研究和利用,西南大... 家蚕是一种重要的经济昆虫、文化载体和模式生物,其不但在蚕丝产业的发展和丝绸之路的文化传播中做出了卓越的贡献,在蚕丝纤维新材料、生物反应器和模式生物中也逐渐凸显出广阔的应用前景。为了对家蚕进行更深入的研究和利用,西南大学夏庆友教授领衔的家蚕基因组研究团队率先开展了家蚕基因组研究,并于2004年和2009年先后在《science》杂志上公布家蚕基因组图谱和家蚕遗传变异图谱。在该研究的推动下,团队在功能基因组研究、家蚕转基因和家蚕生物反应器方面取得了显著的进展,家蚕的研究也受到越来越广泛的关注。但是,家蚕要成为全世界公认的生物反应器和模式生物,依然有很长的路要走,其中最重要的一步就是定点敲除和敲入等基因组编辑技术的建立。 展开更多
关键词 家蚕生物反应器 基因组图谱 编辑技术 《SCIENCE》 测序 模式生物 功能基因组 经济昆虫
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重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子胶囊的一般药理学试验 被引量:1
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作者 林蓉 陈天佳 +1 位作者 张文波 张耀洲 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期232-234,共3页
为探明由家蚕生物反应器生产的重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子胶囊的药理作用,以200、400、800μg/kg3种剂量给小鼠灌服,结果对正常小鼠自主活动数与阈下剂量戊巴比妥纳合用对小鼠入睡动物数均无明显影响;以100、200、400μg/kg剂量... 为探明由家蚕生物反应器生产的重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子胶囊的药理作用,以200、400、800μg/kg3种剂量给小鼠灌服,结果对正常小鼠自主活动数与阈下剂量戊巴比妥纳合用对小鼠入睡动物数均无明显影响;以100、200、400μg/kg剂量由十二指肠注入家猫,对家猫的血压、心率、心电图、呼吸频率和深度均无明显影响。 展开更多
关键词 家蚕生物反应器 重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 一般药理
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简讯
13
《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1218-1218,共1页
人工核酸酶介导的基因组编辑(genome editing with engineered nucleases)技术是近几年发展起来的一种研究手段。家蚕的基因组编辑在研究家蚕基因功能、培育家蚕新型素材、开发家蚕生物反应器等领域有着巨大的应用潜力。西南大学家蚕... 人工核酸酶介导的基因组编辑(genome editing with engineered nucleases)技术是近几年发展起来的一种研究手段。家蚕的基因组编辑在研究家蚕基因功能、培育家蚕新型素材、开发家蚕生物反应器等领域有着巨大的应用潜力。西南大学家蚕功能基因组研究团队紧跟国际上基因组编辑技术的最新发展趋势,迅速在家蚕基因组编辑研究领域开展相关研究工作。 展开更多
关键词 家蚕生物反应器 功能基因组 编辑技术 人工核酸酶 基因功能 发展趋势 介导
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两项干扰素获生产应用安全证书
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《中国饲料》 北大核心 2019年第5期3-3,共1页
近日,农业农村部向中国农业科学院生物技术研究所颁发了重组杆状病毒rBmNPV表达的鸡γ-干扰素和猫ω-干扰素两项生产应用安全证书,标志着利用家蚕生物反应器生产动物用基因工程制品范围得到进一步拓宽。
关键词 Γ-干扰素 安全证书 生产 应用 中国农业科学院 家蚕生物反应器 重组杆状病毒 生物技术
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