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题名松材线虫两种实用分子检测技术
被引量:9
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作者
陈凤毛
叶建仁
吴小芹
谈家金
黄麟
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机构
南京林业大学森林资源与环境学院江苏省有害生物预防与控制重点实验室
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出处
《北京林业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第4期149-152,共4页
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基金
国家自然科学基金项目(30771728)
江苏省高校自然科学研究重大项目(10KJA220021)
南京林业大学科研基金项目(G2009-09)
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文摘
为检验已开发的SCAR标记与实时PCR两种分子检测方法鉴定松材线虫的可靠性,本文选用线虫未知种样品7个以及已知种样品3个为实验材料,采用上述两种分子检测方法进行检测,并且对7个线虫未知种样品进行形态鉴定。结果表明:1)运用SCAR标记检测,第2、3、4、7号4个未知种样品与8号松材线虫样品出现了一条清晰、明亮的860bp特异条带,第1、5、6号样品与9号拟松材线虫、10号大核滑刃线虫均未出现扩增谱带,表明第2、3、4、7号4个待测样品中含有松材线虫,而第1、5、6号3个待测样品中不含有松材线虫;2)运用实时PCR检测,第2、3、4、7号4个样品与8号松材线虫样品表现有明显的阳性扩增信号,其余样品均未出现扩增信号,也无循环阈值(Ct值);3)对7个未知种样品的形态鉴定结果为:第2、4、7号样品为松材线虫样品,3号样品中除松材线虫外还含有其他线虫,第1、5、6号3个样品不含松材线虫。对于松材线虫的检测,两种分子检测结果与形态鉴定结果完全一致,且两种分子检测方法对松材线虫都具有很强的特异性,都可以在较短时间内对松材线虫进行鉴定。其中SCAR标记检测方法约需2h,实时PCR检测方法约需1h。实现了对松材线虫幼虫快速检测目标,检测结果便于判读。
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关键词
松材线虫
实用分子技术
SCAR标记
实时PCR
检测
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Keywords
Bursaphelenchus xylophilus
applied molecular skills
SCAR marker
real time PCR
detection
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分类号
S763.1
[农业科学—森林保护学]
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