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实时荧光LAMP技术快速检测变形杆菌
被引量：
4
1
作者
马桂芬
张蕴哲
+4 位作者
付博宇
袁耀武
苑宁
王鑫
张伟
《食品研究与开发》
CAS
北大核心
2016年第11期127-132,共6页
建立一种快速检测变形杆菌的方法。采用实时荧光LAMP(Real Amp)技术检测变形杆菌,分析Gen Bank中公布的变形杆菌atp D基因序列,针对其6个区域设计4条引物,利用实时荧光监测仪等温(62℃)扩增模板DNA,通过与电脑相连进行实时监测,对该方...
建立一种快速检测变形杆菌的方法。采用实时荧光LAMP(Real Amp)技术检测变形杆菌,分析Gen Bank中公布的变形杆菌atp D基因序列,针对其6个区域设计4条引物,利用实时荧光监测仪等温(62℃)扩增模板DNA,通过与电脑相连进行实时监测,对该方法检测变形杆菌的特异性、灵敏度、人工污染猪肉检出限等方面进行研究,并将该检测法的灵敏度与普通环介导等温扩增(LAMP)检测法进行比较。结果表明,Real Amp检测方法比普通LAMP检测方法更加方便快捷,20 min内即可判定结果;用于特异性试验的19株试验菌株中,6株变形杆菌呈阳性结果,其他13株非变形杆菌均呈阴性结果;检测纯菌的灵敏度为8.1CFU/m L,是普通LAMP检测方法的10倍;人工污染猪肉的检出限为81CFU/m L。本研究建立的Real Amp检测方法操作简单,耗时短,特异性强、灵敏度高,能够实现对变形杆菌的快速检测。
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关键词
实时
荧光
lamp
lamp
变形杆菌
检测
atpD基因
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职称材料
环介导等温扩增技术的应用及研究进展
被引量：
23
2
作者
徐匆
罗华建
+5 位作者
李艳芳
黄皓
梁卫驱
胡珊
胡楚维
罗鸿斌
《广东农业科学》
CAS
2019年第4期116-123,共8页
环介导等温扩增(LAMP)技术自2000年被发明以来以其快速、灵敏、低耗等特点,引起众多研究者的关注。该技术在人、动物、植物、环境等相关微生物的检测、监控等领域得到了广泛研究与应用,其检测灵敏度普遍高于传统PCR 。但是传统LAMP技术...
环介导等温扩增(LAMP)技术自2000年被发明以来以其快速、灵敏、低耗等特点,引起众多研究者的关注。该技术在人、动物、植物、环境等相关微生物的检测、监控等领域得到了广泛研究与应用,其检测灵敏度普遍高于传统PCR 。但是传统LAMP技术对于产物检测存在耗时、易造成污染等问题,以及在野外或医疗点检测时存在判读不便的弊端。就LAMP技术与其他多种产物检测技术结合后的方法如目视LAMP、实时LAMP、微流控LAMP、横向流LAMP及电化学LAMP进行了总结、举例及讨论。目视LAMP具有费用低、适合多环境下使用的特点;实时LAMP、微流控及电化学LAMP法能够有效提高样品检测的准确度,且可减少检测时间;横向流LAMP具有可操作性强、便于判读等特点。根据目前LAMP技术的研究进展及各技术优劣势的分析,预测 LAMP技术未来发展的方向和重点可能为研发手持便携式检测仪。
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关键词
环介导等温扩增(
lamp
)
实时lamp
微流控
lamp
横向流
lamp
电化学
lamp
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职称材料
3种新城疫病毒核酸扩增检测方法的比较研究
3
作者
杜景娇
薛强
+2 位作者
邹明强
郭浩
滕文锋
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2012年第4期178-183,共6页
本研究利用3种方法对新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)进行检测,并对这3种检测方法的灵敏度和特异性作出比较。根据新城疫病毒的融合蛋白基因(F基因)设计合成6条特异性引物,利用水浴LAMP法、PCR及LAMP实时浊度仪进行检测。通过...
本研究利用3种方法对新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)进行检测,并对这3种检测方法的灵敏度和特异性作出比较。根据新城疫病毒的融合蛋白基因(F基因)设计合成6条特异性引物,利用水浴LAMP法、PCR及LAMP实时浊度仪进行检测。通过对恒温水浴中的反应温度、反应时间及反应液中Mg2+浓度进行优化获得最佳反应条件,结果用凝胶电泳分析;用优化的温度进行LAMP实时浊度仪检测,同时都与PCR方法进行比较。结果显示,获得了最佳反应条件,水浴LAMP方法最低检测限是1.58pg,比PCR高100倍,而LAMP实时浊度仪检测灵敏度比水浴LAMP方法高10倍,最低检测限是0.158pg。3种方法对其他非新城疫病毒均无检出。结果表明,新城疫病毒水浴LAMP检测方法速度快、不需要高精密的仪器,而且具有灵敏度高、特异性强、操作简单等特点,有望在核酸扩增领域取代PCR技术,LAMP浊度仪法检测灵敏度更高,但是所需仪器和试剂比较昂贵。
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关键词
环介导等温扩增技术
新城疫病毒
聚合酶链反应
lamp
实时
浊度仪
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职称材料
题名
实时荧光LAMP技术快速检测变形杆菌
被引量：
4
1
作者
马桂芬
张蕴哲
付博宇
袁耀武
苑宁
王鑫
张伟
机构
河北农业大学食品科技学院
河北农业大学理工学院
出处
《食品研究与开发》
CAS
北大核心
2016年第11期127-132,共6页
基金
河北省自然科学基金项目(C2008000216)
文摘
建立一种快速检测变形杆菌的方法。采用实时荧光LAMP(Real Amp)技术检测变形杆菌,分析Gen Bank中公布的变形杆菌atp D基因序列,针对其6个区域设计4条引物,利用实时荧光监测仪等温(62℃)扩增模板DNA,通过与电脑相连进行实时监测,对该方法检测变形杆菌的特异性、灵敏度、人工污染猪肉检出限等方面进行研究,并将该检测法的灵敏度与普通环介导等温扩增(LAMP)检测法进行比较。结果表明,Real Amp检测方法比普通LAMP检测方法更加方便快捷,20 min内即可判定结果;用于特异性试验的19株试验菌株中,6株变形杆菌呈阳性结果,其他13株非变形杆菌均呈阴性结果;检测纯菌的灵敏度为8.1CFU/m L,是普通LAMP检测方法的10倍;人工污染猪肉的检出限为81CFU/m L。本研究建立的Real Amp检测方法操作简单,耗时短,特异性强、灵敏度高,能够实现对变形杆菌的快速检测。
关键词
实时
荧光
lamp
lamp
变形杆菌
检测
atpD基因
Keywords
Rea
lamp
lamp
proteus
detection
atpD
分类号
TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
环介导等温扩增技术的应用及研究进展
被引量：
23
2
作者
徐匆
罗华建
李艳芳
黄皓
梁卫驱
胡珊
胡楚维
罗鸿斌
机构
东莞市农业科学研究中心
东莞市理工学院生态环境工程技术研发中心
出处
《广东农业科学》
CAS
2019年第4期116-123,共8页
基金
广东省科技计划项目(2017A020208002)
文摘
环介导等温扩增(LAMP)技术自2000年被发明以来以其快速、灵敏、低耗等特点,引起众多研究者的关注。该技术在人、动物、植物、环境等相关微生物的检测、监控等领域得到了广泛研究与应用,其检测灵敏度普遍高于传统PCR 。但是传统LAMP技术对于产物检测存在耗时、易造成污染等问题,以及在野外或医疗点检测时存在判读不便的弊端。就LAMP技术与其他多种产物检测技术结合后的方法如目视LAMP、实时LAMP、微流控LAMP、横向流LAMP及电化学LAMP进行了总结、举例及讨论。目视LAMP具有费用低、适合多环境下使用的特点;实时LAMP、微流控及电化学LAMP法能够有效提高样品检测的准确度,且可减少检测时间;横向流LAMP具有可操作性强、便于判读等特点。根据目前LAMP技术的研究进展及各技术优劣势的分析,预测 LAMP技术未来发展的方向和重点可能为研发手持便携式检测仪。
关键词
环介导等温扩增(
lamp
)
实时lamp
微流控
lamp
横向流
lamp
电化学
lamp
Keywords
loop-mediated isothermal amplification (
lamp
)
real-time
lamp
micro-fluidic
lamp
lateral flow detect (LFD)
lamp
electrochemical
lamp
分类号
S188 [农业科学—农业基础科学]
在线阅读
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职称材料
题名
3种新城疫病毒核酸扩增检测方法的比较研究
3
作者
杜景娇
薛强
邹明强
郭浩
滕文锋
机构
中国检验检疫科学研究院
大连医科大学
内蒙古医学院
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2012年第4期178-183,共6页
基金
国际科技合作项目(2009DFA32720)
"十一五"国家科技支撑计划(2009BAK61B04)
文摘
本研究利用3种方法对新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)进行检测,并对这3种检测方法的灵敏度和特异性作出比较。根据新城疫病毒的融合蛋白基因(F基因)设计合成6条特异性引物,利用水浴LAMP法、PCR及LAMP实时浊度仪进行检测。通过对恒温水浴中的反应温度、反应时间及反应液中Mg2+浓度进行优化获得最佳反应条件,结果用凝胶电泳分析;用优化的温度进行LAMP实时浊度仪检测,同时都与PCR方法进行比较。结果显示,获得了最佳反应条件,水浴LAMP方法最低检测限是1.58pg,比PCR高100倍,而LAMP实时浊度仪检测灵敏度比水浴LAMP方法高10倍,最低检测限是0.158pg。3种方法对其他非新城疫病毒均无检出。结果表明,新城疫病毒水浴LAMP检测方法速度快、不需要高精密的仪器,而且具有灵敏度高、特异性强、操作简单等特点,有望在核酸扩增领域取代PCR技术,LAMP浊度仪法检测灵敏度更高,但是所需仪器和试剂比较昂贵。
关键词
环介导等温扩增技术
新城疫病毒
聚合酶链反应
lamp
实时
浊度仪
Keywords
loop-mediated isothermal amplification
Newcastle disease virus
PCR
lamp
turbidimetry
分类号
S854.43 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
实时荧光LAMP技术快速检测变形杆菌
马桂芬
张蕴哲
付博宇
袁耀武
苑宁
王鑫
张伟
《食品研究与开发》
CAS
北大核心
2016
4
在线阅读
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职称材料
2
环介导等温扩增技术的应用及研究进展
徐匆
罗华建
李艳芳
黄皓
梁卫驱
胡珊
胡楚维
罗鸿斌
《广东农业科学》
CAS
2019
23
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
3种新城疫病毒核酸扩增检测方法的比较研究
杜景娇
薛强
邹明强
郭浩
滕文锋
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2012
0
在线阅读
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职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
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