不同厂家非洲猪瘟荧光PCR试剂盒检测性能比对与分析

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作者 徐振娜 郭永添 +4 位作者 黄炳炽 莫钻兰 王健青 钟群芳 洪伟彬 《畜牧兽医科技信息》 2024年第12期73-76,共4页

为评价非洲猪瘟荧光PCR试剂盒检测性能,从市场上挑选4种非洲猪瘟检测试剂盒,用最低检出限、准确性、重复性等指标对试剂盒进行评价。结果显示:3个厂家试剂盒最低检测限5.8~58 copies/μL,一家试剂盒最低检测限> 5.8×10^(3)copi... 为评价非洲猪瘟荧光PCR试剂盒检测性能,从市场上挑选4种非洲猪瘟检测试剂盒,用最低检出限、准确性、重复性等指标对试剂盒进行评价。结果显示:3个厂家试剂盒最低检测限5.8~58 copies/μL,一家试剂盒最低检测限> 5.8×10^(3)copies/μL。4个试剂盒与临床常见病原无交叉反应。有2个厂家试剂盒的准确性较好,有3个试剂盒在检测高浓度样品时重复性较好,在检测低浓度样品时重复性较差。通过研究,能够挑选到合适的检测试剂盒,适合临床推广应用。 展开更多

关键词 非洲猪瘟 荧光pcr试剂盒 比对 分析

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猪伪狂犬病毒野毒株SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR诊断试剂盒的研制 被引量：5

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作者 余波 周思旋 +3 位作者 谭诗文 徐景峨 史开志 杨莉 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2014年第6期128-131,144,共5页

根据GenBank中猪伪狂犬病毒(PRV)gE基因序列设计特异性的引物,PCR扩增获得PRV gE基因片段,构建重组质粒pMD18-T-gE,作为阳性标准品。对SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR反应条件进行优化,建立猪PRV SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR诊断方法,研... 根据GenBank中猪伪狂犬病毒(PRV)gE基因序列设计特异性的引物,PCR扩增获得PRV gE基因片段,构建重组质粒pMD18-T-gE,作为阳性标准品。对SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR反应条件进行优化,建立猪PRV SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR诊断方法,研制诊断试剂盒。扩增产物的熔解曲线分析结果显示只出现单特异峰,无引物二聚体,对猪圆环病毒(PCV-2)、猪细小病毒(PPV)、PRV(gE基因缺失株)、猪源E.coli、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)均无阳性信号扩增,且重复性好,灵敏度可达2.3×101拷贝/μL。结果表明,研制的PRV野毒株SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR试剂盒特异、灵敏、快速、重复性好,适于伪狂犬病毒临床样品的检测。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病毒 野毒株 GE基因 荧光定量pcr 诊断试剂盒

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金黄色葡萄球菌及毒素多重实时荧光PCR检测技术及其试剂盒性能测试 被引量：4

3

作者 周海波 沈宇飞 +2 位作者 陆兆新 胡安妥 别小妹 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1258-1265,共8页

[目的]本文基于自筛的金黄色葡萄球菌特异性靶基因ASL18_04625(sa19)以及2种重要的毒素基因(A型和U型肠毒素,sea344和seu222),建立一种同时检测金黄色葡萄球菌及其肠毒素的多重实时荧光PCR检测方法。[方法]通过优化引物浓度等因素,确定... [目的]本文基于自筛的金黄色葡萄球菌特异性靶基因ASL18_04625(sa19)以及2种重要的毒素基因(A型和U型肠毒素,sea344和seu222),建立一种同时检测金黄色葡萄球菌及其肠毒素的多重实时荧光PCR检测方法。[方法]通过优化引物浓度等因素,确定最适多重实时荧光PCR反应体系,并将此检测体系组装成试剂盒,对人工污染样品和实际样品进行检测。[结果]选用1.5×Syto9 Green作为荧光染料,优化后的反应体系为0.015 U·μL^(-1)Taq酶,0.10 mmol·L^(-1)dNTP,终浓度分别为0.05、0.10和0.20μmol·L^(-1)的3对引物。sa19的基因组灵敏度为40.7 pg·μL^(-1),sea344、seu222的基因组灵敏度均为4.07 pg·μL^(-1);sa19的菌液浓度灵敏度为1.19×10^(3)CFU·mL^(-1),sea344、seu222的菌液浓度灵敏度均为1.19×10^(4)CFU·mL^(-1)。构建的试剂盒组内和组间重复率均为100%。在经历60次反复冻融、72 h泡沫箱储藏、-20℃储藏90 d、4℃储藏45 d后,试剂盒检测结果仍没有显著变化,同时具有良好的特异性与抗干扰能力。[结论]本研究针对食源性金黄色葡萄球菌建立的多重实时荧光PCR法,具有快速、特异性强、灵敏度高的优点,并组建成适用于实际检测应用的商品化试剂盒,在食品安全检测方面具有广阔的应用前景。 展开更多

关键词 金黄色葡萄球菌 毒素基因 多重实时荧光pcr 试剂盒

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丙型肝炎病毒(HCV)荧光PCR(F-PCR)试剂盒的研制及与免疫学方法的比较 被引量：10

4

作者 程钢 何蕴韶 +1 位作者 周新宇 李虎 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第7期464-468,共5页

目的:用荧光PCR（Fluorescence　PCR,F-PCR）方法研制丙型肝炎病毒（Hepatitis C Virus,HCV）RNA检测试剂盒,通过临床验证,考核其性能,并与免疫学方法比较。方法:F-PCR是PCR和荧光探针杂交技术结合所产生的PCR方法。由于采用完全闭管荧... 目的:用荧光PCR（Fluorescence　PCR,F-PCR）方法研制丙型肝炎病毒（Hepatitis C Virus,HCV）RNA检测试剂盒,通过临床验证,考核其性能,并与免疫学方法比较。方法:F-PCR是PCR和荧光探针杂交技术结合所产生的PCR方法。由于采用完全闭管荧光检测,避免了PCR后处理导致的假阳性污染;又采用了荧光检测技术,可以提高检测的灵敏度。结果:设计合成了HLV F-PCR诊断试剂盒。检测了 512份临床血清标本,以美国 Abbott公司的HCV ELISA诊断试剂盒和美国Biotronics公司的HCV荧光RT-PCR诊断试剂盒（B-PCR）为对照。阳性率30.5％,灵敏度97.3％,特异性98.1％。结论:F-PC的灵敏度显著优于ELISA,也高于B-PCR;三者的特异性无统计学差异。F-PCR试剂盒可以检测HCV的真实感染情况,对于临床诊断和疗效考察有一定的指导意义。 展开更多

关键词 荧光pcr 丙型肝炎病毒 诊断试剂盒 HCV 丙型肝炎 诊断 免疫学诊断 荧光聚合酶链反应

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6种不同J亚群禽白血病病毒检测试剂盒的比较

5

作者 赵方钰 崔慧珍 +4 位作者 王一新 常爽 任志浩 崔文平 赵鹏 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第4期62-69,共8页

为了比较6种不同J亚群禽白血病病毒(ALV-J)检测试剂盒的检测结果,以更好地实施禽白血病净化和鸡苗洁净度评估。本试验首先将ALV-J参考株以卵黄囊接种感染无特定病原体(SPF)鸡胚构建雏鸡携带ALV-J模型,对出壳雏鸡逐一采集胎粪和抗凝血,... 为了比较6种不同J亚群禽白血病病毒(ALV-J)检测试剂盒的检测结果,以更好地实施禽白血病净化和鸡苗洁净度评估。本试验首先将ALV-J参考株以卵黄囊接种感染无特定病原体(SPF)鸡胚构建雏鸡携带ALV-J模型,对出壳雏鸡逐一采集胎粪和抗凝血,随后分别将胎粪滤液和血浆接种鸡胚成纤维传代(DF-1)细胞进行病毒培养,维持7 d时收取细胞上清,以A、B、C三家公司的ALV p27抗原酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒以及商品化的磁微粒化学发光检测试剂盒、胶体金试纸条和实时荧光定量PCR检测试剂盒分别对胎粪、不同稀释度胎粪样品、胎粪病毒分离细胞上清和血浆病毒分离细胞上清进行检测。结果显示,6种不同试剂盒对胎粪、胎粪病毒分离细胞上清和血浆病毒分离细胞上清的检测结果判定总体一致,其中以磁微粒化学发光检测试剂盒读数判定最为直观,其阳性样品与阴性样品的读值区分明显、易于判断。对不同稀释度胎粪样品的检测结果显示,以A公司ALV p27抗原ELISA试剂盒、磁微粒化学发光检测试剂盒和实时荧光定量PCR检测试剂盒相对灵敏,可检出低滴度病原。结果表明,不同检测方法对ALV-J检测的整体判定差异不显著,但针对低滴度样品检测时不同方法的检出率有差异,需要根据情况选择方法。 展开更多

关键词 J亚群禽白血病病毒(ALV-J) P27抗原 酶联免疫吸附测定(ELISA) 磁微粒化学发光检测试剂盒 胶体金试纸条 实时荧光定量pcr

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荧光定量PCR技术验证Sinofiler试剂盒的适宜模板量 被引量：3

6

作者 李成涛 郭宏 +3 位作者 林源 柳燕 阙庭志 李莉 《法医学杂志》 CAS CSCD 2008年第2期129-130,133,共3页

目的探讨Sinofiler试剂盒适合扩增的模板DNA用量。方法选取经Sinofiler试剂盒基因分型且图谱完整、扩增均衡性好的DNA样本,进行荧光定量PCR检测。结果实验结果表明,在12.5μL体系中,1.29～1.51ng的模板DNA能够获得理想的分型结果。结论... 目的探讨Sinofiler试剂盒适合扩增的模板DNA用量。方法选取经Sinofiler试剂盒基因分型且图谱完整、扩增均衡性好的DNA样本,进行荧光定量PCR检测。结果实验结果表明,在12.5μL体系中,1.29～1.51ng的模板DNA能够获得理想的分型结果。结论应用荧光定量PCR技术检测不同试剂盒适合扩增的模板DNA用量是一种准确、有效的方法。 展开更多

关键词 法医生物学 荧光定量pcr技术 定量 Sinofiler试剂盒

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结核分支杆菌荧光PCR试剂盒的研制及临床试验 被引量：13

7

作者 程钢 何蕴韶 +2 位作者 周新宇 邓文国 李虎 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第6期533-535,共3页

目的用荧光PCR(fluorescence PCR,F-PCR)方法研制结核分支杆菌(TB)DNA检测试剂盒,通过临床试验评价其性能,并与其他方法进行比较。方法F-PCR是PCR和荧光探针杂交技术结合所产生的PCR方法。由于采用完全闭管荧光检测,避免了PCR后处理导... 目的用荧光PCR(fluorescence PCR,F-PCR)方法研制结核分支杆菌(TB)DNA检测试剂盒,通过临床试验评价其性能,并与其他方法进行比较。方法F-PCR是PCR和荧光探针杂交技术结合所产生的PCR方法。由于采用完全闭管荧光检测,避免了PCR后处理导致的假阳性污染;又采用了荧光检测技术,可以提高检测的灵敏性。应用F-PCR检测了297份肺结核病人和249份非结核对照者的痰液标本,以改良罗氏培养法、金胺荧光染液涂片法、Abbott公司的LCx试剂盒检测作为对照。结果设计合成了TB F-PCR诊断试剂盒。检测阳性率49.1%,灵敏性89.2%,特异性98.8%,符合率93.6%。结论F-PCR在灵敏性上显著优于培养法和涂片法,与LCx试剂盒检测无显著差异。F-PCR试剂盒可以检测TB的真实感染情况,对于临床诊断和疗效考察有一定的指导意义。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 荧光pcr试剂盒 研制 临床试验

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猪圆环病毒2型荧光定量PCR检测试剂盒的研制及应用 被引量：2

8

作者 任方方 胡瑞丽 +5 位作者 倪建平 许燕 李春华 赵笑 杜亚楠 赵凯 《上海农业学报》 CSCD 2017年第2期89-95,共7页

为了开发针对猪圆环病毒2型(PCV2)的诊断技术及其试剂盒,对PCV2的ORF2基因设计相应的特异性引物和探针,采用荧光定量PCR方法检测PCV2。试验表明:该方法循环阈值(Ct)与标准DNA模板在10~1—10~7拷贝/μL浓度范围内具有极好的线性关系,相... 为了开发针对猪圆环病毒2型(PCV2)的诊断技术及其试剂盒,对PCV2的ORF2基因设计相应的特异性引物和探针,采用荧光定量PCR方法检测PCV2。试验表明:该方法循环阈值(Ct)与标准DNA模板在10~1—10~7拷贝/μL浓度范围内具有极好的线性关系,相关系数为0.9999;重复性好,批内试验中Ct值的变异系数在0.59%—1.05%,批间试验的Ct值变异系数为1.9%—4.2%;研制的检测试剂盒与猪瘟病毒(HCV)、猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)不发生交叉反应,检测极限和定量极限分别为10和100拷贝数。用此方法对1 000个临床样品进行检测,结果710个被检测为阳性。结果显示,所研制的PCV2诊断试剂盒灵敏度高,特异性强,稳定性好,为PCV2的检测和流行病学的调查提供了一种简便快速的诊断方法。 展开更多

关键词 猪圆环病毒2型 荧光定量 pcr检测 诊断试剂盒

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检测猪瘟病毒的商业化荧光PCR试剂盒比对验证 被引量：2

9

作者 鞠厚斌 杨德全 +3 位作者 葛菲菲 刘健 李鑫 周锦萍 《上海畜牧兽医通讯》 2015年第1期2-3,共2页

为了比较猪瘟病毒6种荧光PCR检测试剂盒的使用效果,本研究采用标准毒株、疫苗与猪瘟阳性组织3类样品,对这些试剂盒的敏感性、特异性、重复性及有效期符合率进行比较。结果显示,试剂盒差异较大,仅有国外试剂盒和2家国产试剂盒与预期的结... 为了比较猪瘟病毒6种荧光PCR检测试剂盒的使用效果,本研究采用标准毒株、疫苗与猪瘟阳性组织3类样品,对这些试剂盒的敏感性、特异性、重复性及有效期符合率进行比较。结果显示,试剂盒差异较大,仅有国外试剂盒和2家国产试剂盒与预期的结果一致,其对猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型以及阴性猪样品的核酸无交叉反应,重复性与再现性均为理想,在有效期内检测结果没有发生变化。本研究开展检测猪瘟病毒试剂盒验证试验,这将为猪瘟的病原学诊断及实验室开展其它试剂盒验证提供参考。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 荧光pcr 试剂盒 验证

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不同荧光PCR试剂盒检测非洲猪瘟病毒的比对与分析 被引量：7

10

作者 周志刚 马士文 +1 位作者 黄兴军 宇凌 《畜牧兽医杂志》 2020年第6期1-3,6,共4页

为全面认识不同试剂盒检测非洲猪瘟病毒的特性。本文采用商品化的四种非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测试剂盒以ASF阳性对照为样品进行试验与研究。结果表明:同一种试剂扩增不同的阳性样本,其S型曲线轮廓基本相同。相同样本分别用不同试剂扩... 为全面认识不同试剂盒检测非洲猪瘟病毒的特性。本文采用商品化的四种非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测试剂盒以ASF阳性对照为样品进行试验与研究。结果表明:同一种试剂扩增不同的阳性样本,其S型曲线轮廓基本相同。相同样本分别用不同试剂扩增,其S型曲线呈现出不同的轮廓特征。就S型曲线轮廓美观度而言,试剂B和C较理想。就相对荧光强度而言,A>C>B>D差异极显著(P<0.01),A试剂盒反应液中Taq酶、dNTP、离子等最充足,其次为C、B、D。B试剂反应所需要时间最短,最省时,其次为C、D、A。在实际应用中,应根据具体需求选择试剂盒。 展开更多

关键词 非洲猪瘟 实时荧光pcr试剂盒 S型曲线 监测

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6种非洲猪瘟荧光PCR试剂盒对比试验

11

作者 彭苗苗 杜丽飞 +5 位作者 王慧 杨俊 邱美珍 刘伯承 周望平 危婷 《湖南畜牧兽医》 2021年第6期16-20,共5页

对5个厂家的6种非洲猪瘟荧光PCR试剂盒检测的敏感性和一致性进行综合比较,选取已知阳性的核酸样品作为待测样品进行梯度稀释,每组设置三个平行对照,使用A1、A2、B、C、D、E6种试剂盒,按照各厂家试剂盒说明书对所有样品进行非洲猪瘟荧光... 对5个厂家的6种非洲猪瘟荧光PCR试剂盒检测的敏感性和一致性进行综合比较,选取已知阳性的核酸样品作为待测样品进行梯度稀释,每组设置三个平行对照,使用A1、A2、B、C、D、E6种试剂盒,按照各厂家试剂盒说明书对所有样品进行非洲猪瘟荧光PCR检测及结果判定,并从检出ct值的样品数量、检出核酸最低拷贝浓度、检出ct值的平均值和检出ct值的离散度四个维度来综合评估对6种试剂盒的敏感性和一致性。结果显示:检测灵敏度方面,由高至低的排名为试剂盒D>试剂盒C>试剂盒A2>试剂盒E>试剂盒B>试剂盒A1;检测一致性方面,试剂盒D>试剂盒C>试剂盒A2>试剂盒E>试剂盒B=试剂盒A1。综合6种试剂盒的敏感性和一致性来看,试剂盒D的灵敏度和一致性最好,试剂盒C稍低于试剂盒D,但差距很小,几乎在同一水平,试剂盒A2灵敏度和一致性次之,其余三种试剂盒E>试剂盒B>试剂盒A1。 展开更多

关键词 非洲猪瘟荧光pcr检测试剂盒 敏感性测试 一致性

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家蚕微孢子虫荧光定量PCR检测方法及诊断试剂盒 被引量：10

12

作者 何永强 吴姗 +8 位作者 鲁兴萌 张弘 邱海洪 帅江冰 王素华 张晓峰 徐国群 李光才 董强 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期260-265,共6页

基于为蚕种生产与流通贸易提供快速、灵敏、准确检测家蚕微孢子虫的方法,以家蚕微孢子虫小亚单位核糖体RNA基因66 bp片段作为靶标,设计特异性引物和TaqMan探针,用构建的重组质粒制备标准品进行荧光定量PCR扩增,通过优化PCR反应体系,测... 基于为蚕种生产与流通贸易提供快速、灵敏、准确检测家蚕微孢子虫的方法,以家蚕微孢子虫小亚单位核糖体RNA基因66 bp片段作为靶标,设计特异性引物和TaqMan探针,用构建的重组质粒制备标准品进行荧光定量PCR扩增,通过优化PCR反应体系,测定线性范围,评价方法的特异性、灵敏度和重复性,成功构建了家蚕微孢子虫的荧光定量PCR检测方法,并研制出诊断试剂盒。该方法的检测线性范围为1×108～1×102拷贝/mL的7个线性梯度,检测家蚕微孢子虫的敏感度达1×102拷贝/mL,特异性高,3次重复性检测应用试验的批内变异系数为3.6%～7.2%,批间变异系数为5.2%～7.8%。结果表明,建立的家蚕微孢子虫荧光定量PCR检测方法具有准确、灵敏、快速、特异性强的特点。 展开更多

关键词 家蚕微孢子虫 荧光定量pcr 诊断试剂盒

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GeneScan试剂盒法快速定量检测玉米中CaMV35S启动子

13

作者 朱飞宇 黄宇飞 +3 位作者 高梅莹 刘佳 刘丹 铁晓威 《现代农业科技》 2025年第14期121-124,130,共5页

针对玉米中转入的CaMV35S启动子,开展了一种新型试剂盒[GMO Quant(LR)35S Screen corn]荧光定量PCR检测方法试验,建立新的转基因玉米中含有CaMV35S启动子标记基因的定量检测方法。选用3个玉米品种先玉1321、裕丰303和先玉335进行了CaMV... 针对玉米中转入的CaMV35S启动子,开展了一种新型试剂盒[GMO Quant(LR)35S Screen corn]荧光定量PCR检测方法试验,建立新的转基因玉米中含有CaMV35S启动子标记基因的定量检测方法。选用3个玉米品种先玉1321、裕丰303和先玉335进行了CaMV35S启动子荧光定量PCR检测,标准偏差分别为0.15%、0.39%和0.61%,标准曲线相关系数均在0.98以上,扩增效率为90%~110%,试剂盒中配有1%MON863玉米基因组DNA(已知CaMV35S启动子含量在0.5%左右)作为对照材料,试验结果符合荧光定量PCR检测试验要求,确认此方法准确有效。此方法具有高度的特异性、高效性,是一种新型高效定量检测CaMV35S启动子的方法。 展开更多

关键词 荧光定量pcr CaMV35S启动子 转基因玉米 定量检测 GeneScan试剂盒法

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不同厂家非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒比对 被引量：3

14

作者 许秀琼 刘劼 +5 位作者 吴立炀 叶健 查云峰 王福广 孙柏林 卢受昇 《中国动物检疫》 CAS 2022年第7期97-102,共6页

为评价不同厂家非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒的效果,选择当前市场上6个厂家的商品化试剂盒,检测不同类型样品,结合统计学方法对试剂盒的特异性、敏感性和重复性等性能指标进行比对分析。结果显示:6个厂家的试剂盒ROC曲线下区域面积(A... 为评价不同厂家非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒的效果,选择当前市场上6个厂家的商品化试剂盒,检测不同类型样品,结合统计学方法对试剂盒的特异性、敏感性和重复性等性能指标进行比对分析。结果显示:6个厂家的试剂盒ROC曲线下区域面积(AUC)为0.826~0.951,Youden指数为0.76~0.90,说明试剂盒的排他性和包含性等特异性指标总体表现较好;最低检出限(LOD)等敏感性数据显示,6个厂家试剂盒的LOD为10^(-1)~10^(2) copies/μL,说明各试剂盒的敏感性均较理想;用高、低浓度样品对试剂盒分别进行批内、批间重复性试验,发现高浓度样品的批内、批间变异系数(CV)为0.10%~1.28%,说明重复性较好,仅有2个厂家的试剂盒在检测低浓度样品时表现较好,批内CV为2.25%~6.12%,批间CV为2.93%和4.93%,说明不同试剂盒检测低浓度样品时稳定性较差。本研究为商品化荧光PCR检测试剂盒的评价提供了参考。 展开更多

关键词 非洲猪瘟 荧光pcr 试剂盒 比对 评价

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基于非洲猪瘟病毒标准物质的荧光PCR检测试剂盒初步评价 被引量：4

15

作者 马龙 尹才 +3 位作者 李莉 李杰 王晓亮 李知新 《中国动物检疫》 CAS 2021年第4期108-111,共4页

为探究非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)标准物质作为试剂盒评价体系的可行性,比较了市场上5种主流品牌ASFV荧光PCR检测试剂盒的检测性能。使用ASFV P72基因核酸标准物质作为模板,根据5种试剂盒说明书分别进行相应的荧光定... 为探究非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)标准物质作为试剂盒评价体系的可行性,比较了市场上5种主流品牌ASFV荧光PCR检测试剂盒的检测性能。使用ASFV P72基因核酸标准物质作为模板,根据5种试剂盒说明书分别进行相应的荧光定量PCR检测,结合扩增曲线、Ct值,分析不同试剂盒的敏感性、可重复性以及所需反应时间。结果显示:5种试剂盒的阴性、阳性对照均成立,最低检测限均为5.9×10^(-1)拷贝/μL;4个厂家的试剂盒线性关系R2>0.98,其中最优的R^(2)=0.994,离散度最小;各试剂盒的实际反应耗时与理论反应耗时均有一定差异(0.20~0.96 h)。结果表明,各生产厂家使用P72基因作为靶基因研制的ASFV荧光PCR检测试剂盒都可以使用ASFV标准物质作为评价体系,来评判试剂盒的检测性能。本试验为各实验室不同样品检测的ASFV荧光PCR检测试剂盒选择提供了一种可用的评价方法。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒 标准物质 荧光pcr检测试剂盒 比对

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猪圆环病毒2型荧光定量PCR检测试剂盒原材料研究

16

作者 张晓霞 张琪 +5 位作者 张皖静 赵悦琪 吴文静 杨丹 许燕 赵凯 《上海农业学报》 2021年第1期71-75,共5页

通过对比3家公司生产的Taq酶、PCR反应缓冲液和UDG酶,对已建立的猪圆环病毒2型(PCV2)荧光定量PCR检测试剂盒中阳性参考品、最低检测限参考品、精密性参考品和阴性参考品进行制备。结果表明:Takara宝生物工程(上海)有限公司生产的Taq酶、... 通过对比3家公司生产的Taq酶、PCR反应缓冲液和UDG酶,对已建立的猪圆环病毒2型(PCV2)荧光定量PCR检测试剂盒中阳性参考品、最低检测限参考品、精密性参考品和阴性参考品进行制备。结果表明:Takara宝生物工程(上海)有限公司生产的Taq酶、PCR反应缓冲液和上海博彩生物科技有限公司生产的UDG酶的试剂组合扩增效率最高,荧光增长值的平均值达182464,各组合间Ct值无显著性差异。本试验可为相关荧光定量PCR检测试剂盒的药证申报提供参考。 展开更多

关键词 猪圆环病毒2型 荧光定量pcr检测试剂盒 原材料研究 参考品制备

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禽流感病毒通用型荧光定量PCR检测试剂盒比对结果分析 被引量：1

17

作者 吴迪 王林 +5 位作者 吴惠明 高晓龙 张启龙 张跃 刘晓冬 周德刚 《科学技术与工程》 北大核心 2020年第12期4647-4652,共6页

对6种禽流感病毒通用型荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction),PCR检测试剂盒进行比对与科学评价,为实验室采购提供依据。利用禽流感病毒H5、H7、H9亚型标准品,鸡新城疫活疫苗与传染性支气管炎活疫苗对市售的6种品牌(分别... 对6种禽流感病毒通用型荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction),PCR检测试剂盒进行比对与科学评价,为实验室采购提供依据。利用禽流感病毒H5、H7、H9亚型标准品,鸡新城疫活疫苗与传染性支气管炎活疫苗对市售的6种品牌(分别记为A、B、C、D、E、F)禽流感病毒通用型荧光定量PCR检测试剂盒灵敏性与特异性进行了比对,并对97份临床样品进行了检测,筛选出禽流感病毒通用型最佳检测试剂盒。结果表明:A厂家试剂盒最低可检出1:100倍稀释的H7亚型标准品浓度,B厂家试剂盒最低可检出1:1倍稀释的H7亚型标准品浓度,C厂家试剂盒最低可检出1:10倍稀释的H7亚型标准品浓度,D厂家试剂盒最低可检出1:10倍稀释的H7亚型标准品浓度,E厂家试剂盒最低可检出1:1 000倍稀释的H7亚型标准品浓度, F厂家试剂盒最低可检出1:10倍稀释的H7亚型标准品浓度,6种试剂盒特异性均良好。综上,E厂家试剂盒优于其他厂家试剂盒,可以作为动物疫病检测实验室在实施监测任务中的首要选择。 展开更多

关键词 荧光定量pcr 禽流感病毒 试剂盒比对

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不同非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒在检测猪肉及猪肉制品中的比较 被引量：1

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作者 韦莹 陈丽芸 +1 位作者 刘闯 陈立军 《中国动物检疫》 CAS 2021年第7期99-104,共6页

为了解不同非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒在检测猪肉及猪肉制品中的特征,采用国内外6种商品化非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测试剂盒,分别对同一样本开展稳定性试验,对相同非洲猪瘟强阳性、中阳性及弱阳性样本开展敏感性试验。结果显示:6... 为了解不同非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒在检测猪肉及猪肉制品中的特征,采用国内外6种商品化非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测试剂盒,分别对同一样本开展稳定性试验,对相同非洲猪瘟强阳性、中阳性及弱阳性样本开展敏感性试验。结果显示:6种试剂盒扩增稳定性良好;对强阳性样本,所有商品化试剂盒均能检出;对中阳性及弱阳性样本,特别是弱阳性样本,不同试剂盒的检出情况不尽相同。因此在实际应用中,应根据具体需求选择合适检测试剂盒。本试验为一线工作者选择使用不同商品化非洲猪瘟检测试剂盒提供了一定参考。 展开更多

关键词 非洲猪瘟 荧光pcr 商品化试剂盒 猪肉及猪肉制品 比较分析

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新的实时PCR试剂盒可精确检测ASF 被引量：1

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《今日养猪业》 2016年第6期16-16,共1页

最近东欧暴发的非洲猪瘟（ASF）造成对精确诊断技术的需要越来越迫切，以便对这种高度传染性病原进行鉴定和监控，这种病目前既无疗法也无疫苗。赛默飞世尔科技公司的科学家展示了一种新的双工实时PCR试剂盒的研究数据，说明该试剂盒可... 最近东欧暴发的非洲猪瘟（ASF）造成对精确诊断技术的需要越来越迫切，以便对这种高度传染性病原进行鉴定和监控，这种病目前既无疗法也无疫苗。赛默飞世尔科技公司的科学家展示了一种新的双工实时PCR试剂盒的研究数据，说明该试剂盒可高度敏感而特异地检测动物样本中的病毒。 展开更多

关键词 pcr试剂盒 精确检测 实时 ASF 传染性病原 诊断技术 非洲猪瘟 科学家

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常见肉类成分荧光PCR检测试剂盒的比较

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作者 史喜菊 杜思乐 +12 位作者 蒲静 张伟 任彤 徐立伟 邓丛良 赵相鹏 高志强 汪琳 张佳玮 白子龙 张小寒 赖平安 宋悦谦 《中国动物检疫》 CAS 2022年第12期123-127,共5页

目前市场上肉类成分检测试剂盒种类繁多。为了评价不同厂家试剂盒的应用效果,选取当前市场上4个品牌的5种肉类成分荧光PCR检测试剂盒,对其特异性、灵敏性及效率成本进行了分析比较。结果显示:4个品牌的5种肉类成分荧光PCR检测试剂盒特... 目前市场上肉类成分检测试剂盒种类繁多。为了评价不同厂家试剂盒的应用效果,选取当前市场上4个品牌的5种肉类成分荧光PCR检测试剂盒,对其特异性、灵敏性及效率成本进行了分析比较。结果显示:4个品牌的5种肉类成分荧光PCR检测试剂盒特异性均较好,不同肉类之间没有交叉反应;但检测同一种肉类的不同品牌试剂盒及同一品牌检测不同肉类的试剂盒灵敏性存在差异;不同品牌的试剂盒检测时间和成本也有区别,A品牌耗时最短,D品牌价格最高。结果表明,不同品牌试剂盒的灵敏性、检测耗时和检测成本各有特点,使用者可根据使用目的及经费预算选择合适的试剂盒。 展开更多

关键词 肉类成分 荧光pcr试剂盒 比较

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