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骆驼痘病毒实时荧光PCR检测方法的建立 被引量:1
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作者 朱道中 梅明珠 +5 位作者 李明 佟铁铸 王莹 丁宁 徐娟 王春霞 《广东畜牧兽医科技》 2025年第1期46-51,共6页
骆驼痘(Camelpox,CML)是一种广泛流行的骆驼病毒性传染病,它主要发生于中东和东北非的大规模骆驼群,给骆驼产业造成了巨大的经济损失。该研究通过对GenBank中所公布的13个骆驼痘病毒分离株全基因组核苷酸序列进行同源性比较,选取其ATIP... 骆驼痘(Camelpox,CML)是一种广泛流行的骆驼病毒性传染病,它主要发生于中东和东北非的大规模骆驼群,给骆驼产业造成了巨大的经济损失。该研究通过对GenBank中所公布的13个骆驼痘病毒分离株全基因组核苷酸序列进行同源性比较,选取其ATIP基因保守序列,筛选出了一套特异性引物和探针,建立了相应的实时荧光PCR检测方法。结果表明,该方法特异性强、重复性好、灵敏度高,其最低检测限度为7.8 copies/μL。 展开更多
关键词 骆驼痘病毒 实时荧光pcr 方法建立
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荞麦源性成分实时荧光PCR检测方法的建立 被引量:2
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作者 王哲贤 张颖 +3 位作者 亢春雨 曹丽霞 檀建新 赵世峰 《粮食与油脂》 北大核心 2024年第2期155-158,162,共5页
为检测荞麦类食品及原料中的荞麦源性成分,根据荞麦品种DW-1核酸序列信息(KY945277.1)设计了荞麦品种特异性引物;以苦荞和甜荞品种基因组为模板,建立了荞麦源性成分的实时荧光PCR(qPCR)的检测方法,并对购自市场的多个粮食产品进行检测,... 为检测荞麦类食品及原料中的荞麦源性成分,根据荞麦品种DW-1核酸序列信息(KY945277.1)设计了荞麦品种特异性引物;以苦荞和甜荞品种基因组为模板,建立了荞麦源性成分的实时荧光PCR(qPCR)的检测方法,并对购自市场的多个粮食产品进行检测,检测结果与商品标识相符方法特异性强、灵敏度高,为食品中荞麦源性成分的检测提供了新思路。 展开更多
关键词 荞麦 实时荧光pcr 真实性 过敏原 检测方法
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鸽腺病毒通用型实时荧光PCR检测方法的建立与应用
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作者 陈璐 朱明慧 +8 位作者 丁雨 李阳 亓丽红 房立春 蒋文明 王静静 刘华雷 李建亮 于晓慧 《中国动物检疫》 CAS 2024年第3期89-95,共7页
鸽腺病毒(pigeon adenovirus,PiAdV)是影响鸽产业健康发展的重要病原之一。为实现PiAdV的高通量快速检测,根据GeneBank登录的PiAdV-A种和PiAdV-B种病毒pⅧ基因序列的共同保守区域设计特异性检测引物和探针,经反应条件优化,建立了一种Pi... 鸽腺病毒(pigeon adenovirus,PiAdV)是影响鸽产业健康发展的重要病原之一。为实现PiAdV的高通量快速检测,根据GeneBank登录的PiAdV-A种和PiAdV-B种病毒pⅧ基因序列的共同保守区域设计特异性检测引物和探针,经反应条件优化,建立了一种PiAdV通用型实时荧光PCR检测方法,并对该方法进行了特异性、敏感性、重复性试验。结果显示:该方法的最佳探针浓度为0.2μmol/L,与鸽群其他常见病毒无交叉反应,对PiAdV的最低检测限为56.9 copies/μL,比常规PCR敏感性高100倍,组内和组间重复变异系数均小于1.8%。利用该方法和常规PCR方法对20份疑似PiAdV感染样品进行检测,发现PiAdV通用型实时荧光PCR检测方法的病毒阳性检出率高于常规PCR方法。结果表明,本研究建立的PiAdV通用型实时荧光PCR检测方法特异性强、敏感性高、可靠性好,可用于PiAdV感染的临床检测及流行病学调查。 展开更多
关键词 鸽腺病毒 通用型 实时荧光pcr 检测方法
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香蕉细菌性枯萎病菌实时荧光PCR检测方法的建立 被引量:16
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作者 漆艳香 谢艺贤 +3 位作者 张辉强 朱水芳 肖启明 廖晓兰 《华南热带农业大学学报》 2005年第1期1-5,共5页
根据香蕉细菌性枯萎病菌与其它细菌菌株16SrDNA序列差异,设计并合成一对引物和一条具有稳定点突变特异性探针,建立了对香蕉细菌性枯萎病菌的实时荧光PCR检测方法。除烟草青枯病菌和马铃薯青枯病菌外,还对其它属细菌菌株进行了荧光PCR检... 根据香蕉细菌性枯萎病菌与其它细菌菌株16SrDNA序列差异,设计并合成一对引物和一条具有稳定点突变特异性探针,建立了对香蕉细菌性枯萎病菌的实时荧光PCR检测方法。除烟草青枯病菌和马铃薯青枯病菌外,还对其它属细菌菌株进行了荧光PCR检测。结果表明,只有香蕉细菌性枯萎病菌产生荧光,其它细菌都没有荧光产生。从而证明此方法特异性强,灵敏度高,适合病害的快速诊断和口岸检验检疫应用。 展开更多
关键词 香蕉 细菌性枯萎病菌 实时荧光pcr检测方法 TAQMAN探针 细菌基因组
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食品和饲料中火鸡源性成分的实时荧光PCR检测方法 被引量:12
5
作者 张舒亚 谌鸿超 +5 位作者 宋青 高琴 吕蓉 李想 刘月明 李富威 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期207-211,共5页
为对产品真实性提供技术支撑,作者建立了食品和饲料中火鸡源性成分的检测方法。采用TaqMan探针实时荧光PCR方法,对火鸡源性成分特异性、灵敏度进行检测并进行实际应用。实验表明,建立的检测方法具有特异性和高灵敏度,检测限为0.001%。... 为对产品真实性提供技术支撑,作者建立了食品和饲料中火鸡源性成分的检测方法。采用TaqMan探针实时荧光PCR方法,对火鸡源性成分特异性、灵敏度进行检测并进行实际应用。实验表明,建立的检测方法具有特异性和高灵敏度,检测限为0.001%。通过对市售食品和饲料样品的检测,建立的方法适用于食品和饲料中火鸡源性成分的检测。 展开更多
关键词 食品 饲料 火鸡 实时荧光pcr方法 检测
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苹果锈果类病毒实时荧光PCR检测方法的建立 被引量:18
6
作者 吴然 李君英 +2 位作者 邵建柱 孙建设 张鹤 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期150-155,共6页
【目的】建立苹果锈果类病毒(ASSVd)检测灵敏的方法。【方法】根据Gen Bank中ASSVd的RNA序列设计特异性引物ASSVd-F和ASSVd-R,利用实时荧光PCR方法对其进行检测,并对体系的特异性、灵敏性及适用性进行验证。【结果】实时荧光PCR体系能... 【目的】建立苹果锈果类病毒(ASSVd)检测灵敏的方法。【方法】根据Gen Bank中ASSVd的RNA序列设计特异性引物ASSVd-F和ASSVd-R,利用实时荧光PCR方法对其进行检测,并对体系的特异性、灵敏性及适用性进行验证。【结果】实时荧光PCR体系能检测至1×10-6的模板浓度,而常规RT-PCR只能检测至1×10-4,由此可知,实时荧光PCR体系灵敏度高于常规RT-PCR 100倍;引物特异性强,能特异检测ASSVd,对苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)、苹果茎沟病毒(ASGV)、苹果茎痘病毒(ASPV)均不能检出;适用性广,可检测出植物不同部位的ASSVd。【结论】所建立的方法能够灵敏检测ASSVd,特异性强,适用性广。 展开更多
关键词 苹果锈果类病毒(ASSVd) 检测 实时荧光pcr
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虹彩病毒蛙病毒属病毒实时荧光PCR检测方法的建立 被引量:15
7
作者 李惠芳 吕建强 +5 位作者 岳志芹 刘荭 田飞焱 何俊强 蔡依娜 陈昌福 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期172-176,共5页
在GenBank中搜寻虹彩病毒蛙病毒属主衣壳蛋白(MCP)基因序列并进行多重比较后,利用其中的保守序列,设计引物和Taqman探针,建立了虹彩病毒蛙病毒属实时荧光PCR检测方法。对荧光PCR反应条件进行优化,评估该检测方法的特异性、稳定性和重复... 在GenBank中搜寻虹彩病毒蛙病毒属主衣壳蛋白(MCP)基因序列并进行多重比较后,利用其中的保守序列,设计引物和Taqman探针,建立了虹彩病毒蛙病毒属实时荧光PCR检测方法。对荧光PCR反应条件进行优化,评估该检测方法的特异性、稳定性和重复性,利用10倍系列稀释法检验其灵敏度并与常规PCR做了比较。结果显示,该方法对虹彩病毒蛙病毒属成员(新加坡石斑鱼虹彩病毒除外)的检测有高度的特异性,与淋巴囊肿病毒、鳜鱼传染性脾肾坏死病毒、真鲷虹彩病毒、锦鲤疱疹病毒等其他水生动物病毒之间均无交叉反应,有良好的特异性,检测总DNA灵敏度为4.5×10-3pg/μL,比传统PCR的敏感度高出100倍,可对低病毒含量的样品进行准确检测。制作的标准曲线有极好的线性关系,且线性范围宽,相关系数为0.9984。组内和组间重复试验的Ct值标准偏差分别为1.2%和1.6%,有良好的重复性。与常规的PCR相比较,该方法具有快速、特异、敏感、可定量、可同时检测大量样品等优点,可用于出入境检疫和动物防疫监督部门对虹彩病毒蛙病毒属的疫情监测。 展开更多
关键词 虹彩病毒蛙病毒属 实时荧光定量pcr 检测
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牛巴贝斯虫实时荧光PCR检测方法的建立 被引量:8
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作者 刘启生 王振宝 +3 位作者 王真 哈森 张玉婷 巴音查汗 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期58-61,共4页
为建立牛巴贝斯虫(B.bovis)的TaqMan实时荧光PCR检测方法,本研究根据GenBank中B.bovis的18S rRNA基因保守序列,设计引物和TaqMan探针,通过优化反应体系,建立检测B.bovis的实时荧光PCR方法。试验结果表明:实时荧光PCR对靶基因的最低检测... 为建立牛巴贝斯虫(B.bovis)的TaqMan实时荧光PCR检测方法,本研究根据GenBank中B.bovis的18S rRNA基因保守序列,设计引物和TaqMan探针,通过优化反应体系,建立检测B.bovis的实时荧光PCR方法。试验结果表明:实时荧光PCR对靶基因的最低检测值为1.31×101copies/μL,比常规PCR的敏感性高1 000倍;而且与牛的其他血液原虫无交叉反应;组内及组间重复性试验的变异系数均小于3%,具有良好的重复性;在23份被检样品中,实时荧光PCR和常规PCR的检出率分别为52.17%和30.43%。该检测方法的建立为B.bovis的检测提供了一种快速、敏感、特异的技术手段。 展开更多
关键词 牛巴贝斯虫 实时荧光pcr TAQMAN探针 检测
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鸡传染性喉气管炎病毒实时荧光PCR检测方法的建立与应用 被引量:10
9
作者 王楷宬 王素春 +5 位作者 孙亚伟 樊擎莹 康京丽 汪洋 刘华雷 黄保续 《中国动物检疫》 CAS 2020年第3期98-102,共5页
为探索适合临床高通量鸡传染性喉气管炎检测的方法,针对鸡传染性喉气管炎病毒gB基因序列保守区域,筛选1对特异性引物和1条特异性探针,建立了实时荧光PCR检测方法,并对该方法进行特异性、敏感性评估和临床应用检测。结果显示:筛选出的引... 为探索适合临床高通量鸡传染性喉气管炎检测的方法,针对鸡传染性喉气管炎病毒gB基因序列保守区域,筛选1对特异性引物和1条特异性探针,建立了实时荧光PCR检测方法,并对该方法进行特异性、敏感性评估和临床应用检测。结果显示:筛选出的引物和探针与其他禽类常见病毒无交叉反应,检测下限达到100拷贝/反应;对来自13个场的480份临床样本进行检测,检测出17个阳性样品,与常规PCR检测结果符合率为100%。结果表明,此方法特异性强,灵敏度高、耗时少,可用于鸡传染性喉气管炎的快速检测。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 实时荧光pcr检测 方法建立 应用
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转基因大豆MON89788实时荧光PCR检测方法的建立 被引量:8
10
作者 刘欣 张国丛 +2 位作者 周兴虎 祝长青 黄明 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第4期193-197,共5页
为实现转基因大豆MON89788的标识管理,针对转基因大豆MON89788的品系特异性序列设计引物和Taq Man探针,建立转基因大豆MON89788实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进... 为实现转基因大豆MON89788的标识管理,针对转基因大豆MON89788的品系特异性序列设计引物和Taq Man探针,建立转基因大豆MON89788实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行检测。结果显示:建立的转基因大豆MON89788实时荧光PCR检测方法能扩增出127 bp的产物,特异性强,灵敏度达到0.1%,约为40个单倍体基因组拷贝,检测重复性好,可成功应用于实际样品检测。因此,建立的转基因大豆MON89788实时荧光PCR检测方法可以应用于转基因大豆MON89788大豆及其制品的检测。 展开更多
关键词 转基因大豆 MON89788品系 实时荧光pcr 品系特异性检测 转基因标识
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食品和饲料中猫源性成分实时荧光PCR检测方法 被引量:2
11
作者 张舒亚 韩丽 +3 位作者 于翠 张坤 姚静梅 张燕 《上海农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第4期56-59,共4页
采用实时荧光PCR方法对食品和饲料中猫源性成分进行TaqMan探针检测。结果表明:该检测方法具有特异性强、灵敏度高的特点,在动物和植物材料基质中,均能检出0.01%的猫源性成分,适用于市售食品和饲料中猫源性成分的检测。
关键词 饲料 实时荧光pcr方法 检测
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转基因甜菜H7-1实时荧光PCR检测方法 被引量:2
12
作者 张舒亚 吕蓉 +4 位作者 高琴 刘月明 李想 郭云霞 李富威 《种子》 CSCD 北大核心 2012年第1期53-56,共4页
运用实时荧光PCR方法对转基因甜菜H 7-1外源基因FMV 35 S启动子、E 9 3’终止子、CP 4-EPSPS外源基因和品系特异性进行了检测。建立了快速、准确的转基因甜菜H 7-1转基因成分的PCR检测方法。本研究采用的FMV 35 S启动子、E 9 3’终止子... 运用实时荧光PCR方法对转基因甜菜H 7-1外源基因FMV 35 S启动子、E 9 3’终止子、CP 4-EPSPS外源基因和品系特异性进行了检测。建立了快速、准确的转基因甜菜H 7-1转基因成分的PCR检测方法。本研究采用的FMV 35 S启动子、E 9 3’终止子、CP 4-EPSPS和品系特异性检测引物探针能有效检测转基因甜菜H 7-1中转基因成分,具有特异性,且灵敏度达到0.01%。 展开更多
关键词 转基因甜菜H 7-1 实时荧光pcr 检测
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植物乳杆菌的DPO引物实时荧光PCR检测方法 被引量:1
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作者 孙凯 魏霜 +5 位作者 刘玉莉 许如苏 刘中勇 鄞杰平 袁俊杰 吴希阳 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期178-183,共6页
根据已报道的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)的23S rRNA基因保守序列,设计用于检测植物乳杆菌的特异性DPO(dual priming oligonucleotide)引物,结合SYBR GreenⅠ实时荧光PCR技术,建立植物乳杆菌的DPO引物实时荧光PCR检测方法... 根据已报道的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)的23S rRNA基因保守序列,设计用于检测植物乳杆菌的特异性DPO(dual priming oligonucleotide)引物,结合SYBR GreenⅠ实时荧光PCR技术,建立植物乳杆菌的DPO引物实时荧光PCR检测方法,对其特异性和灵敏度进行了评价,并将建立的检测方法用于实际样品的检测中。结果显示,该方法对2株植物乳杆菌能得到阳性扩增,其余11株乳酸菌及阴性对照没有扩增曲线,灵敏度高达0.001 ng/μL,而且在退火温度为50~60℃范围内不影响其特异性,表明该方法对退火温度不敏感;用微生物菌制剂和酸奶共13种益生菌产品进行了验证,检出情况与产品标识一致。因此,该研究建立的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR能够快速、准确、高效地检测微生物菌制剂及其他益生菌产品中的植物乳杆菌。 展开更多
关键词 植物乳杆菌 实时荧光pcr DPO引物 检测
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抗CMV转基因辣椒实时荧光PCR检测方法研究
14
作者 罗阿东 王丽平 +2 位作者 任艳玲 蔡秋 王艳 《现代农业科技》 2019年第5期67-69,共3页
针对辣椒中转基因成分建立快速、高效、准确的实时荧光PCR检测方法,以缩短检测周期,提高检出率。结果表明,针对转基因辣椒的内源基因CaATL1和外源基因CMV建立的检测方法,具有很好的特异性,二者检测灵敏度均可达0.01%。本研究建立的检测... 针对辣椒中转基因成分建立快速、高效、准确的实时荧光PCR检测方法,以缩短检测周期,提高检出率。结果表明,针对转基因辣椒的内源基因CaATL1和外源基因CMV建立的检测方法,具有很好的特异性,二者检测灵敏度均可达0.01%。本研究建立的检测方法特异性、灵敏度和准确度高,也比较方便快速,同时使用的是全部闭管操作,大大降低了普通PCR带来的污染,为转基因辣椒的检测提供了新的检验方法。 展开更多
关键词 转基因辣椒 实时荧光pcr检测方法 CaATL1基因 CMV基因
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复配粉中马铃薯成分实时荧光PCR检测方法的建立 被引量:3
15
作者 姚晓静 张泓 +3 位作者 张春江 胡宏海 于彩河 戴小枫 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期297-303,共7页
为了对马铃薯食品进行有效的鉴别,本研究参照马铃薯龙葵素鼠李糖基转移酶基因的部分序列,设计了马铃薯的特异性引物Sgt3,建立了食品中马铃薯成分的PCR检测方法,并研究了加热过程中其基因的降解情况。通过对比4对引物StLs、scuF、UGPase... 为了对马铃薯食品进行有效的鉴别,本研究参照马铃薯龙葵素鼠李糖基转移酶基因的部分序列,设计了马铃薯的特异性引物Sgt3,建立了食品中马铃薯成分的PCR检测方法,并研究了加热过程中其基因的降解情况。通过对比4对引物StLs、scuF、UGPase、Sgt3在荧光定量PCR试验中的扩增效果,最终确定引物Sgt3可以特异性扩增马铃薯DNA,且能得到线性关系显著的标准曲线。结果表明,采用实时荧光PCR方法,马铃薯质量浓度低至2%时仍呈阳性反应;对于马铃薯熟全粉-小麦粉复配粉,得到R^2=0.9834的线性方程,马铃薯熟全粉含量为50%的待测样品检测结果为50.75%;对于马铃薯生全粉-小麦粉复配粉,得到R^2=0.9945的线性方程,马铃薯生全粉含量为45%的待测样品检测结果为44.42%;将马铃薯生粉100℃加热10 h以上,DNA会严重降解,不利于PCR检测。本研究通过荧光定量PCR技术可以实现马铃薯成分的鉴别,对于成分单一且已知的样品,可以实现量化分析,该方法的建立为马铃薯主食产品品质监管提供了一定的技术支持。 展开更多
关键词 马铃薯成分 实时荧光pcr 检测 热降解
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五重实时荧光PCR检测方法的建立分析
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作者 关伟 《饲料博览》 2019年第8期94-94,共1页
针对狐狸、水貂、貉子和狗源性成分进行具体的分析,并针对其特异性引物以及探针进行相应的研究,从而针对其自身的体质来进行相应的产品进行挑选,为了更好的检测狐狸、水貂、貉子和狗针对荧光PCR反应体系以及反应条件来进行相应的筛选,... 针对狐狸、水貂、貉子和狗源性成分进行具体的分析,并针对其特异性引物以及探针进行相应的研究,从而针对其自身的体质来进行相应的产品进行挑选,为了更好的检测狐狸、水貂、貉子和狗针对荧光PCR反应体系以及反应条件来进行相应的筛选,从而更好地突出狐狸、水貂、貉子和狗各自的特异性,选择与自身属性相符的产品来进行相应的实时荧光PCR检测。 展开更多
关键词 实时荧光pcr检测方法 pcr反应体系 特异性引物 反应条件 狐狸 水貂 产品
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苹果壳色单隔孢溃疡病菌TaqMan实时荧光PCR检测方法 被引量:1
17
作者 林惠娇 牟桂萍 +2 位作者 滕少娜 张海鹏 周而勋 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期65-70,共6页
【目的】针对我国检疫性植物病原真菌苹果壳色单隔孢溃疡病菌Botryosphaeria stevensii,建立实时荧光PCR检测方法。【方法】根据苹果壳色单隔孢溃疡病菌及其近似种的β微管蛋白基因(β-tubulin基因)保守序列设计1对特异性引物和1条TaqMa... 【目的】针对我国检疫性植物病原真菌苹果壳色单隔孢溃疡病菌Botryosphaeria stevensii,建立实时荧光PCR检测方法。【方法】根据苹果壳色单隔孢溃疡病菌及其近似种的β微管蛋白基因(β-tubulin基因)保守序列设计1对特异性引物和1条TaqMan MGB探针,分别以病菌DNA和β-tubulin基因靶标序列重组质粒DNA为阳性标准品检验探针的特异性和灵敏度。【结果】探针BsP267对苹果壳色单隔孢溃疡病菌菌株表现出特异性阳性扩增,且与近缘种及其他常见的果腐病菌无交叉反应,扩增效率为105.858%,探针检测DNA的灵敏度达到1 fg/μL。【结论】本研究建立的苹果壳色单隔孢溃疡病菌实时荧光PCR检测法具有高特异性和灵敏度,可用于该病害的防控检测和检疫工作。 展开更多
关键词 苹果壳色单隔孢溃疡病菌 实时荧光pcr TAQMAN探针 快速检测 β微管蛋白基因
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显微镜与实时荧光PCR检测方法在马蹄淀粉鉴定中的应用 被引量:3
18
作者 陈展册 杜智欣 +2 位作者 高佳 刘军义 罗兆飞 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2016年第20期90-95,共6页
采用光学生物显微镜观测结合实时荧光PCR检测方法对马蹄淀粉中掺杂行为进行定性鉴别,以期为鉴别淀粉掺杂成分提供更客观、更准确的检测手段。结果显示:32个随意掺杂的马蹄淀粉样品中8个是纯马蹄淀粉,5个是纯木薯淀粉,1个是纯玉米淀粉,3... 采用光学生物显微镜观测结合实时荧光PCR检测方法对马蹄淀粉中掺杂行为进行定性鉴别,以期为鉴别淀粉掺杂成分提供更客观、更准确的检测手段。结果显示:32个随意掺杂的马蹄淀粉样品中8个是纯马蹄淀粉,5个是纯木薯淀粉,1个是纯玉米淀粉,3个是纯马铃薯淀粉,3个是马蹄淀粉和马铃薯淀粉的混合物,1个是马蹄淀粉和木薯淀粉的混合物,1个是马蹄淀粉和玉米淀粉的混合物,5个是木薯和玉米淀粉的混合物,3个是木薯淀粉和马铃薯淀粉的混合物,2个是木薯淀粉、玉米淀粉、马铃薯淀粉的混合物。32个样品显微镜镜检结果和PCR检测结果基本吻合。两种方法可为国内淀粉市场质量监督提供有效的检测方法。 展开更多
关键词 镜检法 实时荧光pcr检测 马蹄淀粉 检测 掺杂
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基于ITS序列的菊花花枯病实时荧光PCR检测方法 被引量:1
19
作者 陈吴健 张明哲 +5 位作者 林晓佳 吴蓉 吴志毅 陈曦 武扬 吴旭耀 《浙江农业科学》 2014年第11期1695-1698,共4页
根据菊花花枯病菌与其近似种在ITS序列上的差异,构建特异性引物和探针,并用菊花上常见的病害及其近似种进行验证。结果表明,供试菌株中仅菊花花枯病菌表现出阳性扩增信号,其他菌株和空白对照均未检测到荧光信号。该法可检测到100 fg的阳... 根据菊花花枯病菌与其近似种在ITS序列上的差异,构建特异性引物和探针,并用菊花上常见的病害及其近似种进行验证。结果表明,供试菌株中仅菊花花枯病菌表现出阳性扩增信号,其他菌株和空白对照均未检测到荧光信号。该法可检测到100 fg的阳性DNA,完成整个检测只需约2 h,可快速、灵敏地完成进出境菊花产品中菊花花枯病菌的检测。 展开更多
关键词 菊花花枯病 实时荧光pcr 特异性检测
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茶叶中掺杂大米成分实时荧光PCR检测方法的建立和应用
20
作者 黄迎波 黄才新 +2 位作者 江杰 袁小雅 朱金国 《安徽农业科学》 CAS 2022年第20期174-176,共3页
为探索茶叶中掺杂大米的快速检测方法,根据大米内源PLD基因建立茶叶掺杂大米成分的实时荧光PCR检测方法。通过对样品前处理、方法特异性、方法灵敏度、污染因素的分析,认为该方法用于检测茶叶中掺杂大米成分可以达到理想效果,操作简便,... 为探索茶叶中掺杂大米的快速检测方法,根据大米内源PLD基因建立茶叶掺杂大米成分的实时荧光PCR检测方法。通过对样品前处理、方法特异性、方法灵敏度、污染因素的分析,认为该方法用于检测茶叶中掺杂大米成分可以达到理想效果,操作简便,检测结果可靠性高,重复性好,结果判读直观无污染。利用所建立的方法对36份茶叶样品进行分析,发现6批次产品一定程度上掺杂了大米成分。 展开更多
关键词 茶叶 大米 PLD基因 实时荧光pcr 检测方法
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