基于实时荧光PCR技术检测葛根粉中植物源性成分

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作者 张伊动 刘艳 +6 位作者 李诗瑶 朱必婷 张涛 林津 陈曦 朱力杰 张莉 《中南农业科技》 2024年第9期29-35,共7页

基于实时荧光PCR技术(Real-time fluorescence PCR,RT-PCR),利用不同种属植物之间基因组序列的差异,设计葛根、甘薯、马铃薯、玉米、薯蓣、木薯和豌豆7种典型含淀粉植物的特异性引物及探针,建立葛根粉中植物源性成分检测的RT-PCR检测方... 基于实时荧光PCR技术(Real-time fluorescence PCR,RT-PCR),利用不同种属植物之间基因组序列的差异,设计葛根、甘薯、马铃薯、玉米、薯蓣、木薯和豌豆7种典型含淀粉植物的特异性引物及探针,建立葛根粉中植物源性成分检测的RT-PCR检测方法。通过对豆薯、甘薯、大麦、小麦、黑麦、荞麦、菜豆等27种产品进行引物探针的特异性扩增,验证该方法的特异性,并检测7种引物探针的绝对灵敏度和相对灵敏度。结果表明,葛根、甘薯、木薯、玉米、豌豆成分检出的绝对灵敏度最低可达0.010 ng/μL,薯蓣和马铃薯的绝对灵敏度为0.001 ng/μL;7种引物探针的相对灵敏度低至0.1%(质量分数)。针对葛根粉掺假严重的状况,对市面上流通的40种葛根粉产品进行植物源性成分检测,其中25份样品不含葛根源性成分,占样品总数的62.5%;含葛根的15份样品中有5份样品掺有其他非葛根源性成分,占样品总数的12.5%。所检测到的非葛根源性成分以木薯和玉米居多,豌豆、薯蓣等也有检出。 展开更多

关键词 实时荧光pcr技术 葛根粉 植物源性成分 特异性 灵敏度

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PCR-RFLP技术与结合SYBR GreenⅠ荧光染料的实时荧光PCR技术对HBV拉米夫定耐药基因检测效果分析 被引量：2

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作者 卜范峰 朱晓艳 +4 位作者 彭德志 王睿 田欣欣 王燕 周永坤 《山东医药》 CAS 2018年第8期60-63,共4页

目的分析PCR-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)技术和结合SYBR GreenⅠ荧光染料的实时荧光PCR技术检测HBV拉米夫定耐药基因的效果。方法采用PCR-RFLP技术和结合SYBR GreenⅠ荧光染料的实时荧光PCR技术检测186例份乙肝血清标本拉米夫定耐... 目的分析PCR-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)技术和结合SYBR GreenⅠ荧光染料的实时荧光PCR技术检测HBV拉米夫定耐药基因的效果。方法采用PCR-RFLP技术和结合SYBR GreenⅠ荧光染料的实时荧光PCR技术检测186例份乙肝血清标本拉米夫定耐药HBV DNA聚合酶204、180位点基因突变情况,并进行DNA测序验证。结果两种方法在HBV DNA聚合酶204位点均检出YIDD、YVDD、YMDD/YIDD、YMDD/YVDD、YIDD/YVDD突变类型,未检测出YSDD突变类型,检测结果与DNA测序验证结果比较差异均无统计学意义(χ~2=2.101、1.614,P均>0.05)。两种方法在HBV DNA聚合酶180位点均检出L180M、L180M+M204I、L180M+M204V突变类型,检测结果与DNA测序验证结果比较差异均无统计学意义(χ~2=0.054、1.614,P均>0.05)。结论 PCR-RFLP技术和结合SYBR GreenⅠ荧光染料的实时荧光PCR技术均可用于HBV拉米夫定耐药基因突变检测,但后者更适合大规模耐药基因突变筛查。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 拉米夫定耐药基因 DNA聚合酶基因突变 pcr-限制性片断长度多态性技术 结合SYBR GreenⅠ荧光染料的实时荧光pcr技术

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实时荧光PCR技术在动物疫病诊断中的运用 被引量：2

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作者 韩笑 《中国畜禽种业》 2019年第5期40-40,共1页

实时荧光PCR技术不再局限于一般的动物疫病诊断,还逐步推广到病毒性、寄生虫性疫病中,不仅能发挥常规的PCR技术技术优势,还能实现定量分析,这是以往PCR技术诊断所无法达到的效果。且随着荧光PCR试剂盒的开发与推广,实施荧光技术在动物... 实时荧光PCR技术不再局限于一般的动物疫病诊断,还逐步推广到病毒性、寄生虫性疫病中,不仅能发挥常规的PCR技术技术优势,还能实现定量分析,这是以往PCR技术诊断所无法达到的效果。且随着荧光PCR试剂盒的开发与推广,实施荧光技术在动物疫病诊断中的应用,不需要再进行PCR后期处理,提高结果诊断的可靠性及重复性,对整个实验过程进行实时监测,缩减了以往的检测时间,备受动物疫病诊断者的青睐和关注。 展开更多

关键词 实时荧光pcr技术 动物疫病诊断 应用

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实时荧光定量PCR技术在食品检测中的应用进展 被引量：1

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作者 任瑞娟 《中国食品》 2024年第18期79-81,共3页

“民以食为天,食以安为先”。近年来,食品安全事件时有发生,泰国假香米、阿斯巴甜致癌疑云、“鼠头鸭脖”等事件不断被曝光,公众对食品安全的关注度日益提高。为了保障食品安全,监管部门加强了对食品检测技术的研发和应用。在各种检测... “民以食为天,食以安为先”。近年来,食品安全事件时有发生,泰国假香米、阿斯巴甜致癌疑云、“鼠头鸭脖”等事件不断被曝光,公众对食品安全的关注度日益提高。为了保障食品安全,监管部门加强了对食品检测技术的研发和应用。在各种检测技术中,PCR技术尤其是实时荧光定量PCR,因具有更灵敏、更省时、更特异等优点,在食品安全检测领域得到了广泛应用。本文综述了实时荧光定量PCR技术的原理,及其在食品中植物源性成分、转基因成分、过敏原、动物源成分和微生物等检测中的应用进展,并对该技术未来的发展方向进行了展望,以期该技术未来在食品检测领域得到更广泛的应用。 展开更多

关键词 实时荧光定量pcr技术 食品检测 阿斯巴甜 食品安全检测 转基因成分 食品安全事件 过敏原 香米

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实时荧光定量PCR技术在水产养殖研究中的应用

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作者 陈向红 何瑜 +2 位作者 郑姣妹 耿相昌 奉佳 《当代水产》 2024年第10期70-72,共3页

实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR, qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实现PCR进程的实时监测,进而对未知模板进行定量分析的一种检测技术。qPCR是在普通PCR定性检测基础上发展而来的核酸定量技术。在q... 实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR, qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实现PCR进程的实时监测,进而对未知模板进行定量分析的一种检测技术。qPCR是在普通PCR定性检测基础上发展而来的核酸定量技术。在qPCR技术发展的过程中,两项重要发现起到了关键作用:一是TaqDNA聚合酶的5’端核酸外切酶活性被发现,它能降解特异性荧光标记的探针,使得间接定量检测PCR产物成为可能;二是荧光双标记探针被使用在密闭的反应管中,能实时地监测PCR反应的全过程。 展开更多

关键词 实时荧光定量pcr技术 核酸外切酶 定性检测 水产养殖 荧光基团 TAQDNA聚合酶 荧光信号 荧光标记

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实时荧光定量PCR技术检测转基因大豆方法的建立 被引量：55

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作者 陈颖 徐宝梁 +3 位作者 苏宁 王媛 王丙武 葛毅强 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期65-69,共5页

采用实时荧光定量PCR技术 ,通过使用特异的引物和探针 ,对大豆中的内源基因Lectin和转基因大豆中的外源基因EPSPS进行了定量检测 ,建立了Monsanto公司生产的商业化转基因大豆Roundup Ready○R的定量PCR检测方法。该方法的检测灵敏度 <... 采用实时荧光定量PCR技术 ,通过使用特异的引物和探针 ,对大豆中的内源基因Lectin和转基因大豆中的外源基因EPSPS进行了定量检测 ,建立了Monsanto公司生产的商业化转基因大豆Roundup Ready○R的定量PCR检测方法。该方法的检测灵敏度 <0 0 1% ,是国际上设定的转基因最低限量的 10 展开更多

关键词 实时荧光定量pcr技术 检测 转基因大豆 内源基因Lectin 外源基因NEPSPS

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实时荧光定量PCR技术的类型、特点与应用 被引量：85

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作者 袁亚男 刘文忠 《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第3期27-30,共4页

实时荧光定量PCR技术是一种利用不同的荧光检测方法来定量核酸的技术,具有高度的灵敏性、特异性和精确性。该技术根据荧光作用方式分为:SYBR荧光染料法、TaqMan技术、分子信标和复合探针等类型,依据其各自优缺点可将各技术方法分别应用... 实时荧光定量PCR技术是一种利用不同的荧光检测方法来定量核酸的技术,具有高度的灵敏性、特异性和精确性。该技术根据荧光作用方式分为:SYBR荧光染料法、TaqMan技术、分子信标和复合探针等类型,依据其各自优缺点可将各技术方法分别应用于畜牧兽医领域不同方面的科研工作中,以期得到最优的定量检测效率。 展开更多

关键词 实时荧光定量pcr技术 荧光共振能量转移 荧光探针 淬灭探针

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实时荧光定量PCR技术在食源性致病菌检测中的应用 被引量：6

8

作者 李敏 綦国红 《中国食物与营养》 2014年第8期13-17,共5页

实时荧光定量PCR技术作为一种高效的微生物定量检测法,在食品工业中具有广泛的应用前景。本文综述了实时荧光定量PCR技术检测原理,及其在食源性致病菌如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157∶H7、沙门氏菌和副溶血性弧菌检测中的应用。

关键词 实时荧光定量pcr技术 食源性致病菌检测 微生物检测 定量检测

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实时荧光定量PCR技术的研究进展 被引量：9

9

作者 任广睦 王英元 《临床医药实践》 2007年第4期243-245,共3页

关键词 实时荧光定量pcr技术 聚合酶链式反应技术 核酸定量检测 分子生物学 灵敏性 灵敏度 重复性 全封闭

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实时荧光定量PCR技术研究进展及应用 被引量：3

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作者 刘长海 《中国实用医药》 2011年第31期238-240,共3页

1研究进展 二十多年前,美国Perkin-Elmer Cetus公司人类遗传研究室Mullis等发明了聚合酶链反应（PCR）技术,这成为20世纪生物医学领域革命性创举与里程碑,使人们梦寐以求的体外无限扩增核酸片段的愿望成为现实。几年后,世界生物实验室... 1研究进展 二十多年前,美国Perkin-Elmer Cetus公司人类遗传研究室Mullis等发明了聚合酶链反应（PCR）技术,这成为20世纪生物医学领域革命性创举与里程碑,使人们梦寐以求的体外无限扩增核酸片段的愿望成为现实。几年后,世界生物实验室中,PCR技术占据了统治地位,并成为分子生物领域的关键技术。 展开更多

关键词 实时荧光定量pcr技术 生物实验室 应用 聚合酶链反应 人类遗传 医学领域 核酸片段 分子生物

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实时荧光定量PCR技术的应用 被引量：4

11

作者 韩惠瑛 石丽瑞 张艳红 《中国畜禽种业》 2014年第3期37-39,共3页

1985年Mullis等发明了聚合酶链反应（PCR）技术，成为20世纪生物医学领域革命性创举，使人们梦寐以求的体外无限扩增核酸片段的愿望成为现实。1992年，Higuchi最早提出了实时PCR的设想。

关键词 实时荧光定量pcr技术 应用 聚合酶链反应 实时pcr 医学领域 革命性 生物 核酸

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应用实时荧光定量PCR技术对一例猪瘟的诊断报告 被引量：2

12

作者 李霞 《中国动物保健》 2012年第10期61-61,共1页

猪瘟（HogCholera，HC），又称古典猪瘟（Classi—calSwineFever，CSF）是一种高度接触性传染的病毒病，由黄病毒科，瘟病毒属的猪瘟病毒（HCV或CSFV）引起，于1833年首先发现于美国的俄亥俄州。中国是獬攫彩新刊蓟亚重的国家之一，近... 猪瘟（HogCholera，HC），又称古典猪瘟（Classi—calSwineFever，CSF）是一种高度接触性传染的病毒病，由黄病毒科，瘟病毒属的猪瘟病毒（HCV或CSFV）引起，于1833年首先发现于美国的俄亥俄州。中国是獬攫彩新刊蓟亚重的国家之一，近些年因多科疾病歹巴亡生猪占养猪总数的8％～10％，其中1／3由HC致死，每年的直接经济陨失在20亿元人民币左右。 展开更多

关键词 实时荧光定量pcr技术 古典猪瘟 诊断报告 应用 猪瘟病毒 黄病毒科 俄亥俄州 病毒病

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实时荧光PCR定量检测加工产品中转基因玉米Mon810成分 被引量：9

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作者 覃文 曹际娟 朱水芳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第8期132-134,共3页

采用实时荧光PCR技术,建立了定量(性)鉴定检测加工产品中转基因玉米Mon810成分的方法。实验设计的可以扩增玉米自身基因和外源基因边界序列的引物和探针具有品种和品系特异性,特异性地检测出食品、饲料等加工产品中转基因玉米Mon810成... 采用实时荧光PCR技术,建立了定量(性)鉴定检测加工产品中转基因玉米Mon810成分的方法。实验设计的可以扩增玉米自身基因和外源基因边界序列的引物和探针具有品种和品系特异性,特异性地检测出食品、饲料等加工产品中转基因玉米Mon810成分。某些检测样品不仅检出转基因玉米Mon810成分,还同时检出其它转基因玉米品系或其它转基因品种。本研究实验建立的转基因玉米Mon810品系鉴定检测方法,即可以用于加工产品中转基因成分的定量检测(检测低限为0.1%),也可以用于定性检测,或作为常规PCR定性检测后的确证实验方法。 展开更多

关键词 转基因玉米 实时荧光pcr技术 定量检测 食品 饲料 Mon810成分

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实时荧光PCR法特异性检测棉花曲叶病毒 被引量：2

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作者 张卫东 王岚 +6 位作者 冯宇梅 廖力 权永兵 水克娟 徐淼锋 迟远丽 黄永辉 《广东农业科学》 CAS 2015年第2期126-130,136,共6页

根据棉花曲叶病毒(Cotton leaf curl virus,CLCuV)运动蛋白基因序列特征,设计并合成了特异性Taqman探针和检测引物,建立该病毒的实时荧光PCR快速检测方法。结果表明:该方法可以特异性地从5个不同CLCuV分离物中扩增到荧光信号,而其他6种... 根据棉花曲叶病毒(Cotton leaf curl virus,CLCuV)运动蛋白基因序列特征,设计并合成了特异性Taqman探针和检测引物,建立该病毒的实时荧光PCR快速检测方法。结果表明:该方法可以特异性地从5个不同CLCuV分离物中扩增到荧光信号,而其他6种病毒均无扩增。建立的方法具有快速、准确、灵敏及简便等特点,可为进出境植物检疫和农业安全生产提供可靠的技术支持。 展开更多

关键词 棉花曲叶病毒(CLCuV) 运动蛋白基因 实时荧光pcr技术

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实时荧光定量PCR技术快速检测甲型H1N1流感病毒 被引量：4

15

作者 谷宇佳 《中国卫生产业》 2018年第31期35-36,共2页

目的对疑似甲型H1N1流感病毒携带者的标本进行病毒核酸确诊,进而探讨实时荧光定量PCR技术在甲型H1N1流感病毒检测诊断中的意义。方法选取2017年9—12月某院检验科工作人员采集的330份疑似甲型H1N1流感病毒携带者咽拭子标本,对其进行病... 目的对疑似甲型H1N1流感病毒携带者的标本进行病毒核酸确诊,进而探讨实时荧光定量PCR技术在甲型H1N1流感病毒检测诊断中的意义。方法选取2017年9—12月某院检验科工作人员采集的330份疑似甲型H1N1流感病毒携带者咽拭子标本,对其进行病毒核酸确诊检测,根据检测结果对甲型H1N1流感病毒、甲1型流感病毒、甲3型流感病毒以及乙型流感病毒进行临床分型。结果该组标本中检出甲型H1N1流感病毒核酸阳性标本108份,检出率为108/330(32.73%),检出甲1型流感病毒10份(3.03%),检出甲3型流感病毒21份(6.36%),未检出乙型流感病毒。结论临床上诊断甲型H1N1流感病毒时,采用实时荧光定量PCR技术,此种技术操作简单、快速、有着较强的特异性和较高的灵敏度。有着较高的应用价值。 展开更多

关键词 实时荧光定量pcr技术 检测 甲型H1N1流感病毒

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实时荧光定量PCR技术检测腐乳中大豆转基因成分 被引量：2

16

作者 许银叶 许佩勤 +1 位作者 庄俊钰 冯志强 《江苏调味副食品》 2019年第2期33-35,44,共4页

优化实时荧光定量PCR反应体系条件,运用此技术检测从腐乳中提取的DNA来判定腐乳样品是否含有大豆转基因成分。该检测方法特异性强、灵敏度高,方法检出限为0.1%,而且操作简便,可以推广使用。

关键词 腐乳 实时荧光定量pcr技术 转基因

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实时荧光定量PCR技术对金黄色葡萄球菌的检测概况 被引量：2

17

作者 张嘉荟 方志宇 乔文姝 《食品安全导刊》 2017年第09X期111-111,共1页

本文总结了近几年实时荧光定量PCR技术在金黄色葡萄球菌检测中的应用,并概述了这一技术的前景,以供参考。

关键词 金黄色葡萄球菌 检测 实时荧光定量pcr技术

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基于TaqMan实时荧光PCR检测鲜肉及加工肉制品中的驴源性成分 被引量：11

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作者 海小 刘国强 +1 位作者 罗建兴 郭梁 《肉类研究》 北大核心 2018年第4期62-67,共6页

根据出入境检验检疫行业标准SN/T 3730.4—2013《食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法?第4部分:驴成分检测?实时荧光PCR法》合成引物和探针,利用Taq Man实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测鲜肉及加工肉制... 根据出入境检验检疫行业标准SN/T 3730.4—2013《食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法?第4部分:驴成分检测?实时荧光PCR法》合成引物和探针,利用Taq Man实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测鲜肉及加工肉制品中的驴源性成分。首先对13种不同动物鲜肉组织的DNA进行驴源性成分特异性检测,然后对驴源性DNA模板原液进行梯度稀释,检测方法灵敏度,最后在加工肉制品中检测方法的适用性。结果表明:本研究建立的方法特异性强,除驴肉外,牛、羊、猪、马、骆驼、鹿、狗、兔、鸡、鸭、鸽子、鹌鹑12种动物鲜肉组织均无特异性扩增;方法的灵敏度较高,驴组分DNA的检出限可达100 fg/μL,灵敏度可达0.01%;方法的适用性较广,可以用于加工肉制品中驴源性成分的检测。 展开更多

关键词 TaqMan实时荧光pcr技术 鲜肉及加工肉制品 驴源性成分 特异性 灵敏度

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实时荧光定量PCR技术在人类细小病毒B19检测中的应用

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作者 疏翠 安顺 《河南科技》 2012年第12期64-65,共2页

人类微小病毒B19（Human parvovirusB19，HPVB19）是儿科常见的出疹性疾病——传染性红斑（又称第五病，Erylhemainfection，E1）的病凶。除了这一轻型白限性感染外，B19病毒还可使慢性溶血病病人发生再障危象及急性多关节病。在免疫缺... 人类微小病毒B19（Human parvovirusB19，HPVB19）是儿科常见的出疹性疾病——传染性红斑（又称第五病，Erylhemainfection，E1）的病凶。除了这一轻型白限性感染外，B19病毒还可使慢性溶血病病人发生再障危象及急性多关节病。在免疫缺损病人中可造成持续性感染。由于细小病毒B19致病的广泛性和复杂性，目前国际上对该病毒的研究比较活跃。B19可通过呼吸道传播，也可通过输吡和使用血液制品传播，从而引起多种疾病。B19病毒的近期感染主要通过IgM抗体的检测，常用捕获法或放射免疫测定，IgG抗体对诊断急性感染无意义，其存在仅表明曾感染过，主要用于血清流行病学调查。 展开更多

关键词 细小病毒B19 实时荧光定量pcr技术 检测 人类 持续性感染 放射免疫测定 IGM抗体 应用

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实时荧光定量PCR技术在粮油转基因成分检测中的应用研究

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作者 覃茂峰 《食品界》 2018年第8期86-86,共1页

我国对于转基因作物的成分有着严格的规定。当下常见的转基因作物类型有很多,但是都需要对这些作物进行严格的基因检测,才能流入市场。这就需要选择合适的技术,能够高效、快捷的加以应用。目前的转基因作物检测主要有以下三方面的内容... 我国对于转基因作物的成分有着严格的规定。当下常见的转基因作物类型有很多,但是都需要对这些作物进行严格的基因检测,才能流入市场。这就需要选择合适的技术,能够高效、快捷的加以应用。目前的转基因作物检测主要有以下三方面的内容。首先是判定转基因作物的检测;其次是对该作物品系的类型进行检测;最后就是对其中的含量进行检测。综上,选择实时荧光定量PCR技术是一种最为有效的检测手段。 展开更多

关键词 实时荧光定量pcr技术 转基因作物 成分检测 应用 粮油 基因检测 类型

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