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实时荧光定量PCR技术在食品检测中的应用进展 被引量:1
1
作者 任瑞娟 《中国食品》 2024年第18期79-81,共3页
“民以食为天,食以安为先”。近年来,食品安全事件时有发生,泰国假香米、阿斯巴甜致癌疑云、“鼠头鸭脖”等事件不断被曝光,公众对食品安全的关注度日益提高。为了保障食品安全,监管部门加强了对食品检测技术的研发和应用。在各种检测... “民以食为天,食以安为先”。近年来,食品安全事件时有发生,泰国假香米、阿斯巴甜致癌疑云、“鼠头鸭脖”等事件不断被曝光,公众对食品安全的关注度日益提高。为了保障食品安全,监管部门加强了对食品检测技术的研发和应用。在各种检测技术中,PCR技术尤其是实时荧光定量PCR,因具有更灵敏、更省时、更特异等优点,在食品安全检测领域得到了广泛应用。本文综述了实时荧光定量PCR技术的原理,及其在食品中植物源性成分、转基因成分、过敏原、动物源成分和微生物等检测中的应用进展,并对该技术未来的发展方向进行了展望,以期该技术未来在食品检测领域得到更广泛的应用。 展开更多
关键词 实时荧光定量pcr技术 食品检测 阿斯巴甜 食品安全检测 转基因成分 食品安全事件 过敏原 香米
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实时荧光定量PCR技术在水产养殖研究中的应用
2
作者 陈向红 何瑜 +2 位作者 郑姣妹 耿相昌 奉佳 《当代水产》 2024年第10期70-72,共3页
实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR, qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实现PCR进程的实时监测,进而对未知模板进行定量分析的一种检测技术。qPCR是在普通PCR定性检测基础上发展而来的核酸定量技术。在q... 实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR, qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实现PCR进程的实时监测,进而对未知模板进行定量分析的一种检测技术。qPCR是在普通PCR定性检测基础上发展而来的核酸定量技术。在qPCR技术发展的过程中,两项重要发现起到了关键作用:一是TaqDNA聚合酶的5’端核酸外切酶活性被发现,它能降解特异性荧光标记的探针,使得间接定量检测PCR产物成为可能;二是荧光双标记探针被使用在密闭的反应管中,能实时地监测PCR反应的全过程。 展开更多
关键词 实时荧光定量pcr技术 核酸外切酶 定性检测 水产养殖 荧光基团 TAQDNA聚合酶 荧光信号 荧光标记
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实时荧光定量PCR技术检测转基因大豆方法的建立 被引量:55
3
作者 陈颖 徐宝梁 +3 位作者 苏宁 王媛 王丙武 葛毅强 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期65-69,共5页
采用实时荧光定量PCR技术 ,通过使用特异的引物和探针 ,对大豆中的内源基因Lectin和转基因大豆中的外源基因EPSPS进行了定量检测 ,建立了Monsanto公司生产的商业化转基因大豆Roundup Ready○R的定量PCR检测方法。该方法的检测灵敏度 <... 采用实时荧光定量PCR技术 ,通过使用特异的引物和探针 ,对大豆中的内源基因Lectin和转基因大豆中的外源基因EPSPS进行了定量检测 ,建立了Monsanto公司生产的商业化转基因大豆Roundup Ready○R的定量PCR检测方法。该方法的检测灵敏度 <0 0 1% ,是国际上设定的转基因最低限量的 10 展开更多
关键词 实时荧光定量pcr技术 检测 转基因大豆 内源基因Lectin 外源基因NEPSPS
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实时荧光定量PCR技术的类型、特点与应用 被引量:85
4
作者 袁亚男 刘文忠 《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第3期27-30,共4页
实时荧光定量PCR技术是一种利用不同的荧光检测方法来定量核酸的技术,具有高度的灵敏性、特异性和精确性。该技术根据荧光作用方式分为:SYBR荧光染料法、TaqMan技术、分子信标和复合探针等类型,依据其各自优缺点可将各技术方法分别应用... 实时荧光定量PCR技术是一种利用不同的荧光检测方法来定量核酸的技术,具有高度的灵敏性、特异性和精确性。该技术根据荧光作用方式分为:SYBR荧光染料法、TaqMan技术、分子信标和复合探针等类型,依据其各自优缺点可将各技术方法分别应用于畜牧兽医领域不同方面的科研工作中,以期得到最优的定量检测效率。 展开更多
关键词 实时荧光定量pcr技术 荧光共振能量转移 荧光探针 淬灭探针
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实时荧光定量PCR技术在食源性致病菌检测中的应用 被引量:6
5
作者 李敏 綦国红 《中国食物与营养》 2014年第8期13-17,共5页
实时荧光定量PCR技术作为一种高效的微生物定量检测法,在食品工业中具有广泛的应用前景。本文综述了实时荧光定量PCR技术检测原理,及其在食源性致病菌如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157∶H7、沙门氏菌和副溶血性弧菌检测中的应用。
关键词 实时荧光定量pcr技术 食源性致病菌检测 微生物检测 定量检测
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实时荧光定量PCR技术的研究进展 被引量:9
6
作者 任广睦 王英元 《临床医药实践》 2007年第4期243-245,共3页
关键词 实时荧光定量pcr技术 聚合酶链式反应技术 核酸定量检测 分子生物学 灵敏性 灵敏度 重复性 全封闭
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实时荧光定量PCR技术研究进展及应用 被引量:3
7
作者 刘长海 《中国实用医药》 2011年第31期238-240,共3页
1研究进展 二十多年前,美国Perkin-Elmer Cetus公司人类遗传研究室Mullis等发明了聚合酶链反应(PCR)技术,这成为20世纪生物医学领域革命性创举与里程碑,使人们梦寐以求的体外无限扩增核酸片段的愿望成为现实。几年后,世界生物实验室... 1研究进展 二十多年前,美国Perkin-Elmer Cetus公司人类遗传研究室Mullis等发明了聚合酶链反应(PCR)技术,这成为20世纪生物医学领域革命性创举与里程碑,使人们梦寐以求的体外无限扩增核酸片段的愿望成为现实。几年后,世界生物实验室中,PCR技术占据了统治地位,并成为分子生物领域的关键技术。 展开更多
关键词 实时荧光定量pcr技术 生物实验室 应用 聚合酶链反应 人类遗传 医学领域 核酸片段 分子生物
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实时荧光定量PCR技术的应用 被引量:4
8
作者 韩惠瑛 石丽瑞 张艳红 《中国畜禽种业》 2014年第3期37-39,共3页
1985年Mullis等发明了聚合酶链反应(PCR)技术,成为20世纪生物医学领域革命性创举,使人们梦寐以求的体外无限扩增核酸片段的愿望成为现实。1992年,Higuchi最早提出了实时PCR的设想。
关键词 实时荧光定量pcr技术 应用 聚合酶链反应 实时pcr 医学领域 革命性 生物 核酸
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应用实时荧光定量PCR技术对一例猪瘟的诊断报告 被引量:2
9
作者 李霞 《中国动物保健》 2012年第10期61-61,共1页
猪瘟(HogCholera,HC),又称古典猪瘟(Classi—calSwineFever,CSF)是一种高度接触性传染的病毒病,由黄病毒科,瘟病毒属的猪瘟病毒(HCV或CSFV)引起,于1833年首先发现于美国的俄亥俄州。中国是獬攫彩新刊蓟亚重的国家之一,近... 猪瘟(HogCholera,HC),又称古典猪瘟(Classi—calSwineFever,CSF)是一种高度接触性传染的病毒病,由黄病毒科,瘟病毒属的猪瘟病毒(HCV或CSFV)引起,于1833年首先发现于美国的俄亥俄州。中国是獬攫彩新刊蓟亚重的国家之一,近些年因多科疾病歹巴亡生猪占养猪总数的8%~10%,其中1/3由HC致死,每年的直接经济陨失在20亿元人民币左右。 展开更多
关键词 实时荧光定量pcr技术 古典猪瘟 诊断报告 应用 猪瘟病毒 黄病毒科 俄亥俄州 病毒病
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实时荧光定量PCR技术原理及在食品检测中的应用 被引量:26
10
作者 程海星 郭月英 +4 位作者 任霆 张静 王乐 张利霞 靳烨 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期243-247,共5页
实时荧光定量PCR技术是一种新兴的核酸定量分析技术,与普通PCR定性分析相比,具有简单高效、准确灵敏、实时分析等更多的优势,是一项实用性很强的技术方法。文中主要对实时荧光定量PCR技术的操作原理、荧光类型及其在食品检测和科学研究... 实时荧光定量PCR技术是一种新兴的核酸定量分析技术,与普通PCR定性分析相比,具有简单高效、准确灵敏、实时分析等更多的优势,是一项实用性很强的技术方法。文中主要对实时荧光定量PCR技术的操作原理、荧光类型及其在食品检测和科学研究领域中的应用进行综述。 展开更多
关键词 实时荧光定量pcr 荧光染料 探针 食品检测 应用
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实时荧光定量PCR技术原理与应用 被引量:34
11
作者 周晓丽 朱国坡 +2 位作者 李雪华 王艳玲 刘兴友 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第2期87-89,共3页
实时荧光定量PCR(real-ti me fluorescent quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)是在定性PCR技术基础上发展起来的核酸定量技术,它具有特异性强、PCR污染少、自动化程度高等特点。作者就实时荧光定量PCR技术的主要原理及目... 实时荧光定量PCR(real-ti me fluorescent quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)是在定性PCR技术基础上发展起来的核酸定量技术,它具有特异性强、PCR污染少、自动化程度高等特点。作者就实时荧光定量PCR技术的主要原理及目前在分子生物学领域,病原体和肿瘤等方面的检测和诊断应用进行了概述。 展开更多
关键词 实时荧光定量pcr 原理 检测 应用
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实时荧光定量PCR技术 被引量:39
12
作者 蒋春燕 王泰健 +1 位作者 王琴 范学政 《动物医学进展》 CSCD 2005年第12期97-101,共5页
荧光定量PCR技术是一种目前国内外应用较为广泛的定量PCR技术,是通过始点定量和荧光检测系统实时监测累积荧光强度而实现的,具有灵敏度高、特异性强、线性关系好、操作简单等优点,不但能够用于基因定量检测,还能准确定量疾病相关基因的... 荧光定量PCR技术是一种目前国内外应用较为广泛的定量PCR技术,是通过始点定量和荧光检测系统实时监测累积荧光强度而实现的,具有灵敏度高、特异性强、线性关系好、操作简单等优点,不但能够用于基因定量检测,还能准确定量疾病相关基因的表达,现已广泛应用于人类和动物疾病的快速检测、定量分析、早期诊断、基因分型等方面。它可以采用绝对定量和相对定量2种方式实现定量检测,但都有各自的优缺点,需根据具体的试验选择合适的定量方式,从而得到更准确的试验结果。提高荧光定量PCR技术的特异性和灵敏度需从多方面着手,主要指特异性探针及引物的设计,选择合适的Mg2+浓度、引物和探针浓度、循环数等。 展开更多
关键词 荧光定量pcr 基因定量 检测技术
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实时荧光定量PCR技术研究进展及应用 被引量:39
13
作者 张贺 李波 +1 位作者 周虚 谭建华 《动物医学进展》 CSCD 2006年第z1期5-12,共8页
实时荧光定量PCR(Real-time fluo-rescent quantitative polymerase chain reac-tion,Real-time PCR)技术是20世纪90年代中期发展起来的一种新型核酸定量技术。它利用荧光实时检测PCR反应,具有灵敏度高、特异性强、节约时间等优点。文... 实时荧光定量PCR(Real-time fluo-rescent quantitative polymerase chain reac-tion,Real-time PCR)技术是20世纪90年代中期发展起来的一种新型核酸定量技术。它利用荧光实时检测PCR反应,具有灵敏度高、特异性强、节约时间等优点。文章就常用的4种方法,即DNA结合染色、水解探针、分子信标和杂交探针的原理和特点进行介绍,同时综述了荧光定量PCR技术在实践中的应用。 展开更多
关键词 实时荧光定量pcr 应用
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实时荧光定量PCR技术快速检测志贺氏菌 被引量:11
14
作者 戴陈伟 童琳 +4 位作者 武昌俊 许勇 李舜 朱倩云 蔡标 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第23期8037-8041,共5页
目的建立实时荧光定量PCR法快速检测志贺氏菌。方法提取志贺氏菌基因组为模板扩增virA基因片段,将目的片段连接至pMD19-T载体得到重组质粒,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,验证所得到的重组质粒,以紫外分光光度计测量重组质粒吸光度值A260... 目的建立实时荧光定量PCR法快速检测志贺氏菌。方法提取志贺氏菌基因组为模板扩增virA基因片段,将目的片段连接至pMD19-T载体得到重组质粒,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,验证所得到的重组质粒,以紫外分光光度计测量重组质粒吸光度值A260,并换算为质粒拷贝数后作梯度稀释得到不同浓度的质粒标准品;进行荧光定量PCR分析并通过特异性、灵敏性实验以验证该方法的可行性。结果重组质粒标准品浓度在103~108 copies/μL范围内线性关系良好(r2>0.99),实时荧光定量PCR检测志贺氏菌时出现良好的扩增曲线,鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均未出现扩增曲线。志贺氏菌的检出限为100CFU/m L。结论本方法便捷、高效、可靠,可用于志贺氏菌的快速定性定量检测。 展开更多
关键词 志贺氏菌 实时荧光定量pcr 标准曲线 特异性 灵敏性
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实时荧光定量PCR技术在金黄色葡萄球菌检测中的应用 被引量:8
15
作者 韩齐 孔保华 +1 位作者 李沛军 李暮春 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期359-363,共5页
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是主要的食源性致病菌之一。实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术是近年来广泛应用于食源性致病菌的快速检测方法,具有特异性强、灵敏度高等特点。本文综述了Real-time PCR技术原理、分类及其在... 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是主要的食源性致病菌之一。实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术是近年来广泛应用于食源性致病菌的快速检测方法,具有特异性强、灵敏度高等特点。本文综述了Real-time PCR技术原理、分类及其在检测食品中金黄色葡萄球菌的应用,并对其应用前景进行了展望。 展开更多
关键词 食品 金黄色葡萄球菌 实时荧光定量pcr . 检测
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实时荧光定量PCR技术监测腌制麻竹笋中乳酸乳球菌动态变化 被引量:6
16
作者 夏雪娟 郑炯 +2 位作者 叶秀娟 吴金松 阚建全 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第4期88-92,共5页
采用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR)技术定量监测6 g/100 m L盐质量浓度腌制麻竹笋中乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)的动态变化。经乳酸乳球菌标准菌株基因组DNA提取、... 采用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR)技术定量监测6 g/100 m L盐质量浓度腌制麻竹笋中乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)的动态变化。经乳酸乳球菌标准菌株基因组DNA提取、标准阳性质粒制备、标准曲线绘制、各时期竹笋腌制发酵液中细菌基因组DNA提取和乳酸乳球菌qRTPCR特异性扩增,对腌制液中乳酸乳球菌进行定量检测。结果表明,在腌制过程中(0-63 d),随着腌制时间的延长,乳酸乳球菌含量逐渐升高,在腌制14 d时达到最大值(4.63×10^8 copies/μL),与0 d(2.41×10^2 copies/μL)相比增加了6个数量级,而后浓度缓慢降低,在腌制63 d时浓度为5.02×10^6 copies/μL。qRT-PCR技术为定量监测腌制麻竹笋中微生物的动态变化提供了一条可靠、快速的有效途径。 展开更多
关键词 大叶麻竹笋 腌制 实时荧光定量pcr 乳酸乳球菌 动态变化
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基于实时荧光定量PCR技术监测四川工业泡菜发酵过程中主要细菌的变化 被引量:8
17
作者 张亚豪 梁会朋 +2 位作者 常聪 尹礼国 张文学 《中国调味品》 CAS 北大核心 2018年第1期35-38,47,共5页
采用实时荧光定量PCR(qPCR)技术对四川工业泡菜发酵过程中变形菌门、厚壁菌门、乳杆菌属、盐单胞菌属、假单胞菌属和弧菌属的数量变化进行了检测。结果表明:变形菌门是泡菜发酵前期的优势菌门,而发酵中期和后期的优势菌门为厚壁菌门;在... 采用实时荧光定量PCR(qPCR)技术对四川工业泡菜发酵过程中变形菌门、厚壁菌门、乳杆菌属、盐单胞菌属、假单胞菌属和弧菌属的数量变化进行了检测。结果表明:变形菌门是泡菜发酵前期的优势菌门,而发酵中期和后期的优势菌门为厚壁菌门;在整个发酵过程中,乳杆菌属的含量呈现出明显的增加,假单胞菌属的含量有所降低,盐单胞菌属和弧菌属的含量均基本保持不变。该结果为四川泡菜工业化生产提供了一定的理论基础。 展开更多
关键词 四川工业泡菜 细菌 特异性引物 实时荧光定量pcr 数量变化
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实时荧光定量PCR技术在乳品微生物学中的应用研究进展 被引量:8
18
作者 朱军伟 杭锋 +2 位作者 王钦博 宋馨 侯建平 《安徽农业科学》 CAS 2014年第15期4764-4766,4771,共4页
越来越多的基因组测序给特异性引物和探针的设计带来了极大的支持。最近有研究表明,基于定量聚合酶链式反应(qPCR)方法的技术成功应用于发酵过程中的微生物计数以及乳制品中益生菌数量的计算。基于qPCR方法的技术进步包括实时荧光定量PC... 越来越多的基因组测序给特异性引物和探针的设计带来了极大的支持。最近有研究表明,基于定量聚合酶链式反应(qPCR)方法的技术成功应用于发酵过程中的微生物计数以及乳制品中益生菌数量的计算。基于qPCR方法的技术进步包括实时荧光定量PCR技术,不仅可以计数活菌数量,还可以在单一反应体系中检测多个微生物菌群数量,且能构建高通量PCR流程。实时荧光定量PCR技术在食品工业中的应用已证明其可靠性,尽管如此,该技术在乳品工业中的广泛使用还需要更多的技术支持和标准化方法。综述了实时荧光定量PCR技术及其在乳品微生物学中的最新研究与应用进展。 展开更多
关键词 实时荧光定量 pcr 益生菌 干酪
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实时荧光定量PCR技术在食源性致病菌检测中的应用 被引量:17
19
作者 吕艳芳 马春颖 励建荣 《食品与发酵科技》 CAS 2014年第2期80-84,88,共6页
近年来食源性疾病爆发数量呈上升趋势,食品安全问题已经成为危害人们生命和健康的严重问题,引起了全世界消费者对食品品质、安全和卫生的关注。实时荧光定量PCR技术是在定性PCR技术的基础上发展起来的核酸定量技术,灵敏性高、特异性强,... 近年来食源性疾病爆发数量呈上升趋势,食品安全问题已经成为危害人们生命和健康的严重问题,引起了全世界消费者对食品品质、安全和卫生的关注。实时荧光定量PCR技术是在定性PCR技术的基础上发展起来的核酸定量技术,灵敏性高、特异性强,实现了对DNA模板的定量检测,目前已广泛应用于食品检测领域。本文概述了实时荧光定量PCR技术的原理及其在食源性致病菌检测中的应用,并对其应用前景进行了探讨。 展开更多
关键词 实时荧光定量pcr 食源性致病菌 检测
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采用实时荧光定量PCR技术比较提取土壤真菌DNA方法的差异 被引量:5
20
作者 王淑芳 马桂珍 +1 位作者 钱媛媛 陈月 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第33期20318-20321,共4页
[目的]采用实时荧光定量PCR技术比较手提方式和OMEGA微量土壤DNA提取试剂盒获得土壤中真菌DNA的差异。[方法]接种5个梯度稀释的辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)菌丝到灭菌土壤中,并设置不接种的样品为阴性对照。采用手提方式和OMEGA... [目的]采用实时荧光定量PCR技术比较手提方式和OMEGA微量土壤DNA提取试剂盒获得土壤中真菌DNA的差异。[方法]接种5个梯度稀释的辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)菌丝到灭菌土壤中,并设置不接种的样品为阴性对照。采用手提方式和OMEGA土壤微量DNA提取试剂盒分别提取制备的土壤样品,采用实时荧光定量PCR方法和辣椒疫霉菌的特异性引物对土壤样品中的辣椒疫霉菌进行定量,并对结果进行比较,分析两种方法的特点。[结果]手提方式和试剂盒方式获得的土壤真菌DNA受土壤中杂质的影响较小,并且均能获得适合实时荧光定量PCR技术的模板DNA。采用试剂盒方式获得的辣椒疫霉菌定量结果比手工提取方式获得的辣椒疫霉菌定量结果平均高2.78倍。[结论]采用OMEGA微量土壤DNA提取试剂盒方法获得的菌体基因组DNA的量较多,定量结果更精确;手提方法所需试剂均为常用生化试剂,方便获得且价格低廉。因此,两种方法各有优势,可以根据实际情况选择。 展开更多
关键词 实时荧光定量pcr 真菌 土壤DNA
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