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实时PCR定量分析体内基因转染效率的可行性: 1; 作者高春记《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第2期132-136,共5页; 为了探索实时PCR技术评价基因转染效率的可行性 ,利用克隆PCR检测逆转录病毒载体介导的neo基因导入原代成肌细胞的转染效率 ,同时行实时PCR检测 ,对二者结果进行对比分析 ;利用线性扩增介导的PCR(LAM PCR)技术和逆转录病毒 5′LTR插入... 展开更多; 关键词实时pcr定量分析基因转染效率克隆逆转录病毒载体生物医学; 在线阅读下载PDF 职称材料

刺参虾青素基因的克隆及不同体色个体间表达差异的分析被引量：2: 2; 作者赵鹤凌杨红生 +1 位作者赵欢刘石林《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期22-28,共7页; 仿刺参(Apostichopus japonicus Selenka)的体色变化很大,多数背腹均为黄褐色,极少数呈白化特征,背腹均为纯白色。经人工繁育实验发现,白化仿刺参的子代仍多具白化特征。本文研究了虾青素基因与刺参白化特征的相关性。在克隆虾青素基因c... 展开更多; 关键词虾青素仿刺参(Apostichopusjaponicus Selenka) 白化基因克隆实时定量pcr分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

中国明对虾caspase基因的克隆与表达分析被引量：6: 3; 作者宋光年金松君 +1 位作者张继泉相建海《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1-7,共7页; 利用细胞凋亡来清除多细胞器官受损伤或有害的细胞,为动物发育过程中保持机体平衡起到关键作用。为了研究细胞凋亡在甲壳类动物应对病毒感染后所起到的作用,作者利用同源克隆技术获得了中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)caspase基因... 展开更多; 关键词中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis) 基因克隆 CASPASE WSSV攻毒实时定量pcr分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

海带磷酸甘露糖变位酶(PMM)基因的克隆与表达分析被引量：3: 4; 作者张朋艳于雪 +1 位作者姚建亭段德麟《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期32-39,共8页; 磷酸甘露糖变位酶(PMM)是褐藻胶和岩藻聚糖合成过程中的关键酶之一。本研究利用c DNA末端快速克隆(RACE)技术,获得2条海带PMM基因(Sjpmm1,Sjpmm2)序列。其中,Sjpmm1的开放阅读框(ORF)长759 bp,其编码的Sj PMM1为卤酸脱卤酶(HAD)超家族成... 展开更多; 关键词海带磷酸甘露糖变位酶岩藻聚糖褐藻胶实时定量pcr分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

刺参真核翻译起始因子基因(eif2s1)的cDNA克隆及表达分析被引量：1: 5; 作者赵业杨红生李秉钧《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期120-126,共7页; 夏眠是刺参(Apostichopusjaponicas)应对夏季高温低氧等不良环境的重要生存策略,而抑制高耗能的蛋白合成则是夏眠期机体有效降低能耗的重要环节。真核翻译起始因子eIF2是启动蛋白翻译的关键因子,在蛋白合成调控中发挥了重要作用。本研... 展开更多; 关键词刺参夏眠 eif2s1基因基因克隆实时定量pcr分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

梨果实细胞分裂期内参基因表达稳定性分析被引量：8: 6; 作者蒲小秋田嘉 +4 位作者李疆张艳李鹏覃伟铭井春芝《经济林研究》北大核心 2020年第1期66-74,共9页; 【目的】果实细胞分裂期是果实品质调控的关键时期,qRT-PCR技术在果实品质研究中发挥着重要作用,qRT-PCR技术中内参基因的选择关系到检测结果的准确性。为了筛选出适合分析梨果实细胞分裂期基因表达水平的内参基因。【方法】分别以杜梨... 展开更多; 关键词梨内参基因实时荧光定量pcr分析表达稳定性; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名实时PCR定量分析体内基因转染效率的可行性: 1; 作者高春记; 机构解放军总医院血液科; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第2期132-136,共5页; 文摘为了探索实时PCR技术评价基因转染效率的可行性 ,利用克隆PCR检测逆转录病毒载体介导的neo基因导入原代成肌细胞的转染效率 ,同时行实时PCR检测 ,对二者结果进行对比分析 ;利用线性扩增介导的PCR(LAM PCR)技术和逆转录病毒 5′LTR插入细胞基因组位点的分析 ,确定单细胞内基因转染的拷贝数。结果显示 :①在低转染率的情况下 (<36 % )二者的结果相近 ,但是在高转染率情况下二者的结果差别明显 ;②逆转录病毒载体介导的转染 ,在原代成肌细胞中为单拷贝基因导入基因组内。结论 :实时PCR可以比较精确地估计体内病毒载体介导的基因转染效率 ;而在体外由于多为高转染率。; 关键词实时pcr定量分析基因转染效率克隆逆转录病毒载体生物医学; Keywords pcr real time pcr retroviral vector gene transfection clonal pcr linear amplification mediated pcr; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] R394.8 [医药卫生—医学遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名刺参虾青素基因的克隆及不同体色个体间表达差异的分析被引量：2: 2; 作者赵鹤凌杨红生赵欢刘石林; 机构中国科学院海洋研究所中国科学院研究生院; 出处《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期22-28,共7页; 基金国家863计划项目(2006AA100304/2006AA10A411) 国家自然科学基金项目(40976089) 海洋公益性行业科研专项重点项目(200805069); 文摘仿刺参(Apostichopus japonicus Selenka)的体色变化很大,多数背腹均为黄褐色,极少数呈白化特征,背腹均为纯白色。经人工繁育实验发现,白化仿刺参的子代仍多具白化特征。本文研究了虾青素基因与刺参白化特征的相关性。在克隆虾青素基因cDNA全长的基础上,比较了普通仿刺参和白化仿刺参在不同发育时期虾青素基因表达量的差异。结果表明,该基因的cDNA含有2058个核苷酸,编码560个氨基酸。经实时定量PCR分析,白化成参体壁中虾青素基因表达量显著低于普通成参;而在仿刺参色素沉积的早期,白化稚参体壁中虾青素基因表达量从受精后第39天开始显著低于普通稚参。可见,仿刺参体壁中虾青素基因的低表达与刺参白化特征的发生密切相关。; 关键词虾青素仿刺参(Apostichopusjaponicus Selenka) 白化基因克隆实时定量pcr分析; Keywords astacin Apostichopusjaponicus albinism gene cloning real-time pcr; 分类号 Q789 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名中国明对虾caspase基因的克隆与表达分析被引量：6: 3; 作者宋光年金松君张继泉相建海; 机构中国科学院海洋研究所中国科学院研究生院; 出处《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1-7,共7页; 基金国家973资助项目(2006CB101804) 国家863计划项目(2006AA10A401) 国家自然基金项目(30970422); 文摘利用细胞凋亡来清除多细胞器官受损伤或有害的细胞,为动物发育过程中保持机体平衡起到关键作用。为了研究细胞凋亡在甲壳类动物应对病毒感染后所起到的作用,作者利用同源克隆技术获得了中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)caspase基因(FcCasp)的cDNA序列,并分析了该基因在对虾受到白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,简称WSSV)刺激后的表达变化规律。结果表明,该基因的cDNA含有954个核苷酸,编码317个氨基酸,具有caspase家族典型的QACRG五肽蛋白酶活性位点(190-194氨基酸)。对注射了WSSV的中国明对虾FcCasp的表达进行分析,在5个时间点取其肝胰脏样本,经real-time PCR检测发现,WSSV刺激3 h后,对虾肝胰脏中FcCasp的表达呈现显著性上调,说明FcCasp的表达与WSSV感染密切相关,提示FcCasp基因与细胞凋亡相关。; 关键词中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis) 基因克隆 CASPASE WSSV攻毒实时定量pcr分析; Keywords Fenneropenaeus chinensis caspase gene cloning WSSV challenge real-time pcr; 分类号 Q789 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名海带磷酸甘露糖变位酶(PMM)基因的克隆与表达分析被引量：3: 4; 作者张朋艳于雪姚建亭段德麟; 机构中国科学院海洋研究所实验海洋生物学重点实验室青岛海洋科学与技术国家实验室实验海洋生物学与生物技术实验室中国科学院大学; 出处《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期32-39,共8页; 基金国家科技支撑计划项目(2013BAB01B01) 国家海洋公益性行业科研专项(201405040)~~; 文摘磷酸甘露糖变位酶(PMM)是褐藻胶和岩藻聚糖合成过程中的关键酶之一。本研究利用c DNA末端快速克隆(RACE)技术,获得2条海带PMM基因(Sjpmm1,Sjpmm2)序列。其中,Sjpmm1的开放阅读框(ORF)长759 bp,其编码的Sj PMM1为卤酸脱卤酶(HAD)超家族成员,含252个氨基酸,分子量约为28.51 k Da;而Sjpmm2的ORF长1866 bp,其编码的Sj PMM2属于磷酸己糖变位酶超家族的成员,含621个氨基酸,分子量约为66.49 k Da。海带PMM的二级结构均以?-螺旋为主。进化分析表明,Sjpmm1来自于原始真核生物,而Sjpmm2来源于质体的第一次内共生作用。实时定量PCR分析发现,海带受到高温或低温胁迫时,Sjpmm1和Sjpmm2转录水平上升,以合成岩藻聚糖抵抗环境影响。此外,利用p MAL-c5X载体对Sj PMM1进行体外表达,得到高浓度的可溶性融合蛋白,为后续的Sj PMM功能分析提供基础。; 关键词海带磷酸甘露糖变位酶岩藻聚糖褐藻胶实时定量pcr分析; Keywords Saccharinajaponica phosphomannomutase fucoidan alginate real-time pcr analysis; 分类号 X55 [环境科学与工程—环境工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名刺参真核翻译起始因子基因(eif2s1)的cDNA克隆及表达分析被引量：1: 5; 作者赵业杨红生李秉钧; 机构烟台大学海洋学院中国科学院海洋研究所; 出处《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期120-126,共7页; 基金山东省自然科学基金博士基金(ZR2017BD026) 烟台大学博士科研启动基金(HX15B14)~~; 文摘夏眠是刺参(Apostichopusjaponicas)应对夏季高温低氧等不良环境的重要生存策略,而抑制高耗能的蛋白合成则是夏眠期机体有效降低能耗的重要环节。真核翻译起始因子eIF2是启动蛋白翻译的关键因子,在蛋白合成调控中发挥了重要作用。本研究克隆分析了刺参翻译起始因子eIF2α亚基(eif2s1基因)全长cDNA序列及结构特征,并测定了其在夏眠期间的时空表达模式。结果表明:刺参eif2s1基因序列较保守,与紫海胆该基因同源性最高。同时,刺参eif2s1基因在深度夏眠期组织中出现了不同程度的表达抑制,可能参与了刺参夏眠蛋白抑制调控。; 关键词刺参夏眠 eif2s1基因基因克隆实时定量pcr分析; Keywords Apostichopus japonicus aestivation eif2s1 gene gene cloning real-time pcr analysis; 分类号 S917.4 [农业科学—水产科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名梨果实细胞分裂期内参基因表达稳定性分析被引量：8: 6; 作者蒲小秋田嘉李疆张艳李鹏覃伟铭井春芝; 机构新疆农业大学林学与园艺学院新疆维吾尔自治区巴音郭楞蒙古自治州沙依东园艺场新疆维吾尔自治区巴音郭楞蒙古自治州林业科学技术推广中心; 出处《经济林研究》北大核心 2020年第1期66-74,共9页; 基金国家自然科学基金项目(31760561)。; 文摘【目的】果实细胞分裂期是果实品质调控的关键时期,qRT-PCR技术在果实品质研究中发挥着重要作用,qRT-PCR技术中内参基因的选择关系到检测结果的准确性。为了筛选出适合分析梨果实细胞分裂期基因表达水平的内参基因。【方法】分别以杜梨、香梨和鸭梨梨花露红期、盛花期的花托和授粉后10、20、30、40 d的梨果肉为研究材料,应用qRT-PCR技术,对TUB2、TUB1、TUB3、Actin1、Actin2、UBI、EF1α和GAPDH这8个内参基因在不同梨品种果实细胞分裂期的表达情况进行了分析,利用geNorm和NormFinder对候选内参基因的稳定性进行了分析评价;以FWL1为目标基因,验证了候选基因在同一花期不同梨品种之间表达的稳定性。【结果】Actin1在花期花托中的表达稳定性最高,TUB2在果期的表达稳定性最高,TUB2在总样本中的表达稳定性最高。以FWL1为目的基因对表达稳定性不同的TUB2、Actin1、Actin2和TUB1这4个候选基因的验证结果表明,以TUB2、Actin1和Actin2为内参基因时,FWL1在同一时期不同梨品种之间的表达模式基本一致,使用TUB1作为内参基因得到的FWL1在杜梨、香梨和鸭梨中的表达模式与应用TUB2作为内参基因时的表达模式完全不一致。【结论】Actin1是研究梨花期花托基因表达分析的首选内参基因;TUB2是研究果期果肉基因表达分析的首选内参基因,也是梨果实细胞分裂期基因表达分析的首选内参基因。; 关键词梨内参基因实时荧光定量pcr分析表达稳定性; Keywords pear internal reference genes qRT-pcr analysis expression stability; 分类号 S661.2 [农业科学—果树学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	实时PCR定量分析体内基因转染效率的可行性	高春记	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD	2003	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	刺参虾青素基因的克隆及不同体色个体间表达差异的分析	赵鹤凌杨红生赵欢刘石林	《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心	2012	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	中国明对虾caspase基因的克隆与表达分析	宋光年金松君张继泉相建海	《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心	2010	6	在线阅读下载PDF 职称材料
4	海带磷酸甘露糖变位酶(PMM)基因的克隆与表达分析	张朋艳于雪姚建亭段德麟	《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心	2016	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	刺参真核翻译起始因子基因(eif2s1)的cDNA克隆及表达分析	赵业杨红生李秉钧	《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心	2018	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	梨果实细胞分裂期内参基因表达稳定性分析	蒲小秋田嘉李疆张艳李鹏覃伟铭井春芝	《经济林研究》北大核心	2020	8	在线阅读下载PDF 职称材料