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定向基因传递载体pET15b-Z-VP1的构建
被引量：
1
1
作者
折潇
屈秋民
翟海燕
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期302-305,共4页
目的在JCV VP1氨基末端插入SPA的IgG结合区(Z区),构建原核表达质粒pET15b-Z-VP1。方法PCR扩增JCV基因组VP1和SPA基因的Z片段;重组PCR连接Z片段和VP1;BamHⅠ和NcoⅠ双酶切将Z-VP1片段插入原核表达质粒pET15b。结果经PCR扩增和琼脂糖凝胶...
目的在JCV VP1氨基末端插入SPA的IgG结合区(Z区),构建原核表达质粒pET15b-Z-VP1。方法PCR扩增JCV基因组VP1和SPA基因的Z片段;重组PCR连接Z片段和VP1;BamHⅠ和NcoⅠ双酶切将Z-VP1片段插入原核表达质粒pET15b。结果经PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳纯化,分别得到VP1和Z片段;再用重组PCR将Z片段和VP1连接成Z-VP1重组基因;双酶切将Z-VP1插入pET15b的BamHⅠ和NcoⅠ两个酶切位点之间,并经酶切鉴定和DNA测序证实。Western blotting证明pET15b-Z-VP1在体外表达重组蛋白VP1-Z。结论成功在VP1氨基末端插入Z区,构建了原核表达质粒pET15b-Z-VP1,并体外表达重组蛋白VP1-Z。
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关键词
基因
治疗
定向基因传递
JC病毒
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职称材料
题名
定向基因传递载体pET15b-Z-VP1的构建
被引量：
1
1
作者
折潇
屈秋民
翟海燕
机构
西安交通大学医学院第一附属医院神经内科
出处
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期302-305,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30570630)~~
文摘
目的在JCV VP1氨基末端插入SPA的IgG结合区(Z区),构建原核表达质粒pET15b-Z-VP1。方法PCR扩增JCV基因组VP1和SPA基因的Z片段;重组PCR连接Z片段和VP1;BamHⅠ和NcoⅠ双酶切将Z-VP1片段插入原核表达质粒pET15b。结果经PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳纯化,分别得到VP1和Z片段;再用重组PCR将Z片段和VP1连接成Z-VP1重组基因;双酶切将Z-VP1插入pET15b的BamHⅠ和NcoⅠ两个酶切位点之间,并经酶切鉴定和DNA测序证实。Western blotting证明pET15b-Z-VP1在体外表达重组蛋白VP1-Z。结论成功在VP1氨基末端插入Z区,构建了原核表达质粒pET15b-Z-VP1,并体外表达重组蛋白VP1-Z。
关键词
基因
治疗
定向基因传递
JC病毒
Keywords
gene therapy
targeted gene delivery
JC virus
分类号
R730.54 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
定向基因传递载体pET15b-Z-VP1的构建
折潇
屈秋民
翟海燕
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010
1
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参考文献
引证文献
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