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杀雄剂SQ-1诱导小麦生理型雄性不育小花完整叶绿体差异蛋白质的鉴定
被引量：
15
1
作者
王书平
张改生
+8 位作者
叶景秀
李莉
宋瑜龙
王亮明
代军军
张龙雨
牛娜
马守才
朱建楚
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第9期854-861,共8页
为了在蛋白质水平揭示小麦雄性不育的分子遗传机制,以小麦经杀雄剂SQ-1诱导的生理型雄性不育系,以及对应正常可育系所构建的等生理差异系为试材,应用差速离心和蔗糖密度梯度离心,首先分离出供试材料小花的完整叶绿体,制备蛋白样品后采...
为了在蛋白质水平揭示小麦雄性不育的分子遗传机制,以小麦经杀雄剂SQ-1诱导的生理型雄性不育系,以及对应正常可育系所构建的等生理差异系为试材,应用差速离心和蔗糖密度梯度离心,首先分离出供试材料小花的完整叶绿体,制备蛋白样品后采用固相IEF/SDS-PAGE双向凝胶电泳技术对完整叶绿体蛋白质进行了分离、银染,得到了重复性较好的双向电泳图谱.PDQuest2DE软件分析识别出约150个较为清晰的蛋白质点,采用MALDI-TOF鉴定出的6个差异表达蛋白质分别是:PAP-fibrillin、ATRABB1A、底物同源结构域蛋白/RhoGAP结构域蛋白、铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)、R2R3-MYB转录因子及1个假定蛋白质.生物信息学功能分析暗示,这些蛋白直接参与了花药内激素调节、蛋白质转运、蛋白质互作、活性氧积累及花药的发育,表明SQ-1诱导的小麦生理型雄性不育其败育机理可能就与这些生理代谢过程的变异直接相关.
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关键词
小麦
杀雄剂SQ-1
生理型雄性不育
完整叶绿体
差异蛋白质组学
2D-PAGE
MALDI-TOF-MS
在线阅读
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职称材料
小麦生理型和遗传型雄性不育系及其保持系小花完整叶绿体蛋白质组分比较研究
被引量：
10
2
作者
李莉
王书平
+5 位作者
张改生
王亮明
宋瑜龙
张龙雨
牛娜
马守才
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第7期1134-1143,共10页
采用固相pH梯度SDS聚丙烯酰胺双向凝胶电泳技术,以小麦遗传型雄性不育系ms(S)-1376、杀雄剂SQ-1诱导的生理型雄性不育系ms(A)-1376,以及对应的保持系(A)-1376(杀雄剂诱导前的正常可育系)所构建的等基因和等生理差异系为试材,比较分析了...
采用固相pH梯度SDS聚丙烯酰胺双向凝胶电泳技术,以小麦遗传型雄性不育系ms(S)-1376、杀雄剂SQ-1诱导的生理型雄性不育系ms(A)-1376,以及对应的保持系(A)-1376(杀雄剂诱导前的正常可育系)所构建的等基因和等生理差异系为试材,比较分析了2种分离纯化完整叶绿体的方法。在确立了一套适用的技术方法的基础上,研究了三者在花粉小孢子萌发单核早期小花完整叶绿体蛋白之间的差异。采用30%、45%和60%的不连续蔗糖密度梯度离心的方法能够获得完整且纯度较高的叶绿体,经TCA-丙酮提取蛋白质后,PDQuest软件分析,在分子量14.4～66.2kD,等电点4～7的线性范围内可分辨出2-DE图谱上239个较为清晰的蛋白质点,对其中的6个差异表达蛋白质点进行MALDI-TOF肽质量指纹图谱分析,从生物信息学数据库检索鉴定出6个差异蛋白质点分别是酰基辅酶A脱氢酶结构域蛋白、钙调结合蛋白磷酸酶、多催化功能肽酶、热休克蛋白60、光受体蛋白2及1个未知功能的表达蛋白质。这些蛋白质在供试小麦叶绿体物质能量代谢、叶绿体防卫抵御机制、叶绿体细胞内信号转导及植物极性生长等生理应答反应中起调控作用,它们能在本研究供试两不育系和对应可育系中差异表达,可能与雄性不育相关。
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关键词
小麦
遗传型和生理型雄性不育
完整叶绿体
蛋白质组
差异表达
2D—PAGE
MALDI-TOF-MS
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职称材料
优化的蔗糖密度梯度离心法分离完整叶绿体
被引量：
9
3
作者
张年辉
《实验技术与管理》
CAS
北大核心
2010年第7期44-46,共3页
建立了一种简单、低成本的分离完整叶绿体的方法。以家用食品料理机破碎植物细胞,采用两层不连续蔗糖梯度和使用较低的离心速度等措施降低了实验成本和对设备的要求;通过采取措施防止叶绿体粗提物制备过程中叶绿体外被膜的破裂,以及在...
建立了一种简单、低成本的分离完整叶绿体的方法。以家用食品料理机破碎植物细胞,采用两层不连续蔗糖梯度和使用较低的离心速度等措施降低了实验成本和对设备的要求;通过采取措施防止叶绿体粗提物制备过程中叶绿体外被膜的破裂,以及在梯度制备和随后离心过程中由于颗粒扩散而导致的梯度不稳定,从而使方法具有很好的重复性。用该方法分离的完整叶绿体完整性很高（〉90%）,可以用于叶绿体细胞生物学、生物化学与分子生物学等多方面的研究。
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关键词
完整叶绿体
密度梯度离心
不连续蔗糖梯度
本科生实验
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职称材料
题名
杀雄剂SQ-1诱导小麦生理型雄性不育小花完整叶绿体差异蛋白质的鉴定
被引量：
15
1
作者
王书平
张改生
叶景秀
李莉
宋瑜龙
王亮明
代军军
张龙雨
牛娜
马守才
朱建楚
机构
西北农林科技大学陕西省作物杂种优势研究与利用重点实验室/小麦育种教育部工程研究中心
青海省农林科学院
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第9期854-861,共8页
基金
国家高技术研究发展计划重大专项(863计划
No.2009AA101102)
+3 种基金
高等学校博士学科点专项科研基金(No.20090204110024)
陕西省"13115"科技创新工程重大科技专项(No.2007ZDKG-020)
国家杨凌农业生物技术育种中心专项基金(No.99-1A)
西北农林科技大学拔尖人才支持计划项目资助~~
文摘
为了在蛋白质水平揭示小麦雄性不育的分子遗传机制,以小麦经杀雄剂SQ-1诱导的生理型雄性不育系,以及对应正常可育系所构建的等生理差异系为试材,应用差速离心和蔗糖密度梯度离心,首先分离出供试材料小花的完整叶绿体,制备蛋白样品后采用固相IEF/SDS-PAGE双向凝胶电泳技术对完整叶绿体蛋白质进行了分离、银染,得到了重复性较好的双向电泳图谱.PDQuest2DE软件分析识别出约150个较为清晰的蛋白质点,采用MALDI-TOF鉴定出的6个差异表达蛋白质分别是:PAP-fibrillin、ATRABB1A、底物同源结构域蛋白/RhoGAP结构域蛋白、铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)、R2R3-MYB转录因子及1个假定蛋白质.生物信息学功能分析暗示,这些蛋白直接参与了花药内激素调节、蛋白质转运、蛋白质互作、活性氧积累及花药的发育,表明SQ-1诱导的小麦生理型雄性不育其败育机理可能就与这些生理代谢过程的变异直接相关.
关键词
小麦
杀雄剂SQ-1
生理型雄性不育
完整叶绿体
差异蛋白质组学
2D-PAGE
MALDI-TOF-MS
Keywords
wheat
CHA-SQ-1
physiological male sterility
intact chloroplasts
differential proteomics
2D-PAGE
MALDI-TOF-MS
分类号
Q51 [生物学—生物化学]
Q946.1 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
小麦生理型和遗传型雄性不育系及其保持系小花完整叶绿体蛋白质组分比较研究
被引量：
10
2
作者
李莉
王书平
张改生
王亮明
宋瑜龙
张龙雨
牛娜
马守才
机构
西北农林科技大学陕西省作物杂种优势研究与利用重点实验室
出处
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第7期1134-1143,共10页
基金
国家高技术研究发展计划(863计划)重大专项(2009AA101102)
国家自然科学基金项目(31071477)
+2 种基金
高等学校博士学科点专项科研基金(20090204110024)
陕西省“13115”科技创新工程重大科技专项(2010ZDKG-68)
西北农林科技大学拔尖人才支持计划项目资助
文摘
采用固相pH梯度SDS聚丙烯酰胺双向凝胶电泳技术,以小麦遗传型雄性不育系ms(S)-1376、杀雄剂SQ-1诱导的生理型雄性不育系ms(A)-1376,以及对应的保持系(A)-1376(杀雄剂诱导前的正常可育系)所构建的等基因和等生理差异系为试材,比较分析了2种分离纯化完整叶绿体的方法。在确立了一套适用的技术方法的基础上,研究了三者在花粉小孢子萌发单核早期小花完整叶绿体蛋白之间的差异。采用30%、45%和60%的不连续蔗糖密度梯度离心的方法能够获得完整且纯度较高的叶绿体,经TCA-丙酮提取蛋白质后,PDQuest软件分析,在分子量14.4～66.2kD,等电点4～7的线性范围内可分辨出2-DE图谱上239个较为清晰的蛋白质点,对其中的6个差异表达蛋白质点进行MALDI-TOF肽质量指纹图谱分析,从生物信息学数据库检索鉴定出6个差异蛋白质点分别是酰基辅酶A脱氢酶结构域蛋白、钙调结合蛋白磷酸酶、多催化功能肽酶、热休克蛋白60、光受体蛋白2及1个未知功能的表达蛋白质。这些蛋白质在供试小麦叶绿体物质能量代谢、叶绿体防卫抵御机制、叶绿体细胞内信号转导及植物极性生长等生理应答反应中起调控作用,它们能在本研究供试两不育系和对应可育系中差异表达,可能与雄性不育相关。
关键词
小麦
遗传型和生理型雄性不育
完整叶绿体
蛋白质组
差异表达
2D—PAGE
MALDI-TOF-MS
Keywords
Wheat
Genetic and physiological male sterilities
Intact chloroplast proteins
Differential expression
2-dimensionalelectrophoresis
MALDI-TOF-MS
分类号
S512.1 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
优化的蔗糖密度梯度离心法分离完整叶绿体
被引量：
9
3
作者
张年辉
机构
四川大学生命科学学院
出处
《实验技术与管理》
CAS
北大核心
2010年第7期44-46,共3页
基金
教育部高等学校特色专业建设——四川大学生物科学(教高函[2008]21号),教育部国家级教团队——四川大学国家生物学人才培养基地专业课教学学团队(教高函[2008]19号),教育部国家生命科学与技术人才培养基地——四川大学跨学科人才培养模式创新实验区(教高函[2009]4号)
四川大学生命科学学院本科生创新实验项目
文摘
建立了一种简单、低成本的分离完整叶绿体的方法。以家用食品料理机破碎植物细胞,采用两层不连续蔗糖梯度和使用较低的离心速度等措施降低了实验成本和对设备的要求;通过采取措施防止叶绿体粗提物制备过程中叶绿体外被膜的破裂,以及在梯度制备和随后离心过程中由于颗粒扩散而导致的梯度不稳定,从而使方法具有很好的重复性。用该方法分离的完整叶绿体完整性很高（〉90%）,可以用于叶绿体细胞生物学、生物化学与分子生物学等多方面的研究。
关键词
完整叶绿体
密度梯度离心
不连续蔗糖梯度
本科生实验
Keywords
intact chloroplasts
density gradient centrifugation
discontinuous sucrose gradient
experiment of undergraduates
分类号
Q2-33 [生物学—细胞生物学]
Q942 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
杀雄剂SQ-1诱导小麦生理型雄性不育小花完整叶绿体差异蛋白质的鉴定
王书平
张改生
叶景秀
李莉
宋瑜龙
王亮明
代军军
张龙雨
牛娜
马守才
朱建楚
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
15
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
小麦生理型和遗传型雄性不育系及其保持系小花完整叶绿体蛋白质组分比较研究
李莉
王书平
张改生
王亮明
宋瑜龙
张龙雨
牛娜
马守才
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
10
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下载PDF
职称材料
3
优化的蔗糖密度梯度离心法分离完整叶绿体
张年辉
《实验技术与管理》
CAS
北大核心
2010
9
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职称材料
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