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不完全酶切去除载体多个相同酶切位点的简易方法 被引量:1
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作者 杨金玲 黄镇太 +2 位作者 朱慧新 朱平 程克棣 《西北植物学报》 CAS CSCD 2003年第11期1981-1983,共3页
以去除真核表达载体pIGF3的3个EcoR 位点为例,介绍一种通过不完全酶切去除载体多个相同酶切位点的方法。本方法步骤简单,经济实用。
关键词 完全酶切 真核表达载体 质粒
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条斑紫菜高纯度总DNA及其质粒状DNA的提取 被引量:14
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作者 郭宝太 毕玉平 +2 位作者 单雷 李广存 戴继勋 《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期87-91,共5页
提取条斑紫菜高纯度总DNA及其质粒状DNA的新方法.先用海螺酶处理 紫菜叶状体制备细胞,然后用SDS-蛋白酶K裂解细胞提取总DNA,再用玻璃粉浆 (glassmilk)对其纯化,经纯化后的总DNA能被EcoRI,Dra... 提取条斑紫菜高纯度总DNA及其质粒状DNA的新方法.先用海螺酶处理 紫菜叶状体制备细胞,然后用SDS-蛋白酶K裂解细胞提取总DNA,再用玻璃粉浆 (glassmilk)对其纯化,经纯化后的总DNA能被EcoRI,Dral与HaeⅢ等限制酶完全酶 切,并在酶切图谱上形成明显的DNA带型.当用异硫氰酸胍一十二烷基肌氨酸钠裂 解紫菜细胞时,在总DNA提取物中直接发现有一条质粒状DNA带(2.3 Kb),即建 立了一种极简便的质粒状DNA提取方法. 展开更多
关键词 条斑紫菜 细胞 总DNA 完全酶切 质粒状DNA提取
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AtDREB2B基因的克隆及植物表达载体的构建
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作者 王天祥 严晓丹 +1 位作者 贾文锁 王华芳 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第21期8943-8945,共3页
[目的]获得耐旱转录因子的植物表达载体,进而转化植物获得耐旱性提高的新植物株系。[方法]提取脱水处理的拟南芥总RNA,利用AtDREB2B特异引物通过RT-PCR扩增出1.2kb片段,并将其克隆至pBS-T上,测序。[结果]序列分析表明,该克隆序列与GenB... [目的]获得耐旱转录因子的植物表达载体,进而转化植物获得耐旱性提高的新植物株系。[方法]提取脱水处理的拟南芥总RNA,利用AtDREB2B特异引物通过RT-PCR扩增出1.2kb片段,并将其克隆至pBS-T上,测序。[结果]序列分析表明,该克隆序列与GenBank上登录AtDREB2B基因序列的一致性为100%。进一步通过片段的亚克隆,将其构建至植物表达载体pCAMBIA1301和pBin438上,分别由rd29A启动子和重复35S启动子调控基因表达。[结论]成功构建了2种AtDREB2B的植物表达载体,并通过冻融法转化根癌农杆菌GV3101,为农杆菌介导的AtDREB2B基因对植物的遗传转化奠定基础。 展开更多
关键词 DREB2B 载体构建 基因克隆 完全酶切
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