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题名不完全酶切去除载体多个相同酶切位点的简易方法
被引量:1
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作者
杨金玲
黄镇太
朱慧新
朱平
程克棣
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机构
中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所
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出处
《西北植物学报》
CAS
CSCD
2003年第11期1981-1983,共3页
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基金
国家"863"计划项目(2001AA234021)
国家自然科学基金项目(39900002)
北京市自然科学基金项目(5992012)
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文摘
以去除真核表达载体pIGF3的3个EcoR 位点为例,介绍一种通过不完全酶切去除载体多个相同酶切位点的方法。本方法步骤简单,经济实用。
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关键词
不完全酶切
真核表达载体
质粒
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Keywords
incomplete digestion
eukaryotic expression vector
plasmid
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分类号
Q946-33
[生物学—植物学]
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题名条斑紫菜高纯度总DNA及其质粒状DNA的提取
被引量:14
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作者
郭宝太
毕玉平
单雷
李广存
戴继勋
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机构
青岛海洋大学海洋生命学院
山东省农业科学研究院生物技术中心
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出处
《海洋学报》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第2期87-91,共5页
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文摘
提取条斑紫菜高纯度总DNA及其质粒状DNA的新方法.先用海螺酶处理 紫菜叶状体制备细胞,然后用SDS-蛋白酶K裂解细胞提取总DNA,再用玻璃粉浆 (glassmilk)对其纯化,经纯化后的总DNA能被EcoRI,Dral与HaeⅢ等限制酶完全酶 切,并在酶切图谱上形成明显的DNA带型.当用异硫氰酸胍一十二烷基肌氨酸钠裂 解紫菜细胞时,在总DNA提取物中直接发现有一条质粒状DNA带(2.3 Kb),即建 立了一种极简便的质粒状DNA提取方法.
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关键词
条斑紫菜
细胞
总DNA
完全酶切
质粒状DNA提取
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Keywords
Porphyra yezoensis, cells, total DNA, glassmilk, complete digestion, plasmid-like DNA
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分类号
Q949.292.1
[生物学—植物学]
Q503
[生物学—生物化学]
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题名AtDREB2B基因的克隆及植物表达载体的构建
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作者
王天祥
严晓丹
贾文锁
王华芳
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机构
北京林业大学生物科学与技术学院
中国农业大学农学与生物技术学院
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出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008年第21期8943-8945,共3页
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基金
国家林业局948项目(2007-4-02)
国家林业局公益林研究项目(200704017)
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文摘
[目的]获得耐旱转录因子的植物表达载体,进而转化植物获得耐旱性提高的新植物株系。[方法]提取脱水处理的拟南芥总RNA,利用AtDREB2B特异引物通过RT-PCR扩增出1.2kb片段,并将其克隆至pBS-T上,测序。[结果]序列分析表明,该克隆序列与GenBank上登录AtDREB2B基因序列的一致性为100%。进一步通过片段的亚克隆,将其构建至植物表达载体pCAMBIA1301和pBin438上,分别由rd29A启动子和重复35S启动子调控基因表达。[结论]成功构建了2种AtDREB2B的植物表达载体,并通过冻融法转化根癌农杆菌GV3101,为农杆菌介导的AtDREB2B基因对植物的遗传转化奠定基础。
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关键词
DREB2B
载体构建
基因克隆
不完全酶切
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Keywords
DREB2B
Construction of vectors
Gene cloning
Incomplete digestion
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分类号
S188
[农业科学—农业基础科学]
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