2,4-二氯苯氧乙酸完全抗原和抗体的制备 被引量：6

1

作者 余若祯 施汉昌 +2 位作者 何苗 郭洁菡 钱易 《中国环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第3期288-292,共5页

以小分子环境污染物2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)为半抗原,牛血清蛋白(BSA)为载体蛋白,通过与水溶性碳化二亚胺(EDC)的偶联反应,合成适当结合比、性能良好的2,4-D完全抗原,并制备了2,4-D的多克隆抗体.完全抗原合成方法为:在pH6、0.05mol/L... 以小分子环境污染物2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)为半抗原,牛血清蛋白(BSA)为载体蛋白,通过与水溶性碳化二亚胺(EDC)的偶联反应,合成适当结合比、性能良好的2,4-D完全抗原,并制备了2,4-D的多克隆抗体.完全抗原合成方法为:在pH6、0.05mol/L的磷酸盐缓冲溶液中进行偶联反应,2,4-D的最终浓度控制为12mg/mL,于4℃条件下反应18h,EDC的加入量控制在6~9mg之间.以结合比为16:1的完全抗原免疫新西兰白兔,获得了效价达到6.55×106兔抗血清.抗血清稀释2000倍,剂量-反应曲线在2,4-D浓度为0.5~2000mg/L的范围内线性度最好,相关系数R=0.9946.抗血清稀释8000和16000倍,2,4-D的检测范围为8μg/L^125mg/L,线性相关系数R分别为0.9352和0.9655.经过免疫检测条件的优化,制备的抗血清可以用于饮用水中2,4-D的检测. 展开更多

关键词 2 4-二氯苯氧乙酸 完全抗原 抗体 免疫检测

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玉米赤霉醇完全抗原的制备及质量鉴定 被引量：5

2

作者 胡骁飞 邓歌 +5 位作者 柴书军 姚静静 孙亚宁 王方雨 邓瑞广 张改平 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期637-645,共9页

旨在合成玉米赤霉醇(ZER)人工抗原,并用其免疫小鼠以获得含高滴度ZER多克隆抗体的小鼠血清,为ZER单克隆抗体的制备奠定基础。改造ZER第16位上的羟基,合成半抗原ZER-16-羧丙基丁醚,然后分别采用混合酸酐法和碳二亚胺(EDC)法将改造后的半... 旨在合成玉米赤霉醇(ZER)人工抗原,并用其免疫小鼠以获得含高滴度ZER多克隆抗体的小鼠血清,为ZER单克隆抗体的制备奠定基础。改造ZER第16位上的羟基,合成半抗原ZER-16-羧丙基丁醚,然后分别采用混合酸酐法和碳二亚胺(EDC)法将改造后的半抗原与载体蛋白BSA或OVA偶联,制备免疫原ZER-BSA和包被原ZER-OVA,并采用凝胶电泳、动物免疫对人工抗原进行质量鉴定,间接ELISA测定抗血清效价,间接竞争(阻断)ELISA测定抗血清的敏感性和特异性。结果表明,用制备的免疫原免疫小鼠血清效价均已达到1∶104以上。6号鼠的血清敏感性最高,对ZER的半数抑制质量浓度(IC50)达15.77ng/mL,获得的血清除与α-玉米赤霉醇特异性反应外,与其结构类似物β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮、玉米赤霉烯酮分别有12.5%、100%、12.5%、25%、100%的交叉反应,与其他霉菌毒素交叉反应性均小于0.5%。表明试验成功获得ZER人工抗原,通过动物免疫制备敏感性好、特异性强的ZER多克隆抗体,为ZER单克隆抗体的制备及其免疫学检测方法的建立奠定基础。 展开更多

关键词 玉米赤霉醇 完全抗原 多克隆抗体 ELISA

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己烯雌酚完全抗原的合成及分析 被引量：7

3

作者 王蓓 彭池方 胥传来 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第6期1523-1528,共6页

以己烯雌酚(DES)?氯乙酸钠(CH2ClCOONa)和牛血清蛋白(BSA)等为主要原料,首先用氯乙酸钠修饰DES分子中的一个酚羟基从而合成单羧甲醚己烯雌酚(DES-MCME),然后以混合酸酐法将DES-MCME与载体蛋白(BSA?OVA)偶联形成完全抗原,并以紫外扫描分... 以己烯雌酚(DES)?氯乙酸钠(CH2ClCOONa)和牛血清蛋白(BSA)等为主要原料,首先用氯乙酸钠修饰DES分子中的一个酚羟基从而合成单羧甲醚己烯雌酚(DES-MCME),然后以混合酸酐法将DES-MCME与载体蛋白(BSA?OVA)偶联形成完全抗原,并以紫外扫描分析完全抗原的偶联比率,再将得到的免疫原DES-BSA按免疫程序免疫新西兰白兔。结果表明己烯雌酚及其衍生物存在着顺反异构转化现象,极性有机溶剂的溶剂化作用促使顺反异构体的转化。高分辨质谱测得合成的DES-MCME相对分子质量为325。人工免疫原及包被原的最适结合比为13和10。采用间接酶联免疫测定,产生的抗血清的稀释度可以达到102400。从而建立了DES-MCME的制备方法,并通过高分辨质谱和ELISA检测方法验证了DES人工抗原的有效性,为研制DES残留免疫检测试剂盒奠定了基础。 展开更多

关键词 己烯雌酚 氯乙酸钠 牛血清蛋白 混合酸酐法 完全抗原 抗体

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除草剂2,4-D完全抗原的合成与鉴定 被引量：4

4

作者 于基成 刘秋 +2 位作者 赵娜 曹远银 范圣第 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第13期3791-3792,共2页

通过活化酯法和混合酸酐法,用牛血清蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）合成2,4-D免疫抗原和包被抗原,再分别采用紫外分光光度法和酶联免疫吸附法（ELISA）进行鉴定.结果是：2种方法合成的完全抗原中2,4-D和蛋白质的偶联比分别为24：1和17：1... 通过活化酯法和混合酸酐法,用牛血清蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）合成2,4-D免疫抗原和包被抗原,再分别采用紫外分光光度法和酶联免疫吸附法（ELISA）进行鉴定.结果是：2种方法合成的完全抗原中2,4-D和蛋白质的偶联比分别为24：1和17：1,抗血清效价为1.28×10^4～2.56×10^4. 展开更多

关键词 2 4-D 完全抗原 合成 鉴定 ELISA

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双酚A完全抗原的制备 被引量：4

5

作者 石春红 章银珠 +2 位作者 俞晔 孙秀兰 姚卫蓉 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期37-40,共4页

采用重氮化法在双酚A(BPA)上引入羧基,将其与牛血清白蛋白(BSA)偶联,制备双酚A完全抗原BPAH-BSA。紫外扫描光谱和红外光谱实验表明偶联成功,为进一步制备抗BPA抗体提供了良好的免疫原。

关键词 双酚A 完全抗原 牛血清白蛋白 紫外扫描光谱 红外光谱

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赭曲霉毒素A完全抗原的制备及鉴定 被引量：3

6

作者 周景明 李春革 +3 位作者 祁艳华 张罗莎 张改平 王爱萍 《动物医学进展》 北大核心 2016年第1期38-42,共5页

赭曲霉毒素A(OTA)是一种对人和动物具有广泛毒性的霉菌毒素,为建立OTA在食品和饲料中的快速检测方法,采用活性酯法(NHS)将OTA与牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,分别制备了免疫原OTA-BSA和包被原OTA-OVA。紫外扫描和SDS-PAGE... 赭曲霉毒素A(OTA)是一种对人和动物具有广泛毒性的霉菌毒素,为建立OTA在食品和饲料中的快速检测方法,采用活性酯法(NHS)将OTA与牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,分别制备了免疫原OTA-BSA和包被原OTA-OVA。紫外扫描和SDS-PAGE鉴定表明,OTA与BSA和OTA与OVA偶联成功,偶联物OTA-BSA和OTA-OVA的偶联比分别为7∶1和4.5∶1。用免疫原OTABSA免疫Balb/c小鼠,制备多克隆抗体,用OTA-OVA包被ELISA板进行检测,小鼠血清中抗OTA的抗体效价最高可达1∶51 200。表明制备的免疫原OTA-BSA具有良好的免疫原性,为OTA单克隆抗体的制备奠定了基础。 展开更多

关键词 赭曲霉毒素A 活性酯法 完全抗原 多克隆抗体

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盐酸克伦特罗完全抗原的合成及其偶联工艺的优化 被引量：9

7

作者 杨香瑜 黄鹤 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第2期355-359,共5页

为获取用于快速免疫分析的免疫抗原和包被抗原,本实验采用重氮化反应制备盐酸克伦特罗(Clenbuterol hydrochloride,CL)完全抗原,在强酸条件下CL先经重氮化,再与鸡卵清白蛋白(OVA)发生共价取代制备了盐酸克伦特罗包被抗原(OVA-CL),并以... 为获取用于快速免疫分析的免疫抗原和包被抗原,本实验采用重氮化反应制备盐酸克伦特罗(Clenbuterol hydrochloride,CL)完全抗原,在强酸条件下CL先经重氮化,再与鸡卵清白蛋白(OVA)发生共价取代制备了盐酸克伦特罗包被抗原(OVA-CL),并以正交实验确定了共价取代反应的关键影响因素,进一步采用单因素实验确定了反应所需的最佳条件,并通过紫外扫描对制得的包被抗原进行了鉴定。结果表明,投料比例是盐酸克伦特罗完全抗原合成的关键因素,搅拌转速和反应时间也起着至关重要的作用。而且偶联反应在1h内基本完成,延长反应时间对提高产物偶联比影响不大。当投料比例为30:1,pH值约为8,低速搅拌状况下,包被抗原和免疫抗原的偶联比分别高达29:1和48:1,盐酸克伦特罗完全抗原合成条件的优化筛选取得了预期的效果。 展开更多

关键词 盐酸克伦特罗 重氮化反应 完全抗原 偶联比

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青霉素钠完全抗原制备及其抗体水平检测 被引量：2

8

作者 杜军 贾芳 +1 位作者 张玉彦 周学章 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第2期193-196,共4页

利用戊二醛法偶联青霉素钠(Penicillin,PEN)与BSA和OVA,制备完全抗原PEN-BSA和PEN-OVA。经紫外扫描及SDS-PAGE电泳鉴定完全抗原PEN-BSA和PEN-OVA偶联成功,并进行动物免疫制备抗血清,建立间接ELISA法测定免疫血清效价,经测定抗原PEN-BSA... 利用戊二醛法偶联青霉素钠(Penicillin,PEN)与BSA和OVA,制备完全抗原PEN-BSA和PEN-OVA。经紫外扫描及SDS-PAGE电泳鉴定完全抗原PEN-BSA和PEN-OVA偶联成功,并进行动物免疫制备抗血清,建立间接ELISA法测定免疫血清效价,经测定抗原PEN-BSA和PEN-OVA均达到理想的免疫效价,为进一步制备青霉素钠单克隆抗体及其青霉素钠药物残留快速检测试剂盒奠定基础。 展开更多

关键词 青霉素钠 完全抗原 BSA OVA

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米诺环素完全抗原的制备与表征 被引量：2

9

作者 纪淑娟 郭德超 杜阿楠 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第21期305-308,共4页

研究制备能有效用于米诺环素(MNC)残留检测的完全抗原。采用戊二醛合成法和重氮化合成法,将米诺环素与牛血清白蛋白(BSA)偶联,分别制备MNC完全抗原MNC-BSA。经红外和紫外光谱扫描结果表明:两种物质已经偶联,两种完全抗原的平均偶联比分... 研究制备能有效用于米诺环素(MNC)残留检测的完全抗原。采用戊二醛合成法和重氮化合成法,将米诺环素与牛血清白蛋白(BSA)偶联,分别制备MNC完全抗原MNC-BSA。经红外和紫外光谱扫描结果表明:两种物质已经偶联,两种完全抗原的平均偶联比分别为9.9和5.9。采用戊二醛法合成的完全抗原免疫兔,检测抗血清效价为1:16000,表明合成的完全抗原可以作为免疫原用于制备抗体及检测时的包被原进行ELISA检测。 展开更多

关键词 米诺环素 牛血清白蛋白 偶联 完全抗原

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三聚氰胺半抗原及完全抗原的合成与鉴定 被引量：2

10

作者 林伊莱 张小燕 +2 位作者 施祖灏 王杏龙 高玉时 《中国家禽》 北大核心 2013年第9期31-35,共5页

本研究合成了三聚氰胺半抗原及完全抗原并鉴定合成是否成功,为制备三聚氰胺抗体奠定基础。将2-氯-4,6-二氨基-1,3,5-三嗪和3-巯基丙酸的反应合成半抗原3-(4,6-二氨基-1,3,5-三嗪-2-基硫代)丙酸,采用质谱鉴定和红外光谱鉴定;通过活性酯... 本研究合成了三聚氰胺半抗原及完全抗原并鉴定合成是否成功,为制备三聚氰胺抗体奠定基础。将2-氯-4,6-二氨基-1,3,5-三嗪和3-巯基丙酸的反应合成半抗原3-(4,6-二氨基-1,3,5-三嗪-2-基硫代)丙酸,采用质谱鉴定和红外光谱鉴定;通过活性酯法将半抗原分别与牛血清白蛋白、卵清蛋白进行偶联制备完全抗原,采用紫外光谱法初步鉴定,后经动物免疫进一步验证。结果表明半抗原与完全抗原合成成功,为后续的抗体制备奠定了基础。 展开更多

关键词 三聚氰胺 半抗原 完全抗原

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羧化孔雀石绿完全抗原的构建与鉴定 被引量：2

11

作者 周有祥 夏虹 +3 位作者 彭茂民 路磊 李书谦 胡定金 《湖北农业科学》 北大核心 2010年第10期2541-2544,2570,共5页

以对醛基苯甲酸和N,N-二甲基苯胺为原料,合成了羧化无色孔雀石绿和羧化孔雀石绿;通过薄层色谱分离纯化了合成产物,对各组分进行了高效液相色谱-质谱鉴定,结果表明m/z为375.2和373.2的碎片峰分别为羧化无色孔雀石绿的[M+H]+和羧化孔雀石... 以对醛基苯甲酸和N,N-二甲基苯胺为原料,合成了羧化无色孔雀石绿和羧化孔雀石绿;通过薄层色谱分离纯化了合成产物,对各组分进行了高效液相色谱-质谱鉴定,结果表明m/z为375.2和373.2的碎片峰分别为羧化无色孔雀石绿的[M+H]+和羧化孔雀石绿的[M]+准离子峰;将合成的羧化半抗原通过碳化二亚胺与阳离子化BSA偶联,制备完全抗原,经紫外-可见光谱分析计算,两种完全抗原中的羧化无色孔雀石绿和羧化孔雀石绿与BSA的摩尔比分别为9.2∶1和11.1∶1。完全抗原的成功构建为后续抗体制备奠定了物质基础。 展开更多

关键词 羧化无色孔雀石绿 羧化孔雀石绿 阳离子牛血清白蛋白 完全抗原

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阿莫西林完全抗原的合成与鉴定 被引量：1

12

作者 孙武勇 刘向辉 +3 位作者 屈凌波 李建军 王云龙 李斐菲 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第1期72-74,共3页

目的:制备阿莫西林完全抗原并鉴定。方法:采用碳二亚胺两步法将半抗原阿莫西林与牛血清白蛋白偶联制备免疫原,采用混合酸酐法将阿莫西林与卵清蛋白偶联制备ELISA包被原。采用紫外光谱分析和动物免疫试验鉴定偶联产物。结果与结论:紫外... 目的:制备阿莫西林完全抗原并鉴定。方法:采用碳二亚胺两步法将半抗原阿莫西林与牛血清白蛋白偶联制备免疫原,采用混合酸酐法将阿莫西林与卵清蛋白偶联制备ELISA包被原。采用紫外光谱分析和动物免疫试验鉴定偶联产物。结果与结论:紫外光谱分析和动物免疫试验证实阿莫西林抗原合成成功,该抗原可用于阿莫西林ELISA检测试剂盒的研制。 展开更多

关键词 阿莫西林 完全抗原 碳二亚胺法 氯甲酸异丁酯法

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己烯雌酚完全抗原的合成和多克隆抗体的制备 被引量：3

13

作者 曲志娜 刘爽 +8 位作者 路平 雷利辉 陈德坤 李葳 孙淑芳 张衍海 郑增忍 郭福生 蒋正军 《中国兽药杂志》 2005年第1期6-11,共6页

采用混合酸酐法 ,将己烯雌酚与牛血清白蛋白或卵清蛋白偶联形成完全抗原。经紫外分光光度计扫描鉴定 ,并通过聚丙烯酰胺电泳实验 ,推算出牛血清白蛋白与DES HS的结合比是 1∶2 5～ 1∶30。以己烯雌酚 -牛血清白蛋白为抗原免疫家兔 ,制... 采用混合酸酐法 ,将己烯雌酚与牛血清白蛋白或卵清蛋白偶联形成完全抗原。经紫外分光光度计扫描鉴定 ,并通过聚丙烯酰胺电泳实验 ,推算出牛血清白蛋白与DES HS的结合比是 1∶2 5～ 1∶30。以己烯雌酚 -牛血清白蛋白为抗原免疫家兔 ,制备出多克隆抗体 ,经酶联免疫吸附试验和琼脂扩散试验进行鉴定 ,并采用酶联免疫吸附方法进行效价测定 ,抗血清效价均超过了 1∶1 0 0 0 0。 展开更多

关键词 己烯雌酚 完全抗原 合成 多克隆抗体 制备 混合酸酐法 酶联免疫吸附测定法 雌激素

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黄曲霉毒素B_1完全抗原构建中结合位点研究 被引量：8

14

作者 孙秀兰 张银志 +1 位作者 汤坚 朱瑜 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期99-103,共5页

通过衍生化反应,合成了AFB1羧甲基活化物,然后利用碳二亚胺法合成AFB1-O-BSA偶联物,构建AFB1完全抗原,并通过多种光谱和质谱对合成完全抗原过程中偶联比和结合位点进行研究。通过荧光光谱在分子水平上探讨AFB1与BSA载体蛋白的偶联机制... 通过衍生化反应,合成了AFB1羧甲基活化物,然后利用碳二亚胺法合成AFB1-O-BSA偶联物,构建AFB1完全抗原,并通过多种光谱和质谱对合成完全抗原过程中偶联比和结合位点进行研究。通过荧光光谱在分子水平上探讨AFB1与BSA载体蛋白的偶联机制及偶联反应对BSA的构象影响,推测黄曲霉毒素和牛血清白蛋白反应的结合部位,同时发生在BSA的酪氨酸残基和色氨酸残基上,使得BSA疏水性增加,肽链伸展程度降低。 展开更多

关键词 黄曲霉毒素B1 完全抗原构建 结合位点

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泰妙菌素完全抗原制备及鉴定

15

作者 王爱萍 王新洲 +5 位作者 周景明 祁艳华 郑伟 栗宁 段倩倩 张改平 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期191-195,共5页

为建立泰妙菌素(Tiamulin,TML)完全抗原制备方法,分别用混合酸酐法(Mixed anhydride,MA)和N,N-羰基二咪唑法(1,1′-Carbonyldiimidazole,CDI)将半抗原泰妙菌素偶联至载体牛血清白蛋白(Bovine serum albumen,BSA),以制备泰妙菌素完全抗... 为建立泰妙菌素(Tiamulin,TML)完全抗原制备方法,分别用混合酸酐法(Mixed anhydride,MA)和N,N-羰基二咪唑法(1,1′-Carbonyldiimidazole,CDI)将半抗原泰妙菌素偶联至载体牛血清白蛋白(Bovine serum albumen,BSA),以制备泰妙菌素完全抗原。对2种方法制备的抗原进行紫外扫描鉴定和SDS-PAGE凝胶电泳鉴定,根据SDS-PAGE凝胶电泳图估算出完全抗原的偶联比。结果均显示抗原偶联成功,估算出的偶联比分别约为1∶23.6和1∶8.1,说明,混合酸酐法制备泰妙菌素完全抗原时偶联率更高。 展开更多

关键词 泰妙菌素 完全抗原 制备 鉴定

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双酯型乌头碱完全抗原的制备与鉴定

16

作者 陆辉 李晶 +2 位作者 左伟勇 王健 王永娟 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2014年第12期156-159,共4页

为制备双酯型乌头碱(DAC)的完全抗原,通过活化酯法将小分子的DAC偶联到牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA),合成免疫原DAC-BSA、检测原DAC-OVA,采用紫外扫描光谱法、BCA试剂盒法、酶联免疫吸附法(ELISA)鉴定偶联结果。结果表明,免疫... 为制备双酯型乌头碱(DAC)的完全抗原,通过活化酯法将小分子的DAC偶联到牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA),合成免疫原DAC-BSA、检测原DAC-OVA,采用紫外扫描光谱法、BCA试剂盒法、酶联免疫吸附法(ELISA)鉴定偶联结果。结果表明,免疫原和检测原均偶联成功;按100μg/只的剂量每2周免疫一次小鼠,共免疫5次,最后一次免疫4d后,眼眶静脉采血,测定多抗血清的效价均达到1∶25 600,且第2组小鼠多抗血清的敏感性最好,半数抑制浓度(IC50)为30ng/mL,最低检出限为1ng/mL,与其他药物的交叉反应率均小于1%,具有很好的特异性。成功合成了DAC人工抗原,并得到了敏感性高、特异性好的多抗血清。 展开更多

关键词 乌头碱 双酯型乌头碱 活化酯法 完全抗原 制备 鉴定

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氯吡脲完全抗原的合成与鉴定

17

作者 陆健康 周有祥 +1 位作者 李述刚 艾明艳 《湖北农业科学》 2016年第15期3945-3949,共5页

氯吡脲(Forchlorfenuron)是半抗原,只有将其与载体蛋白偶联形成完全抗原才能刺激机体产生抗体。以2-氯异烟酸为基础设计并合成了半抗原CPPU-H1和CPPU-H2,并采用活性酯法分别将其与载体蛋白偶联制备完全抗原;采用质谱和核磁共振对半抗原C... 氯吡脲(Forchlorfenuron)是半抗原,只有将其与载体蛋白偶联形成完全抗原才能刺激机体产生抗体。以2-氯异烟酸为基础设计并合成了半抗原CPPU-H1和CPPU-H2,并采用活性酯法分别将其与载体蛋白偶联制备完全抗原;采用质谱和核磁共振对半抗原CPPU-H1和CPPU-H2的结构进行分析,并用紫外光谱法和ELISA法对完全抗原进行鉴定。结果表明,半抗原CPPU-H1和CPPU-H2成功合成,且合成后的CPPU-H1-BSA和CPPU-H2-OVA具有吸收峰叠加效应,表明CPPU完全抗原合成成功,其偶联比分别为16.8∶1和22.3∶1;间接ELISA测定4次免疫后小鼠血清效价最高可达1∶25 600。CPPU完全抗原的制备为抗CPPU抗体的制备及免疫学方法的建立奠定了基础。 展开更多

关键词 氯吡脲 半抗原 完全抗原 鉴定

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土霉素完全抗原的制备及ELISA检测方法的建立 被引量：8

18

作者 曹金博 胡骁飞 +6 位作者 王耀 李燕虹 曹夕丹 邢云瑞 孙亚宁 邓瑞广 张改平 《食品与机械》 北大核心 2019年第9期77-83,共7页

为制备土霉素(Oxytetracycline,OTC)完全抗原,获得免疫学特性良好的土霉素鼠源多抗血清并建立OTC免疫学检测方法,采用重氮化法在OTC分子上引入羧基,进而利用改进碳二亚胺法将其与载体蛋白偶联制备完全抗原,通过红外扫描、紫外扫描和凝... 为制备土霉素(Oxytetracycline,OTC)完全抗原,获得免疫学特性良好的土霉素鼠源多抗血清并建立OTC免疫学检测方法,采用重氮化法在OTC分子上引入羧基,进而利用改进碳二亚胺法将其与载体蛋白偶联制备完全抗原,通过红外扫描、紫外扫描和凝胶电泳鉴定其偶联效果,然后将完全抗原免疫BLAB/c小鼠获得多抗血清(pAb)并对其免疫学特性进行鉴定,通过优化条件建立OTC间接竞争ELISA检测方法。结果表明,偶联效果良好,免疫的4只小鼠多抗血清效价均达到1 12 800;4只小鼠多抗血清均有抑制效果,其中2号小鼠产生的多抗血清效果最佳,基于该多抗血清建立的OTC间接竞争ELISA检测方法半数抑制浓度(IC 50)为32.92 ng/mL,检测限(LOD)为1.3 ng/mL,牛奶样品中添加回收率在84.70%~87.45%,与金霉素、四环素的交叉反应率分别为5.27%,4.10%,与其他竞争物交叉反应率<0.4%。该试验成功合成了OTC完全抗原,获得了免疫学特性良好的OTC多抗血清,并建立了OTC免疫学检测方法。 展开更多

关键词 土霉素 完全抗原 多抗血清 ELISA

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T-2毒素完全抗原制备及免疫学检测方法的建立 被引量：3

19

作者 郉云瑞 孙亚宁 +5 位作者 姚静静 王英华 郝慧芳 柴书军 李俊鹏 胡骁飞 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2018年第4期124-129,共6页

为建立小分子霉菌毒素中T-2毒素残留的检测方法,合成并鉴定T-2毒素完全抗原,通过制备敏感性强的抗T-2毒素多抗血清,建立T-2毒素免疫学检测方法。采用N,N'-羰基二咪唑(CDI)法合成完全抗原T-2-BSA和包被原T-2-OVA,采用聚丙烯酰胺凝胶... 为建立小分子霉菌毒素中T-2毒素残留的检测方法,合成并鉴定T-2毒素完全抗原,通过制备敏感性强的抗T-2毒素多抗血清,建立T-2毒素免疫学检测方法。采用N,N'-羰基二咪唑(CDI)法合成完全抗原T-2-BSA和包被原T-2-OVA,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)和动物免疫试验对合成的完全抗原进行鉴定,优化ELISA反应条件,建立T-2毒素间接竞争ELISA检测方法。SDS-PAGE结果显示,完全抗原T-2-BSA合成成功;动物试验结果显示,制备的完全抗原能够刺激小鼠产生针对T-2毒素的特异性抗体;基于该抗体所建立的T-2毒素间接竞争ELISA检测方法的灵敏度(IC50)为8.34 ng/m L,检测限(LOD)为0.048 ng/m L。综上,成功合成了完全抗原T-2-BSA,获得了效价高、敏感性强的抗T-2毒素的鼠源多克隆抗体,并初步建立了T-2毒素免疫学检测方法。 展开更多

关键词 T-2毒素 完全抗原 多克隆抗血清 ELISA

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土霉素完全抗原的制备与鉴定 被引量：3

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作者 徐桂连 代翠红 马莺 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期192-196,共5页

为了建立土霉素完全抗原的制备方法,实验以土霉素为半抗原,牛血清白蛋白(BSA)为载体蛋白,利用N,N,-二环己基碳化二亚胺(DCC)、邻联甲苯胺(o-tolidine)为偶联剂,将牛血清白蛋白与土霉素偶联制备土霉素人工完全抗原。通过偶联率的计算确... 为了建立土霉素完全抗原的制备方法,实验以土霉素为半抗原,牛血清白蛋白(BSA)为载体蛋白,利用N,N,-二环己基碳化二亚胺(DCC)、邻联甲苯胺(o-tolidine)为偶联剂,将牛血清白蛋白与土霉素偶联制备土霉素人工完全抗原。通过偶联率的计算确定邻联甲苯胺为最佳偶联剂。随后利用红外光谱分析和免疫原性测定实验鉴定了土霉素、牛血清白蛋白和邻联甲苯胺的偶联情况。结果表明,制得的土霉素完全抗原在免疫健康的Balb/c小鼠体内能刺激小鼠机体产生最高效价为25600(ELISA)的抗血清。 展开更多

关键词 土霉素 完全抗原 鉴定

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