除草剂2,4-D完全抗原的合成与鉴定 被引量：4

1

作者 于基成 刘秋 +2 位作者 赵娜 曹远银 范圣第 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第13期3791-3792,共2页

通过活化酯法和混合酸酐法,用牛血清蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）合成2,4-D免疫抗原和包被抗原,再分别采用紫外分光光度法和酶联免疫吸附法（ELISA）进行鉴定.结果是：2种方法合成的完全抗原中2,4-D和蛋白质的偶联比分别为24：1和17：1... 通过活化酯法和混合酸酐法,用牛血清蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）合成2,4-D免疫抗原和包被抗原,再分别采用紫外分光光度法和酶联免疫吸附法（ELISA）进行鉴定.结果是：2种方法合成的完全抗原中2,4-D和蛋白质的偶联比分别为24：1和17：1,抗血清效价为1.28×10^4～2.56×10^4. 展开更多

关键词 2 4-D 完全抗原 合成 鉴定 ELISA

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双酚A完全抗原的制备 被引量：4

2

作者 石春红 章银珠 +2 位作者 俞晔 孙秀兰 姚卫蓉 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期37-40,共4页

采用重氮化法在双酚A(BPA)上引入羧基,将其与牛血清白蛋白(BSA)偶联,制备双酚A完全抗原BPAH-BSA。紫外扫描光谱和红外光谱实验表明偶联成功,为进一步制备抗BPA抗体提供了良好的免疫原。

关键词 双酚A 完全抗原 牛血清白蛋白 紫外扫描光谱 红外光谱

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赭曲霉毒素A完全抗原的制备及鉴定 被引量：3

3

作者 周景明 李春革 +3 位作者 祁艳华 张罗莎 张改平 王爱萍 《动物医学进展》 北大核心 2016年第1期38-42,共5页

赭曲霉毒素A(OTA)是一种对人和动物具有广泛毒性的霉菌毒素,为建立OTA在食品和饲料中的快速检测方法,采用活性酯法(NHS)将OTA与牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,分别制备了免疫原OTA-BSA和包被原OTA-OVA。紫外扫描和SDS-PAGE... 赭曲霉毒素A(OTA)是一种对人和动物具有广泛毒性的霉菌毒素,为建立OTA在食品和饲料中的快速检测方法,采用活性酯法(NHS)将OTA与牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,分别制备了免疫原OTA-BSA和包被原OTA-OVA。紫外扫描和SDS-PAGE鉴定表明,OTA与BSA和OTA与OVA偶联成功,偶联物OTA-BSA和OTA-OVA的偶联比分别为7∶1和4.5∶1。用免疫原OTABSA免疫Balb/c小鼠,制备多克隆抗体,用OTA-OVA包被ELISA板进行检测,小鼠血清中抗OTA的抗体效价最高可达1∶51 200。表明制备的免疫原OTA-BSA具有良好的免疫原性,为OTA单克隆抗体的制备奠定了基础。 展开更多

关键词 赭曲霉毒素A 活性酯法 完全抗原 多克隆抗体

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青霉素钠完全抗原制备及其抗体水平检测 被引量：2

4

作者 杜军 贾芳 +1 位作者 张玉彦 周学章 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第2期193-196,共4页

利用戊二醛法偶联青霉素钠(Penicillin,PEN)与BSA和OVA,制备完全抗原PEN-BSA和PEN-OVA。经紫外扫描及SDS-PAGE电泳鉴定完全抗原PEN-BSA和PEN-OVA偶联成功,并进行动物免疫制备抗血清,建立间接ELISA法测定免疫血清效价,经测定抗原PEN-BSA... 利用戊二醛法偶联青霉素钠(Penicillin,PEN)与BSA和OVA,制备完全抗原PEN-BSA和PEN-OVA。经紫外扫描及SDS-PAGE电泳鉴定完全抗原PEN-BSA和PEN-OVA偶联成功,并进行动物免疫制备抗血清,建立间接ELISA法测定免疫血清效价,经测定抗原PEN-BSA和PEN-OVA均达到理想的免疫效价,为进一步制备青霉素钠单克隆抗体及其青霉素钠药物残留快速检测试剂盒奠定基础。 展开更多

关键词 青霉素钠 完全抗原 BSA OVA

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米诺环素完全抗原的制备与表征 被引量：2

5

作者 纪淑娟 郭德超 杜阿楠 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第21期305-308,共4页

研究制备能有效用于米诺环素(MNC)残留检测的完全抗原。采用戊二醛合成法和重氮化合成法,将米诺环素与牛血清白蛋白(BSA)偶联,分别制备MNC完全抗原MNC-BSA。经红外和紫外光谱扫描结果表明:两种物质已经偶联,两种完全抗原的平均偶联比分... 研究制备能有效用于米诺环素(MNC)残留检测的完全抗原。采用戊二醛合成法和重氮化合成法,将米诺环素与牛血清白蛋白(BSA)偶联,分别制备MNC完全抗原MNC-BSA。经红外和紫外光谱扫描结果表明:两种物质已经偶联,两种完全抗原的平均偶联比分别为9.9和5.9。采用戊二醛法合成的完全抗原免疫兔,检测抗血清效价为1:16000,表明合成的完全抗原可以作为免疫原用于制备抗体及检测时的包被原进行ELISA检测。 展开更多

关键词 米诺环素 牛血清白蛋白 偶联 完全抗原

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己烯雌酚完全抗原的合成和多克隆抗体的制备 被引量：3

6

作者 曲志娜 刘爽 +8 位作者 路平 雷利辉 陈德坤 李葳 孙淑芳 张衍海 郑增忍 郭福生 蒋正军 《中国兽药杂志》 2005年第1期6-11,共6页

采用混合酸酐法 ,将己烯雌酚与牛血清白蛋白或卵清蛋白偶联形成完全抗原。经紫外分光光度计扫描鉴定 ,并通过聚丙烯酰胺电泳实验 ,推算出牛血清白蛋白与DES HS的结合比是 1∶2 5～ 1∶30。以己烯雌酚 -牛血清白蛋白为抗原免疫家兔 ,制... 采用混合酸酐法 ,将己烯雌酚与牛血清白蛋白或卵清蛋白偶联形成完全抗原。经紫外分光光度计扫描鉴定 ,并通过聚丙烯酰胺电泳实验 ,推算出牛血清白蛋白与DES HS的结合比是 1∶2 5～ 1∶30。以己烯雌酚 -牛血清白蛋白为抗原免疫家兔 ,制备出多克隆抗体 ,经酶联免疫吸附试验和琼脂扩散试验进行鉴定 ,并采用酶联免疫吸附方法进行效价测定 ,抗血清效价均超过了 1∶1 0 0 0 0。 展开更多

关键词 己烯雌酚 完全抗原 合成 多克隆抗体 制备 混合酸酐法 酶联免疫吸附测定法 雌激素

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黄曲霉毒素B_1完全抗原构建中结合位点研究 被引量：8

7

作者 孙秀兰 张银志 +1 位作者 汤坚 朱瑜 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期99-103,共5页

通过衍生化反应,合成了AFB1羧甲基活化物,然后利用碳二亚胺法合成AFB1-O-BSA偶联物,构建AFB1完全抗原,并通过多种光谱和质谱对合成完全抗原过程中偶联比和结合位点进行研究。通过荧光光谱在分子水平上探讨AFB1与BSA载体蛋白的偶联机制... 通过衍生化反应,合成了AFB1羧甲基活化物,然后利用碳二亚胺法合成AFB1-O-BSA偶联物,构建AFB1完全抗原,并通过多种光谱和质谱对合成完全抗原过程中偶联比和结合位点进行研究。通过荧光光谱在分子水平上探讨AFB1与BSA载体蛋白的偶联机制及偶联反应对BSA的构象影响,推测黄曲霉毒素和牛血清白蛋白反应的结合部位,同时发生在BSA的酪氨酸残基和色氨酸残基上,使得BSA疏水性增加,肽链伸展程度降低。 展开更多

关键词 黄曲霉毒素B1 完全抗原构建 结合位点

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土霉素完全抗原的制备及ELISA检测方法的建立 被引量：8

8

作者 曹金博 胡骁飞 +6 位作者 王耀 李燕虹 曹夕丹 邢云瑞 孙亚宁 邓瑞广 张改平 《食品与机械》 北大核心 2019年第9期77-83,共7页

为制备土霉素(Oxytetracycline,OTC)完全抗原,获得免疫学特性良好的土霉素鼠源多抗血清并建立OTC免疫学检测方法,采用重氮化法在OTC分子上引入羧基,进而利用改进碳二亚胺法将其与载体蛋白偶联制备完全抗原,通过红外扫描、紫外扫描和凝... 为制备土霉素(Oxytetracycline,OTC)完全抗原,获得免疫学特性良好的土霉素鼠源多抗血清并建立OTC免疫学检测方法,采用重氮化法在OTC分子上引入羧基,进而利用改进碳二亚胺法将其与载体蛋白偶联制备完全抗原,通过红外扫描、紫外扫描和凝胶电泳鉴定其偶联效果,然后将完全抗原免疫BLAB/c小鼠获得多抗血清(pAb)并对其免疫学特性进行鉴定,通过优化条件建立OTC间接竞争ELISA检测方法。结果表明,偶联效果良好,免疫的4只小鼠多抗血清效价均达到1 12 800;4只小鼠多抗血清均有抑制效果,其中2号小鼠产生的多抗血清效果最佳,基于该多抗血清建立的OTC间接竞争ELISA检测方法半数抑制浓度(IC 50)为32.92 ng/mL,检测限(LOD)为1.3 ng/mL,牛奶样品中添加回收率在84.70%~87.45%,与金霉素、四环素的交叉反应率分别为5.27%,4.10%,与其他竞争物交叉反应率<0.4%。该试验成功合成了OTC完全抗原,获得了免疫学特性良好的OTC多抗血清,并建立了OTC免疫学检测方法。 展开更多

关键词 土霉素 完全抗原 多抗血清 ELISA

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环丙氨嗪完全抗原的合成及免疫原性鉴定 被引量：3

9

作者 郉云瑞 姚静静 +3 位作者 邢广旭 柴书军 孙亚宁 胡骁飞 《食品安全质量检测学报》 CAS 2018年第1期68-73,共6页

目的合成并鉴定环丙氨嗪(cyromazine,CA)人工抗原。方法采用碳二亚胺法(1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride,EDC)将环丙氨嗪与牛血清蛋白(bovine serum albumin,BSA)和鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA)分别偶联;采... 目的合成并鉴定环丙氨嗪(cyromazine,CA)人工抗原。方法采用碳二亚胺法(1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride,EDC)将环丙氨嗪与牛血清蛋白(bovine serum albumin,BSA)和鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA)分别偶联;采用紫外分光光度法(ultraviolet spectrophotometry,UV)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)和动物免疫对人工抗原进行鉴定。经过4次免疫,间接ELISA测定小鼠血清抗体效价,间接竞争ELISA测定血清灵敏性。结果 UV法和SDS-PAGE法结果初步显示半抗原环丙氨嗪和载体蛋白偶联成功;小鼠血清效价均在1:6400以上,2号小鼠多抗血清半数抑制浓度IC_(50)为27.5 ng/mL。结论本研究成功合成了环丙氨嗪的人工抗原,为环丙氨嗪单克隆抗体制备奠定基础。 展开更多

关键词 环丙氨嗪 完全抗原 多抗血清 酶联免疫吸附法

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土霉素完全抗原的制备与鉴定 被引量：3

10

作者 徐桂连 代翠红 马莺 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期192-196,共5页

为了建立土霉素完全抗原的制备方法,实验以土霉素为半抗原,牛血清白蛋白(BSA)为载体蛋白,利用N,N,-二环己基碳化二亚胺(DCC)、邻联甲苯胺(o-tolidine)为偶联剂,将牛血清白蛋白与土霉素偶联制备土霉素人工完全抗原。通过偶联率的计算确... 为了建立土霉素完全抗原的制备方法,实验以土霉素为半抗原,牛血清白蛋白(BSA)为载体蛋白,利用N,N,-二环己基碳化二亚胺(DCC)、邻联甲苯胺(o-tolidine)为偶联剂,将牛血清白蛋白与土霉素偶联制备土霉素人工完全抗原。通过偶联率的计算确定邻联甲苯胺为最佳偶联剂。随后利用红外光谱分析和免疫原性测定实验鉴定了土霉素、牛血清白蛋白和邻联甲苯胺的偶联情况。结果表明,制得的土霉素完全抗原在免疫健康的Balb/c小鼠体内能刺激小鼠机体产生最高效价为25600(ELISA)的抗血清。 展开更多

关键词 土霉素 完全抗原 鉴定

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牛乳中α-酪蛋白完全抗原的合成及多克隆抗体的制备 被引量：3

11

作者 褚晓红 周玉 +8 位作者 李岩松 孟星宇 张莹 卢士英 任洪林 胡盼 柳增善 王男男 李丹 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第2期75-78,共4页

为研制α-酪蛋白多克隆抗体,以商品化α-酪蛋白为基础,通过戊二醛法制备完全抗原:免疫原(α-酪蛋白-BSA)和检测原(α-酪蛋白-OVA)。通过变性与非变性PAGE电泳对完全抗原进行鉴定。免疫新西兰大白兔,获得针对α-酪蛋白的多克隆抗体,经初... 为研制α-酪蛋白多克隆抗体,以商品化α-酪蛋白为基础,通过戊二醛法制备完全抗原:免疫原(α-酪蛋白-BSA)和检测原(α-酪蛋白-OVA)。通过变性与非变性PAGE电泳对完全抗原进行鉴定。免疫新西兰大白兔,获得针对α-酪蛋白的多克隆抗体,经初步鉴定抗体效价为1∶256000,与κ-酪蛋白存在明显的交叉反应。本研究制备的多克隆抗体可用于检测牛乳中α-酪蛋白和κ-酪蛋白的总量。 展开更多

关键词 α-酪蛋白 完全抗原 多克隆抗体

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芴完全抗原和多克隆抗体制备与鉴定 被引量：1

12

作者 王男男 李岩松 +7 位作者 孟星宇 周玉 乔斌 孙宇 胡盼 卢士英 任洪林 柳增善 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第9期108-112,共5页

以9-芴乙酸(fluorene-9-aceticacid,FLU)为原料,经活性酯法合成完全抗原FLU-牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)和FLU-卵清白蛋白(ovalbumin,OVA),偶联产物通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及紫外扫描法鉴定。使用FLU-BSA足垫免疫BAL... 以9-芴乙酸(fluorene-9-aceticacid,FLU)为原料,经活性酯法合成完全抗原FLU-牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)和FLU-卵清白蛋白(ovalbumin,OVA),偶联产物通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及紫外扫描法鉴定。使用FLU-BSA足垫免疫BALB/c小鼠获得多克隆抗体,间接酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测得多克隆抗体效价为51 200,间接竞争ELISA方法测得芴多克隆抗体的特异性,与荧蒽的交叉反应率为12%,与其他14种多环芳烃交叉反应不明显。 展开更多

关键词 9-芴乙酸 完全抗原 多克隆抗体 酶联免疫吸附实验

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泰拉霉素完全抗原的合成和鉴定

13

作者 朱欣凤 张亦凡 +3 位作者 张银志 孙秀兰 王轶凡 李影 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期62-66,共5页

利用丁二酸酐法对泰拉霉素的羟基衍生化,引入游离羧基,合成泰拉霉素半抗原。采用活泼酯法将泰拉霉素半抗原分别与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,合成人工完全抗原泰拉霉素-BSA和泰拉霉素-OVA。利用LC-MS鉴定衍生化后半抗原... 利用丁二酸酐法对泰拉霉素的羟基衍生化,引入游离羧基,合成泰拉霉素半抗原。采用活泼酯法将泰拉霉素半抗原分别与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,合成人工完全抗原泰拉霉素-BSA和泰拉霉素-OVA。利用LC-MS鉴定衍生化后半抗原的合成,利用荧光光谱、考马斯亮法鉴定完全抗原的合成。用泰拉霉素-BSA免疫小鼠,采用间接ELISA法测定小鼠抗血清效价。泰拉霉素半抗原和BSA的偶联比为17∶1。三免后小鼠抗血清效价可达1∶8 000。 展开更多

关键词 泰拉霉素 完全抗原 ELISA 鉴定

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洛克沙胂完全抗原的制备及其单克隆抗体的研制 被引量：2

14

作者 刘红亮 王奇奇 +5 位作者 张改平 祁艳华 周景明 刘燕凯 马丽萍 王爱萍 《中国动物检疫》 CAS 2019年第2期97-102,共6页

本研究以洛克沙胂(ROX)的结构类似物3-氨基-4-羟基苯胂酸(HAPA)为小分子半抗原,采用碳二亚胺法,分别将其与载体蛋白——牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,制备免疫抗原HAPA-BSA和检测抗原HAPA-OVA。经紫外光谱扫描及聚丙烯酰... 本研究以洛克沙胂(ROX)的结构类似物3-氨基-4-羟基苯胂酸(HAPA)为小分子半抗原,采用碳二亚胺法,分别将其与载体蛋白——牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,制备免疫抗原HAPA-BSA和检测抗原HAPA-OVA。经紫外光谱扫描及聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定后,以20μg/只剂量的HAPA-BSA免疫BALB/c小鼠;选择血清效价高、敏感性强的小鼠,取脾脏进行细胞融合,制备杂交瘤细胞株。利用间接ELISA法筛选得到1株可以稳定分泌抗ROX单克隆抗体的细胞株,命名为G12;间接ELISA法测定其细胞上清效价为1:512,间接竞争ELISA测定其半数抑制浓度IC_(50)为3.147 ng/μL。经小鼠体内诱生腹水,辛酸-硫酸铵法纯化获得纯度较高的单克隆抗体,间接ELISA测定其效价为1:102 400,IC_(50)为1.433 ng/μL,且具有良好的特异性。本试验成功合成了ROX人工抗原,并制备了可以分泌高敏感性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,为ROX免疫学快速检测方法的建立奠定了基础。 展开更多

关键词 洛克沙胂 3-氨基-4羟基苯胂酸 完全抗原 碳二亚胺法 单克隆抗体

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半抗原直接包被的四环素酶联免疫吸附分析法的建立 被引量：1

15

作者 张玉超 刘良禹 +1 位作者 朱思洁 刘旭东 《食品研究与开发》 CAS 2024年第3期187-193,共7页

为建立更优的四环素(tetracycline,TC)酶联免疫吸附分析法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),将TC与蛋白质偶联制备人工完全抗原免疫BALB/c小鼠,获得抗TC的单克隆抗体(monoclonal antibody,MAb)。采用酸性高锰酸钾羧化酶标板,... 为建立更优的四环素(tetracycline,TC)酶联免疫吸附分析法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),将TC与蛋白质偶联制备人工完全抗原免疫BALB/c小鼠,获得抗TC的单克隆抗体(monoclonal antibody,MAb)。采用酸性高锰酸钾羧化酶标板,将TC直接包被在酶标板上,并对ELISA反应体系条件进行优化,构建一种半抗原直接包被的TC ELISA检测方法。所制备的MAb特异性良好,交叉反应率低。所构建的检测方法最低检测限IC_(10)值为0.306 ng/mL,半数抑制率IC_(50)值为9.26 ng/mL,牛奶和水中加标回收率分别为96.46%~101.89%、96.84%~102.50%。与人工完全抗原包被的检测方法相比(IC_(10)值:0.624 ng/mL,IC_(50)值:28.24 ng/mL,牛奶和水中加标回收率分别为93.86%~105.12%、94.04%~105.56%),检测灵敏度有明显提高,并可用于实际样品中TC含量的检测,具备良好的应用前景。 展开更多

关键词 四环素 半抗原包被 人工完全抗原 单克隆抗体 酶联免疫吸附分析法

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齐帕特罗人工抗原合成及其多克隆抗体制备 被引量：4

16

作者 郭东光 陈明艳 +14 位作者 冯春花 王丰 卞爽丽 李文明 王凯露 吕薇薇 郑文珺 陈子怡 孙国鹏 李雪华 田金河 李鹏 朱艳平 岳锋 王选年 《动物医学进展》 北大核心 2022年第5期6-12,共7页

为制备齐帕特罗(ZIL)完全抗原,获得抗ZIL多克隆抗体(pAb),将ZIL与4-溴丁酸乙酯反应后,采用EDC/NHS方法使ZIL-丁酸盐中间体与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA)进行偶联,分别用紫外全波长扫描(UV)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行... 为制备齐帕特罗(ZIL)完全抗原,获得抗ZIL多克隆抗体(pAb),将ZIL与4-溴丁酸乙酯反应后,采用EDC/NHS方法使ZIL-丁酸盐中间体与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA)进行偶联,分别用紫外全波长扫描(UV)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定后,通过免疫新西兰大白兔获得抗ZIL多抗血清,并对抗体效价、半数抑制浓度(IC_(50))和特异性进行鉴定。HPLC-MS检测结果显示,改造后的主产物分子质量为348.21 u,约占整个反应体系产物的92.23%,与ZIL-丁酸盐分子质量完全相符;SDS-PAGE电泳结果显示,BSA/OVA在电泳中的迁移速率明显大于偶联产物;UV结果显示,相比载体蛋白,偶联产物ZIL-BSA/OVA的特征吸收峰均发生了明显变化;ELISA效价检测结果表明,ZIL多抗血清效价在1∶6400以上,通过建立标准曲线测得IC_(50)分别为0.38 ng/mL和1.13 ng/mL,并且与沙丁胺醇(SAL)、特布他林(TBL)、溴布特罗(BRO)、西马特罗(CIM)、克仑特罗(CLB)、盐酸多巴胺(DH)、莱克多巴胺(RAC)、达氟沙星(DAN)、泰乐菌素(TYL)均不存在任何交叉反应。成功制备了ZIL完全抗原ZIL-BSA/OVA,获得了一种高灵敏度和高特异性的抗ZIL pAb,为后续建立ZIL免疫学快速检测方法奠定了基础。 展开更多

关键词 齐帕特罗 新型瘦肉精 半抗原 完全抗原 多克隆抗体

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多西环素人工抗原的合成与鉴定 被引量：3

17

作者 乐涛 严佩峰 +3 位作者 王喜亮 郭延成 沈亚安 毕丁仁 《中国兽药杂志》 2010年第1期30-34,55,共6页

将多西环素（doxycycline，DOX）进行化学修饰引入羧基或氨基等活性基团，然后与牛血清白蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）偶联合成人工免疫原DOX—PABA—BSA、DOX—BSA和包被原DOX—PABA—OVA、DOX～OVA，并用紫外吸收（UV）、凝胶电泳（... 将多西环素（doxycycline，DOX）进行化学修饰引入羧基或氨基等活性基团，然后与牛血清白蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）偶联合成人工免疫原DOX—PABA—BSA、DOX—BSA和包被原DOX—PABA—OVA、DOX～OVA，并用紫外吸收（UV）、凝胶电泳（SDS—PAGE）和EUSA方法对人工抗原进行鉴定；将合成的人工抗原DOX—PABA—BSA、DOX—BSA分别免疫BALB／C小鼠，用间接ELISA方法测定多抗（pAb）效价，用竞争ELISA方法鉴定其敏感性，用交叉反应试验鉴定其特异性。结果表明，二个免疫组6只小鼠血清抗体效价均在1：6400以上，DOXpAb对DOX的50％抑制浓度（IC50）在39．79～53．13μg/L，抗血清与四环素类药物交叉反应很低。本实验为建立多西环素ELISA残留免疫学检测方法和并制备多西环素试剂盒奠定了基础。 展开更多

关键词 多西环素 半抗原 完全抗原 合成 鉴定

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食品中残留已烯雌酚人工抗原的制备、分析与鉴定 被引量：1

18

作者 彭池方 胥传来 金征宇 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第10期46-49,共4页

采用LichrospherC-18柱,用甲醇和水为流动相,流速0.3ml/min,甲醇从60%～100%梯度洗脱25min,液质联用,电喷雾(ESI),对己烯雌酚及其衍生物己烯雌酚-单(双)-丁酸乙酯基-醚进行了分离和结构鉴定。以混合酸酐法将DES-MCPE与载体蛋白偶联形成... 采用LichrospherC-18柱,用甲醇和水为流动相,流速0.3ml/min,甲醇从60%～100%梯度洗脱25min,液质联用,电喷雾(ESI),对己烯雌酚及其衍生物己烯雌酚-单(双)-丁酸乙酯基-醚进行了分离和结构鉴定。以混合酸酐法将DES-MCPE与载体蛋白偶联形成完全抗原,并以紫外扫描分析了完全抗原的偶联比率。结果表明:在极性溶剂中,己烯雌酚和其衍生物存在着顺反异构转化现象,极性有机溶剂的溶剂化作用促使顺反异构体的转化。计算DES-MCPE-BSA偶联比率为10。 展开更多

关键词 液质联用 分离 己烯雌酚 完全抗原

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展青霉素人工抗原的制备与鉴定 被引量：2

19

作者 王欣然 聂虹霞 +8 位作者 李岩松 谭彩云 胡盼 冯小丽 任洪林 郭一平 周玉 柳增善 卢士英 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第7期14-20,共7页

为探讨展青霉素(patulin,PAT)不同抗原合成方法对完全抗原制备及抗体产生的影响,本试验利用琥珀酸酐联合活泼酯法,分别制备免疫原PAT-BSA和包被原PAT-OVA。为提高PAT与偶联蛋白的结合率,尝试将BSA修饰为EDA-BSA后与PAT进行偶联,并对比2... 为探讨展青霉素(patulin,PAT)不同抗原合成方法对完全抗原制备及抗体产生的影响,本试验利用琥珀酸酐联合活泼酯法,分别制备免疫原PAT-BSA和包被原PAT-OVA。为提高PAT与偶联蛋白的结合率,尝试将BSA修饰为EDA-BSA后与PAT进行偶联,并对比2种偶联方法制备的完全抗原免疫动物后抗血清的效价水平。同时利用琼脂糖凝胶电泳、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、凝胶渗透色谱多种方法分析鉴定偶联结果,为PAT单克隆抗体的制备及免疫学检测方法的建立奠定了基础。 展开更多

关键词 展青霉素 偶联 鉴定 完全抗原

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高效液相色谱与质谱联用法分离与鉴定己烯雌酚合成抗原的研究 被引量：2

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作者 朱东辉 胥传来 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第12期199-201,共3页

采用LichrospherC-18柱,用甲醇和水为流动相,流速0.3ml/min,甲醇从60%～100%梯度洗脱25min,液质联用,电喷雾(ESI),对己烯雌酚及其衍生物己烯雌酚-单(双)-丁酸乙酯基-醚进行了分离和结构鉴定。以混合酸酐法将DES-MCPE与载体蛋白偶联形成... 采用LichrospherC-18柱,用甲醇和水为流动相,流速0.3ml/min,甲醇从60%～100%梯度洗脱25min,液质联用,电喷雾(ESI),对己烯雌酚及其衍生物己烯雌酚-单(双)-丁酸乙酯基-醚进行了分离和结构鉴定。以混合酸酐法将DES-MCPE与载体蛋白偶联形成完全抗原,并以紫外扫描分析了完全抗原的偶联比率。结果表明:在极性溶剂中,己烯雌酚和其衍生物存在着顺反异构转化现象,极性有机溶剂的溶剂化作用促使顺反异构体的转化。计算DES-MCPE-BSA偶联比率为10。 展开更多

关键词 液质联用 分离 己烯雌酚 完全抗原

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