亚精胺对人子宫内膜基质细胞自噬和炎症细胞因子表达的影响

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作者 张雪 米旭光 +4 位作者 林秀英 付建华 刘磊 高心月 方艳秋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1023-1029,共7页

目的:探讨克罗米芬(CC)对子宫内膜基质细胞(hEndoSCs)的损伤作用,并研究亚精胺对受损子宫内膜基质细胞自噬和炎症细胞因子表达的影响。方法:实验分为对照组、亚精胺组、克罗米芬组(CC组)、CC+亚精胺组。MTT法检测hEndoSCs与不同浓度CC... 目的:探讨克罗米芬(CC)对子宫内膜基质细胞(hEndoSCs)的损伤作用,并研究亚精胺对受损子宫内膜基质细胞自噬和炎症细胞因子表达的影响。方法:实验分为对照组、亚精胺组、克罗米芬组(CC组)、CC+亚精胺组。MTT法检测hEndoSCs与不同浓度CC或亚精胺共同孵育24 h后细胞的存活率;流式细胞技术检测4组细胞内活性氧(ROS)含量和细胞凋亡水平。Western blot检测自噬途径相关蛋白ULK1、p-ULK1、LC-3Ⅱ和凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved-caspase 3的表达。采用RT-qPCR检测IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA表达量。结果:与对照组相比,CC组细胞存活率下降,细胞凋亡率、ROS含量、Bax、Cleaved-caspase 3表达量升高,Bcl-2表达量降低,自噬相关蛋白p-ULK1、LC-3Ⅱ/Ⅰ水平降低,炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA表达升高(P<0.01)。与对照组相比,亚精胺组细胞的存活率无明显变化(P>0.05)。与CC组相比,CC+亚精胺组细胞存活率显著提高,细胞凋亡率、ROS含量、Bax和Cleaved-caspase 3表达量降低,Bcl-2表达量升高,自噬相关蛋白p-ULK1、LC-3Ⅱ/Ⅰ表达升高,炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA表达降低(P<0.01)。结论:CC能够抑制子宫内膜基质细胞增殖,促进细胞凋亡,提高炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α的转录水平。亚精胺可通过激活细胞自噬,降低CC损伤的子宫内膜基质细胞胞内ROS水平,提高细胞存活率,并抑制炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α表达。 展开更多

关键词 亚精胺 子宫内膜基质细胞 炎症 自噬 细胞凋亡 克罗米芬

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人脐带间充质干细胞培养上清对米非司酮处理的人子宫内膜基质细胞存活、凋亡和子宫内膜容受性的影响 被引量：1

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作者 武梦雪 陈士玲 +4 位作者 刘艳 米旭光 林秀英 付建华 方艳秋 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期79-87,共9页

目的:探讨人脐带间充质干细胞培养上清(hUCMSCs-Sup)对米非司酮(Ms)处理的人子宫内膜基质细胞(hEndoSCs)增殖、凋亡和子宫内膜容受性的影响,并阐明其可能的作用机制。方法:体外培养hEndoSCs,分为对照组和40、60、80及100μmol·L-1... 目的:探讨人脐带间充质干细胞培养上清(hUCMSCs-Sup)对米非司酮(Ms)处理的人子宫内膜基质细胞(hEndoSCs)增殖、凋亡和子宫内膜容受性的影响,并阐明其可能的作用机制。方法:体外培养hEndoSCs,分为对照组和40、60、80及100μmol·L-1 Ms组,MTT法检测各组细胞存活率。hEndoSCs分为对照组、40μmol·L-1 Ms组和60μmol·L-1 Ms组,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤2 (Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平并计算Bcl-2/Bax比值。hUCMSCs-Sup作用后,hEndoSCs分为对照组、Ms组、Ms+hUCMSCs-Sup组和Ms+hUCMSCs-Sup+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组,MTT法检测各组细胞存活率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中微管相关蛋白1轻链3B-Ⅱ(LC3B-Ⅱ)和微管相关蛋白1轻链3B-Ⅰ(LC3B-Ⅰ)蛋白表达水平并计算LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值,实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测各组细胞中子宫内膜容受性标志分子mRNA表达水平。结果:与对照组比较,40、60、80和100μmol·L-1 Ms组细胞存活率明显降低(P<0.05),且具有时间和剂量依赖性。与对照组比较,40和60μmol·L-1 Ms组细胞凋亡率明显升高(P<0.05),细胞中Bcl-2/Bax比值明显降低(P<0.05)。hUCMSCs-Sup作用后,与对照组比较,Ms组细胞存活率和细胞中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值明显降低(P<0.05),细胞凋亡率明显升高(P<0.05),细胞中同源框基因A10 (HOXA10)、白血病抑制因子(LIF)和整合素亚基β3 (ITGB3) mRNA表达水平明显降低(P<0.05);与Ms组比较,Ms+hUCMSCs-Sup组细胞存活率和细胞中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值明显升高(P<0.05),细胞凋亡率明显降低(P<0.05),细胞中HOXA10、LIF和ITGb3 mRNA表达水平表达明显升高(P<0.05);与Ms+hUCMSCs-Sup组比较,Ms+hUCMSCs-Sup+3-MA组细胞存活率和细胞中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值明显降低(P<0.05)。结论:hUCMSCs-Sup可提高Ms处理后hEndoSCs的存活率,降低其凋亡率,提高子宫内膜容受性,其机制可能与hUCMSCs-Sup激活hEndoSCs自噬有关。 展开更多

关键词 脐带间充质干细胞 人子宫内膜基质细胞 细胞凋亡 细胞自噬 子宫内膜容受性

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氟苯尼考影响子宫内膜基质细胞蜕膜化的功能研究

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作者 何佳仪 代德贤 +3 位作者 李伟轲 高茹菲 王应雄 龙菁 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期838-843,共6页

目的:探究氟苯尼考(florfenicol,FLO)暴露对蜕膜化的影响及线粒体在其中发挥的作用。方法:构建FLO暴露的原代小鼠蜕膜基质细胞(mouse decidual stromal cells,mDSCs)模型,经FLO(1.56、6.25、25.00μg/mL)暴露后,采用鬼笔环肽染色法观察... 目的:探究氟苯尼考(florfenicol,FLO)暴露对蜕膜化的影响及线粒体在其中发挥的作用。方法:构建FLO暴露的原代小鼠蜕膜基质细胞(mouse decidual stromal cells,mDSCs)模型,经FLO(1.56、6.25、25.00μg/mL)暴露后,采用鬼笔环肽染色法观察细胞形态变化,采用Western blot检测蜕膜化标志分子HOXA10表达以分析FLO对蜕膜化的影响;采用流式细胞术检测细胞凋亡,采用Western blot检测细胞增殖标志分子PCNA表达以分析FLO对蜕膜化过程中细胞增殖、凋亡的影响;采用荧光探针Mito-tracker Red观察线粒体形态,采用免疫荧光检测线粒体外膜标志蛋白TOMM20表达并检测ATP水平以分析FLO对蜕膜基质细胞线粒体功能的影响。结果:25.00μg/mL FLO暴露导致细胞形态异常,蜕膜化标志分子HOXA10表达降低(P=0.002),细胞凋亡水平增加,细胞增殖能力降低;进一步发现FLO暴露后线粒体外膜标志蛋白TOMM20表达降低(P=0.010)、线粒体形态异常和ATP水平降低(P=0.003)。结论:25.00μg/mLFLO暴露可能与线粒体功能打破mDSCs的细胞增殖、凋亡平衡,损伤蜕膜化进程有关。 展开更多

关键词 氟苯尼考 蜕膜化 子宫内膜基质细胞 线粒体

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滋养细胞分泌14-3-3 τ蛋白对子宫内膜基质细胞表达整合素α_vβ_3蛋白的影响 被引量：5

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作者 程琰 胡蓉 +1 位作者 马开东 李笑天 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期505-509,共5页

目的探讨滋养细胞分泌14-3-3τ蛋白对子宫内膜基质细胞容受性分子整合素αvβ3表达的影响。方法RNA干扰技术下调人绒癌滋养细胞株Be Wo细胞14-3-3τ蛋白的表达。Western blot法检测Be Wo细胞及培养液中14-3-3τ蛋白的表达。建立14-3-3... 目的探讨滋养细胞分泌14-3-3τ蛋白对子宫内膜基质细胞容受性分子整合素αvβ3表达的影响。方法RNA干扰技术下调人绒癌滋养细胞株Be Wo细胞14-3-3τ蛋白的表达。Western blot法检测Be Wo细胞及培养液中14-3-3τ蛋白的表达。建立14-3-3τ蛋白表达下调的Be Wo细胞与人子宫内膜基质细胞(endometrial stromal cells,ESC)的共培养体系,Western blot法检测共培养体系培养液中14-3-3τ蛋白的表达,以及ESC容受性分子整合素αvβ3的表达变化。结果与si RNA阴性对照组相比,特异性si RNA显著下调Be Wo细胞和培养液中14-3-3τ蛋白的表达(P<0.05)。共培养体系中,与si RNA阴性对照组相比,与14-3-3τ蛋白表达下调的Be Wo细胞共培养的ESC整合素αvβ3的表达显著上调(P<0.05),提示ESC容受性增加。与单独培养的ESC相比,培养液中添加14-3-3τ重组蛋白的ESC培养24 h后整合素αvβ3的表达显著下调(P<0.05),提示ESC容受性降低。结论14-3-3τ蛋白可以被滋养细胞分泌至细胞外,并可能发挥调控ESC容受性的作用,但其作用机制仍需进一步研究。 展开更多

关键词 14-3—3 ι蛋白 αvβ3细胞 子宫内膜基质细胞 容受性 共培养

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lncRNA HAND2-AS1通过调节miR-21表达对子宫内膜异位症患者子宫内膜基质细胞迁移和侵袭的抑制作用 被引量：5

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作者 苗卉 苗聪秀 +1 位作者 李娜 韩晶 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期733-741,共9页

目的:探讨子宫内膜异位症(EMT)患者子宫内膜组织中长链非编码RNAs(lncRNAs)HAND2-AS1对异位子宫内膜(EC)组织中子宫内膜基质细胞(ESCs)增殖、迁移和侵袭能力的影响,并阐明其可能机制。方法:收集30例EMT患者(EMT组)的EC组织和30例健康育... 目的:探讨子宫内膜异位症(EMT)患者子宫内膜组织中长链非编码RNAs(lncRNAs)HAND2-AS1对异位子宫内膜(EC)组织中子宫内膜基质细胞(ESCs)增殖、迁移和侵袭能力的影响,并阐明其可能机制。方法:收集30例EMT患者(EMT组)的EC组织和30例健康育龄女性(对照组)的子宫内膜组织,分离子宫内膜组织获取ESCs。采用脂质体转染法转染EMT患者EC组织的ESCs,并将ESCs分为pcDNA组(转染pcDNA空质粒)、HAND2-AS1组(转染HAND2-AS1过表达质粒)、mimic NC组(转染mimic NC)、miR-21 mimic组(转染miR-21 mimic)、pcDNA+mimic NC组(联合转染pcDNA和mimic NC)、HAND2-AS1+mimic NC组(联合转染HAND2-AS1过表达质粒和mimic NC)、pcDNA+miR-21 mimic组(联合转染pcDNA空质粒和miR-21 mimic)和HAND2-AS1+miR-21 mimic组(联合转染HAND2-AS1过表达质粒和miR-21 mimic),另设未转染的细胞为空白对照组。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组研究对象子宫内膜组织和ESCs中HAND2-AS1 mRNA和miR-21表达水平,采用Pearson相关系数分析其相关性。采用生物信息学软件Starbase预测lncRNA HAND2-AS1与miR-21的靶向作用关系,荧光素酶基因报告实验进行验证。CCK-8法检测各组ESCs增殖活性,Transwell小室实验检测ESCs的迁移和侵袭数。结果:2组研究对象年龄、体质量指数(BMI)和血清中卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)及催乳素(PRL)水平比较差异均无统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,EMT组患者血清中雌二醇(E2)水平升高(P<0.05),EMT组患者EC组织中HAND2-AS1 mRNA表达水平降低(P<0.05),miR-21表达水平升高(P<0.05);与对照组比较,EMT组ESCs中HAND2-AS1 mRNA表达水平降低(P<0.05),miR-21表达水平明显升高(P<0.01)。Pearson相关系数分析,对照组研究对象HAND2-AS1与miR-21表达水平无明显相关性(r=0.34,P>0.05),EMT组患者ES组织中和ESCs中HAND2-AS1与miR-21表达水平呈负相关关系(r=-0.57,P<0.05)。RT-qPCR法检测,与空白对照组比较,HAND2-AS1组ESCs中HAND2-AS1 mRNA表达水平明显升高(P<0.01),miR-21 mimic组ESCs中miR-21表达水平明显升高(P<0.01),HAND2-AS1+mimic NC组ESCs中miR-21表达水平降低(P<0.05),pcDNA+miR-21 mimic组ESCs中miR-21表达水平明显升高(P<0.01);与pcDNA+miR-21 mimic组比较,HAND2-AS1+miR-21 mimic组ESCs中miR-21表达水平降低(P<0.05)。lncRNA HAND2-AS1与miR-21存在潜在结合位点;双荧光素酶基因报告实验,与mimic NC组比较,miR-21 mimic组HAND2-AS1-WT中荧光素酶活性明显降低(P<0.01)。与空白对照组比较,HAND2-AS1+mimic NC组ESCs增殖活性、迁移和侵袭数均明显降低(P<0.05或P<0.01),pcDNA+miR-21 mimic组ESCs增殖活性、迁移和侵袭数升高(P<0.05);与pcDNA+miR-21 mimic组比较,HAND2-AS1+miR-21 mimic组ESCs增殖活性、迁移和侵袭数均降低(P<0.05)。结论:HAND2-AS1在EMT患者EC组织和ESCs中表达明显降低,其可通过靶向抑制miR-21表达下调EC组织中ESCs的增殖、迁移和侵袭,从而参与EMT的发生发展。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 异位子宫内膜 长链非编码RNA HAND2-AS1 MIR-21 子宫内膜基质细胞 细胞迁移 细胞侵袭

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子宫蓄脓犬与健康犬子宫内膜基质细胞的分离比较 被引量：2

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作者 周朋洋 靳涛 +1 位作者 杜淼 马文芝 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第6期158-161,共4页

通过分离子宫蓄脓犬与健康犬子宫内膜基质细胞,观察其生长特性并对其进行细胞免疫荧光鉴定,分析比较该细胞在病犬中是否异常。结果显示,轻度子宫蓄脓犬和健康犬的子宫内膜基质细胞形态和特性基本一致,前者的细胞活性更强,增殖速度较快,... 通过分离子宫蓄脓犬与健康犬子宫内膜基质细胞,观察其生长特性并对其进行细胞免疫荧光鉴定,分析比较该细胞在病犬中是否异常。结果显示,轻度子宫蓄脓犬和健康犬的子宫内膜基质细胞形态和特性基本一致,前者的细胞活性更强,增殖速度较快,可在接种后4d融合成片,细胞多数呈梭形,少数呈多角状。经细胞免疫荧光鉴定,该细胞表达波形蛋白,阳性率98%以上。结果表明本试验所分离的细胞为犬子宫内膜基质细胞,该细胞在轻度子宫蓄脓犬和健康犬中无明显变化。 展开更多

关键词 犬 子宫蓄脓 子宫内膜基质细胞 免疫荧光

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SLP-2调控人子宫内膜基质细胞细胞系T-HESC的增殖和分化

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作者 冯倩 刘学庆 +7 位作者 张雪 兰曦 耿艳清 陈雪梅 高茹菲 何俊琳 王应雄 丁裕斌 《重庆医科大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第8期936-941,共6页

目的:研究stomatin样蛋白2(stomatin-like protein 2,SLP-2)对人子宫内膜基质细胞系T-HESC的增殖和分化的调控作用。方法:培养子宫内膜基质细胞系T-HESC,体外诱导蜕膜化,RT-q PCR、Western blot和免疫荧光方法检测SLP-2在体外诱导蜕膜... 目的:研究stomatin样蛋白2(stomatin-like protein 2,SLP-2)对人子宫内膜基质细胞系T-HESC的增殖和分化的调控作用。方法:培养子宫内膜基质细胞系T-HESC,体外诱导蜕膜化,RT-q PCR、Western blot和免疫荧光方法检测SLP-2在体外诱导蜕膜化模型中的表达变化以及蜕膜化标志分子催乳素(prolactin,PRL)、胰岛素样生长因子结合蛋白1(insulin like growth factor binding protein 1,IGFBP1)和Desmin的表达。转染特异性SLP-2干扰小RNA(si RNA),敲低SLP-2的表达,分析敲低SLP-2表达对基质细胞增殖和分化(蜕膜化)的影响。结果:体外诱导蜕膜化条件下,诱导蜕膜化标志物IGFBP1和PRL的表达明显增加;Desmin显著表达于在体外诱导蜕膜化的细胞中;SLP-2表达明显升高。在蜕膜化细胞中转染SLP-2 si RNA敲低SLP-2表达,蜕膜化行为受到显著抑制;细胞增殖标志分子CCND3表达明显下降,细胞增殖降低。结论:SLP-2的表达可影响人子宫内膜基质细胞细胞系T-HESC的增殖和分化。 展开更多

关键词 Stomatin样蛋白2 胚胎植入 蜕膜化 子宫内膜基质细胞

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山羊子宫内膜基质细胞永生化研究 被引量：9

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作者 盛宏霞 吴庆侠 +2 位作者 靳亚平 秦新喜 董海龙 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期818-823,共6页

将真核表达质粒pCI-neo-hTERT通过DNA转染技术导入山羊子宫内膜基质细胞（ESCs）,筛选稳定转染的细胞克隆,进行表型鉴定、生长特性及E2、P4等性腺激素的反应性测定。结果,传至2代的山羊ESCs经转染pCI-neo-hTERT,G418筛选2~3周后,抗性克... 将真核表达质粒pCI-neo-hTERT通过DNA转染技术导入山羊子宫内膜基质细胞（ESCs）,筛选稳定转染的细胞克隆,进行表型鉴定、生长特性及E2、P4等性腺激素的反应性测定。结果,传至2代的山羊ESCs经转染pCI-neo-hTERT,G418筛选2~3周后,抗性克隆形成,滤纸片法转移,扩增并连续培养,共获得5个细胞克隆,扩大培养后的细胞呈典型的长梭形和三角形,相互平行排列成束,与原代培养形态一致。转染后细胞有较高的端粒酶活性,细胞增殖加速,传代时间缩短,传至50代仍稳定增殖。波形蛋白检测阳性,角蛋白检测阴性,具有转染前山羊子宫内膜基质细胞特性。雌激素（100 nmol.L-1）和少量孕激素（10 nmol.L-1）对转染后基质细胞增殖有促进作用。获得了永生化的ESCs,为子宫内膜细胞体外研究奠定了基础。 展开更多

关键词 山羊 子宫内膜基质细胞 永生化细胞

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miR-151-3p在子宫内膜异位症组织中的表达及其对子宫内膜基质细胞迁移和侵袭的影响 被引量：5

9

作者 谢震 赵健 +3 位作者 吴娟 王雅丽 马丽霞 赵彩粉 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2023年第5期456-462,共7页

目的分析miR-151-3p在子宫内膜异位症(EMS)患者子宫内膜组织中的表达水平及其对子宫内膜基质细胞(ESCs)迁移和侵袭的影响。方法收集87份EMS患者的在位子宫内膜组织(eEMS组)和异位子宫内膜组织(nEMS组),同时收集47份因子宫肌瘤等良性妇... 目的分析miR-151-3p在子宫内膜异位症(EMS)患者子宫内膜组织中的表达水平及其对子宫内膜基质细胞(ESCs)迁移和侵袭的影响。方法收集87份EMS患者的在位子宫内膜组织(eEMS组)和异位子宫内膜组织(nEMS组),同时收集47份因子宫肌瘤等良性妇科疾病进行手术治疗的患者正常子宫内膜组织作为对照组,qRT-PCR法检测各组患者子宫内膜组织中miR-151-3p的表达水平。分离、鉴定、培养人ESCs细胞,再将miR-151-3p mimics、mimics NC、miR-151-3p inhibitors和inhibitors NC分别转染至ESCs细胞中,采用qRT-PCR检测各组细胞中miR-151-3p表达水平;CCK-8检测细胞增殖能力;Transwell检测细胞侵袭与迁移能力;Western blot检测各组细胞MMP-2和MMP-9以及上皮-间充质转化(EMT)标记物E-cadherin、N-cadherin和Vimentin等蛋白表达水平。利用在线miRNA靶基因预测网站对miR-151-3p下游靶基因进行预测,并结合PPI分析筛选关键靶基因。结果eEMS组(0.79±0.21)和nEMS组(0.62±0.15)miR-151-3p表达水平均显著低于对照组(1.02±0.17),差异有统计学意义(P<0.05),其中nEMS组最低。miR-151-3p过表达可显著上调ESCs细胞中miR-151-3p表达水平,抑制细胞增殖及迁移和侵袭能力,并下调MMP-2、MMP-9、N-cadherin和Vimentin等蛋白表达水平,上调E-cadherin蛋白表达水平(P<0.05);而抑制miR-151-3p表达显著降低ESCs细胞中miR-151-3p表达水平,促进细胞增殖、迁移和侵袭,并上调MMP-2、MMP-9、N-cadherin和Vimentin等蛋白表达水平,降低E-cadherin蛋白表达水平(P<0.05)。通过数据库预测出miR-151-3p下游34个交集靶基因,结合PPI分析筛选出4个关键靶基因:RC3H1、AGO2、AGO3和FXR1。结论MiR-151-3p可能在EMS患者的nEMS组织中低表达,其过表达可抑制ESCs细胞的迁移和侵袭。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 miR-151-3p 子宫内膜基质细胞 增殖 侵袭 上皮-间充质转化

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玉米赤霉烯酮诱导山羊子宫内膜基质细胞凋亡的研究 被引量：9

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作者 王宗捷 张瑞雪 +2 位作者 刘守勤 靳亚平 林鹏飞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期535-542,共8页

玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)是由镰刀菌产生的一种霉菌毒素,具有细胞毒性和雌激素活性,会对生殖系统、泌尿系统和消化系统等产生严重毒性影响。目前,ZEN对山羊子宫内膜基质细胞(endometrial stromal cells,ESCs)凋亡的潜在作用仍不... 玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)是由镰刀菌产生的一种霉菌毒素,具有细胞毒性和雌激素活性,会对生殖系统、泌尿系统和消化系统等产生严重毒性影响。目前,ZEN对山羊子宫内膜基质细胞(endometrial stromal cells,ESCs)凋亡的潜在作用仍不清楚。本研究通过体外培养山羊永生化ESCs,采用CCK-8和流式细胞术检测ZEN对山羊ESCs增殖和凋亡的影响;应用Real-time PCR和Western blot技术检测内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)和凋亡关键基因的变化,探讨ZEN是否通过ERS影响山羊ESCs的增殖与凋亡。结果显示,ZEN抑制了山羊ESCs的增殖过程并呈剂量依赖性关系。随着ZEN剂量的增加,山羊ESCs的凋亡比例显著上升。ZEN剂量依赖性地上调了Caspase-8、Caspase-9及Bax/Bcl-2 mRNA表达水平。ZEN显著上调了ERS标志分子GRP78和CHOP mRNA和蛋白的表达水平,同时,ERS关键分子ATF6、PERK和IRE1 mRNA表达水平显著增加,并且ZEN对IRE1通路的影响更为显著。添加ERS特异性抑制剂4-PBA和IRE1特异性抑制剂Irestatin 9389均可显著降低ZEN对ESCs增殖的抑制作用。综上表明,ZEN可以通过ERS通路调控山羊ESCs的凋亡进程。 展开更多

关键词 玉米赤霉烯酮 子宫内膜基质细胞 细胞凋亡 内质网应激 山羊

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小鼠子宫内膜基质细胞中HOXA10调控DNM1L表达机制的研究 被引量：1

11

作者 肖成 胡进 +4 位作者 纪红军 牛亚茹 焦建桥 戴玉健 徐银学 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1023-1029,共7页

[目的]本文旨在研究转录因子同源框A10基因(HOXA10)结合动力蛋白基因(DNM1L)启动子区域绑定位点,并调控DNM1L基因的表达机制。[方法]通过转录因子网站(TFSITESCAN)预测DNM1L启动子区域存在HOXA10的结合位点。分离怀孕1~7 d的小鼠子宫内... [目的]本文旨在研究转录因子同源框A10基因(HOXA10)结合动力蛋白基因(DNM1L)启动子区域绑定位点,并调控DNM1L基因的表达机制。[方法]通过转录因子网站(TFSITESCAN)预测DNM1L启动子区域存在HOXA10的结合位点。分离怀孕1~7 d的小鼠子宫内膜,采用RT-q PCR检测其HOXA10和DNM1L mRNA表达量的变化规律。结合HOXA10过表达和siRNA干扰试验,分析小鼠子宫内膜基质细胞中HOXA10 mRNA表达量的变化如何影响DNM1L表达。构建DNM1L野生型和绑定位点突变型启动子区域(-1 749^-2 033 bp)荧光素酶报告载体,分别与HOXA10过表达载体和siRNA共转染到小鼠3T3细胞,检测DNM1L启动子区荧光素酶活性值变化。[结果]网站(TFSITESCAN)预测DNM1L在转录起始位点上游-1 767 bp的位置存在HOXA10转录结合位点。HOXA10 mRNA表达量在怀孕4 d小鼠的子宫内膜中达到峰值,DNM1L mRNA表达量则在怀孕3 d时达到峰值。HOXA10过表达和siRNA干扰试验结果表明:基质细胞中HOXA10表达量升高或降低能相对应降低或提高DNM1L表达水平(P<0.01)。双荧光素酶活性试验结果表明:HOXA10过表达载体和siRNA分别与野生型DNM1L报告载体共转染细胞,前者荧光活性值极显著下降,后者荧光活性值极显著上升(P<0.01)。突变型DNM1L报告载体对荧光活性值无明显影响(P>0.05)。[结论]HOXA10可结合于DNM1L启动子区域,并调控DNM1L基因表达。 展开更多

关键词 同源框A10基因(HOXA10) 动力蛋白基因(DNM1L) 小鼠子宫内膜基质细胞

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miR-34a-5p靶向AKT1基因对子宫内膜异位症子宫内膜基质细胞侵袭及自噬的调控 被引量：9

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作者 刘敏娟 邓月秀 马颖 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期776-782,共7页

目的研究微小RNA-34a-5p(miR-34a-5p)靶向AKT1基因对子宫内膜异位症(EM)子宫内膜基质细胞(ESCs)侵袭及自噬的调控作用。方法原代分离、培养EM患者ESCs,构建negative control RNA(NC)及mimic细胞模型,采用双荧光肾素酶报告系统验证miR-34... 目的研究微小RNA-34a-5p(miR-34a-5p)靶向AKT1基因对子宫内膜异位症(EM)子宫内膜基质细胞(ESCs)侵袭及自噬的调控作用。方法原代分离、培养EM患者ESCs,构建negative control RNA(NC)及mimic细胞模型,采用双荧光肾素酶报告系统验证miR-34a-5p与AKT1基因存在结合位点,RT-PCR及Western blotting检测并验证2组细胞miR-34a-5p和AKT1基因的表达及调控关系;检测miR-34a-5p对ESCs的增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响。结果EM患者ESCs中miR-34a-5p较非EM患者明显降低,而AKT1基因的表达明显升高,且两者变化呈负相关;miR-34a-5p通过特异性结合AKT1基因的3’UTR区对AKT1基因的表达进行调控;转染miR-34a-5p mimic可使ESCs中miR-34a-5p表达升高,AKT1基因表达降低,同时使ESCs的增殖、迁移及侵袭能力增强,而凋亡及自噬能力下降。结论miR-34a-5p靶向AKT1基因促进ESCs的增殖、迁移及侵袭能力,降低其凋亡及自噬能力,可能在EM的发病过程中发挥作用。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 微小RNA-34a-5p AKT1基因 子宫内膜基质细胞

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孕酮对子宫蓄脓犬子宫内膜基质细胞增殖的影响 被引量：1

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作者 郭松扬念 常仁旭 +2 位作者 陈指龙 刘进辉 杨青 《动物医学进展》 北大核心 2023年第4期20-24,共5页

旨在研究子宫蓄脓对犬子宫内膜基质细胞(endometrial stromal cells,ESCs)增殖的影响及孕酮(progesterone,P_(4))的干预作用。收集健康犬和经腹部B超确诊患子宫蓄脓犬的子宫,采用胶原酶消化法分离ESCs,并通过细胞免疫荧光检测进行鉴定;... 旨在研究子宫蓄脓对犬子宫内膜基质细胞(endometrial stromal cells,ESCs)增殖的影响及孕酮(progesterone,P_(4))的干预作用。收集健康犬和经腹部B超确诊患子宫蓄脓犬的子宫,采用胶原酶消化法分离ESCs,并通过细胞免疫荧光检测进行鉴定;采用CCK-8法检测培养不同时间后两种ESCs的细胞活力及孕酮作用的影响。结果显示,胶原酶消化法可分离获得高纯度的犬ESCs;将分离的ESCs培养24 h和48 h时,子宫蓄脓犬ESCs的细胞活力显著高于健康犬(P<0.01)。用0、5、15、30 ng/mL等不同浓度P_(4)处理两种ESCs,当作用24 h时,两种细胞的活力与相应的对照比均无显著变化(P>0.05);作用48 h时,30 ng/mL的P_(4)可显著促进健康犬ESCs的增殖(P<0.01),而对子宫蓄脓犬ESCs的增殖具有显著的抑制作用(P<0.05);作用72 h时,3种浓度P_(4)均显著促进健康犬ESCs的增殖(P<0.01),但对子宫蓄脓犬ESCs的增殖均无显著影响(P>0.05)。以上结果表明,子宫蓄脓犬ESCs的快速增殖可能与子宫内膜的囊性增生密切相关,P_(4)可促进健康犬ESCs的增殖,但在一定程度上抑制子宫蓄脓犬ESCs的增殖。 展开更多

关键词 犬子宫蓄脓 子宫内膜基质细胞 孕酮

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甲硫脑啡肽通过阿片受体促进脂多糖作用下奶牛子宫内膜基质细胞的增殖

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作者 孙雯叶 李建基 +3 位作者 王亨 董俊升 李俊 崔璐莹 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期1229-1239,共11页

为明确甲硫脑啡肽(Met-enkephalin,MENK)调控原代奶牛子宫内膜基质细胞(bovine endometrial stromal cell,BESC)增殖的作用机制,采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、MENK和阿片受体拮抗剂共处理细胞进行了本试验。本研究使用的阿片受... 为明确甲硫脑啡肽(Met-enkephalin,MENK)调控原代奶牛子宫内膜基质细胞(bovine endometrial stromal cell,BESC)增殖的作用机制,采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、MENK和阿片受体拮抗剂共处理细胞进行了本试验。本研究使用的阿片受体拮抗剂包括非选择性阿片受体拮抗剂纳洛酮(naloxone,Nx)、δ阿片受体拮抗剂ICI 154129和μ阿片受体拮抗剂CTAP,分组情况:空白对照组,LPS处理组,LPS与MENK(10-10mol·L^(-1))共处理组(LM组),LPS、MENK和阿片受体拮抗剂(Nx、CTAP和ICI 154129,均为10-10mol·L^(-1))共处理组以及LPS与阿片受体拮抗剂共处理组。检测细胞活性、细胞周期、细胞增殖相关因子基因表达以及Wnt/β-catenin和PI3K/AKT相关通路变化。结果表明:阿片受体拮抗剂单独或与LPS共处理细胞24 h,对细胞活力无影响(P>0.05)。与LM组相比,LPS、MENK和Nx共处理组(LMN组)以及LPS、MENK和ICI 154129共处理组(LMI组)的G1期相对细胞数升高(P<0.05),LMN组以及LPS、MENK和CTAP共处理组(LMC组)S期相对细胞数降低(P<0.05)。与LM组相比,LMN组和LMI组细胞CCN2、TGFB1和TGFB3基因表达下调(P<0.01),LMC组细胞CCN2基因表达下调(P<0.01)。与LM组相比,LMN组cyclinD1和GSK-3β蛋白表达上调(P<0.05),LMI组细胞β-catenin和GSK-3β蛋白表达上调(P<0.01),LMC组细胞cyclinD1蛋白表达上调(P<0.05);与LM组相比,LMN组、LMI组和LMC组AKT磷酸化水平升高(P<0.05)。以上结果说明,μ阿片受体和δ阿片受体均参与MENK对BESC的促增殖作用。 展开更多

关键词 甲硫脑啡肽 奶牛子宫内膜基质细胞 阿片受体 阿片受体拮抗剂 细胞增殖

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敲减TCF3抑制人子宫内膜基质细胞蜕膜化的研究

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作者 卫晓薇 田福举 +3 位作者 刘晓瑞 曾维宏 陈彩莲 林羿 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1247-1257,共11页

目的·探讨转录因子3(transcription factor 3,TCF3)对人子宫内膜基质细胞(human endometrial stromal cell,HESC)蜕膜化功能的影响。方法·用8-溴腺苷3’,5’-环腺苷酸(8-bromoadenosine 3’,5’-cyclic adenosine monophospha... 目的·探讨转录因子3(transcription factor 3,TCF3)对人子宫内膜基质细胞(human endometrial stromal cell,HESC)蜕膜化功能的影响。方法·用8-溴腺苷3’,5’-环腺苷酸(8-bromoadenosine 3’,5’-cyclic adenosine monophosphate,8-Br-cAMP)和醋酸甲羟孕酮(medroxy progesterone acetate,MPA)方案在体外诱导HESC蜕膜化。用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默TCF3基因,实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和Western blotting验证TCF3的敲减效率。RT-qPCR和酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测蜕膜化标志物胰岛素样生长因子结合蛋白1(insulin like growth factor binding protein 1,IGFBP1)和催乳素(prolactin,PRL)的表达水平。Alexa Fluor标记的鬼笔环肽染色检测HESC蜕膜化后及敲减TCF3后细胞形态的变化。将HESC分为3组,分别为未蜕膜化+NC(转染对照siRNA)组、蜕膜化4 d+NC组、蜕膜化4 d+siTCF3(转染TCF3 siRNA)组,进行RNA测序;对测序结果进行聚类分析、京都基因与基因组数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)分析和基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)以探究TCF3调节HESC蜕膜化功能的作用机制,并采用qPCR对测序结果进行验证。结果·在HESC蜕膜化2 d和4 d后,TCF3的表达水平逐渐升高。蜕膜化2 d和4 d,ELISA和RT-qPCR结果均显示敲减TCF3后蜕膜化标志物IGFBP1和PRL的表达水平较NC组下降。鬼笔环肽染色结果表明,蜕膜化后细胞从纤细长梭形结构转变为大而圆的细胞形态,而在敲减TCF3后,细胞形态又恢复成长梭形结构。测序结果表明蜕膜化4 d和敲减TCF3后差异基因主要富集在细胞因子-细胞因子受体通路,GSEA分析验证了这一结果。RT-qPCR结果验证了敲减TCF3调节多种细胞因子的表达,如下调白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL1B)、白细胞介素-1受体1(interleukin-1 receptor type 1,IL1R1)和集落刺激因子1(colony stimulating factor 1,CSF1)。结论·下调TCF3表达可能通过调节细胞因子LIF、IL-6、IL1B、IL1R1和CSF1的表达来抑制HESC蜕膜化。 展开更多

关键词 人子宫内膜基质细胞 转录因子3 蜕膜化 细胞因子

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脐带间充质干细胞外泌体对子宫内膜基质细胞氧化损伤和炎症因子表达的影响

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作者 王琳 米旭光 +7 位作者 林秀英 付建华 刘磊 王爱乔 杜茜 张文琦 范美娇 方艳秋 《中国免疫学杂志》 2025年第9期2153-2160,共8页

目的:探讨脐带间充质干细胞外泌体(hUCMSCs-Exo)对双酚AF(BPAF)诱导的子宫内膜基质细胞(hESCs)氧化损伤和炎症因子释放的影响。方法:将hESCs分为Control组、BPAF组(25μmol/L BPAF处理)、BPAF+Exo组(25μmol/L BPAF+hUCMSCs-Exo处理)、B... 目的:探讨脐带间充质干细胞外泌体(hUCMSCs-Exo)对双酚AF(BPAF)诱导的子宫内膜基质细胞(hESCs)氧化损伤和炎症因子释放的影响。方法:将hESCs分为Control组、BPAF组(25μmol/L BPAF处理)、BPAF+Exo组(25μmol/L BPAF+hUCMSCs-Exo处理)、BPAF+Exo+LY组(25μmol/L BPAF+hUCMSCs-Exo+10μmol/L LY294002处理)。MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡、胞内ROS水平以及线粒体膜电位水平;Western blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved-caspase-3及PI3K/AKT信号通路蛋白表达;RT-qPCR检测炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA表达。结果:与对照组相比,随着BPAF(≥25μmol/L)浓度升高,hESCs存活率逐渐降低(P<0.01),细胞凋亡率逐渐升高。与对照组相比,BPAF组ROS水平升高,线粒体膜电位水平下降,Bax、Cleaved-caspase-3蛋白表达明显增多,Bcl-2、p-PI3K、p-AKT蛋白表达明显减少。与BPAF组相比,BPAF+Exo组细胞存活率升高(P<0.01),ROS水平降低,线粒体膜电位水平升高,Bax、Cleaved-caspase-3蛋白表达减少,Bcl-2、p-PI3K、p-AKT蛋白表达增加。与BPAF+Exo组相比,BPAF+Exo+LY组细胞Bax、Cleaved-caspase-3蛋白表达增加,Bcl-2、p-PI3K、p-AKT蛋白表达减少。与对照组相比,BPAF组炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA表达明显上调(P<0.01),与BPAF组相比,BPAF+Exo组炎症因子mRNA表达明显下调(P<0.05)。结论:BPAF(≥25μmol/L)可抑制hESCs增殖,促进细胞凋亡,hUCMSCs-Exo通过PI3K/AKT信号通路抑制BPAF诱导的hESCs氧化损伤和炎症因子表达。 展开更多

关键词 子宫内膜基质细胞 外泌体 内分泌干扰物 磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白激酶B 炎症因子

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双酚A对子宫内膜间充质干/基质细胞干性的影响及人脐带间充质干细胞源性上清对细胞损伤的改善作用

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作者 王爱乔 米旭光 +7 位作者 林秀英 付建华 刘磊 王琳 张文琦 邓玲 陈士玲 方艳秋 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1557-1564,共8页

目的:探讨双酚A(BPA)对子宫内膜间充质干/基质细胞(eMSCs)增殖活性和干性特征的影响,阐明人脐带间充质干细胞源性上清(hUCMSC-Sup)对细胞损伤的改善作用。方法:体外培养eMSCs,以0、200、250、300、350、400μmol·L^(-1)BPA处理。将... 目的:探讨双酚A(BPA)对子宫内膜间充质干/基质细胞(eMSCs)增殖活性和干性特征的影响,阐明人脐带间充质干细胞源性上清(hUCMSC-Sup)对细胞损伤的改善作用。方法:体外培养eMSCs,以0、200、250、300、350、400μmol·L^(-1)BPA处理。将eMSCs分为对照组(仅培养液培养)、BPA组(含200μmol·L^(-1)BPA的等体积培养液培养)、BPA+hUCMSC-Sup组(含200μmol·L^(-1)BPA及50%体积比hUCMSC-Sup的等体积培养液培养)和BPA+CHIR-99021组(含200μmol·L^(-1)BPA及10μmol·L^(-1)CHIR-99021的等体积培养液培养),使用干细胞成球培养液培养eMSCs干细胞球,其余细胞均使用DMEM/F12完全培养基培养。噻唑蓝(MTT)法检测各组eMSCs存活率,球体形成实验检测各组eMSCs干细胞球数和直径,CCK-8法检测各组eMSCs干细胞球中细胞增殖活性,流式细胞术检测各组eMSCs中CD73+细胞百分率,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组eMSCs中性别决定区Y框蛋白2(Sox2)、八聚体结合转录因子4(Oct4)和Nanog mRNA表达水平,Western blotting法检测各组eMSCs中β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达水平。结果:MTT法检测,BPA作用24和48 h,与0μmol·L^(-1)BPA组比较,200、250、300、350和400μmol·L^(-1)BPA组eMSCs存活率均明显降低(P<0.01)。药物作用24 h时,与对照组比较,BPA组eMSCs存活率明显降低(P<0.01);药物作用48 h时,与对照组比较,BPA组eMSCs存活率明显降低(P<0.01);与BPA组比较,BPA+hUCMSC-Sup组eMSCs存活率明显升高(P<0.05)。球体形成实验检测,与培养3 d组比较,培养4和5 d组eMSCs干细胞球数和直径均明显增加(P<0.05或P<0.01);与对照组比较,培养48 h时BPA组eMSCs干细胞球数和直径均明显减少(P<0.05或P<0.01)。CCK-8法检测,处理24和48 h时,与对照组比较,BPA组eMSCs干细胞球中细胞增殖活性均明显降低(P<0.01);与BPA组比较,BPA+hUCMSC-Sup组eMSCs干细胞球中细胞增殖活性均明显升高(P<0.01)。流式细胞术检测,与对照组比较,BPA组eMSCs中CD73+细胞百分率明显降低(P<0.01);与BPA组比较,BPA+hUCMSC-Sup组eMSCs中CD73+细胞百分率明显升高(P<0.01)。RT-qPCR法检测,与对照组比较,BPA组eMSCs中Sox2、Oct4和Nanog mRNA表达水平均明显降低(P<0.01);与BPA组比较,BPA+hUCMSC-Sup组和BPA+CHIR-99021组eMSCs中Sox2、Oct4及Nanog mRNA表达水平均明显升高(P<0.01)。Western blotting法检测,与对照组比较,BPA组eMSCs中β-catenin蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与BPA组比较,BPA+hUCMSC-Sup组和BPA+CHIR-99021组eMSCs中β-catenin蛋白表达水平均明显升高(P<0.01)。结论:BPA能够抑制eMSCs的干性特征,损伤子宫内膜的自我更新及修复作用,其机制可能与下调细胞中Wnt/β-catenin信号通路活性有关。hUCMSC-Sup可以促进受损eMSCs的增殖,并对BPA诱导的eMSCs干性损伤起到改善作用。 展开更多

关键词 双酚A 子宫内膜间充质干/基质细胞 人脐带间充质干细胞 干细胞球

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H9胚胎干细胞源细胞外囊泡促进子宫内膜损伤修复的研究

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作者 陈芷琪 马靖 +5 位作者 姜咏竹 马官荣 杨邦亚 王斓茜 方廖琼 王智彪 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1497-1504,共8页

目的:探究H9人胚胎干细胞(H9-hESCs)细胞外囊泡(EVs)对子宫内膜损伤修复的影响。方法:从H9-hESCs培养上清中提取EVs并鉴定。建立小鼠子宫内膜损伤模型,将其双侧子宫分为EVs实验组和PBS对照组,分别进行EVs和PBS注射,HE染色观察子宫内膜... 目的:探究H9人胚胎干细胞(H9-hESCs)细胞外囊泡(EVs)对子宫内膜损伤修复的影响。方法:从H9-hESCs培养上清中提取EVs并鉴定。建立小鼠子宫内膜损伤模型,将其双侧子宫分为EVs实验组和PBS对照组,分别进行EVs和PBS注射,HE染色观察子宫内膜组织病理学变化、免疫组化法分析增殖细胞核抗原(PCNA)表达情况。通过EdU法、Western blot法评估EVs对人子宫内膜基质细胞(hEndoSCs)增殖的影响。结果:H9-hESCs-EVs是粒径为(144.7±2.1)nm并且具有膜结构的纳米小体,表达CD63和TSG101特征蛋白。与PBS组相比,EVs实验组子宫内膜组织形态完整、厚度及腺体数量增加,EVs实验组PCNA表达的平均光密度较PBS组显著升高(P<0.05)。EdU、Western blot检测结果显示H9-hESCs-EVs促进hEndoSCs增殖,且与EVs呈现蛋白浓度正相关(P<0.05)。结论:H9-hESCs-EVs通过提高子宫内膜基质细胞增殖促进子宫内膜损伤修复。 展开更多

关键词 胚胎干细胞 细胞外囊泡 子宫内膜 子宫内膜基质细胞 细胞增殖

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甲基化转移酶抑制剂BIX01294促进小鼠子宫基质细胞迁移、抑制基质细胞蜕膜化 被引量：1

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作者 廖晖淇 田鎏 +3 位作者 杨慧 马妮 张昌军 刁红录 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期730-736,共7页

目的探讨甲基化转移酶抑制剂BIX01294(BIX)对小鼠子宫内膜基质细胞迁移和蜕膜化过程的作用和影响。方法取妊娠第3.5天小鼠子宫分离培养得小鼠子宫内膜基质细胞,采用细胞划痕运动分析、体外诱导小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化模型及Real-tim... 目的探讨甲基化转移酶抑制剂BIX01294(BIX)对小鼠子宫内膜基质细胞迁移和蜕膜化过程的作用和影响。方法取妊娠第3.5天小鼠子宫分离培养得小鼠子宫内膜基质细胞,采用细胞划痕运动分析、体外诱导小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化模型及Real-time PCR方法分别从形态学和分子生物学角度观察BIX对小鼠子宫内膜基质细胞迁移及蜕膜化的影响。结果在一定浓度范围内(BIX≤15μmol/L),小鼠子宫内膜基质细胞的迁移距离随着BIX浓度的升高而增加,与对照组相比,BIX 15μmol/L处理组基质细胞的迁移距离增加最明显,差异具有统计学意义,当BIX浓度提高到20μmol/L时,细胞迁移距离增加不明显,且此时开始出现细胞的死亡;与对照组相比,BIX处理24 h组小鼠子宫内膜基质细胞Ehmt2 m RNA表达显著下调(P<0.01);并且15μmol/L BIX能够抑制小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化反应。结论一定浓度范围的BIX通过抑制Ehmt2m RNA在基质细胞中的表达促进小鼠子宫内膜基质细胞的迁移,并且对小鼠子宫基质细胞的蜕膜化过程有抑制作用。 展开更多

关键词 子宫内膜基质细胞 迁移 蜕膜化 BIX01294 组蛋白甲基化

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家兔子宫内膜细胞和平滑肌细胞的分离培养及鉴定 被引量：7

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作者 李瑞梅 陈秀荔 +1 位作者 王海滨 靳亚平 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2007年第6期19-23,共5页

为了建立一种高效的子宫细胞分离培养方法,用酶消化、过滤、离心与差速贴壁纯化相结合的方法分离培养家兔子宫细胞,分别以上皮细胞角蛋白、波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白等为抗原的免疫荧光对分离培养的细胞进行鉴定,并采用流式细胞仪分... 为了建立一种高效的子宫细胞分离培养方法,用酶消化、过滤、离心与差速贴壁纯化相结合的方法分离培养家兔子宫细胞,分别以上皮细胞角蛋白、波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白等为抗原的免疫荧光对分离培养的细胞进行鉴定,并采用流式细胞仪分析细胞纯度。结果表明,家兔子宫内膜上皮细胞培养24 h后大部分贴壁,培养3 d左右形成单层细胞集落,呈角蛋白阳性,细胞圆形或椭圆形,胞质呈红色,核呈蓝色,纯度达96%以上;子宫内膜基质细胞培养0.5 h后即有贴壁,培养2 d后呈单层细胞集落状生长,呈波形蛋白阳性,细胞多边形或梭形,胞质呈红色,核呈蓝色,纯度达95%以上;平滑肌细胞培养24 h后大部分贴壁,6-7 d融合成片,呈α-平滑肌肌动蛋白阳性,细胞大都长梭形,胞质呈红色,核呈蓝色,纯度达98%以上。说明该方法能够成功分离并得到高产量、高纯度、高增殖能力的子宫内膜细胞及平滑肌细胞。 展开更多

关键词 动物细胞培养 子宫内膜上皮细胞 子宫内膜基质细胞 子宫平滑肌细胞 家兔

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