双重荧光逆转录-聚合酶链式反应与荧光逆转录-重组酶介导等温扩增快速检测食源性GⅠ型、GⅡ型诺如病毒

1

作者 邓迎春 郭旭光 +3 位作者 牛会敏 任宝红 韩小改 郭瑞 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第12期151-157,共7页

目的建立双重荧光逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)与荧光逆转录-重组酶介导等温扩增(reverse transcription recombinase-aided amplification,RT-RAA)快速有效地检测食品中食源性GⅠ型... 目的建立双重荧光逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)与荧光逆转录-重组酶介导等温扩增(reverse transcription recombinase-aided amplification,RT-RAA)快速有效地检测食品中食源性GⅠ型和GⅡ型诺如病毒的方法。方法根据GⅠ型、GⅡ型诺如病毒基因组保守序列设计引探,经过一系列引探浓度筛选,建立了双重荧光RT-PCR和恒温荧光RT-RAA两种检测方法,分别从敏感性、特异性、稳定性、重复性等方面进行了比较研究;同时将这两种方法应用于实际临床样本检测中,并与GB4789.42—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验诺如病毒检验》进行比对验证。结果建立的两种方法特异性良好,敏感性均可达10 copies/μL;双重荧光RT-PCR方法质粒梯度变异系数(coefficient of variation,CV)值在0.1%~1.5%区间,恒温荧光RT-RAA方法CV值在1.0%~10.0%区间,稳定性和重复性显示双重荧光RT-PCR优于恒温荧光RT-RAA检测方法;31份诺如病毒阳性食品核酸样本均能检出,且50份食品盲样检测结果与国标一致。结论本研究成功建立了双重荧光RT-PCR与恒温荧光RT-RAA快速检测食源性GⅠ型、GⅡ型诺如病毒方法,两种方法各有优缺点,双重荧光RT-PCR稳定性和重复性好,恒温荧光RT-RAA检测时间短,仅20 min就能完成扩增,可根据不同需求选择一种或两种作为食源性GⅠ型、GⅡ型诺如病毒的检测方法。 展开更多

关键词 荧光逆转录-聚合酶链式反应 恒温荧光逆转录-重组酶介导等温扩增 GⅠ型诺如病毒 GⅡ型诺如病毒

在线阅读 下载PDF 职称材料

逆转录－套式PCR检测血清中丙肝病毒RNA

2

作者 胡向阳 黄晓明 +1 位作者 高翼之 尤大钰 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第S1期3-4,共2页

利用与丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因组５＇非编码区保守序列同源的套式引物，建立了检测血清中ＨＣＶＲＮＡ的聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，由于在引物设计中选择了最保守的区域且避开了与黄病毒属的同源序列，保证了ＰＣＲ检测的灵敏度... 利用与丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因组５＇非编码区保守序列同源的套式引物，建立了检测血清中ＨＣＶＲＮＡ的聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，由于在引物设计中选择了最保守的区域且避开了与黄病毒属的同源序列，保证了ＰＣＲ检测的灵敏度和特异性。经逆转录和两轮ＰＣＲ扩增，可检出１×１０－３ｕｌ血清中的ＨＣＶＲＮＡ。研究了影响ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ检测的各种因素，并对ＲＮＡ分离及ＲＴ－ＰＣＲ反应体系进行了优化，在此基础上研制了ＨＣＶ的ＰＣＲ检测试剂盒。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒RNA 逆转录 套式聚合酶链反应.

在线阅读 下载PDF 职称材料

马铃薯卷叶病毒的RT-PCR快速检测 被引量：13

3

作者 路平 王蒂 司怀军 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2005年第4期532-534,共3页

根据马铃薯卷叶病毒的外壳蛋白基因序列,设计合成了一对寡核苷酸引物。从感染马铃薯卷叶病毒(PLRV)的马铃薯叶片中提取出病毒RNA,进行cDNA合成并运用RT-PCR技术进行体外扩增,得到一条长度约627bp的特异PCR扩增产物,与理论设计的外壳蛋... 根据马铃薯卷叶病毒的外壳蛋白基因序列,设计合成了一对寡核苷酸引物。从感染马铃薯卷叶病毒(PLRV)的马铃薯叶片中提取出病毒RNA,进行cDNA合成并运用RT-PCR技术进行体外扩增,得到一条长度约627bp的特异PCR扩增产物,与理论设计的外壳蛋白基因大小一致,而对照未得到任何产物。从而建立了快速灵敏的PLRV检测方法,为PLRV的防治及检测提供了有效手段。 展开更多

关键词 马铃薯卷叶病毒 逆转录-聚合酶链式反应 病毒检测

在线阅读 下载PDF 职称材料

佳米驴β防御素aBD-1基因克隆及序列分析 被引量：2

4

作者 屈雷 闫海龙 +3 位作者 庞全海 敬晓棋 杨银凤 高晔 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第8期34-38,共5页

为获得佳米驴β防御素-1(aBD-1)的全长cDNA序列,为开发其药用功能积累资料。从佳米驴舌黏膜上皮组织中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增出aBD-1(ass-βdefensin-1)cDNA的中间片段后,再采用RACE法,扩增佳米驴β防御素aBD-1的cDNA全序列。aBD... 为获得佳米驴β防御素-1(aBD-1)的全长cDNA序列,为开发其药用功能积累资料。从佳米驴舌黏膜上皮组织中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增出aBD-1(ass-βdefensin-1)cDNA的中间片段后,再采用RACE法,扩增佳米驴β防御素aBD-1的cDNA全序列。aBD-1 cDNA全序列长为360 bp,其中包含192 bp的开放阅读框,37 bp的5′非翻译区(5′UTR),102 bp的3′非翻译区(3′UTR)以及poly(A)26。在GenBank上注册号为EU265778,测序结果和序列生物信息学分析结果表明,其与马β防御素eBD-1、牛的β防御素TAP、绵羊的β防御素sBD-1、猪的β防御素pBD-1和人的β防御素hBD-2的同源性分别为92%、68%、75%、75%和68%。aBD-1全长cDNA是β防御素家族中的一个新基因。 展开更多

关键词 佳米驴 Β防御素 逆转录-聚合酶链式反应 RACE CDNA

在线阅读 下载PDF 职称材料

长期烟雾暴露对大鼠肺泡上皮超微结构及转化生长因子-β_1表达的影响 被引量：2

5

作者 李若葆 李洪先 +2 位作者 薄其付 黄琰 王金平 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期11-14,共4页

目的:观察长期烟雾暴露对肺泡上皮超微结构和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,探讨TGF-β1在长期烟雾所致肺病理变化中的作用。方法:建立Wistar大鼠烟雾暴露模型,电镜下观察烟雾暴露对大鼠肺泡上皮超微结构的影响,应用免疫组织化学... 目的:观察长期烟雾暴露对肺泡上皮超微结构和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,探讨TGF-β1在长期烟雾所致肺病理变化中的作用。方法:建立Wistar大鼠烟雾暴露模型,电镜下观察烟雾暴露对大鼠肺泡上皮超微结构的影响,应用免疫组织化学及RT-PCR-检测TGF-β1及TGF-β1 mRNA在肺组织中的表达。结果:与对照组比较,随着烟雾暴露时间的延长,实验组大鼠肺泡上皮细胞细胞器出现损伤并逐渐加重,5月末最重;随着烟雾暴露月份的增加,熏烟组肺组织TGF-β1和TGF-β1 mRNA表达增多,至5月末时表达最多,6月表达减少。结论:烟雾暴露可导致肺泡上皮细胞超微结构破坏和TGF-β1表达增强,说明肺组织破坏与TGF-β1表达正相关。 展开更多

关键词 烟雾暴露 大鼠 转化生长因子-Β1 免疫组织化学 逆转录-聚合酶链式反应

在线阅读 下载PDF 职称材料

采用RT-PCR技术检测甜樱桃“红灯”上的PNRSV 被引量：3

6

作者 侯义龙 张立娟 +1 位作者 于亚军 于大永 《大连大学学报》 2006年第4期59-60,共2页

[目的]调查大连市特色水果品种甜樱桃“红灯”的田间植株携带PNRSV的情况．[方法]利用作者已建立的PNRSV RT-PCR检测体系．[结果]被检植株PNRSV的感染率达100％,但程度不同．[结论]对于其中感染PNRSV较轻的植株可以作为今后培育无PNRSV... [目的]调查大连市特色水果品种甜樱桃“红灯”的田间植株携带PNRSV的情况．[方法]利用作者已建立的PNRSV RT-PCR检测体系．[结果]被检植株PNRSV的感染率达100％,但程度不同．[结论]对于其中感染PNRSV较轻的植株可以作为今后培育无PNRSV苗木的原材料． 展开更多

关键词 逆转录-聚合酶链式反应 PNRSV 检测

在线阅读 下载PDF 职称材料

卵巢照射及卵巢切除对大鼠骨组织COLI与TGF-β_1 mRNA表达的影响

7

作者 高艳虹 高建军 +1 位作者 金慰芳 王洪复 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期280-283,共4页

探讨卵巢辐射损伤与卵巢切除对大鼠骨组织转移生长因子β1(TGF-β1)与主要的基质蛋白I型胶原(COLI)基因表达的影响。50Gγ剂量γ射线局部照射大鼠卵巢和双侧卵巢切除后应用逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)法检测大鼠骨组织中TGF-β1与COL... 探讨卵巢辐射损伤与卵巢切除对大鼠骨组织转移生长因子β1(TGF-β1)与主要的基质蛋白I型胶原(COLI)基因表达的影响。50Gγ剂量γ射线局部照射大鼠卵巢和双侧卵巢切除后应用逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)法检测大鼠骨组织中TGF-β1与COLI的mRNA表达水平。结果表明,骨组织COLI的mRNA表达水平上升,而TGF-β1mRNA表达减少,卵巢辐射损伤大鼠与卵巢切除大鼠两者结果相似。 展开更多

关键词 卵巢照射 卵巢切除 生长因子 大鼠骨组织 I型原胶原 基因表达 逆转录-多聚酶链式反应法 凝胶电泳分析 聚合酶链式反应

在线阅读 下载PDF 职称材料

骨形成蛋白-2、4在人脑胶质瘤组织中的表达及意义

8

作者 陈彩霞 宋丹 +5 位作者 蔡军 张艳敏 李素珍 高兰 鲍玉洲 步星耀 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期336-339,共4页

目的：研究骨形成蛋白（BMP）-2、4在人脑胶质瘤发生发展中所起的作用及其与临床病理分级的关系。方法；应用RT-PCR技术和免疫组织化学SABC法检测BMP-2、4mRNA和蛋白质在20例正常脑组织和40例不同级别人脑胶质瘤组织中的表达变化，并分... 目的：研究骨形成蛋白（BMP）-2、4在人脑胶质瘤发生发展中所起的作用及其与临床病理分级的关系。方法；应用RT-PCR技术和免疫组织化学SABC法检测BMP-2、4mRNA和蛋白质在20例正常脑组织和40例不同级别人脑胶质瘤组织中的表达变化，并分析其与患者的年龄、性别、病理分级的相关性。结果：BMP-2和BMP-4在正常脑组织和人脑胶质瘤组织中均有表达，且在胶质瘤中的表达显著高于正常脑组织，即BMP-2、4mRNA和蛋白质Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤组织中的表达显著高于Ⅰ、Ⅱ级，且其与患者的年龄及性别无关。结论：BMP-2、4在人脑胶质瘤的发生发展过程中起一定作用。 展开更多

关键词 脑胶质瘤 骨形成蛋白 逆转录-聚合酶链式反应 免疫组织化学

在线阅读 下载PDF 职称材料

RT-PCR法对感染性疾病患者检测效能分析 被引量：1

9

作者 郑文改 杨雨鑫 +1 位作者 王鹏涵 徐岷 《临床心身疾病杂志》 CAS 2023年第3期113-116,共4页

目的探讨2种分子生物学检测方法对病原微生物感染疾病患者的检测效果,并观察愈后患者焦虑抑郁状态改善。方法将实验室病理组织学检测确认病原微生物感染的48例患者作为病例组以及无病原微生物感染的42例患者作为对照组,分析比较聚合酶... 目的探讨2种分子生物学检测方法对病原微生物感染疾病患者的检测效果,并观察愈后患者焦虑抑郁状态改善。方法将实验室病理组织学检测确认病原微生物感染的48例患者作为病例组以及无病原微生物感染的42例患者作为对照组,分析比较聚合酶链反应、逆转录酶-聚合酶链锁反应检测结果,并依据医院焦虑抑郁量表评估患者愈后心理状态改善情况。结果逆转录酶-聚合酶链锁反应的病原微生物检测总阳性率(95.83%,46/48)高于聚合酶链反应检测结果(83.33%,40/48),差异有统计学意义(P<0.01)。逆转录酶-聚合酶链锁反应检测灵敏度、特异度均高于聚合酶链反应检测,差异均有统计学意义(P<0.01)。治疗愈后患者的医院焦虑抑郁量表的焦虑、抑郁维度评分均低于治疗前,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论逆转录酶-聚合酶链锁反应检测技术在病原微生物感染患者中的检测效果高于聚合酶链反应检测技术。病原微生物感染愈后患者的焦虑抑郁症状的改善明显。 展开更多

关键词 病原微生物感染 分子生物学技术 逆转录-聚合酶链式反应 焦虑 抑郁

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于RT-dd PCR技术的食品中诺如病毒定量检测 被引量：5

10

作者 徐蕾蕊 李丹 +6 位作者 汪琦 马丹 魏咏新 魏海燕 赵晓娟 张西萌 曾静 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第20期313-320,共8页

目的:构建基于逆转录微滴式聚合酶链式反应(reverse transcriptase droplet digital polymerase chain reaction,RT-ddPCR)技术的食品中诺如病毒(norovirus,NoV)定量检测方法。方法:筛选引物探针,建立并优化GI、GII型NoV和MS2噬菌体一步... 目的:构建基于逆转录微滴式聚合酶链式反应(reverse transcriptase droplet digital polymerase chain reaction,RT-ddPCR)技术的食品中诺如病毒(norovirus,NoV)定量检测方法。方法:筛选引物探针,建立并优化GI、GII型NoV和MS2噬菌体一步法RT-ddPCR检测体系,确定特异性。利用NoV RNA标准物质和MS2噬菌体RNA确认RT-ddPCR检测体系的定量限、准确度和重复性。制备人工阳性样品,分析MS2噬菌体对定量结果的影响。结果:3个RT-ddPCR检测体系具有良好的特异性、准确度和重复性,NoV RT-ddPCR检测体系的定量限包含10~4~10~0拷贝/μL 5个数量级,MS2噬菌体RT-ddPCR检测体系定量限与NoV相当,添加与不添加MS2噬菌体的人工阳性样品的定量结果无显著差异(P≥0.05)。结论:NoV RT-ddPCR检测体系可准确定量NoV RNA,MS2噬菌体不影响定量结果,可作为过程控制的模式病毒被添加到食品中,指示回收率,计算食品中NoV实际载量。 展开更多

关键词 逆转录微滴式数字聚合酶链式反应 诺如病毒 MS2噬菌体 回收率

在线阅读 下载PDF 职称材料

RT-PCR技术在新型冠状病毒核酸检测的应用及质量评价分析 被引量：1

11

作者 李泽锐 高静 刘兴旺 《中国实用医药》 2023年第19期163-165,共3页

在新型冠状病毒感染患者的诊断中,采取有效检测方式进行及早诊断尤为重要。逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术有较高灵敏度和特异度。本文分析临床应用RT-PCR技术检测新型冠状病毒的常见问题和应对策略,旨在为疫情防控常态化形势下临... 在新型冠状病毒感染患者的诊断中,采取有效检测方式进行及早诊断尤为重要。逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术有较高灵敏度和特异度。本文分析临床应用RT-PCR技术检测新型冠状病毒的常见问题和应对策略,旨在为疫情防控常态化形势下临床实验室正确、高效开展新型冠状病毒检测提供参考意见。 展开更多

关键词 逆转录-聚合酶链式反应技术 新型冠状病毒 核酸检测

在线阅读 下载PDF 职称材料

河南省牛病毒性腹泻病毒分子流行病学调查与分析 被引量：7

12

作者 杨德新 徐峥嵘 +5 位作者 王新庄 闫磊 朱小洁 薛永康 刘晓曼 张震 《动物医学进展》 北大核心 2022年第8期126-130,共5页

为了解河南地区规模化奶牛场牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus, BVDV)的感染情况及主要基因型,用商品化酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒对来自河南省14个市和不同地区的40个规模化奶牛养殖场共5 486份血清中BVDV抗原进行检... 为了解河南地区规模化奶牛场牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus, BVDV)的感染情况及主要基因型,用商品化酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒对来自河南省14个市和不同地区的40个规模化奶牛养殖场共5 486份血清中BVDV抗原进行检测,同时对ELISA方法检测的97份抗原阳性样本,用套式逆转录-聚合酶链式反应(nRT-PCR)进行BVDV抗原检测和基因分型。结果表明,A10奶牛场BVDV抗原阳性率最高,为7.8%(11/141),A11、A17奶牛场BVDV抗原阳性率最低,为0.66%(1/151)。不同牛场的BVDV抗原阳性率为0~7.8%,平均阳性率为1.77%;河南地区牛病毒性腹泻病毒的基因型均为BVDV-1型,未发现其他基因型。提示BVDV在河南省规模化奶牛场存在,但不同地区、不同牛场的BVDV阳性率不同,主要以BVDV-1型感染为主。 展开更多

关键词 牛病毒性腹泻病毒 流行病学 酶联免疫吸附试验 套式逆转录-聚合酶链式反应 抗原

在线阅读 下载PDF 职称材料

含4种食源性病毒检测靶标多联装甲RNA的制备、纯化与定值 被引量：5

13

作者 姚琳 张奇 +5 位作者 李风铃 张媛 逄凤娇 江艳华 王联珠 翟毓秀 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第8期293-299,共7页

基于Qβ噬菌体装甲RNA制备平台构建同时含有诺如病毒(norovirus,NoV)、甲肝病毒(hepatitis Avirus,HAV)、轮状病毒(rotavirus,RV)、星状病毒(astrovirus,AstV)检测靶标RNA的多联装甲RNA(multiplexarmoredRNA,AR-MulV),并进行纯化与初步... 基于Qβ噬菌体装甲RNA制备平台构建同时含有诺如病毒(norovirus,NoV)、甲肝病毒(hepatitis Avirus,HAV)、轮状病毒(rotavirus,RV)、星状病毒(astrovirus,AstV)检测靶标RNA的多联装甲RNA(multiplexarmoredRNA,AR-MulV),并进行纯化与初步定值。结果表明,重组质粒在大肠杆菌中成功表达,表达产物大小约为14.1 kDa;制备的AR-MulV经纯化后无杂蛋白与残留重组质粒,电镜下可见大量结构形态完整的病毒样颗粒,大小约为25 nm。初步定值结果显示,AR-MulV中GⅠ型NoV、GⅡ型NoV、HAV、RV和AstV检测靶标RNA的含量分别为(1.24±0.2)×10~7、(2.54±0.6)×10~7、(2.24±0.3)×10~7、(2.96±0.5)×10~7 copies/μL和(3.19±0.4)×10~7 copies/μL。本研究基于Qβ噬菌体装甲RNA制备平台成功制备同时包含4种食源性病毒标准方法检测靶标的多联装甲RNA,为食源性病毒的分子检测以及多重实时荧光定量逆转录-聚合酶链式反应阳性质控样品的研发提供新思路。 展开更多

关键词 食源性病毒 多联装甲RNA Qβ噬菌体 阳性质控样品 实时荧光定量逆转录-聚合酶链式反应

在线阅读 下载PDF 职称材料

猪瘟病毒3种检测方法的比较 被引量：7

14

作者 张艳英 高桂生 +4 位作者 高光平 史秋梅 张贵贤 田和杰 李秋艳 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第3期205-209,共5页

本研究旨在比较3种检测猪瘟病毒方法的优缺点。应用反转录—复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)、荧光抗体法、胶体金免疫层析试纸条3种方法,分别对30份疑似猪瘟病料中的猪瘟病毒进行检测。试验结果显示,RT-nPCR方法检出阳性样品数为11份... 本研究旨在比较3种检测猪瘟病毒方法的优缺点。应用反转录—复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)、荧光抗体法、胶体金免疫层析试纸条3种方法,分别对30份疑似猪瘟病料中的猪瘟病毒进行检测。试验结果显示,RT-nPCR方法检出阳性样品数为11份,荧光抗体法为13份,胶体金免疫层析试纸条为8份;3种方法检测全为阳性8份,全为阴性17份。试验结果表明,荧光抗体检测法所需时间较短,但需要经验比较丰富人员来判定结果,且存在假阳性结果,敏感性比较差;胶体金免疫层析试纸条诊断方法最大的优点就是简便快速,且适合基层的应用,该方法的不足之处就是敏感性较低;RT-nPCR检测法具有快速、敏感等优点,但需一定仪器设备及成熟的技术方法。RT-nPCR还能区分待检样品为疫苗毒株(弱毒)还是野毒株感染(强毒),这是其他2种方法所不可比拟的。 展开更多

关键词 猪瘟 荧光抗体法 反转录—复合套式聚合酶链式反应 胶体金免疫层析试纸条

在线阅读 下载PDF 职称材料

外周血Mfn2基因表达检测在乳腺癌诊断中的意义 被引量：1

15

作者 胡继卫 张景华 +5 位作者 洪慧 李玉凤 马杰 陈晶晶 张顺礼 胡万宁 《成都医学院学报》 CAS 2014年第6期704-707,共4页

目的 探讨线粒体融合蛋白2（Mfn2）mRNA在乳腺癌患者外周血中的表达及意义。方法 收集62例乳腺癌患者和25例健康人外周静脉血和组织病理学标本,提取总RNA,检测Mfn2mRNA以及乳腺癌组织中表皮生长因子受体（EGFR）的表达。结果 0~Ⅱ期与Ⅲ... 目的 探讨线粒体融合蛋白2（Mfn2）mRNA在乳腺癌患者外周血中的表达及意义。方法 收集62例乳腺癌患者和25例健康人外周静脉血和组织病理学标本,提取总RNA,检测Mfn2mRNA以及乳腺癌组织中表皮生长因子受体（EGFR）的表达。结果 0~Ⅱ期与Ⅲ~Ⅳ期乳腺癌患者外周血中Mfn2mRNA阳性率比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;健康人外周静脉血中Mfn2mRNA的表达为100%,明显高于其在乳腺癌患者外周血中的表达（P〈0.05）;乳腺癌患者组织病理学标本中,EGFR阳性34例,其中外周血Mfn2mRNA阳性者12例;EGFR阴性28例,其中外周血Mfn2 mRNA阳性者17例。EGFR阳性患者中Mfn2 mRNA的表达率明显低于EGFR阴性者（P〈0.05）。结论 乳腺癌患者外周血中Mfn2mRNA表达阳性率与肿瘤分期、转移和EGFR表达有关。RT-PCR法检测乳腺癌患者外周血Mfn2mRNA可能有望成为检测乳腺癌细胞微转移的有效方法。 展开更多

关键词 乳腺癌 线粒体融合蛋白-2 表皮生长因子受体 逆转录聚合酶链式反应 免疫组织化学法

在线阅读 下载PDF 职称材料

广西牛群戊型肝炎病毒感染情况调查

16

作者 李斌 苏乾莲 +9 位作者 赵武 秦毅斌 梁家幸 何颖 梁保忠 严子斌 覃勇 韦建华 段群棚 许力匆 《中国动物检疫》 CAS 2011年第10期46-48,共3页

为了解广西牛群中戊型肝炎(HE)的感染状况,应用反转录—套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)对采自广西8个市牛群的粪、肝样品进行了戊型肝炎病毒(HEV)RNA检测。结果从广西6个市牛粪样品中检出HEV阳性率为19.13%(35/183),从4个市牛肝样品中检出... 为了解广西牛群中戊型肝炎(HE)的感染状况,应用反转录—套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)对采自广西8个市牛群的粪、肝样品进行了戊型肝炎病毒(HEV)RNA检测。结果从广西6个市牛粪样品中检出HEV阳性率为19.13%(35/183),从4个市牛肝样品中检出HEV的阳性率为20%(5/25),8个市牛粪、牛肝样品中HEV的总阳性率为19.23%(40/208)。表明广西受检牛群中存在HEV感染,应重视牛HE这一新发人畜共患传染病的防控。 展开更多

关键词 广西 牛 戊型肝炎病毒 反转录-套式聚合酶链式反应 人畜共患传染病

在线阅读 下载PDF 职称材料

甘肃特产药材红芪actin基因片段的克隆及序列分析 被引量：2

17

作者 何军刚 强正泽 +2 位作者 马冬妮 冯晓莉 李成义 《中国现代中药》 CAS 2020年第12期1972-1976,共5页

目的:研究红芪Hedysari Radix次生代谢产物与基因表达的相关性,克隆红芪的肌动蛋白基因(actin)并进行序列分析和定量研究。方法:通过查找GenBank中的其他豆科植物的编码序列(CDS)设计简并引物,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术克... 目的:研究红芪Hedysari Radix次生代谢产物与基因表达的相关性,克隆红芪的肌动蛋白基因(actin)并进行序列分析和定量研究。方法:通过查找GenBank中的其他豆科植物的编码序列(CDS)设计简并引物,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术克隆红芪actin基因的核心片段,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析该基因在不同部位中的稳定性表达。结果:克隆出了长度946 bp的红芪actin基因,其中编码蛋白框855 bp,编码284个氨基酸,经Blast比对序列,红芪的actin基因与甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.、花苜蓿Medicago ruthenica(L.)Trautv.、红车轴草Trifolium pratense L.的核苷酸序列同源性分别为95.44%、94.42%、94.20%,氨基酸序列的相似性也高达97%以上,红芪actin基因在根、茎、叶不同部位中的表达量基本稳定。结论:首次在国内成功克隆出了红芪的actin基因,并且证实了该基因可作为红芪其他优良基因表达调控的内参基因,为红芪质量研究提供参考。 展开更多

关键词 红芪 肌动蛋白基因 克隆 序列分析 逆转录-聚合酶链式反应

在线阅读 下载PDF 职称材料

卵巢肿瘤组织中EGFR、CK20表达及意义 被引量：1

18

作者 徐杰 杨蕊蕊 陈爱平 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第48期28-29,共2页

目的探讨细胞角质蛋白20(CK20)和表皮生长因子受体(EGFR)mRNA在卵巢上皮性肿瘤发生中的作用。方法应用RT-PCR法检测12份正常卵巢(对照组)、18份卵巢良性肿瘤(良性组)、33份卵巢恶性肿瘤(恶性组)和14份胃肠道转移性卵巢肿瘤(转移组)组织... 目的探讨细胞角质蛋白20(CK20)和表皮生长因子受体(EGFR)mRNA在卵巢上皮性肿瘤发生中的作用。方法应用RT-PCR法检测12份正常卵巢(对照组)、18份卵巢良性肿瘤(良性组)、33份卵巢恶性肿瘤(恶性组)和14份胃肠道转移性卵巢肿瘤(转移组)组织中CK20、EGFR mRNA的表达。结果恶性组中CK20、EGFR mRNA阳性率显著高于对照组及良性组(P<0.05),与转移组比较无明显差异;恶性组CK20 mRNA表达与手术病理分期、淋巴结转移有关(P<0.05),EGFR mRNA表达与手术病理分期有关(P<0.05)。结论CK20、EG-FR高表达可促进卵巢恶性肿瘤的发生、转移;其检测对判断预后有一定价值。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 表皮生长因子受体 细胞角质蛋白20 逆转录-聚合酶链式反应

在线阅读 下载PDF 职称材料

冷链食品中诺如病毒的检测方法研究以及污染状况分析 被引量：2

19

作者 柯振华 《福建轻纺》 2023年第12期12-15,6,共5页

文章以冷链食品中的诺如病毒为研究对象,建立冷链食品中诺如病毒的高效提取方法。该方法设计特异性引物探针,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检验冷链食品中诺如病毒,文章应用所构建的方法开展了冷链食品中诺如病毒污染状况的抽样调... 文章以冷链食品中的诺如病毒为研究对象,建立冷链食品中诺如病毒的高效提取方法。该方法设计特异性引物探针,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检验冷链食品中诺如病毒,文章应用所构建的方法开展了冷链食品中诺如病毒污染状况的抽样调查。结果表明,应用RT-PCR成功扩增了诺如病毒特征性核酸,在后续使用该方法进行的冷链食品中病毒的抽样检测调查中发现诺如病毒总体检出率为7.0%(27/383),病毒分型发现检出的27株诺如病毒中有25份为诺如病毒GII型,2份为诺如病毒GI型。 展开更多

关键词 逆转录-聚合酶链式反应 冷链食品 诺如病毒

在线阅读 下载PDF 职称材料