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荧光定量PCR方法检测头孢类产品中的残留DNA 被引量:1
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作者 蒋惠源 张培培 +1 位作者 仇雅静 王琰 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期1385-1392,共8页
目的荧光实时定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RTFQ-PCR)检测头孢类产品中残留DNA方法开发、验证及应用。方法采用柱式游离DNA抽提试剂盒(离心柱法)提取供试品中残留DNA;将已知浓度的产黄枝顶孢霉基因组DNA标准溶液系... 目的荧光实时定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RTFQ-PCR)检测头孢类产品中残留DNA方法开发、验证及应用。方法采用柱式游离DNA抽提试剂盒(离心柱法)提取供试品中残留DNA;将已知浓度的产黄枝顶孢霉基因组DNA标准溶液系列稀释后,根据DNA标准溶液的循环阈值与浓度之间的线性关系,对5种头孢类产品中的残留DNA进行定量分析;对方法进行专属性、线性和范围、准确度、精密度验证,并使用该方法对5种头孢类产品进行残留DNA检测。结果DNA标准溶液的线性范围为10 fg/μL~1 ng/μL、相关系数R^(2)>0.99、扩增效率为90%~110%、LOD相当于83 pg/g,质控样品回收率为50%~150%,供试品相对标准偏差(RSD)均小于30%,方法学验证的各项参数均符合规定。结论离心柱法结合qPCR探针法能够简便、快速、准确地对5种头孢类抗生素中的残留DNA进行定量测定,方法的专属性、线性、准确度、精密度等各项指标均可达到方法验证的要求,适用于头孢类产品中残留DNA的检测,对其他发酵或半合成抗生素的质量控制具有借鉴意义。 展开更多
关键词 荧光定量PCR 头孢类产品 发酵和半合成类抗生素 残留DNA
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HPLC-CDD法测定以碳酸钠为助溶剂的头孢类产品中碳酸钠的含量 被引量:4
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作者 谭胜连 闵翠娥 +1 位作者 李毅 江少仪 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期920-923,共4页
目的建立高效液相-电导法(HPLC-CDD法)测定以碳酸钠为助溶剂的头孢类产品中碳酸钠的含量。方法以羧酸基键合硅胶为分析柱的填充剂(metrosep C47μm×100mm×4.0mm);流动相:(1.7mmol/L硝酸+0.7mmol/L吡啶二羧酸溶液)-乙腈(90:10)... 目的建立高效液相-电导法(HPLC-CDD法)测定以碳酸钠为助溶剂的头孢类产品中碳酸钠的含量。方法以羧酸基键合硅胶为分析柱的填充剂(metrosep C47μm×100mm×4.0mm);流动相:(1.7mmol/L硝酸+0.7mmol/L吡啶二羧酸溶液)-乙腈(90:10);流速:1mL/min;柱温:35℃;进样量:20μL;检测器:非抑制型电导检测器。结果以注射用头孢他啶为例,钠离子在4.0~15.8μg/mL浓度范围内与其峰面积呈良好的线性关系,r=1.0000。高、中、低3种浓度的平均回收率为100.9%,RSD为0.5%。结论该方法简便、准确、灵敏度高,重现性好,可作为以碳酸钠为助溶剂的头孢类产品中碳酸钠的含量。 展开更多
关键词 HPLC—CDD 碳酸钠 头孢类产品 含量
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