转天麻抗真菌蛋白GAFP基因烟草的获得及离体抑菌活性检测 被引量：10

1

作者 陈英 王义琴 +3 位作者 诸葛强 施季森 黄敏仁 王明庥 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 2002年第2期1-5,共5页

通过根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导,采用叶盘法将天麻(GastrodiaelataBl.)抗真菌蛋白基因GAFP转入烟草(NicotianatabacumL.),PCR和Southern blotting分析证明已将GAFP基因整合进烟草植株。体外抑菌实验表明GAFP转基因的烟... 通过根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导,采用叶盘法将天麻(GastrodiaelataBl.)抗真菌蛋白基因GAFP转入烟草(NicotianatabacumL.),PCR和Southern blotting分析证明已将GAFP基因整合进烟草植株。体外抑菌实验表明GAFP转基因的烟草植株对真菌瑞氏木霉(Trichodermareesei)表现出一定的抑菌活性。 展开更多

关键词 活性检测 根癌农杆菌介导 天麻抗真菌蛋白 转基因烟草 离体抑菌活性 抗病育种

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天麻抗真菌蛋白基因转化辣椒的研究 被引量：4

2

作者 张守鸿 李长福 +2 位作者 葛正龙 范芳 冯雪松 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2010年第5期12-15,共4页

为获取辣椒的抗真菌种质资源,运用RT-PCR技术扩增出GAFP的cDNA序列,通过基因工程技术构建植物表达载体pBI121-GAFP,并导入遵椒1号辣椒。转化后再生的植株经PCR检测,初步证实GAFP基因已经整合到辣椒基因组中,得到了GAFP基因转化遵椒1号... 为获取辣椒的抗真菌种质资源,运用RT-PCR技术扩增出GAFP的cDNA序列,通过基因工程技术构建植物表达载体pBI121-GAFP,并导入遵椒1号辣椒。转化后再生的植株经PCR检测,初步证实GAFP基因已经整合到辣椒基因组中,得到了GAFP基因转化遵椒1号辣椒植株。 展开更多

关键词 天麻抗真菌蛋白 辣椒 抗真菌 植物表达载体 转化

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天麻抗真菌蛋白cDNA克隆及植物表达载体的构建 被引量：1

3

作者 李长福 张守鸿 +1 位作者 葛正龙 范芳 《贵州农业科学》 CAS 2008年第3期10-11,共2页

采用RT-PCR技术扩增出天麻抗真菌蛋白(Gastrodia antifungal protein,GAFP)的cDNA序列,通过pGM-T载体转入大肠杆菌JM109克隆,在培养基上筛选重组质粒酶切鉴定,阳性克隆经限制性内切酶Xba1和Sac1酶切与同样酶切的植物表达载体pBI121连接... 采用RT-PCR技术扩增出天麻抗真菌蛋白(Gastrodia antifungal protein,GAFP)的cDNA序列,通过pGM-T载体转入大肠杆菌JM109克隆,在培养基上筛选重组质粒酶切鉴定,阳性克隆经限制性内切酶Xba1和Sac1酶切与同样酶切的植物表达载体pBI121连接,构建天麻抗真菌蛋白(GAFP)的植物表达载体pBI121-GAFP。结果,天麻抗真菌蛋白(GAFP)的植物表达载体构建成功。 展开更多

关键词 天麻抗真菌蛋白 CDNA克隆 植物表达载体

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天麻抗真菌蛋白基因(GAFP)转化彩色棉新品系抗黄、枯萎病性鉴定 被引量：8

4

作者 刘丰疆 马德成 +5 位作者 李仁敬 李卫平 陈大军 姚正培 宋武 李玮 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2004年第4期244-247,共4页

将天麻抗真菌蛋白基因(GastrodiaAntifargalProtein,GAFP)利用花粉管通道法导入彩色棉品种新彩棉1号和新彩棉3号,转化后代经卡那霉素初筛、分子检测、农艺性状选择,培育出16个转基因新品系,对其在人工病圃进行田间黄、枯萎病的抗性鉴定... 将天麻抗真菌蛋白基因(GastrodiaAntifargalProtein,GAFP)利用花粉管通道法导入彩色棉品种新彩棉1号和新彩棉3号,转化后代经卡那霉素初筛、分子检测、农艺性状选择,培育出16个转基因新品系,对其在人工病圃进行田间黄、枯萎病的抗性鉴定,结果表明:参试的转基因品系中LB5007、ZB5020等5个品系既抗黄萎病又抗枯萎病,为兼抗类型;其余11个品系均为抗黄萎病耐枯萎病类型。 展开更多

关键词 天麻抗真菌蛋白基因 彩色棉 黄萎病 枯萎病 抗性鉴定 转基因

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天麻抗真菌蛋白基因或可防治棉花黄萎病

5

《中国食用菌》 2016年第4期62-62,共1页

黄萎病一直被认为是棉花的“癌症”。目前，中科院研究人员发现天麻中存在着4个抗真菌蛋白基因gafp，gafp对包括黄萎病在内的多种真菌具有较好抗性，其中，gafp4具有最强的抑菌活性，且带有胞间质定位的信号肽可以明显增强抗性。

关键词 天麻抗真菌蛋白基因 棉花黄萎病 防治 研究人员 抑菌活性 中科院 信号肽 抗性

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新疆陆地棉转天麻毒蛋白基因GAFP特性研究 被引量：1

6

作者 沈海涛 王爱英 +1 位作者 李玉霞 祝建波 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期1-8,共8页

本研究利用花粉管通道技术将在天麻中克隆的天麻毒蛋白基因(GAFP)转化棉花,经PCR和RTPCR鉴定,证实得到了5个转基因株系672GAFP-1,672GAFP-2,672GAFP-3,672GAFP-4,672GAFP-5。通过两年在无病田和病圃中连续种植分析转基因植株抗病性、农... 本研究利用花粉管通道技术将在天麻中克隆的天麻毒蛋白基因(GAFP)转化棉花,经PCR和RTPCR鉴定,证实得到了5个转基因株系672GAFP-1,672GAFP-2,672GAFP-3,672GAFP-4,672GAFP-5。通过两年在无病田和病圃中连续种植分析转基因植株抗病性、农艺性状和经济性状的研究,结果表明:外源基因GAFP的导入对棉花农艺性状和经济性状无显著影响;转基因株系672GAFP-1,672GAFP-2,672GAFP-5在病圃中的抗病指数、株高、产量和纤维品质与受体材料672差异显著(P<0.05),产量较对照提高近30%;转基因植株农艺性状和经济性状的各项指标均优于对照,具较强耐枯、黄萎病能力,且能稳定遗传。 展开更多

关键词 天麻抗真菌蛋白 转基因抗病陆地棉 棉花枯萎病 黄萎病

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海拔对乌红杂交天麻产量与品质的影响及其酶学作用机制 被引量：13

7

作者 杨婧 王传华 +3 位作者 曾春函 王洋洋 侯云波 杨林 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期281-289,共9页

蜜环菌生物种和天麻的共生关系是二者侵染-消化系统相互作用的结果,受到温度等环境因子的调节。为揭示海拔对天麻产量及品质的影响,以及温度升高影响蜜环菌生物种-天麻共生关系的作用机制。该研究通过测定不同海拔栽培天麻的产量、主要... 蜜环菌生物种和天麻的共生关系是二者侵染-消化系统相互作用的结果,受到温度等环境因子的调节。为揭示海拔对天麻产量及品质的影响,以及温度升高影响蜜环菌生物种-天麻共生关系的作用机制。该研究通过测定不同海拔栽培天麻的产量、主要药用成分天麻素和对羟基苯甲醇的含量;在室内对天麻共生体进行升温处理,测定天麻组织液几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶、苯丙氨酸解氨酶与多酚氧化酶的活性变化,及天麻组织提取液对蜜环菌菌丝体的抑制效应。结果显示:(1)海拔对乌红杂交天麻的产量和有效药用成分存在显著影响,在1600 m产量最高,且杂交天麻在海拔1600 m有效成分含量最高。(2)温度显著影响天麻组织的抑菌系统,且天麻的消化酶及防御酶系统对其的响应具有差异性,具体表现为低温状况下天麻的消化酶系统活性增强,高温时防御酶系统活性提升。(3)温度升高导致天麻组织液对蜜环菌菌丝体的抑制效果显著下降,天麻活体中可能存在促进蜜环菌生长的热失活因子。研究表明,天麻种植区海拔下降引起的温度升高可能削弱天麻消化和抑制蜜环菌的能力,从而破坏天麻-蜜环菌的共生平衡。该研究对于揭示蜜环菌-天麻的共生机制具有重要科学价值,并对天麻栽培的区划具有实际指导意义。 展开更多

关键词 天麻 蜜环菌 消化酶 防御酶 天麻抗真菌蛋白

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新疆陆地棉抗病转基因棉花的初步筛选 被引量：7

8

作者 危晓薇 黄全生 +6 位作者 孟庆玉 王冬梅 美丽古力 李仁敬 陈爱民 谢迪佳 师维军 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2002年第1期18-19,共2页

通过花粉管通道法将天麻抗真菌蛋白基因导入新疆陆地棉 3个品种 (系 ) ,经过标记基因阳性试验和病圃生物学检测 ,得到初步的筛选结果。

关键词 花粉管通道法 天麻抗真菌蛋白基因 黄萎病 阳性反应 生物学检测 新疆 陆地棉 抗病性 转基因棉

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新疆陆地棉转基因抗病品系材料的获得 被引量：4

9

作者 危晓薇 师维军 +4 位作者 葛峰 徐利民 王义琴 黄全生 吾买尔江 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2007年第4期402-407,共6页

天麻抗真菌蛋白(gastrodia antifungal protein简称GAFP)是从我国传统中药天麻(Gastrodia elata Bl.)中分离得到的一种具有广谱抗真菌活性的蛋白质,它对许多植物真菌病的致病菌离体具有很强的抑制作用。研究将所获得的转GAFP基因的陆地... 天麻抗真菌蛋白(gastrodia antifungal protein简称GAFP)是从我国传统中药天麻(Gastrodia elata Bl.)中分离得到的一种具有广谱抗真菌活性的蛋白质,它对许多植物真菌病的致病菌离体具有很强的抑制作用。研究将所获得的转GAFP基因的陆地棉经Southern点杂交,证实得到了2株高抗枯、黄萎病的转基因植株。其后代经过进一步的抗病性筛选、PCR鉴定、选育和扩繁,发现转基因陆地棉后代具有稳定的、较强抗枯、黄萎病能力。研究为新疆陆地棉通过植物抗病基因工程的方法进行抗病品种选育提供了一条新的途径。 展开更多

关键词 天麻抗真菌蛋白 转基因抗病陆地棉 棉花枯萎病和黄萎病

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双价抗病基因植物表达载体构建及在烟草中表达的初步研究 被引量：4

10

作者 陈英 戴咏梅 +2 位作者 黄敏仁 诸葛强 王明庥 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第5期81-85,共5页

多基因转化是基因工程研究热点之一。本研究应用DNA重组技术,将两个抗病机制不同,抗菌谱较广的抗病基因(天麻抗真菌蛋白GAFP和兔防御素NP1基因)构建在一个植物表达载体pBin35SGAFP-NP1上,两者具有各自的CaMV35S启动子和Nos终止子。通过... 多基因转化是基因工程研究热点之一。本研究应用DNA重组技术,将两个抗病机制不同,抗菌谱较广的抗病基因(天麻抗真菌蛋白GAFP和兔防御素NP1基因)构建在一个植物表达载体pBin35SGAFP-NP1上,两者具有各自的CaMV35S启动子和Nos终止子。通过根癌农杆菌介导,采用叶盘法转化烟草,PCR和PCR-Southern分析证明已将NP1和GAFP基因整合到烟草基因组中。离体抑菌实验表明转基因植株对真菌和细菌表现出一定的抗性。以上结果表明通过该表达载体进行遗传转化可获得含双价抗病基因植物,并能有效表达,提高转基因植物抗病能力。 展开更多

关键词 防御素基因NP1 天麻抗真菌蛋白基因翻肿 双价抗病基因植物表达载体 转基因烟草 抗病性

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一种改进的cDNA文库固相构建法 被引量：2

11

作者 王义琴 李文彬 +1 位作者 张利明 孙勇如 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期253-254,共2页

本文介绍一种新的cDNA文库固相构建法。文库构建过程中 ,cDNA的合成和修饰全部在固相介质———磁珠上完成,简便、迅速、文库质量高 ,能满足不同目的的cDNA文库构建 ,是一种值得借鉴和应用的好方法。

关键词 CDNA文库 固相构建 磁珠 天麻抗真菌蛋白

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不同因素对农杆菌介导的杉木转化效率的影响 被引量：6

12

作者 席梦利 施季森 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第3期46-50,共5页

以杉木试管苗靠近茎尖的茎段为受体材料，研究6个影响杉木遗传转化效果的因素，初步确定杉木茎段较为合适的转化体系为：预培养1—3d，OD600 nm为0．1-0．4的菌液浸染10-15min，共培养3—5d，共培养基附加乙酰丁香酮（AS）80μmol·... 以杉木试管苗靠近茎尖的茎段为受体材料，研究6个影响杉木遗传转化效果的因素，初步确定杉木茎段较为合适的转化体系为：预培养1—3d，OD600 nm为0．1-0．4的菌液浸染10-15min，共培养3—5d，共培养基附加乙酰丁香酮（AS）80μmol·L^-1，共培养后延迟3d筛选。在初次筛选培养基上共得到186个卡那霉素（Km）抗性芽，在二次筛选培养基上获得39个Km抗性芽。PCR检测有2个Km抗性芽呈稳定阳性，初步证明外源天麻抗真菌蛋白（GAFP）基因已整合到这2个Km抗性芽的基因组DNA中。 展开更多

关键词 杉木 农杆菌介导 天麻抗真菌蛋白基因

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新疆彩色棉抗病转基因植株的病圃筛选

13

作者 陈大军 李卫平 +7 位作者 黄全生 刘丰疆 危晓薇 胡晓玲 王冬梅 姚正培 美丽古力 李仁敬 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2002年第2期82-83,共2页

将用天麻抗真菌蛋白基因 (GAFP)转化的天然彩色棉 (棕色、绿色 )R0 代种子种植在黄、枯萎病混生的病圃中。根据标记基因的不同 ,分别用卡那霉素和除草剂 (Basta)对 9个筛选材料的R1代 1 92 5 3× 10 4株进行了筛选 ,入选 133株。入... 将用天麻抗真菌蛋白基因 (GAFP)转化的天然彩色棉 (棕色、绿色 )R0 代种子种植在黄、枯萎病混生的病圃中。根据标记基因的不同 ,分别用卡那霉素和除草剂 (Basta)对 9个筛选材料的R1代 1 92 5 3× 10 4株进行了筛选 ,入选 133株。入选的 133个植株经过四次抗病性鉴定、筛选 ,获得了抗病植株 16株。进一步进行分子检测 ,转化植株出现了杂交信号 ,证明了抗病基因的整合和表达。 展开更多

关键词 天然彩色棉 天麻抗真菌 蛋白基因 病圃筛选 新疆 抗病转基因 植株

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转GAFP基因对彩色棉性状的影响

14

作者 刘丰疆 李仁敬 +3 位作者 张振南 王义琴 曹燕燕 焦明钰 《中国棉花》 北大核心 2006年第3期13-14,共2页

关键词 AFP基因 彩色棉 天麻抗真菌蛋白基因 棉花研究所 新彩棉1号 主栽品种 遗传结构 发育生物学 天然彩色 外源基因

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生物防治

15

《生物技术通报》 CAS CSCD 1996年第3期77-78,共2页

961062 无菌培养罗马柄锈菌的技术[英]/Bedi, J.S.…//Curr.Sci.-1995,69(1).-21～23[译自DBA,1995,14(17),95-10278] 由罗马柄锈菌引起的诱病可用作针对香附子的潜在生防因子。在不同温度(20、25、30和35℃)下研究了真菌的生长和孢子... 961062 无菌培养罗马柄锈菌的技术[英]/Bedi, J.S.…//Curr.Sci.-1995,69(1).-21～23[译自DBA,1995,14(17),95-10278] 由罗马柄锈菌引起的诱病可用作针对香附子的潜在生防因子。在不同温度(20、25、30和35℃)下研究了真菌的生长和孢子形成。 展开更多

关键词 杀虫活性 荧光假单胞菌 原生质体融合 天麻抗真菌蛋白基因 融合子 柄锈菌 染色体 生防因子 cDNA克隆 晶体蛋白

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