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题名耳廓软骨天然生物支架材料的制备及初步研究
被引量：7
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作者
王彦君
孔维佳
毕胜斌
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机构
华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科
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出处
《中华耳科学杂志》
CSCD
2005年第3期194-199,共6页
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基金
国家杰出青年科学基金(39925035)
国家自然科学基金(39670781
30070809)资助
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文摘
目的探讨制备兔耳廓天然软骨细胞外基质材料的新方法,制备适用于组织工程应用的天然生物支架材料。方法①采用多步骤去污剂—酶处理技术抽提兔耳廓软骨细胞制备天然软骨细胞外基质(Nature Extracellular Matrix,NECM),对NECM行HE染色、澳新蓝染色、维多利亚蓝染色、VanGieson染色并进行组织学及扫描电镜观察;②以灰家兔NECM为支架材料和新西兰大白兔耳廓软骨细胞为种子细胞进行体外培养,倒置显微镜下观察其亲水性和对细胞的吸附力,并通过四氮唑盐比色法(MTTAssay)观察NECM对软骨细胞的增殖作用。结果通过HE染色、蛋白多糖、胶原及弹力纤维特染、扫描电镜观察分析证实经过多步骤去污剂—酶法抽提软骨细胞制备的天然生物支架材料里,不含细胞及细胞器成分,仅含有不溶解的胶原、弹性蛋白和蛋白多糖,亦即NECM;体外培养实验发现,兔耳廓软骨细胞易进入脱细胞异体软骨基质结构裸露的空穴,且生长旺盛,组织学检查证实兔耳廓软骨NECM上裸露的骨陷窝已部分被软骨细胞占据。MTTAssay检测证实NECM对软骨细胞增殖有促进作用。结论本实验制备的NECM脱细胞彻底、细胞外基质成分保留较完整,并具有促进细胞粘附、增殖和分化生长的作用,是一种较为理想的天然生物支架材料。
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关键词
天然细胞外基质
组织工程
兔
体外细胞培养
四氮唑盐比色法
生物支架材料
耳廓软骨
制备
天然
细胞外基质材料
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Keywords
Nature extracellular matrix （NECM）
Tissue engineering
Rabbit
Cell culture in itro
MTF assay
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分类号
R318
[医药卫生—生物医学工程]
R329.33
[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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题名自制NECM修复兔耳廓软骨缺损的试验研究
被引量：1
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作者
王彦君
孔维佳
毕胜斌
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机构
华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科
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出处
《中华耳科学杂志》
CSCD
2004年第1期48-53,共6页
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基金
国家杰出青年科学基金(39925035)
国家自然科学基金(39670781和30070809)
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文摘
目的本研究的目的在于评价自制同种异体天然细胞外基质(NatureExtracellularMatrix,NECM)在修复兔耳廓软骨缺损中的价值,从而在体外研究的基础上进一步证实我们采用的去污剂-酶四步法制作的NECM在组织工程学中的可行性。方法选用10只新西兰大白兔,于其双耳廓制造1郾0×1郾0cm大小的软骨缺损后,分别作以下研究①灰兔NECM修复兔耳廓缺损。②灰兔NECM复合软骨膜修复兔耳廓缺损;③不植任何材料的空白对照。术后4、6、12、24周取材并行组织学检查。结果NECM植入后4、6周有轻重不一的炎症反应,第12周炎症反应消失,NECM周边无包裹现象。第12周时NECM复合软骨膜组有软骨膜细胞长入NECM,此时的软骨膜细胞多处于增殖期,24周时软骨膜细胞继续增殖分化细胞逐渐长入NECM深部,且部分软骨膜细胞发育成熟。单纯NECM修复组,第6周出现纤维结缔组织长入NECM,12、24周纤维结缔组织逐渐长入NECM深部,并逐渐取代NECM。结论①NECM可诱导软骨膜细胞增殖分化生长,修复软骨缺损;②NECM具有较好的组织亲和性和相容性;③软骨膜细胞可以作为NECM再生软骨的种子细胞的来源;④软骨膜可以阻止纤维结缔组织侵入修复区NECM。
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关键词
NECM
兔
耳廓
软骨缺损
天然细胞外基质
组织工程学
软骨膜
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Keywords
Nature Extracellular Matrix (NECM)
Cartilage
Perichondrium
Tissue Engineering
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分类号
R764
[医药卫生—耳鼻咽喉科]
R-332
[医药卫生]
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