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耳廓软骨天然生物支架材料的制备及初步研究 被引量:7
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作者 王彦君 孔维佳 毕胜斌 《中华耳科学杂志》 CSCD 2005年第3期194-199,共6页
目的探讨制备兔耳廓天然软骨细胞外基质材料的新方法,制备适用于组织工程应用的天然生物支架材料。方法①采用多步骤去污剂—酶处理技术抽提兔耳廓软骨细胞制备天然软骨细胞外基质(Nature Extracellular Matrix,NECM),对NECM行HE染色、... 目的探讨制备兔耳廓天然软骨细胞外基质材料的新方法,制备适用于组织工程应用的天然生物支架材料。方法①采用多步骤去污剂—酶处理技术抽提兔耳廓软骨细胞制备天然软骨细胞外基质(Nature Extracellular Matrix,NECM),对NECM行HE染色、澳新蓝染色、维多利亚蓝染色、VanGieson染色并进行组织学及扫描电镜观察;②以灰家兔NECM为支架材料和新西兰大白兔耳廓软骨细胞为种子细胞进行体外培养,倒置显微镜下观察其亲水性和对细胞的吸附力,并通过四氮唑盐比色法(MTTAssay)观察NECM对软骨细胞的增殖作用。结果通过HE染色、蛋白多糖、胶原及弹力纤维特染、扫描电镜观察分析证实经过多步骤去污剂—酶法抽提软骨细胞制备的天然生物支架材料里,不含细胞及细胞器成分,仅含有不溶解的胶原、弹性蛋白和蛋白多糖,亦即NECM;体外培养实验发现,兔耳廓软骨细胞易进入脱细胞异体软骨基质结构裸露的空穴,且生长旺盛,组织学检查证实兔耳廓软骨NECM上裸露的骨陷窝已部分被软骨细胞占据。MTTAssay检测证实NECM对软骨细胞增殖有促进作用。结论本实验制备的NECM脱细胞彻底、细胞外基质成分保留较完整,并具有促进细胞粘附、增殖和分化生长的作用,是一种较为理想的天然生物支架材料。 展开更多
关键词 天然细胞外 组织工程 体外细胞培养 四氮唑盐比色法 生物支架材料 耳廓软骨 制备 天然 细胞外材料
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云杉、冷杉外生菌根菌培养基筛选试验 被引量:3
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作者 何华 李玉环 王尚学 《农业科技与信息》 2010年第14期47-48,共2页
云、冷杉外生菌根真菌与宿主植物是共生关系,在人工条件下很难模拟其生长发育所需营养物质和条件。所以菌根真菌适宜母种、原种培养基配方的筛选,是该课题重要技术支撑。经筛选试验,使用麸皮、玉米粉、高粱粉、马铃薯等天然基质的培养基... 云、冷杉外生菌根真菌与宿主植物是共生关系,在人工条件下很难模拟其生长发育所需营养物质和条件。所以菌根真菌适宜母种、原种培养基配方的筛选,是该课题重要技术支撑。经筛选试验,使用麸皮、玉米粉、高粱粉、马铃薯等天然基质的培养基,菌根真菌的生长远优于传统的无机盐类培养基。 展开更多
关键词 云杉 冷杉 外生菌根菌 培养 天然基质 筛选试验
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杏鲍菇液体培养条件的研究 被引量:17
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作者 刘炳明 曹德宾 +2 位作者 于迎春 马晓红 鲁桂珍 《中国食用菌》 北大核心 2004年第1期40-41,共2页
研究了杏鲍菇在摇床阶段的培养条件 ,认为培养基配方以天然基质 ,如 :麦麸、豆粉等适量加入为好 ,并优选了蔗糖 0 2 % ,蛋白胨 0 0 5 % ,麦麸 5 % ,KH2 PO40 3% ,MgSO40 15 % ,琼脂 0 1%的配方 ,其生物量干重达 4 4 9g/ 10 0mL ;... 研究了杏鲍菇在摇床阶段的培养条件 ,认为培养基配方以天然基质 ,如 :麦麸、豆粉等适量加入为好 ,并优选了蔗糖 0 2 % ,蛋白胨 0 0 5 % ,麦麸 5 % ,KH2 PO40 3% ,MgSO40 15 % ,琼脂 0 1%的配方 ,其生物量干重达 4 4 9g/ 10 0mL ;摇床培养时间 7d为宜 ,其生长曲线提示 ,为减少发酵罐培养动力、人力等投入 ,应在增殖旺盛期转接 ,预计可使时间缩短为 4d左右 ;摇床培养三角瓶装量 1/ 2以内 ,溶解氧满足需要 ,生物量较稳定 ,大于 1/ 2生物量明显减少。 展开更多
关键词 杏鲍菇 液体培养 培养条件 培养配方 天然基质
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自制NECM修复兔耳廓软骨缺损的试验研究 被引量:1
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作者 王彦君 孔维佳 毕胜斌 《中华耳科学杂志》 CSCD 2004年第1期48-53,共6页
目的本研究的目的在于评价自制同种异体天然细胞外基质(NatureExtracellularMatrix,NECM)在修复兔耳廓软骨缺损中的价值,从而在体外研究的基础上进一步证实我们采用的去污剂-酶四步法制作的NECM在组织工程学中的可行性。方法选用10只新... 目的本研究的目的在于评价自制同种异体天然细胞外基质(NatureExtracellularMatrix,NECM)在修复兔耳廓软骨缺损中的价值,从而在体外研究的基础上进一步证实我们采用的去污剂-酶四步法制作的NECM在组织工程学中的可行性。方法选用10只新西兰大白兔,于其双耳廓制造1郾0×1郾0cm大小的软骨缺损后,分别作以下研究①灰兔NECM修复兔耳廓缺损。②灰兔NECM复合软骨膜修复兔耳廓缺损;③不植任何材料的空白对照。术后4、6、12、24周取材并行组织学检查。结果NECM植入后4、6周有轻重不一的炎症反应,第12周炎症反应消失,NECM周边无包裹现象。第12周时NECM复合软骨膜组有软骨膜细胞长入NECM,此时的软骨膜细胞多处于增殖期,24周时软骨膜细胞继续增殖分化细胞逐渐长入NECM深部,且部分软骨膜细胞发育成熟。单纯NECM修复组,第6周出现纤维结缔组织长入NECM,12、24周纤维结缔组织逐渐长入NECM深部,并逐渐取代NECM。结论①NECM可诱导软骨膜细胞增殖分化生长,修复软骨缺损;②NECM具有较好的组织亲和性和相容性;③软骨膜细胞可以作为NECM再生软骨的种子细胞的来源;④软骨膜可以阻止纤维结缔组织侵入修复区NECM。 展开更多
关键词 NECM 耳廓 软骨缺损 天然细胞外 组织工程学 软骨膜
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