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天冬酰胺合成酶在复发/难治的结外NK/T细胞淋巴瘤中的表达及临床意义
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作者 吴少杰 李余发 王玉珏 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期465-469,共5页
目的探讨天冬酰胺合成酶在复发/难治的结外NK/T细胞淋巴瘤中的表达及临床的意义。方法收集我科从2013年1月~2016年1月经病理形态学和免疫组化确诊的10例经其他方案化疗失败的复发/难治的结外NK/T细胞淋巴瘤,评估其疗效,利用支链DNA液相... 目的探讨天冬酰胺合成酶在复发/难治的结外NK/T细胞淋巴瘤中的表达及临床的意义。方法收集我科从2013年1月~2016年1月经病理形态学和免疫组化确诊的10例经其他方案化疗失败的复发/难治的结外NK/T细胞淋巴瘤,评估其疗效,利用支链DNA液相芯片技术检测复发/难治的结外NK/T细胞淋巴瘤组织及慢性鼻炎组织中天冬酰胺合成酶表达量。利用统计学方法分析天冬酰胺合成酶表达量与组织病理学和总生存期、无进展生存期的关系。结果 10例复发/难治的结外NK/T细胞淋巴瘤患者中6例因疾病进展而死亡;研究发现复发/难治的结外NK/T细胞淋巴瘤组织与非肿瘤组织中天冬酰胺合成酶m RNA表达存在差异(P<0.05)。天冬酰胺合成酶表达量与国际预后指数相关(P=0.023);Kaplan-Meier生存曲线显示高表达天冬酰胺合成酶的患者总生存期及无进展生存期短。结论研究表明低表达天冬酰胺合成酶的复发/难治的结外淋巴瘤更适合以门冬酰胺酶为基础的方案治疗。 展开更多
关键词 复发/难治的结外NK/T细胞淋巴瘤 天冬酰胺合成酶表达量 门冬酰胺 疗效
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桑树天冬酰胺合成酶基因的克隆与表达分析 被引量:5
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作者 潘宝华 潘刚 +4 位作者 方荣俊 赵卫国 张林 程嘉翎 刘利 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期1-8,共8页
天冬酰胺合成酶B(asparagine synthetase,AS-B;EC 6.3.5.4)参与植物氮同化过程的催化与调节。在构建的盐胁迫下桑树(Morus L.)抑制消减杂交(SSH)文库中发现一个编码天冬酰胺合成酶的基因片段,采用cDNA末端快速扩增(RACE)方法获得2 061 b... 天冬酰胺合成酶B(asparagine synthetase,AS-B;EC 6.3.5.4)参与植物氮同化过程的催化与调节。在构建的盐胁迫下桑树(Morus L.)抑制消减杂交(SSH)文库中发现一个编码天冬酰胺合成酶的基因片段,采用cDNA末端快速扩增(RACE)方法获得2 061 bp的全长序列,完整的开放读码框(ORF)长1 761 bp,编码586个氨基酸,预测蛋白分子质量65.66 kD,将该基因命名为桑树天冬酰胺合成酶基因(MaAS,GenBank登录号:HQ025955)。序列分析显示,MaAS编码的蛋白包括2个保守的功能域(谷氨酰胺-氨基转移结构域和合成酶结构域),与其它植物天冬酰胺合成酶的氨基酸序列相似性在75%以上。将MaAS基因开放读码框连接到pET28a(+)表达载体中,转化大肠杆菌BL21后,诱导表达的MaAS重组蛋白分子质量大小与预测的分子质量一致。采用邻接法构建的桑树和其它植物基于MaAS蛋白氨基酸序列的系统进化树显示:桑树、葡萄(Vitis vinif-era)、毛果杨(Populus trichocarpa)、蓖麻(Ricinus communis)聚为一类,亲缘关系较近。半定量RT-PCR分析表明,MaAS基因在桑树不同部位的转录水平存在明显差异,在盛花期的雌花中转录水平最高,尚未木质化的幼根和成熟桑椹中的转录水平较高,幼茎的茎皮和木质部中的转录水平较低,嫩叶中的转录水平很低,腋芽中的转录水平最低。 展开更多
关键词 桑树 天冬酰胺合成酶 基因克隆 基因表达
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大豆天冬酰胺合成酶B基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 被引量:3
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作者 张继 王相晶 +2 位作者 于丹 王晴 向文胜 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期17-21,共5页
根据GenBank登陆大豆天冬酰胺合成酶(AS-B)基因序列(登录号:GMU55874)设计特异引物,通过PCR扩增从大豆(Glycine max)cDNA中克隆出AS-B基因。将该基因克隆到pET30a(+)载体,构建重组表达载体pET30a-AS,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)pLysS,并... 根据GenBank登陆大豆天冬酰胺合成酶(AS-B)基因序列(登录号:GMU55874)设计特异引物,通过PCR扩增从大豆(Glycine max)cDNA中克隆出AS-B基因。将该基因克隆到pET30a(+)载体,构建重组表达载体pET30a-AS,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)pLysS,并进行表达条件优化。结果表明,在16℃条件下,经0.5mmol·L-1IPTG诱导14 h,大部分重组AS-B以可溶性蛋白的形式存在。经Ni-NTA亲和层析和Sephadex G50脱盐后,重组蛋白产率为23.4 mg·L-1,纯度>90%,以L-谷氨酰胺和NH4Cl为氮源供体时,其比活力分别为2.32和2.60μmol·min-1.mg-1。研究结果为研究大豆AS-B结构与功能和酶催化动力学机制及建立AS-B抑制剂的高通量筛选平台奠定基础。 展开更多
关键词 天冬酰胺合成酶B 克隆 表达
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小黑麦天冬酰胺合成酶基因表达载体构建及功能验证 被引量:1
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作者 张晓磊 李培培 +1 位作者 任丽彤 孔广超 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1392-1399,共8页
【目的】对所克隆的小黑麦天冬酰胺合成酶基因(TriAS)的功能进行验证。【方法】构建TriAS-PZP植物表达载体,并通过沾花法侵染拟南芥。在盐胁迫条件下对转基因拟南芥种子萌发情况进行调查,并测定其幼苗中丙二醛含量和SOD酶活性。【结果... 【目的】对所克隆的小黑麦天冬酰胺合成酶基因(TriAS)的功能进行验证。【方法】构建TriAS-PZP植物表达载体,并通过沾花法侵染拟南芥。在盐胁迫条件下对转基因拟南芥种子萌发情况进行调查,并测定其幼苗中丙二醛含量和SOD酶活性。【结果】构建了TriAS-PZP植物表达载体,将TriAS基因已整合入拟南芥基因组中,并能够在拟南芥中稳定遗传。转TriAS基因拟南芥在盐胁迫条件下萌发率、幼苗根长增长速度均较野生型高,且丙二醛含量和SOD酶活性却均低于野生型。【结论】构建了所克隆基因TriAS的过量植物表达载体,证明所克隆的小黑麦天冬酰胺合成酶基因促进了拟南芥耐盐性能的提高,表明该基因具有增强植物耐盐性的功能。 展开更多
关键词 小黑麦 天冬酰胺合成酶 表达载体
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枇杷黄酮醇合成酶FLS基因表达与黄酮醇积累的相关性分析 被引量:7
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作者 郑雪莲 李嘉仪 +1 位作者 杨俊 郑国华 《福建农业科技》 2019年第5期1-6,共6页
以解放钟枇杷为材料,分析果实发育过程中黄酮醇合成酶(Flavonol Synthase,FLS)基因表达与黄酮醇积累的相关性,进而探讨枇杷果实黄酮醇积累的分子机制。利用高效液相色谱法(HPLC)对不同时期枇杷果实黄酮醇含量进行测定,通过RT-qPCR技术... 以解放钟枇杷为材料,分析果实发育过程中黄酮醇合成酶(Flavonol Synthase,FLS)基因表达与黄酮醇积累的相关性,进而探讨枇杷果实黄酮醇积累的分子机制。利用高效液相色谱法(HPLC)对不同时期枇杷果实黄酮醇含量进行测定,通过RT-qPCR技术检测了不同发育时期果实黄酮醇合成酶FLS基因的表达量。结果表明:枇杷果实中以黄酮醇含量最高,其次是二氢黄酮醇。黄酮醇含量在成熟过程中总体呈现下降趋势,特别在果实发育前期(花后55~65d)其含量下降幅度较大;而二氢黄酮醇含量呈上升趋势,黄酮醇合成酶FLS基因的表达量变化与黄酮醇含量变化趋势相似。枇杷果实不同时期的黄酮醇合成酶FLS基因表达量与黄酮醇含量呈显著正相关,但与二氢黄酮醇含量呈显著负相关,表明黄酮醇合成酶FLS基因对枇杷果实黄酮醇的合成具有明显的正调控作用。 展开更多
关键词 枇杷 黄酮醇 黄酮醇合成酶基因 基因表达
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枇杷果实蔗糖磷酸合酶基因cDNA片段的克隆及表达分析 被引量:1
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作者 倪照君 高志红 +3 位作者 顾林平 章镇 黄蕾芳 王秀云 《江西农业学报》 CAS 2010年第9期42-45,共4页
根据GenBank中已登录的多种植物的蔗糖磷酸合成酶基因的保守序列设计引物,采用RT-PCR方法,从枇杷果实中扩增出该基因的cDNA片段并测序,分别为386 bp和383 bp。序列分析表明,枇杷果实蔗糖磷酸合成酶基因与桃果实蔗糖磷酸合成酶基因相似性... 根据GenBank中已登录的多种植物的蔗糖磷酸合成酶基因的保守序列设计引物,采用RT-PCR方法,从枇杷果实中扩增出该基因的cDNA片段并测序,分别为386 bp和383 bp。序列分析表明,枇杷果实蔗糖磷酸合成酶基因与桃果实蔗糖磷酸合成酶基因相似性达91%。半定量RT-PCR分析表明,该基因在枇杷果实生长发育过程中的表达量逐渐增加。所得基因片段已在GenBank中注册,386 bp和383 bp登记号分别为HM122759和HM146926。 展开更多
关键词 枇杷果实 蔗糖 磷酸合成酶基因 合酶基因 CDNA片段 克隆 表达分析 GENBANK 生长发育过程 分析表 RT-PCR分析 RT-PCR方法 保守序列 设计引物 基因片段 多种植物 相似性 桃果实 表达 半定
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