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大豆根系天冬氨酸分解代谢对低氮低磷胁迫的应答
1
作者 孙铭泽 杨光 +3 位作者 刘子君 刘美玲 谷勇哲 敖雪 《大豆科学》 北大核心 2025年第1期72-83,共12页
天冬氨酸分解代谢途径产生了多种必需氨基酸,该途径也是植物体内各种氨基酸代谢的关键途径。氮和磷是限制大豆根系发育和代谢的重要元素,为探究大豆根系天冬氨酸代谢对低氮低磷胁迫的响应机制,以不同磷效率大豆品种为试验材料,采用砂培... 天冬氨酸分解代谢途径产生了多种必需氨基酸,该途径也是植物体内各种氨基酸代谢的关键途径。氮和磷是限制大豆根系发育和代谢的重要元素,为探究大豆根系天冬氨酸代谢对低氮低磷胁迫的响应机制,以不同磷效率大豆品种为试验材料,采用砂培试验,设置不同氮磷培养处理,分析大豆根系天冬氨酸分解代谢途径在低氮和低磷条件下的变化情况,包括相关代谢产物的积累、氨基酸含量和相关酶活性及GmAK1基因表达量的变化。设置两个磷处理:常磷处理(P+,0.5 mmol·L^(-1))和低磷处理(P-,0.005 mmol·L^(-1))。设置两个氮处理:常氮处理(N+,2 mmol·L^(-1))和低氮处理(N-,0.2 mmol·L^(-1))。结果表明:与常磷常氮(P+N+)条件相比,常磷低氮(P+N-)胁迫处理使大豆根系氮磷积累量下降了11.63%~44.89%,低磷常氮(P-N+)胁迫使其降低了14.80%~46.89%,P-N+胁迫对大豆根系氮磷积累量造成的影响更为显著。大豆根系天冬氨酸激酶(AK)活性在各个时期都显著高于天冬氨酸转氨酶(AST)和天冬酰胺合成酶(ASNS)。在V2期,低磷低氮(P-N-)胁迫使磷高效大豆品种辽豆13根系的ASNS活性显著提高10.86%,P+N-胁迫使磷低效大豆铁丰3号根系的AK活性显著提高5.21%;在R^(2)期,P-N-胁迫使铁丰3号根系的ASNS活性显著提高了8.84%;在R6期,3种酶活性在不同处理下变化范围较小。所测氨基酸含量中,除蛋氨酸(Met)外,其余氨基酸均对P-N+胁迫反应明显,且苗期最显著。此外,两个品种大豆根系AK酶编码基因GmAK1的表达量受P-N+胁迫影响更为明显,其中,P-N+胁迫使磷高效大豆辽豆13根系GmAK1的表达量在R^(2)期显著增加了77.92%,使磷低效大豆铁丰3号显著降低了89.61%。研究阐明了低磷胁迫较低氮胁迫对大豆根系天冬氨酸分解代谢途径具有更为显著的影响,且苗期表现最为明显,为低氮和低磷条件影响大豆根系的研究提供新思路。 展开更多
关键词 大豆根系 低氮 低磷 氨基酸代谢 天冬氨酸分解代谢 酶活性
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大豆AK基因的克隆与序列多样性分析
2
作者 于妍 唐敬仙 +5 位作者 姜威 蒋洪蔚 邱红梅 刘春燕 陈庆山 胡国华 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期574-580,共7页
基于NCBI网站下载获得的大豆AK基因cDNA序列设计特异引物,以大豆品种东农42总RNA为模板,通过RT-PCR获得约1 690 bp cDNA片段,经序列比对认定为AK基因序列。以19个赖氨酸和蛋氨酸含量特殊的大豆品种为材料,采用相同方法在RNA中进行扩增,... 基于NCBI网站下载获得的大豆AK基因cDNA序列设计特异引物,以大豆品种东农42总RNA为模板,通过RT-PCR获得约1 690 bp cDNA片段,经序列比对认定为AK基因序列。以19个赖氨酸和蛋氨酸含量特殊的大豆品种为材料,采用相同方法在RNA中进行扩增,并对产物测序,利用软件对所得序列进行分析。结果显示：在不同的大豆品种中AK基因的核酸序列存在两种变异方式,第一种是在336 bp产生1个T碱基突变的基因序列,第二种是在1 369-1 374 bp处出现“CAAGTG”6个碱基插入的序列;在蛋白质水平上,主要是在456-457个氨基酸处存在A和S两个氨基酸插入突变。AK基因结构完整,其编码的蛋白产物具有AA_kinase、Carbamate kinase-like、Aspartate kinase和ACT保守结构域。本研究首次对大豆中AK基因多样性进行了分析,为大豆天冬氨酸代谢途径其它相关酶基因的研究提供了理论依据,也为大豆AK基因在植物基因工程等领域的研究和应用奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 大豆 天冬氨酸代谢 天冬氨酸激酶(AK) 基因多样性
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问号钩端螺旋体诱导J774A．1细胞凋亡及caspase-3、-6活化对凋亡的影响 被引量：1
3
作者 金丹丹 董海艳 +2 位作者 严杰 李立伟 毛亚飞 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2008年第6期558-563,共6页
目的:了解问号钩端螺旋体(钩体)诱导小鼠单核-巨噬样细胞(J774A.1)凋亡的作用,以及caspase-3、-6活化对凋亡的影响。方法:建立问号钩体黄疸出血群赖型56601株J774A.1细胞感染模型。采用FITC-Annexin V/PI荧光标记流式细胞术检测细胞凋... 目的:了解问号钩端螺旋体(钩体)诱导小鼠单核-巨噬样细胞(J774A.1)凋亡的作用,以及caspase-3、-6活化对凋亡的影响。方法:建立问号钩体黄疸出血群赖型56601株J774A.1细胞感染模型。采用FITC-Annexin V/PI荧光标记流式细胞术检测细胞凋亡或坏死情况。分别采用荧光比色法和WesternBlot,检测感染细胞caspase-3、-6活性及其底物(PARA和LaminA/C)剪切情况。结果:多种不同浓度的问号钩体赖株感染均可使J774A.1细胞发生凋亡,其中以问号钩体∶细胞=100∶1的比例感染时凋亡率最高(48.81%±5.95%)。感染细胞caspase-3和-6最大活性分别为(1453.41±36.07)FU和(618.65±39.82)FU,是未感染细胞的16.38和9.98倍。感染细胞的PARP和Lamin A/C均被剪切。Caspase-3、-6抑制剂对问号钩体赖株诱导的J774A.1细胞凋亡有明显的阻断作用。结论:问号钩体可诱导J774A.1细胞凋亡,caspase-3和-6与该细胞凋亡密切相关。 展开更多
关键词 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶酶/代谢 钩端螺旋体 问号/致病力 流式细胞术 细胞凋亡 信号传导/caspase
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