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雌激素受体α真核表达载体的构建及在大鼠骨髓基质干细胞中的表达
被引量：
3
1
作者
祝强
王婧
+3 位作者
董隽
史立新
张旭
洪宝发
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2014年第1期34-37,共4页
目的雌激素在很多靶器官中发挥重要生物调节作用,主要通过雌激素受体(estrogen receptor,ER)来介导。构建ERα真核表达载体并于大鼠骨髓基质干细胞(rat marrow mesenchymal stem cells,rBMSCs)中表达,为后续研究ERα的功能奠定良好的基...
目的雌激素在很多靶器官中发挥重要生物调节作用,主要通过雌激素受体(estrogen receptor,ER)来介导。构建ERα真核表达载体并于大鼠骨髓基质干细胞(rat marrow mesenchymal stem cells,rBMSCs)中表达,为后续研究ERα的功能奠定良好的基础。方法采用RT-PCR技术从SD大鼠子宫及双侧附件中提取并扩增ERα,酶切后,克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+);重组载体经PCR、酶切、测序鉴定正确后瞬时转染rBMSCs,采用RT-PCR和Western blotting分析ERα在细胞中的表达,并采用Realtime-PCR和MTT的方法比较ERα高表达后对细胞生长周期的影响。结果成功构建了重组质粒pcDNA-ERα,RT-PCR和Western blotting显示该质粒能在rBMSCs中高效表达,Realtime-PCR和MTT比较分析表明,ERα的高表达对细胞的生长产生一定的抑制作用。结论成功构建ERα真核表达载体,该载体在rBMSCs中成功转录与表达,外源性ERα基因转染能使rBMSCs的增殖受抑,可能与ERα的核内高表达相关。
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关键词
雌激素受体理
基
因表达
大鼠骨髓基质干细胞
转染
鉴定
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职称材料
淫羊藿苷通过OPG/RANKL信号途径调节骨吸收的机理研究
被引量：
22
2
作者
马小妮
葛宝丰
+6 位作者
陈克明
周建
王嘉琪
郭晓宇
宋鹏
吕享
成魁
《中国骨质疏松杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期1-5,共5页
目的探讨淫羊藿苷抑制骨吸收的机理。方法贴壁分离法培养大鼠骨髓基质干细胞,流式检测细胞纯度。加入10-5M淫羊藿苷12 h、24 h、36 h、48 h后用Real-time-RT-PCR检测OPG和RANKL基因表达,Western blotting检测蛋白表达。结果第2代培养细...
目的探讨淫羊藿苷抑制骨吸收的机理。方法贴壁分离法培养大鼠骨髓基质干细胞,流式检测细胞纯度。加入10-5M淫羊藿苷12 h、24 h、36 h、48 h后用Real-time-RT-PCR检测OPG和RANKL基因表达,Western blotting检测蛋白表达。结果第2代培养细胞的纯度达到95%以上。OPG基因和蛋白表达水平在24 h时明显升高,与对照相比有显著差异。OPG和RANKL的比值显著高于对照组。结论淫羊藿苷主要通过提高OPG及OPG和RANKL的比值来发挥抑制骨吸收的作用。
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关键词
大鼠骨髓基质干细胞
核因子ΚB受体活化因子配体
骨保护素
淫羊藿苷
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职称材料
题名
雌激素受体α真核表达载体的构建及在大鼠骨髓基质干细胞中的表达
被引量：
3
1
作者
祝强
王婧
董隽
史立新
张旭
洪宝发
机构
解放军总医院泌尿外科
解放军总医院泌尿外科口腔科
出处
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2014年第1期34-37,共4页
文摘
目的雌激素在很多靶器官中发挥重要生物调节作用,主要通过雌激素受体(estrogen receptor,ER)来介导。构建ERα真核表达载体并于大鼠骨髓基质干细胞(rat marrow mesenchymal stem cells,rBMSCs)中表达,为后续研究ERα的功能奠定良好的基础。方法采用RT-PCR技术从SD大鼠子宫及双侧附件中提取并扩增ERα,酶切后,克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+);重组载体经PCR、酶切、测序鉴定正确后瞬时转染rBMSCs,采用RT-PCR和Western blotting分析ERα在细胞中的表达,并采用Realtime-PCR和MTT的方法比较ERα高表达后对细胞生长周期的影响。结果成功构建了重组质粒pcDNA-ERα,RT-PCR和Western blotting显示该质粒能在rBMSCs中高效表达,Realtime-PCR和MTT比较分析表明,ERα的高表达对细胞的生长产生一定的抑制作用。结论成功构建ERα真核表达载体,该载体在rBMSCs中成功转录与表达,外源性ERα基因转染能使rBMSCs的增殖受抑,可能与ERα的核内高表达相关。
关键词
雌激素受体理
基
因表达
大鼠骨髓基质干细胞
转染
鉴定
Keywords
Estrogen receptor a
Gene expression
Rat marrow mesenchymal stem cells
Transfection
Identification
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
淫羊藿苷通过OPG/RANKL信号途径调节骨吸收的机理研究
被引量：
22
2
作者
马小妮
葛宝丰
陈克明
周建
王嘉琪
郭晓宇
宋鹏
吕享
成魁
机构
兰州军区兰州总医院骨科研究所
出处
《中国骨质疏松杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期1-5,共5页
基金
甘肃省科技重大专项资助项目(09ZNKDA025)
文摘
目的探讨淫羊藿苷抑制骨吸收的机理。方法贴壁分离法培养大鼠骨髓基质干细胞,流式检测细胞纯度。加入10-5M淫羊藿苷12 h、24 h、36 h、48 h后用Real-time-RT-PCR检测OPG和RANKL基因表达,Western blotting检测蛋白表达。结果第2代培养细胞的纯度达到95%以上。OPG基因和蛋白表达水平在24 h时明显升高,与对照相比有显著差异。OPG和RANKL的比值显著高于对照组。结论淫羊藿苷主要通过提高OPG及OPG和RANKL的比值来发挥抑制骨吸收的作用。
关键词
大鼠骨髓基质干细胞
核因子ΚB受体活化因子配体
骨保护素
淫羊藿苷
Keywords
Rat bone marrow stromal cells
Receptor activator of nuclear factor-κB ligand （RANKL）
osteoprotegerin
Icariin
分类号
R965 [医药卫生—药理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
雌激素受体α真核表达载体的构建及在大鼠骨髓基质干细胞中的表达
祝强
王婧
董隽
史立新
张旭
洪宝发
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2014
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
淫羊藿苷通过OPG/RANKL信号途径调节骨吸收的机理研究
马小妮
葛宝丰
陈克明
周建
王嘉琪
郭晓宇
宋鹏
吕享
成魁
《中国骨质疏松杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
22
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职称材料
已选择
0
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参考文献
引证文献
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