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稠李花色苷酶法制备及对H_2O_2诱导大鼠胰岛素瘤细胞损伤的保护作用 被引量:2
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作者 刘晓 曹向宇 +5 位作者 李其久 孙宇航 杨思敏 于慧 王纬宇 刘剑利 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第6期7-12,共6页
目的:探究纤维素酶酶法制备稠李花色苷的最佳条件,并研究制备的稠李花色苷对H_2O_2诱导的大鼠胰岛素瘤(Ins-1)细胞损伤的保护作用。方法:通过单因素试验和正交试验,优化得到酶法制备稠李花色苷的最佳条件;稠李花色苷处理大鼠Ins-1细胞,... 目的:探究纤维素酶酶法制备稠李花色苷的最佳条件,并研究制备的稠李花色苷对H_2O_2诱导的大鼠胰岛素瘤(Ins-1)细胞损伤的保护作用。方法:通过单因素试验和正交试验,优化得到酶法制备稠李花色苷的最佳条件;稠李花色苷处理大鼠Ins-1细胞,进行形态学观察、3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]细胞活力实验、2’,7’-二氢二氯荧光素二乙酸酯(2’,7’-dichloro dihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)荧光探针法检测细胞内活性氧实验研究稠李花色苷对H_2O_2诱导损伤的Ins-1细胞保护作用。结果:纤维素酶法提取稠李花色苷的最佳条件为:温度60℃、纤维素酶添加量9 mg/g、料液比1∶35(g/m L)、p H 3.5,此条件下稠李花色苷得率为(0.956±0.027)mg/g;形态学观察及MTT细胞活力实验显示,稠李花色苷对H_2O_2诱导损伤的Ins-1细胞具有较强的保护作用,DCFH-DA法检测细胞内活性氧实验说明,稠李花色苷能够显著地清除Ins-1细胞内的活性氧。结论:纤维素酶法制备稠李花色苷是一种有效的方法,制备的稠李花色苷对H_2O_2诱导的大鼠Ins-1细胞损伤具有较强的保护作用。 展开更多
关键词 花色苷 酶法 氧化损伤 保护 大鼠胰岛素瘤(Ins-1)细胞
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虎杖苷对四氧嘧啶诱导的大鼠胰岛细胞损伤的保护作用 被引量:3
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作者 李卫玲 茹琴 +2 位作者 林款 郑小茂 李超英 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2020年第3期315-320,共6页
目的:研究虎杖苷(Polydatin)对四氧嘧啶(Alloxan)诱导的大鼠胰岛素瘤INS-1细胞损伤的保护作用。方法:利用细胞增殖实验分别检测四氧嘧啶或虎杖苷对INS-1细胞增殖的影响,确定给药浓度;实验分为空白组、模型组(18 mmol/L四氧嘧啶)和不同... 目的:研究虎杖苷(Polydatin)对四氧嘧啶(Alloxan)诱导的大鼠胰岛素瘤INS-1细胞损伤的保护作用。方法:利用细胞增殖实验分别检测四氧嘧啶或虎杖苷对INS-1细胞增殖的影响,确定给药浓度;实验分为空白组、模型组(18 mmol/L四氧嘧啶)和不同浓度虎杖苷保护组(分别给予25、50μg/mL虎杖苷,同时给予18 mmol/L四氧嘧啶),检测细胞存活率、LDH释放、胰岛素分泌、凋亡相关Caspase-3和Caspase-9的活性、活性氧簇ROS、一氧化氮NO、丙二醛MDA的含量及抗氧化相关超氧化物歧化酶SOD、还原型谷胱甘肽GSH水平。结果:10~30 mmol/L四氧嘧啶处理使INS-1细胞存活率显著降低(P<0.05),18 mmol/L四氧嘧啶处理细胞贴壁数目减少,LDH释放升高,胰岛素分泌量降低,凋亡相关Caspase-3和Caspase-9的活性显著升高(P<0.05),氧化应激相关ROS、NO和MDA含量显著提高(P<0.05),抗氧化相关SOD和GSH水平显著降低(P<0.05)。5~100μg/mL虎杖苷对INS-1细胞无毒性作用,相较于模型组,25和50μg/mL虎杖苷能显著提高四氧嘧啶诱导INS-1细胞存活率,改善细胞形态,降低LDH活性,增加胰岛素分泌量,抑制凋亡相关Caspase-3和Caspase-9酶活性,抑制四氧嘧啶诱导的氧化损伤,提高抗氧化相关酶活力(P<0.05)。结论:虎杖苷对四氧嘧啶诱导的INS-1细胞损伤有显著保护作用,其作用机制可能与抑制氧化应激及凋亡有关。 展开更多
关键词 虎杖苷 四氧嘧啶 大鼠胰岛素瘤细胞 氧化应激
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蜜环菌菌索多糖对四氧嘧啶致胰岛细胞损伤的保护作用 被引量:6
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作者 陆军 操玉平 +1 位作者 于敏 沈业寿 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1160-1165,共6页
目的研究蜜环菌菌索多糖(AMP-1)对四氧嘧啶(AXN)致胰岛细胞损伤的影响。方法培养大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1),以AXN损伤细胞,培养液中加入不同浓度的AMP-1(2、10、50、100、500、1000mg.L-1),用MTT法测细胞存活率;使用放免法检测不同浓度AM... 目的研究蜜环菌菌索多糖(AMP-1)对四氧嘧啶(AXN)致胰岛细胞损伤的影响。方法培养大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1),以AXN损伤细胞,培养液中加入不同浓度的AMP-1(2、10、50、100、500、1000mg.L-1),用MTT法测细胞存活率;使用放免法检测不同浓度AMP-1对INS-1细胞葡萄糖刺激性的胰岛素分泌量的变化;用比色法检测INS-1细胞一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)等指标的变化。结果AMP-1可减少AXN对INS-1细胞的损伤,AMP-1处理组的INS-1细胞存活率增加;在5.6mmol.L-1、16.7mmol.L-1葡萄糖刺激下,AMP-1(50、100、500、1000mg.L-1)剂量依赖性地促进了INS-1细胞葡萄糖刺激性的胰岛素分泌;AMP-1能使INS-1细胞NOS活性降低,MDA和NO含量减少,同时增强了SOD的活性,增加了GSH的含量。结论一定浓度范围的AMP-1对葡萄糖刺激下INS-1细胞的胰岛素分泌的促进作用,可能与AMP-1能够增加细胞清除自由基能力有关。 展开更多
关键词 蜜环菌菌索多糖 四氧嘧啶 大鼠胰岛素瘤细胞 胰岛素分泌 氧化损伤
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蜜环菌多糖对大鼠INS-1细胞凋亡的拮抗作用 被引量:7
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作者 许宝奎 操玉平 +2 位作者 于敏 沈业寿 陆军 《中国食用菌》 北大核心 2010年第1期45-48,共4页
培养大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1),以四氧嘧啶损伤细胞,培养液中加入不同浓度的AMP-1,MTT法测定细胞存活率,PI荧光染色观测凋亡细胞密度,流式细胞术法检测细胞凋亡率,Western blot法检测蛋白bcl-2和bax的表达。结果表明,AMP-1浓度在50 mg... 培养大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1),以四氧嘧啶损伤细胞,培养液中加入不同浓度的AMP-1,MTT法测定细胞存活率,PI荧光染色观测凋亡细胞密度,流式细胞术法检测细胞凋亡率,Western blot法检测蛋白bcl-2和bax的表达。结果表明,AMP-1浓度在50 mg·L^(-1)至500 mg·L^(-1)之间,均可提高受四氧嘧啶损伤的INS-1细胞的存活率,其中浓度为400 mg·L^(-1)时存活率最高;凋亡细胞密度,随AMP-1浓度的增大而降低;AXN+AMP-1组INS-1细胞凋亡率均低于四氧嘧啶组;Western blot法检测显示bcl-2蛋白表达量升高,bax蛋白表达量降低。AMP-1对四氧嘧啶诱导大鼠INS-1细胞凋亡具有明显的拮抗作用,其作用机制可能是通过对线粒体途径中bcl-2和bax蛋白表达的调控而抑制了细胞的凋亡。 展开更多
关键词 蜜环菌菌索多糖 大鼠胰岛素瘤细胞 细胞凋亡 拮抗作用
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