卡巴胆碱对失血性休克大鼠肺微血管内皮细胞功能的影响

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作者 陈超 王化冰 +3 位作者 索小燕 李征 张辉 李方方 《河南医学研究》 CAS 2024年第11期1935-1939,共5页

目的 观察大鼠失血性休克时卡巴胆碱对肺微血管内皮细胞的作用。方法 将30只健康雄性SD大鼠(SPF级)按每组10只随机分为假休克组(SS组)、失血性休克组(HS组)、失血性休克+卡巴胆碱组(CBL组)。失血性休克动物模型按照Wiggers改良法制作,... 目的 观察大鼠失血性休克时卡巴胆碱对肺微血管内皮细胞的作用。方法 将30只健康雄性SD大鼠(SPF级)按每组10只随机分为假休克组(SS组)、失血性休克组(HS组)、失血性休克+卡巴胆碱组(CBL组)。失血性休克动物模型按照Wiggers改良法制作,各组模型制备完毕后6 h,经右侧股动脉采血,检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,取右肺下叶肺组织检测Src抑制的蛋白激酶C的底物(SSeCKS)、E-选择素蛋白质水平,取右肺下叶行透射电镜检查肺微血管内皮细胞超微结构。结果 SS组表达少量的TNF-α、SSeCKS、E-选择素,HS组和CBL组表达升高(P<0.05),与HS组相比,CBL组表达降低(P<0.05)。SS组肺微血管内皮细胞细胞膜表面光滑,细胞膜、细胞质、细胞核形态结构正常;HS组肺微血管内皮细胞出现细胞水肿、坏死和凋亡表现(细胞膜表面皱折、细胞膜表面凹凸不平、细胞器水肿、异染色质染色加深边集等);CBL组较SS组,细胞有所损伤,但好于HS组。结论 大鼠失血性休克时卡巴胆碱对肺微血管内皮细胞具有保护作用,也可通过抑制炎症细胞合成和释放炎症介质减轻对血管内皮细胞的损伤。 展开更多

关键词 失血性休克 肺微血管内皮细胞 卡巴胆碱 SSECKS E-选择素

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抑制PKCβ2活化改善脂多糖诱导的大鼠肺微血管内皮细胞线粒体损伤 被引量：1

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作者 张元 夏中元 +1 位作者 苏娃婷 雷少青 《山西医科大学学报》 CAS 2018年第10期1175-1178,共4页

目的探究蛋白激酶C beta 2(protein kinase C beta 2,PKCβ2)信号对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)处理的大鼠肺微血管内皮细胞(rat pulmonary microvascular endothelial cells,RPMECs)线粒体的影响。方法生长良好的RPMECs随机分为三... 目的探究蛋白激酶C beta 2(protein kinase C beta 2,PKCβ2)信号对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)处理的大鼠肺微血管内皮细胞(rat pulmonary microvascular endothelial cells,RPMECs)线粒体的影响。方法生长良好的RPMECs随机分为三组(n=6):正常对照组(C组),脂多糖处理组(LPS组),脂多糖处理加PKCβ2特异性抑制剂CGP53353治疗组(LPS+CGP组)。相应商品化试剂盒检测细胞活力、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量、超氧化物歧化酶(super oxide dismutase,SOD)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。Western blotting检测p-PKCβ2 (phosphorylated-PKCβ2)、PKCβ2、细胞色素c(cytochrome c,Cyt c)表达水平。结果 LPS曝露可导致RPMECs细胞活力显著降低(P <0. 05),SOD含量显著减少(P <0. 05);而LDH释放量、MDA含量、p-PKCβ2及Cyt c蛋白表达水平显著增加(均P <0. 05)。CGP干预可有效抑制LPS诱导的细胞活力下降,SOD消耗、LDH释放、MDA生成、PKCβ2活化及Cyt c表达上调(均P <0. 05)。结论抑制PKCβ2活化可减轻LPS诱导的RPMECs线粒体损伤。 展开更多

关键词 蛋白激酶C BETA 2 脂多糖 大鼠肺微血管内皮细胞 线粒体损伤

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升降散对急性肺损伤大鼠肺微血管内皮细胞NF-κB表达的影响 被引量：5

3

作者 魏凯峰 耿义红 +3 位作者 常加松 潘云 张庆宏 张梅勇 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 2008年第5期341-342,F0003,共3页

目的探讨升降散对急性肺损伤的治疗作用机理。方法40只雄性SD大鼠,随机分为正常组、模型组、升降散大剂量组、中剂量组及小剂量组。给药6 d后,舌下静脉注射LPS复制急性肺损伤模型,取肺组织切片,免疫组化检测。采集图像,分析微血管内皮... 目的探讨升降散对急性肺损伤的治疗作用机理。方法40只雄性SD大鼠,随机分为正常组、模型组、升降散大剂量组、中剂量组及小剂量组。给药6 d后,舌下静脉注射LPS复制急性肺损伤模型,取肺组织切片,免疫组化检测。采集图像,分析微血管内皮细胞核的平均灰度。结果药物治疗组与模型组比较,能明显抑制微血管内皮细胞核中NF-κB的表达,有显著性差异。结论升降散可通过抑制肺微血管内皮细胞NF-κB的表达,抑制炎症反应对肺组织造成的急性损伤,对急性肺损伤起到防治作用。 展开更多

关键词 升降散 急性肺损伤 肺微血管内皮细胞 核因子kB表达

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大鼠肺微血管内皮细胞的体外分离培养与纯化 被引量：2

4

作者 梁宏伟 冯波 +3 位作者 朱雯宇 王建舫 张涛 穆祥 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期2143-2150,共8页

旨在建立一种简单易行、获得细胞纯度较高的体外分离、培养大鼠肺微血管内皮细胞的方法。取5~7日龄SD大鼠分离外周肺组织,组织植块法获得原代大鼠肺微血管内皮细胞,37℃、5%CO_2培养箱中传代培养,采用免疫磁珠法对其进行分离纯化,并对... 旨在建立一种简单易行、获得细胞纯度较高的体外分离、培养大鼠肺微血管内皮细胞的方法。取5~7日龄SD大鼠分离外周肺组织,组织植块法获得原代大鼠肺微血管内皮细胞,37℃、5%CO_2培养箱中传代培养,采用免疫磁珠法对其进行分离纯化,并对分离纯化后的细胞进行免疫荧光及流式细胞鉴定,通过MTT比色分析法准确、安全、可靠地检测纯化后传代肺微血管内皮细胞的增殖情况。结果显示：倒置显微镜下观察单个细胞呈短梭形或多角形,汇合后呈铺路石样,单层贴壁生长,细胞分离纯化后经免疫荧光检测CD31呈阳性,流式细胞仪检测淋巴管内皮细胞表面特有标记VEGFR-3呈阴性（P=0.1,且P〈0.5）,且复苏后经MTT测得传代细胞的增殖情况良好。成功建立了一种分离高纯度大鼠肺微血管内皮细胞的体外培养方法。 展开更多

关键词 大鼠 肺微血管内皮细胞 体外分离培养 免疫磁珠纯化

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槟榔多酚对大鼠肺微血管内皮细胞低氧损伤的保护作用 被引量：2

5

作者 贺嘉馨 霍妍 +4 位作者 孙月梅 程俊飞 赵以览 李文斌 王荣 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期405-414,共10页

目的:探究槟榔多酚对大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)低氧损伤的保护作用。方法:采用氧化应激指标丙二醛和超氧化物歧化酶筛选肺部缺氧损伤细胞模型最适条件;采用细胞计数试剂盒法筛选槟榔多酚最适给药剂量。将PMVEC分为常氧对照组、模型... 目的:探究槟榔多酚对大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)低氧损伤的保护作用。方法:采用氧化应激指标丙二醛和超氧化物歧化酶筛选肺部缺氧损伤细胞模型最适条件;采用细胞计数试剂盒法筛选槟榔多酚最适给药剂量。将PMVEC分为常氧对照组、模型对照组和槟榔多酚组,采用BCA法检测蛋白浓度并测定PMVEC中的氧化应激水平,蛋白质印迹法检测炎症和凋亡相关蛋白的表达,免疫荧光染色法检测闭合蛋白和闭锁小带1等紧密连接蛋白的表达,Transwell小室实验检测跨内皮细胞膜电阻,罗丹明荧光染料检测PMVEC屏障的通透性。结果:1%氧浓度培养PMVEC细胞48 h后成功构建肺部缺氧损伤细胞模型;20μg/mL的槟榔多酚可以显著逆转缺氧损伤细胞模型中PMVEC的存活率下降以及氧化应激水平的升高(均P<0.05);槟榔多酚对于低氧诱导下PMVEC中炎症相关蛋白核因子κB(NF-κB)和核因子E2相关因子(Nrf)2的上调有显著抑制作用(均P<0.05);槟榔多酚可以下调低氧诱导下PMVEC中凋亡相关蛋白胱天蛋白酶(caspase)3、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达(均P<0.05),从而减轻低氧诱导下细胞的凋亡;槟榔多酚显著上调低氧诱导下PMVEC闭合蛋白和闭锁小带1的表达(均P<0.05),提高跨膜电阻值并降低罗丹明透过量,改善肺微血管内皮屏障的通透性。结论:槟榔多酚可以通过减轻PMVEC的氧化应激损伤、降低炎症相关蛋白表达、减少细胞凋亡及提高细胞屏障的通透性,改善PMVEC的低氧损伤。 展开更多

关键词 槟榔多酚 低氧肺损伤 细胞凋亡 紧密连接蛋白 氧化应激 肺微血管内皮细胞

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不同酶消化液对大鼠肺微血管内皮细胞分离培养的影响 被引量：1

6

作者 李佩珊 张志欢 +3 位作者 孙雄 吴显平 张永红 张涛 《北京农学院学报》 2020年第2期114-117,共4页

【目的】筛选适用于大鼠肺组织消化分离的酶消化液,为改良大鼠肺微血管内皮细胞的体外分离培养方法提供依据。【方法】无菌取新生大乳鼠肺脏组织,剪碎后随机分为9组,加入相应的酶消化液后,于37℃水浴消化,15 min、30 min和60 min时分别... 【目的】筛选适用于大鼠肺组织消化分离的酶消化液,为改良大鼠肺微血管内皮细胞的体外分离培养方法提供依据。【方法】无菌取新生大乳鼠肺脏组织,剪碎后随机分为9组,加入相应的酶消化液后,于37℃水浴消化,15 min、30 min和60 min时分别吹打和观察、拍照,消化液过70μm细胞筛,滤液离心,沉淀用培养基重悬,接种孵育培养2 h,洗去未贴壁细胞后显微镜观察、拍照。【结果】消化60 min时,除木瓜蛋白酶组外,其他各组均已无明显的块状结构,其中,胰蛋白酶组、胰蛋白酶-弹性蛋白酶组和弹性蛋白酶-胶原酶Ⅱ组消化最为充分;接种孵育2 h后,分散酶Ⅱ-胶原酶Ⅱ组的贴壁细胞量最多,木瓜蛋白酶组无明显的贴壁细胞,其他各组居于二者之间。【结论】分离培养大乳鼠肺微血管内皮细胞时,0.1%分散酶Ⅱ-0.1%胶原酶Ⅱ溶液优于本试验所用其他8种酶消化液。 展开更多

关键词 微血管内皮细胞 酶消化 肺 胶原酶Ⅱ 分散酶Ⅱ

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红景天苷对烟雾暴露大鼠肺微血管内皮细胞活性及细胞核因子-κB/Bcl-2表达水平的影响 被引量：3

7

作者 黄会 曾玉兰 +3 位作者 廖珍慧 施玉琴 黄露 周月泉 《解剖学杂志》 CAS 2021年第6期473-477,490,共6页

目的:探究红景天苷对烟雾暴露大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)活性及细胞核因子-κB(NF-κB)/Bcl-2表达水平的影响。方法:将大鼠随机分为空白组,烟雾组,红景天苷低、中、高剂量组。体外培养大鼠PMVEC,MTT法检测各组PMVEC活性,流式细胞仪检... 目的:探究红景天苷对烟雾暴露大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)活性及细胞核因子-κB(NF-κB)/Bcl-2表达水平的影响。方法:将大鼠随机分为空白组,烟雾组,红景天苷低、中、高剂量组。体外培养大鼠PMVEC,MTT法检测各组PMVEC活性,流式细胞仪检测各组PMVEC凋亡率,H-E染色观察各组大鼠肺病理组织学改变,免疫印迹法检测各组大鼠肺组织NF-κB和Bcl-2蛋白表达。结果:H-E染色结果显示,和空白组比较,烟雾组大鼠可见支气管壁和肺泡结构的破坏,支气管管腔结构变窄,炎症细胞浸润,有黏性液分泌物,肺泡腔变大、壁薄;肺泡间隔变窄或中断,还可见肺大泡;红景天苷低、高剂量组的肺组织结构出现明显改善,且红景天苷高剂量组的肺组织改善最为明显。MTT结果显示,烟雾组大鼠24 h和48 h的PMVEC活性明显低于空白组;和烟雾组比较,红景天苷低、中、高剂量组大鼠的PMVEC活性显著提升,且红景天苷高剂量组大鼠PMVEC活性升高最为显著。细胞凋亡结果显示,和空白组比较,烟雾组PMVEC凋亡率显著增加,红景天苷低、中、高剂量组PMVEC凋亡率显著降低,且随着红景天苷剂量的增加,凋亡率随之降低。和空白组大鼠比较,烟雾组NF-κB蛋白表达显著升高,Bcl-2蛋白表达降低,红景天苷低、中、高剂量组NF-κB蛋白表达显著低于烟雾组,Bcl-2蛋白表达显著升高,且红景天苷高剂量组的效果最为显著。结论:红景天苷可抑制烟雾暴露大鼠PMVEC的凋亡,其作用机制可能与抑制NF-κB的活性、促进Bcl-2表达有关。 展开更多

关键词 红景天苷 烟雾暴露 肺微血管内皮细胞 细胞活性 细胞核因子-ΚB B淋巴细胞瘤-2

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细胞间黏附分子-1在ARDS小鼠肺微血管内皮细胞内的表达变化 被引量：9

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作者 耿申 吴婷 +4 位作者 穆先敏 张晨 刘晨阳 尤强 苏欣 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第4期342-347,共6页

目的细胞间黏附分子-1（intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1）在介导中性粒细胞肺部浸润的过程中起到很大作用。在脂多糖（Lipopolysaccharides,LPS）诱导的急性呼吸窘迫综合征小鼠模型中,观察ICAM-1以及丝裂原激活蛋白激酶2（mi... 目的细胞间黏附分子-1（intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1）在介导中性粒细胞肺部浸润的过程中起到很大作用。在脂多糖（Lipopolysaccharides,LPS）诱导的急性呼吸窘迫综合征小鼠模型中,观察ICAM-1以及丝裂原激活蛋白激酶2（mitogen-activated protein kinase activated protein kinase 2,MK2）和人抗原R（human antigen R,HuR）在小鼠肺微血管内皮细胞（pulmonary microvascular endothelial cell,PMVEC）内表达的变化。方法健康清洁型6~8周雄性C57BL/6小鼠,随机数字表法分为对照组和LPS组,每组5只。LPS组腹腔注射LPS 5 mg/kg（溶于100μL的PBS中）,对照组腹腔注射PBS（5mg/kg）,24 h处死全部小鼠。在LPS诱导的小鼠ARDS模型中,用Real-time PCR方法检测小鼠肺组织分离得到的PMVEC内人抗原R（human antigen R,HuR）、ICAM-1的mRNA表达量,用Western blot法检测总MK2、磷酸化MK2、HuR以及ICAM-1表达量的变化,利用流式细胞仪检测PMVEC表面ICAM-1的表达量及肺部浸润的中性粒细胞数量。结果 LPS组小鼠肺组织W/D较对照组高,差异有统计学意义[（6.16±0.40）vs（3.61±0.28）,P〈0.05]。流式细胞术检测LPS组中性粒细胞浸润率较对照组高[（13.92±3.23）%vs（3.24±1.24）%,P〈0.05]。LPS刺激后小鼠肺组织中ICAM-1的mRNA及蛋白表达较对照组明显增加（P〈0.05）,PMVEC表面ICAM-1表达较对照组也明显增加（P〈0.05）。MK2总量无明显变化,磷酸化MK2较对照组明显增加,HuR mRNA及蛋白总量无明显变化,但存在核质转移。结论特异性阻断或减少微血管内皮细胞中HuR的表达可使ICAM-1表达减少,从而减少中性粒细胞的浸润,减轻ARDS病理生理改变,可为临床治疗ARDS提供一个新靶点。 展开更多

关键词 小鼠肺微血管内皮细胞 急性呼吸窘迫综合征 丝裂原激活蛋白激酶2 人抗原R 细胞间黏附分子-1

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干扰素-γ作用后的小鼠肺微血管内皮细胞对共培养T淋巴细胞增殖的影响及机制 被引量：2

9

作者 徐金环 尹琎 +2 位作者 李琳 李赟 张义成 《山东医药》 CAS 2020年第23期11-15,共5页

目的探讨干扰素-γ(IFN-γ)作用后的小鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)对共培养T淋巴细胞增殖的影响,并探讨其可能的机制。方法分离雌性Balb/C小鼠肺组织,采用组织块贴壁法培养PMVECs;经倒置显微镜、透射电镜观察及内皮细胞表面标志CD31荧... 目的探讨干扰素-γ(IFN-γ)作用后的小鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)对共培养T淋巴细胞增殖的影响,并探讨其可能的机制。方法分离雌性Balb/C小鼠肺组织,采用组织块贴壁法培养PMVECs;经倒置显微镜、透射电镜观察及内皮细胞表面标志CD31荧光检测鉴定,证实为PMVECs且纯度>95%。在Transwell板下层小室中加入PMVECs,随机分为空白对照组、10 ng/m L组、20 ng/m L组、50 ng/m L组、80 ng/m L组,加入终浓度分别为0、10、20、50、80 ng/m L的IFN-γ,Transwell板上层小室中加入T淋巴细胞进行共培养,采用流式细胞术检测上层小室T淋巴细胞增殖指数。将第3代PMVECs随机分为观察组和对照组,分别加入终浓度为80 ng/m L的IFN-γ及等量PBS;采用反相高效液相色谱法检测细胞培养上清中色氨酸、犬尿氨酸水平及吲哚胺2,3-加氧酶(IDO)活性,RT-PCR法及Western blotting法检测细胞IDO mRNA及蛋白表达。结果空白对照组、10 ng/m L组、20 ng/m L组、50 ng/m L组、80ng/m L组T淋巴细胞增殖指数分别为3.06±0.07、2.93±0.09、2.46±0.28、2.21±0.41、2.20±0.05,20 ng/m L组、50ng/m L组、80 ng/m L组T淋巴细胞增殖指数均低于空白对照组(P均<0.01),20 ng/m L组、50 ng/m L组、80 ng/m L组T淋巴细胞增殖指数比较差异均无统计学差异(P均>0.05)。观察组细胞培养上清中色氨酸水平低于对照组,犬尿氨酸水平及IDO活性均高于对照组(P均<0.01)。观察组和对照组细胞IDO mRNA相对表达量分别为0.68±0.02、0,IDO蛋白相对表达量分别为0.49±0.02、0;两组比较P均<0.01。结论IFN-γ作用后的PMVECs可抑制共培养的T淋巴细胞增殖,其机制可能与促进色氨酸降解、犬尿氨酸累积及IDO表达有关。 展开更多

关键词 排异反应 肺微血管内皮细胞 IDO IFN-γ T淋巴细胞

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清热中药对大鼠肺及其微血管内皮细胞磷酸二酯酶活性的影响

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作者 侯显涛 陈武 +2 位作者 朱莉娜 姜代勋 穆祥 《北京农学院学报》 2008年第2期35-38,共4页

采用组织贴块法培养分离大鼠肺微血管内皮细胞（PMVEC），以高效液相色谱（HPLC）检测环核苷酸（cAMP）在酶反应前后磷酸二酯酶（PDE）的变化计算PDE活性，并分析药物对其影响，为研究PMVEC特异性PDE抑制剂和清热药作用机理积累资料。... 采用组织贴块法培养分离大鼠肺微血管内皮细胞（PMVEC），以高效液相色谱（HPLC）检测环核苷酸（cAMP）在酶反应前后磷酸二酯酶（PDE）的变化计算PDE活性，并分析药物对其影响，为研究PMVEC特异性PDE抑制剂和清热药作用机理积累资料。结果显示：分离培养经CD31鉴定的PMVEC，其酶量在5-20μL范围内与PDE活性存在良好的线性关系（r=0.9929）；17味入肺经清热药均对肺组织cAMP-PDE酶活性有不同程度的抑制作用，其中黄芩、黄药子、青蒿抑制率较高，对肺组织酶分别为：75.37%，72%，61.26%，对PMVEC分别为：66.1%，63.54%，59.39%，结果提示以cAMP-PDE活性为指标，有望筛选出其特异性PDE抑制剂，并揭示入肺经清热药的作用机制。 展开更多

关键词 肺微血管内皮细胞 磷酸二酯酶 大鼠 清热中药

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黄芩苷、连翘酯苷对肺微血管内皮细胞分泌IFN-α、IFN-γ的影响 被引量：11

11

作者 林红 胡格 +2 位作者 伊鹏霏 蒋小林 穆祥 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第6期30-34,共5页

为了研究黄芩苷、连翘酯苷对大鼠肺微血管内皮细胞(pul monary microvascular endothelial cells,PMVECs)分泌IFN-α、IFN-γ的影响,本试验以体外培养的PMVECs为模型,用ELISA法检测这2种中药成分在不同浓度、不同时间点诱导PMVECs分泌I... 为了研究黄芩苷、连翘酯苷对大鼠肺微血管内皮细胞(pul monary microvascular endothelial cells,PMVECs)分泌IFN-α、IFN-γ的影响,本试验以体外培养的PMVECs为模型,用ELISA法检测这2种中药成分在不同浓度、不同时间点诱导PMVECs分泌IFN-α和IFN-γ的量。结果表明,黄芩苷在10μg/mL,24 h时诱导PMVECs分泌的IFN-α和IFN-γ的量均最高,连翘酯苷分别在20μg/mL、12 h时和5μg/mL、24 h时诱导PMVECs分泌的IFN-α和IFN-γ的量最高。这一结果为体外筛选诱导PMVECs表达干扰素的中药成分提供了参考,为进一步研究中药成分的抗病毒机理奠定了基础。 展开更多

关键词 黄芩苷 连翘酯苷 肺微血管内皮细胞 IFN-Α IFN-Γ

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黄芪水煎液诱导大鼠肠黏膜微血管内皮细胞增殖以及分泌IFN-γ的研究 被引量：7

12

作者 张磊 孙静 +4 位作者 张涛 董虹 杨佐君 穆祥 胡格 《动物医学进展》 北大核心 2015年第3期50-53,共4页

为了探讨黄芪水煎液能否诱导大鼠肠黏膜微血管内皮细胞(RIMVECs)表达IFN-γ,采用MTT和双夹心ELISA分别检测了黄芪水煎液对体外培养的RIMMVECs增殖以及表达IFN-γ的影响。结果显示,黄芪水煎液在25mg/L^3 200mg/L时促进RIMVECs增殖。为更... 为了探讨黄芪水煎液能否诱导大鼠肠黏膜微血管内皮细胞(RIMVECs)表达IFN-γ,采用MTT和双夹心ELISA分别检测了黄芪水煎液对体外培养的RIMMVECs增殖以及表达IFN-γ的影响。结果显示,黄芪水煎液在25mg/L^3 200mg/L时促进RIMVECs增殖。为更好的研究黄芪水煎液诱导效果,将不同浓度的黄芪水煎液(0.1、1、6、30mg/mL)诱导RIMVECs 6、12、24h检测IFN-γ含量,结果显示,在各检测时间点0.1、1mg/mL组和空白组差异显著(P<0.05),6mg/mL组差异极显著(P<0.01),30mg/mL组差异不显著(P>0.05)。说明黄芪水煎液的抗病毒作用可能与诱导微血管内皮细胞表达IFN-γ有直接的关系,为黄芪"益气解毒"功效的现代阐释提供了试验依据。 展开更多

关键词 黄芪 微血管内皮细胞 Γ干扰素 大鼠

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柴贝止痫汤影响大鼠脑微血管内皮细胞乳腺癌耐药蛋白、核因子p65表达的研究 被引量：8

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作者 鄢泽然 张青 +3 位作者 王潇慧 王越 聂莉媛 刘金民 《环球中医药》 CAS 2014年第4期241-246,共6页

目的探索中药柴贝止痫汤对离体大鼠脑微血管内皮细胞乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)和核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)p65表达的影响。方法培养原代大鼠脑微血管内皮细胞,传至3代时分为正常组、模型... 目的探索中药柴贝止痫汤对离体大鼠脑微血管内皮细胞乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)和核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)p65表达的影响。方法培养原代大鼠脑微血管内皮细胞,传至3代时分为正常组、模型组和中药组,正常组常规培养,模型组用100 nmol/L的地塞米松作用细胞24小时,诱导细胞膜上BCRP表达增加;中药组在造模基础上分别用柴贝止痫汤四个浓度(10μg/ml、100μg/ml、500μg/ml、1 mg/ml)干预模型细胞24小时。Western blot检测各组细胞BCRP、NF-κB p65的表达,差异比较采用方差分析;Real-time PCR检测Bcrp mRNA的扩增,相对定量法比较各组间扩增差异。结果柴贝止痫汤10μg/ml、100μg/ml组BCRP表达及Bcrp mRNA的扩增均较模型组降低(P<0.05);柴贝止痫汤1 mg/ml组NF-κB p65的表达较模型组降低(P<0.05)。结论柴贝止痫汤可以下调地塞米松诱导的大鼠脑微血管内皮细胞BCRP及Bcrp mRNA的表达;可能对NF-κB p65的表达有下调作用。 展开更多

关键词 柴贝止痫汤 乳腺癌耐药蛋白 大鼠脑微血管内皮细胞 难治性癫痫

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洛美利嗪对大鼠脑微血管内皮细胞上P-糖蛋白功能的影响 被引量：4

14

作者 吴玉林 祝浩杰 +1 位作者 郑莉 刘国卿 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期352-355,共4页

目的 :研究洛美利嗪对大鼠脑微血管内皮细胞上P 糖蛋白功能的影响。方法 :使用荧光分光光度计和流式细胞术分析大鼠脑微血管内皮细胞内P 糖蛋白底物 罗丹明 12 3的荧光强度。结果 :环孢素A和洛美利嗪与大鼠脑微血管内皮细胞孵育后能明... 目的 :研究洛美利嗪对大鼠脑微血管内皮细胞上P 糖蛋白功能的影响。方法 :使用荧光分光光度计和流式细胞术分析大鼠脑微血管内皮细胞内P 糖蛋白底物 罗丹明 12 3的荧光强度。结果 :环孢素A和洛美利嗪与大鼠脑微血管内皮细胞孵育后能明显提高胞内罗丹明 12 3的荧光强度。人脐静脉内皮细胞内荧光强度则不受环孢素A和洛美利嗪的影响。结论 :洛美利嗪能显著地抑制大鼠脑微血管内皮细胞上P 糖蛋白的活性 ,提高P 糖蛋白底物的胞内浓度。 展开更多

关键词 P-糖蛋白 罗丹明123 大鼠脑微血管内皮细胞 流式细胞术 洛美利嗪

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大鼠脑微血管内皮细胞的体外培养与鉴定 被引量：3

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作者 王鑫 冯波 +3 位作者 刘晓晔 张倩 董虹 穆祥 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1260-1264,共5页

本研究旨在建立1种简单易行、获得细胞纯度较高的体外分离、培养大鼠脑微血管内皮细胞的方法。取7¹0日龄SD大鼠,分离大脑皮质,经Ⅱ型分散酶消化、葡聚糖3次离心法获得大鼠脑微血管段,用胶原/分散酶消化后,在37℃... 本研究旨在建立1种简单易行、获得细胞纯度较高的体外分离、培养大鼠脑微血管内皮细胞的方法。取7¹0日龄SD大鼠,分离大脑皮质,经Ⅱ型分散酶消化、葡聚糖3次离心法获得大鼠脑微血管段,用胶原/分散酶消化后,在37℃5%CO₂培养箱中进行原代细胞培养。利用第Ⅷ因子相关抗原免疫荧光检测法,结合细胞形态学观察对培养的细胞进行鉴定。成功分离培养了大鼠脑微血管内皮细胞,倒置显微镜下单个细胞呈短梭形或多角形,汇合后呈铺路石样,单层贴壁生长;免疫荧光检测第Ⅷ因子相关抗原呈阳性。本试验成功建立了分离纯度较高的大鼠脑微血管内皮细胞的体外培养方法。 展开更多

关键词 大鼠 脑微血管内皮细胞 体外分离培养

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蓝舌病病毒感染对绵羊微血管内皮细胞中Ⅰ型干扰素应答的影响

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作者 罗世美 陈韵伊 +7 位作者 李其沙 周艳梅 胡雪柔 李铭悦 魏子昱 李芳 马鲜平 易华山 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期5631-5640,共10页

蓝舌病病毒(bluetongue virus,BTV)是一种严重危害绵羊等反刍动物的虫媒病毒,而绵羊微血管内皮细胞(sheep lung microvascular endothelial cells,SLMECs)构成肺半选择性屏障,为研究BTV感染与SLMECs干扰素抗病毒免疫应答的分子机制。本... 蓝舌病病毒(bluetongue virus,BTV)是一种严重危害绵羊等反刍动物的虫媒病毒,而绵羊微血管内皮细胞(sheep lung microvascular endothelial cells,SLMECs)构成肺半选择性屏障,为研究BTV感染与SLMECs干扰素抗病毒免疫应答的分子机制。本研究通过BTV噬斑试验以感染复数(MOI)为1的BTV诱导18、24、36 h的SLMECs,通过实时荧光定量PCR分析干扰素相关通路基因mRNA表达特征,以及Western blot分析MDA5、TRAF3、RIG-I和TBK1蛋白表达。结果表明,在诱导36 h时,干扰素信号通路基因mRNA表达的变化最明显,RIG-I、MDA5、IKKε、IFN-β、TBK 1和TRAF 6基因mRNA上调表达,差异极显著;而IFN-α、VISA、USP 18基因mRNA下调表达,差异极显著;在蛋白水平上MDA5、TBK1、RIG-I和TRAF3蛋白都上调表达。本研究发现BTV可感染SLMECs诱导Ⅰ型干扰素免疫应答,为进一步分析IFN-I信号通路的激活在抗BTV感染天然免疫应答中的作用机制研究奠定基础。 展开更多

关键词 蓝舌病病毒 Ⅰ型干扰素 绵羊肺微血管内皮细胞

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肺微血管内皮细胞的信号通路在肝肺综合征发病机制中的研究进展 被引量：2

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作者 王芝 易斌 鲁开智 《医学研究生学报》 CAS 2011年第11期1212-1215,共4页

肝肺综合征(hepatopulmonary syndrome,HPS)是慢性肝病的严重并发症,以肺微血管扩张(pulmonary vaso dilata-tion,PVD)引起的低氧血症为典型病理改变,主要发生于各型肝硬化及各种慢性肝病。由于肺微血管主要构成细胞为肺微血管内皮细胞(... 肝肺综合征(hepatopulmonary syndrome,HPS)是慢性肝病的严重并发症,以肺微血管扩张(pulmonary vaso dilata-tion,PVD)引起的低氧血症为典型病理改变,主要发生于各型肝硬化及各种慢性肝病。由于肺微血管主要构成细胞为肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs),因此针对HPS发病机制的研究常以PMVECs的异常改变及其相关信号通路为切入点,文中就此方面近年的研究报道进行综述。 展开更多

关键词 肝肺综合征 肺微血管内皮细胞 信号通路

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硫酸软骨素对大鼠心肌膜微血管内皮细胞分泌IFN-γ的影响 被引量：1

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作者 徐巨 张涛 +4 位作者 吕娟 田丽芳 胡格 穆祥 蒋文灿 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第6期42-44,共3页

研究硫酸软骨素(chondroitin sulfate,CS)对微血管内皮细胞(MVECs)分泌IFN-γ的影响,为进一步研究CS的免疫增强机制提供资料。体外培养大鼠心肌膜微血管内皮细胞(RMMVECs),CS分为10、50、500μg/mL 3个浓度组刺激RM-MVECs,ELISA法检测... 研究硫酸软骨素(chondroitin sulfate,CS)对微血管内皮细胞(MVECs)分泌IFN-γ的影响,为进一步研究CS的免疫增强机制提供资料。体外培养大鼠心肌膜微血管内皮细胞(RMMVECs),CS分为10、50、500μg/mL 3个浓度组刺激RM-MVECs,ELISA法检测药物处理后细胞上清液中IFN-γ的含量。结果显示,RMMVECs正常情况下能够分泌一定量的IFN-γ,经CS处理后IFN-γ的分泌量显著升高,且3个剂量组在刺激后24 h分泌量均达到峰值。结果表明,CS诱导大鼠心肌膜微血管内皮细胞分泌IFN-γ可能是其免疫增强作用机制之一。 展开更多

关键词 Γ-干扰素 硫酸软骨素 微血管内皮细胞 大鼠

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烧伤后大鼠肺毛细血管内皮细胞损伤的电镜研究 被引量：1

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作者 沙继宏 叶煦亭 +3 位作者 陆月良 吴越 杨勇骥 郑尊 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期475-476,共2页

关键词 烧伤 大鼠 肺毛细血管内皮细胞 损伤 电镜研究 多器官功能不全综合症

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中药有效成分诱导肺微血管内皮细胞表达IFN-γ的研究 被引量：1

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作者 林红 胡格 +3 位作者 索占伟 伊鹏霏 胡屹屹 穆祥 《北京农学院学报》 2008年第3期46-49,共4页

以体外培养的RPMVECs(rat pul monary microvascular endothelial cells,RPMVECs)为模型,采用双夹心ELISA法和MTT法,研究了绿原酸、连翘酯苷、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素诱导RPMVECs表达IFN-γ(inferteron-γ)的影响以及对PMVECs的毒性。... 以体外培养的RPMVECs(rat pul monary microvascular endothelial cells,RPMVECs)为模型,采用双夹心ELISA法和MTT法,研究了绿原酸、连翘酯苷、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素诱导RPMVECs表达IFN-γ(inferteron-γ)的影响以及对PMVECs的毒性。ELISA检测结果表明,加入质量浓度为5,10,20,50,100μg/mL的5种中药成分刺激细胞16 h后,在培养细胞上清液内均能检测到IFN-γ,其中绿原酸、黄芩素组IFN-γ的表达量随药物浓度增大而减少;连翘酯苷组IFN-γ的表达量均较多;黄芩苷、汉黄芩素组均在10μg/mL时IFN-γ的表达量达到峰值,随后IFN-γ的表达量随浓度增大而减少。MTT检测结果显示,各浓度的黄芩苷、黄芩素对PMVECs均有一定程度的抑制作用,而连翘酯苷对PMVECs均有增殖作用,绿原酸、汉黄芩素的细胞毒性则随药物浓度而发生变化。 展开更多

关键词 肺微血管内皮细胞 γ-干扰素 中药有效成分 ELISA法 MTT法

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