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重组人白细胞介素-6(IL-6)受体基因导入大鼠髓性白血病细胞及基因表达
被引量：
6
1
作者
任蕴芳
郭宁
+3 位作者
张贺秋
毛宁
A.C.M.Martens
A.Hagenbeek
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
1994年第1期35-41,共7页
可移植性大鼠急性粒系白血病(Brown Norway rat acute myelocytic leukemia,BNML)是研究人急性粒系白血病的颇为完备的实验模型。由于重组人IL-6(rhIL-6)可作用于大鼠,然而大鼠BNML细胞系LT12缺乏rhIL-6受体(rhIL-6R)表达。为了在BNML...
可移植性大鼠急性粒系白血病(Brown Norway rat acute myelocytic leukemia,BNML)是研究人急性粒系白血病的颇为完备的实验模型。由于重组人IL-6(rhIL-6)可作用于大鼠,然而大鼠BNML细胞系LT12缺乏rhIL-6受体(rhIL-6R)表达。为了在BNML模型探讨rhIL-6在体外以及体内对白血病细胞增殖和分化的影响,本文应用改良的磷酸钙共沉淀法将携带rhIL-6R cDNA的逆转录病毒表达质粒XM6/IL-6RNeo导入LT12细胞,经过G418筛选获得G418抗性克隆,建立了表达rhIL-6R的LT12亚细胞系(称之为R cell lines)。我们分别应用三种不同的方法(rhIL-6R的单克隆抗体和FACScan检测、^(125)I-rhIL-6的配基结合分析测定、地高辛配基标记的rhIL-6R cDNA探针的细胞原位杂交技术)分折了R细胞系在体外不同条件下传代过程中及给BN大鼠尾静脉回输后其rhIL-6R的表达。研究结果表明,用改良的磷酸钙共沉淀法将编码rhIL-6R cDNA和Neo^R基因的逆转录病毒表达质粒XM6/IL-6RNeo导入LT12细胞系后,受体细胞在体外含适当浓度G418的基质液中传代培养,可长期稳定表达rhIL-6R,给BN大鼠尾静脉回输后20天左右,其脾脏和骨髓细胞均可检测到rhIL-6R的明显表达,而且~3H-TdR掺入分析证明细胞膜表面所表达的rhIL-6R可以介导外源性rhIL-6信号传到细胞核内。
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关键词
大鼠白血病细胞系
逆转录病毒载体
基因转移
重组人白
细胞
介素-6受体
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职称材料
题名
重组人白细胞介素-6(IL-6)受体基因导入大鼠髓性白血病细胞及基因表达
被引量：
6
1
作者
任蕴芳
郭宁
张贺秋
毛宁
A.C.M.Martens
A.Hagenbeek
机构
北京基础医学研究所
荷兰应用科学研究院放射生物学研究所
出处
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
1994年第1期35-41,共7页
基金
中荷合作研究基金
文摘
可移植性大鼠急性粒系白血病(Brown Norway rat acute myelocytic leukemia,BNML)是研究人急性粒系白血病的颇为完备的实验模型。由于重组人IL-6(rhIL-6)可作用于大鼠,然而大鼠BNML细胞系LT12缺乏rhIL-6受体(rhIL-6R)表达。为了在BNML模型探讨rhIL-6在体外以及体内对白血病细胞增殖和分化的影响,本文应用改良的磷酸钙共沉淀法将携带rhIL-6R cDNA的逆转录病毒表达质粒XM6/IL-6RNeo导入LT12细胞,经过G418筛选获得G418抗性克隆,建立了表达rhIL-6R的LT12亚细胞系(称之为R cell lines)。我们分别应用三种不同的方法(rhIL-6R的单克隆抗体和FACScan检测、^(125)I-rhIL-6的配基结合分析测定、地高辛配基标记的rhIL-6R cDNA探针的细胞原位杂交技术)分折了R细胞系在体外不同条件下传代过程中及给BN大鼠尾静脉回输后其rhIL-6R的表达。研究结果表明,用改良的磷酸钙共沉淀法将编码rhIL-6R cDNA和Neo^R基因的逆转录病毒表达质粒XM6/IL-6RNeo导入LT12细胞系后,受体细胞在体外含适当浓度G418的基质液中传代培养,可长期稳定表达rhIL-6R,给BN大鼠尾静脉回输后20天左右,其脾脏和骨髓细胞均可检测到rhIL-6R的明显表达,而且~3H-TdR掺入分析证明细胞膜表面所表达的rhIL-6R可以介导外源性rhIL-6信号传到细胞核内。
关键词
大鼠白血病细胞系
逆转录病毒载体
基因转移
重组人白
细胞
介素-6受体
Keywords
Brown Norway rat acute myelocytic leukemia(BNML) retrovirus vector gene transfer recombinant human IL-6 receptor
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
重组人白细胞介素-6(IL-6)受体基因导入大鼠髓性白血病细胞及基因表达
任蕴芳
郭宁
张贺秋
毛宁
A.C.M.Martens
A.Hagenbeek
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
1994
6
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参考文献
引证文献
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