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镍纹样蛋白对TGF-β1诱导的大鼠心脏成纤维细胞活性、增殖和胶原合成功能的影响
1
作者 朱晓丹 白婧 +1 位作者 唐俊楠 张金盈 《郑州大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第4期536-540,共5页
目的:探讨镍纹样蛋白(METRNL)对TGF-β1诱导的大鼠心脏成纤维细胞活性、增殖和胶原合成功能的影响。方法:分离培养原代大鼠心脏成纤维细胞,采用TGF-β1刺激成纤维细胞诱导细胞活化、增殖,将其分为对照组、TGF-β1组、METRNL组、TGF-β1+... 目的:探讨镍纹样蛋白(METRNL)对TGF-β1诱导的大鼠心脏成纤维细胞活性、增殖和胶原合成功能的影响。方法:分离培养原代大鼠心脏成纤维细胞,采用TGF-β1刺激成纤维细胞诱导细胞活化、增殖,将其分为对照组、TGF-β1组、METRNL组、TGF-β1+METRNL组,采用MTT法检测细胞活性和增殖率,采用qRT-PCR检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α平滑肌蛋白(α-SMA)mRNA的表达水平,采用免疫荧光染色检测Ⅲ型胶原和α-SMA蛋白的表达,采用Western blot检测p-Smad2、p-Smad3、Smad2、Smad3、Smad4蛋白的表达。结果:TGF-β1作用后细胞Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原及α-SMA mRNA表达水平增加,Ⅲ型胶原及α-SMA蛋白表达水平增加,p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3升高;METRNL作用后上述指标均降低,且TGF-β1和METRNL存在交互作用(P<0.05)。结论:METRNL可减弱TGF-β1诱导的大鼠心脏成纤维细胞活化、增殖和胶原合成功能。 展开更多
关键词 心肌纤维化 心脏成纤维细胞 镍纹样蛋白 SMAD信号通路 大鼠 TGF-β1
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白介素⁃17A通过自噬调控支气管成纤维细胞胶原降解 被引量：4
2
作者 姚培学 杨胜红 +1 位作者 陈杰 欧阳瑶 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第4期423-427,共5页
目的探讨白介素⁃17A(interleukin⁃17A,IL⁃17A)对大鼠支气管成纤维细胞(bronchial fibro⁃blasts,BF)增殖、自噬及自噬后胶原降解的影响。方法采用酶联合消化法+组织块贴壁法培养BF并鉴定,CCK⁃8法检测细胞增殖能力;实验分组:对照组、雷帕... 目的探讨白介素⁃17A(interleukin⁃17A,IL⁃17A)对大鼠支气管成纤维细胞(bronchial fibro⁃blasts,BF)增殖、自噬及自噬后胶原降解的影响。方法采用酶联合消化法+组织块贴壁法培养BF并鉴定,CCK⁃8法检测细胞增殖能力;实验分组:对照组、雷帕霉素组、雷帕霉素+IL⁃17A组、IL⁃17A组;透射电镜观察细胞自噬泡的形成情况;Western blot检测BF中自噬标记蛋白LC3、p62的表达;ELISA法检测各组中基质金属蛋白酶⁃1(matrix metalloproteinase⁃1,MMP⁃1)与基质金属蛋白酶抑制剂(matrix metalloproteinase inhibitor,TIMP⁃1)的表达。结果IL⁃17A浓度为20 ng/mL时BF细胞增殖能力最佳。IL⁃17A组中自噬泡数量明显减少,LC3⁃Ⅱ/LC3⁃I的比值及MMP⁃1的表达水平明显下调,p62及TIMP⁃1的表达水平明显上调(P<0.05)。雷帕霉素部分逆转了IL⁃17A的作用。结论(1)IL⁃17A可促进BF细胞增殖;(2)IL⁃17A通过抑制自噬,发挥抑制胶原降解的作用,促进气道重塑的发生发展。 展开更多
关键词 白介素⁃17A 大鼠支气管成纤维细胞 自噬 增殖 胶原
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传染性支气管炎病毒在鸡胚成纤维细胞中适应及复制的生物学特性研究 被引量：2
3
作者 金梅林 陈焕春 +2 位作者 何启盖 吴斌 吴美洲 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1998年第11期3-5,共3页
将传染性支气管郯病毒ＩＢＶ－ＮＨ、Ｔ、Ｈ５２、Ｍ４１适应鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ），连续传代获得毒价稳定细胞适应毒并对其生物学特性进行研究。观察了ＩＢＶ致ＣＥＦ细胞病变效应的特征，测定ＴＣＩＤ５０滴度为１０６．０～１０... 将传染性支气管郯病毒ＩＢＶ－ＮＨ、Ｔ、Ｈ５２、Ｍ４１适应鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ），连续传代获得毒价稳定细胞适应毒并对其生物学特性进行研究。观察了ＩＢＶ致ＣＥＦ细胞病变效应的特征，测定ＴＣＩＤ５０滴度为１０６．０～１０６．０。细胞培养病毒提纯后负染置电镜下进行形态学观察，见到典型的冠状病毒粒子。病毒经胰酶处理显示出血凝特性，该血凝性能被特异性血清所抑制。表明ＣＥＦ细胞病变（ＣＰＥ）确为ＩＢＶ所致。通过对４株ＩＢＶ在ＣＥＦ细胞中最佳培养时间及繁殖量关系的摸索，证实了３６～７２ｈ释放到培养液中有活性的病毒粒子达高峰，ＴＣＩＤ５０最高可达１０７．０／ｍｌ。 展开更多
关键词 鸡胚成纤维细胞 传染性支气管炎 病毒 鸡 病变
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小分子组合诱导大鼠胚胎成纤维细胞重编程为功能性神经元
4
作者 高群伟 代振佳 +2 位作者 杨新康 刘长青 刘高峰 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期498-508,共11页
目的:建立通过小分子化合物将大鼠胚胎成纤维细胞(REF)重编程为化学诱导神经元(ciNC)的方法体系,为细胞移植治疗神经退行性疾病提供安全有效的供体细胞。方法:以裴钢研究团队建立的人成纤维细胞直接重编程为神经元的方法为基础,通过更... 目的:建立通过小分子化合物将大鼠胚胎成纤维细胞(REF)重编程为化学诱导神经元(ciNC)的方法体系,为细胞移植治疗神经退行性疾病提供安全有效的供体细胞。方法:以裴钢研究团队建立的人成纤维细胞直接重编程为神经元的方法为基础,通过更换包被液、缓解氧化应激损伤、添加神经源性保护因子、调整毛喉素浓度和小分子去除实验对诱导培养基和成熟培养基进行优化,并通过免疫荧光法和蛋白质印迹法验证不同诱导阶段细胞的相关蛋白质。结果:以原方案进行诱导时,细胞存活率仅(34.24±2.77)%。包被液更换为基质胶后,细胞存活率上升到(45.41±4.27)%;添加褪黑素后细胞存活率提高至(67.95±5.61)%,(23.43±1.42)%的细胞转变为神经样细胞;添加小分子P7C3-A20后细胞存活率进一步提升至(76.27±1.41)%,(39.72±4.75)%的细胞转变为神经样细胞;毛喉素浓度提升至30μmol/L时,神经样细胞比例达到(55.79±1.90)%;去除SP600125后,(86.96±2.15)%细胞存活,神经样细胞生成率提高至(63.43±1.60)%。以优化后的方案诱导,可经过神经前体细胞将REF诱导为ciNC。其中,神经前体细胞能够高表达神经前体细胞标志物SRY-box转录因子2、配对盒6以及神经元特异性标志物Ⅲ类β-微管蛋白,而成纤维相关蛋白波形蛋白表达量减少。神经前体细胞在成熟培养基中诱导两周后,可见大部分细胞呈神经样细胞形态,诱导后的ciNC高表达Ⅲ类β-微管蛋白和微管相关蛋白2,而成纤维相关蛋白波形蛋白表达减少。结论:优化后的小分子组合在常氧条件下能将REF重编程为ciNC。 展开更多
关键词 体细胞重编程 小分子化合物 胚胎成纤维细胞 化学诱导神经元 大鼠
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寒冷刺激支气管上皮细胞产生外泌体促肺成纤维细胞表达气道重塑相关因子 被引量：4
5
作者 朱芮 李敏超 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1070-1075,共6页
外泌体可由多种细胞分泌,是具有多种生物学功能的细胞外囊泡,但其在气道重塑中的作用尚不明确。为探讨经寒冷刺激的人支气管上皮细胞(BEAS-2B)分泌的外泌体对人胚肺成纤维细胞(HLF1)气道重塑相关因子表达的影响,收集BEAS-2B细胞株培养... 外泌体可由多种细胞分泌,是具有多种生物学功能的细胞外囊泡,但其在气道重塑中的作用尚不明确。为探讨经寒冷刺激的人支气管上皮细胞(BEAS-2B)分泌的外泌体对人胚肺成纤维细胞(HLF1)气道重塑相关因子表达的影响,收集BEAS-2B细胞株培养液提取外泌体,利用透射电镜及Western印迹对外泌体进行其大小、形态及标志性蛋白的检测;提取的外泌体与HLF1共同培育,分别设置空白对照组、正常对照组(加入未作干预的BEAS-2B细胞所产的外泌体)及寒冷刺激组(加入经寒冷刺激后的BEAS-2B细胞所产的外泌体)。运用Real-time PCR及Western印迹技术,分别检测各组HLF1表达FGF-2、TNF-α、MMP-9的mRNA及蛋白情况。结果显示,提取BEAS-2B细胞分泌的外泌体为直径小于100 nm的圆形或椭圆形结构,并表达外泌体标志性蛋白CD9、TSG101、ALIX;寒冷刺激组24 h后,其FGF-2、TNF-α、MMP-9的mRNA及蛋白表达均显著高于空白对照组及正常对照组(均P<0.05)。本研究结果表明,BEAS-2B细胞能够释放外泌体;经寒冷刺激后的BEAS-2B细胞所释放的外泌体可以携带并传递生物信号,诱导HLF1表达气道重塑相关因子。 展开更多
关键词 寒冷刺激 外泌体 气道重塑 人支气管上皮细胞 人胚肺成纤维细胞
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重组人酸性成纤维细胞生长因子促进大鼠烫伤愈合的研究 被引量：17
6
作者 许华 郑青 +3 位作者 姚成灿 杨晓明 王艳萍 李校 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 2003年第2期7-11,共5页
　目的:研究重组人酸性成纤维细胞生长因子(rh-aFGF)促进大鼠烫伤创面愈合的作用。方法:采用大鼠背部深II度烫伤模型,将3种不同浓度的rh-aFGF溶液隔日一次滴注于创面,观察伤后不同时间的创面面积变化和病理组织学改变。结果:rh-aFGF可... 　目的:研究重组人酸性成纤维细胞生长因子(rh-aFGF)促进大鼠烫伤创面愈合的作用。方法:采用大鼠背部深II度烫伤模型,将3种不同浓度的rh-aFGF溶液隔日一次滴注于创面,观察伤后不同时间的创面面积变化和病理组织学改变。结果:rh-aFGF可明显加速大鼠皮肤创伤的愈合,使创面面积明显缩小(P<0 05)。病理组织学检查发现,rh-aFGF组创面伤后7d成纤维细胞生长活跃、数量多,其毛细血管胚芽与成纤维细胞数量显著多于溶媒对照组;伤后14d,创面收缩与再上皮化明显,新生上皮向创面中心爬行较快。结论:外用rh-aFGF对大鼠深II度烫伤创面有明显的促愈合作用。 展开更多
关键词 重组人酸性成纤维细胞生长因子 烫伤愈合 大鼠
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金属硫蛋白抑制同型半胱氨酸诱导的大鼠血管成纤维细胞激活 被引量：6
7
作者 王冬艳 郭杰 +3 位作者 李夏 李扬 唐朝枢 李菊香 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期773-777,共5页
目的 :观察外源性金属硫蛋白 (MT)和ZnCl2 诱导内源性MT生成对同型半胱氨酸 (HCY)激活大鼠血管成纤维细胞增殖的影响 ,以探讨MT拮抗HCY血管损伤的可能机理。方法 :采用 [3 H]-胸腺嘧啶 ([3 H]-TdR)和[3 H]-脯氨酸 ([3 H]-Pro)掺入法测... 目的 :观察外源性金属硫蛋白 (MT)和ZnCl2 诱导内源性MT生成对同型半胱氨酸 (HCY)激活大鼠血管成纤维细胞增殖的影响 ,以探讨MT拮抗HCY血管损伤的可能机理。方法 :采用 [3 H]-胸腺嘧啶 ([3 H]-TdR)和[3 H]-脯氨酸 ([3 H]-Pro)掺入法测定细胞增殖及胶原生成 ,自动生化分析仪测定乳酸脱氢酶 (LDH)漏出量 ,台盼蓝排斥法计算细胞存活率 ,并用 [10 9Cd]-血红蛋白饱和法检测细胞MT的含量。结果 :HCY 5 0、10 0、5 0 0 μmol/L呈浓度依赖性刺激血管成纤维细胞增殖 ,胶原合成和分泌 (P <0 0 5或P <0 0 1) ,5 0 0 μmol/LHCY使细胞LDH漏出量增多 ,细胞存活率降低。MT 1× 10 -5mol/L、1× 10 -4mol/L与 5 0 0 μmol/LHCY共孵育组与单纯HCY组比较 ,[3 H]-TdR、[3 H]-Pro掺入、胶原分泌降低 ,LDH漏出量减少 (P <0 0 5或P <0 0 1)。ZnCl2 预处理诱导细胞MT含量增加 (P <0 0 5 ) ,而ZnCl2 处理与HCY 5 0、10 0、5 0 0 μmol/L共孵育组 [3 H]-TdR和 [3 H]-Pro掺入 ,胶原分泌、LDH漏出量都明显低于单纯HCY组细胞 ,且细胞存活率高于单纯HCY组 (P <0 0 5或P <0 0 1)。结论 :HCY刺激血管成纤维细胞增殖与胶原合成 ,MT无论外源应用或内源性诱导生成均能有效拮抗HCY的上述作用。MT对HCY作用的拮抗效应可能是其血管细? 展开更多
关键词 金属硫蛋白 高胱氨酸 成纤维细胞 大鼠
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细胞外基质硬度对TGF2-β1诱导的支气管哮喘成纤维细胞向成肌纤维细胞转分化过程的影响
8
作者 时彦玲 邓林红 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 2009年第S1期62-63,共2页
关键词 肌成纤维细胞 支气管哮喘 成肌纤维细胞 细胞外基质 转分化 硬度 平滑肌肌动蛋白 诱导 平滑肌细胞 基底膜
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针康法对局灶性脑缺血大鼠神经功能缺损及缺血区碱性成纤维细胞生长因子、血管抑制素蛋白表达的影响 被引量：22
9
作者 唐强 姜云飞 +2 位作者 朱路文 叶涛 宋名杨 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2015年第10期1151-1155,共5页
目的探讨针康法对局灶性脑缺血大鼠神经功能缺损及缺血区碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)和血管抑制素(AS)蛋白表达的影响。方法采用随机数字表法将90只清洁健康级雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺治疗组、康复治... 目的探讨针康法对局灶性脑缺血大鼠神经功能缺损及缺血区碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)和血管抑制素(AS)蛋白表达的影响。方法采用随机数字表法将90只清洁健康级雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺治疗组、康复治疗组和针康治疗组,各组又分为3 d、7 d、14 d 3个亚组(n=6)。改良Longa法制备永久性脑缺血大鼠模型。模型组与假手术组不予任何治疗,针刺治疗组采用头穴丛刺疗法,康复治疗组采用跑台训练,针康治疗组采用针康法治疗。术后3 d、7 d、14 d采用改良神经功能缺损评分(m NSS)评估各实验组大鼠的神经功能,Western blotting法检测各实验组大鼠缺血半暗区b FGF和AS蛋白的表达。结果术后3 d、7 d、14 d,与模型组、针刺治疗组、康复治疗组比较,针康治疗组m NSS评分降低(P<0.05),b FGF蛋白表达升高(P<0.05),AS蛋白表达降低(P<0.05)。结论针康法能降低局灶性脑缺血大鼠神经功能缺损,其机制可能与上调b FGF蛋白表达、下调AS蛋白表达有关。 展开更多
关键词 脑缺血 神经功能 针康法 碱性成纤维细胞生长因子 血管抑制素 大鼠
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载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化早期血管外膜成纤维细胞增殖活性增强 被引量：10
10
作者 徐芳 刘颖 +3 位作者 石磊 蔡虹静 王蔚琛 胡维诚 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1503-1508,共6页
目的:探讨动脉外膜成纤维细胞增殖与早期动脉粥样硬化病灶形成的关系。方法:选择6周龄载脂蛋白E基因敲除[apoE(-/-)]小鼠和野生型C57BL/6小鼠,高脂喂养2、4和10周后,在各个时点处死动物前24 h经腹腔注射5-溴-2-脱氧尿嘧啶(BrdU),后选取... 目的:探讨动脉外膜成纤维细胞增殖与早期动脉粥样硬化病灶形成的关系。方法:选择6周龄载脂蛋白E基因敲除[apoE(-/-)]小鼠和野生型C57BL/6小鼠,高脂喂养2、4和10周后,在各个时点处死动物前24 h经腹腔注射5-溴-2-脱氧尿嘧啶(BrdU),后选取升主动脉制备连续切片,通过HE染色观察组织形态学的变化,用免疫组化方法观察不同时点血管外膜及内膜BrdU的表达变化。体外培养高脂喂养2周的apoE(-/-)小鼠和C57BL/6小鼠动脉外膜成纤维细胞,通过BrdU掺入法测定细胞增殖活性,流式细胞术测定细胞周期。结果:体内实验发现apoE(-/-)小鼠高脂喂养2周后,在无可见内膜病灶形成之前,首先在主动脉外膜发现BrdU标记的阳性细胞,之后才在损伤内膜观察到BrdU标记细胞。而C57BL/6小鼠在任何时点都未检测到BrdU标记的细胞。体外实验观察到apoE(-/-)小鼠血管外膜成纤维细胞BrdU标记的细胞数显著多于C57BL/6小鼠(P<0.01),apoE(-/-)小鼠血管外膜成纤维细胞S期及G2/M期所占百分比明显高于对照组(P<0.05)。结论:血管外膜成纤维细胞增殖可能参与早期动脉粥样硬化病灶形成。 展开更多
关键词 成纤维细胞 外膜 细胞增殖 动脉粥样硬化 载脂蛋白E基因敲除小鼠
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电针阿是穴对骨骼肌损伤大鼠肌肉再生及碱性成纤维细胞生长因子表达的影响 被引量：18
11
作者 陈欢 张莉 +2 位作者 崔强 卢虎英 卫肖艳 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2013年第4期334-340,共7页
目的观察电针阿是穴对骨骼肌损伤大鼠腓肠肌增殖细胞核抗原(PCNA)、结蛋白(Desmin)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响,探讨电针阿是穴对骨骼肌损伤后肌卫星细胞增殖分化的可能机制。方法将78只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为... 目的观察电针阿是穴对骨骼肌损伤大鼠腓肠肌增殖细胞核抗原(PCNA)、结蛋白(Desmin)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响,探讨电针阿是穴对骨骼肌损伤后肌卫星细胞增殖分化的可能机制。方法将78只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为模型组6只,空白组、电针组、自然修复组各24只,每组再分为1 d、4 d、7 d、14 d 4个亚组,各6只。模型组、自然修复组与电针组采用腓肠肌钝挫伤结合离心运动的方法造模,模型建立后,模型组取腓肠肌行HE染色,其余各组按时间点相应处理并取腓肠肌行PCNA、Desmin和bFGF免疫组化染色。结果自然修复组各时间点PCNA表达均明显高于空白组(P<0.01);Desmin在损伤后1 d、14 d低于空白组(P<0.05),损伤后7 d高于空白组(P>0.05);bFGF在损伤后7 d高于空白组(P<0.01)。电针组PCNA、bFGF与Desmin的表达在损伤后1 d、4 d均高于自然修复组(P<0.05)。结论电针阿是穴能促进肌卫星细胞增殖,加快其成肌分化,缩短损伤修复进程,其机制可能与上调及提前bFGF的表达有关。 展开更多
关键词 骨骼肌损伤 电针 阿是穴 增殖细胞核抗原 碱性成纤维细胞生长因子 结蛋白 大鼠
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CTRP9对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心肌成纤维细胞活化和增殖的影响 被引量：8
12
作者 梁翠 高路 +6 位作者 姚瑞 李亚彭 李鹏程 刘源 张殿红 王铮 张彦周 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2020年第2期228-232,共5页
目的:探讨CTRP9对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的大鼠心肌成纤维细胞活化、增殖的影响。方法:分离培养原代大鼠心肌成纤维细胞,将其分为对照组、AngⅡ(1μmol/L)组和不同浓度(10、25、50、100、200 mg/L)CTRP9组,48 h后采用CCK-8法检测细胞... 目的:探讨CTRP9对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的大鼠心肌成纤维细胞活化、增殖的影响。方法:分离培养原代大鼠心肌成纤维细胞,将其分为对照组、AngⅡ(1μmol/L)组和不同浓度(10、25、50、100、200 mg/L)CTRP9组,48 h后采用CCK-8法检测细胞增殖率。细胞分为对照组、AngⅡ(1μmol/L)组、50和200 mg/L CTRP9组,48 h后采用α-SMA染色观察成纤维细胞活化情况,qRT-PCR法检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤维连接蛋白、结缔组织生长因子mRNA的表达,Western blot法检测AMPKa、P70和mTOR蛋白的磷酸化情况。采用AMPKa抑制剂复合物C处理细胞,将细胞分为对照组、AngⅡ(1μmol/L)组、CTRP9+复合物C(10μmol/L)组和CTRP9(200 mg/L)组,48 h后重复上述检测。结果:AngⅡ组心肌成纤维细胞增殖率高于对照组,各CTRP9组细胞增殖率低于AngⅡ组(P<0.05)。AngⅡ组细胞α-SMA表达高于对照组,50和200 mg/L CTRP9组α-SMA表达低于AngⅡ组。AngⅡ组细胞Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤维连接蛋白和结缔组织生长因子mRNA的表达高于对照组,50和200 mg/L CTRP9组细胞Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤维连接蛋白和结缔组织生长因子mRNA的表达低于AngⅡ组(P<0.05)。AngⅡ组细胞AMPKa蛋白磷酸化水平低于对照组,P70和mTOR蛋白磷酸化水平高于对照组;200 mg/L CTRP9组AMPKa蛋白磷酸化水平高于AngⅡ组,P70和mTOR蛋白磷酸化水平低于AngⅡ组(P<0.05)。结论:CTRP9通过激活AMPKa信号通路抑制AngⅡ诱导的大鼠心肌成纤维细胞活化、增殖功能。 展开更多
关键词 CTRP9 心肌成纤维细胞 心肌纤维化 血管紧张素Ⅱ AMPKa 大鼠
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再生丝素膜对鼠胚真皮层成纤维细胞遗传特性的影响 被引量：6
13
作者 龚爱华 李明忠 +5 位作者 盛伟华 谢宇锋 缪竞成 姜海燕 吴徽宇 杨吉成 《中国生物医学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第1期38-42,共5页
目的 :研究再生丝素膜 (WL组 ,HY组 ,SD组 )对大鼠鼠胚成纤维细胞的遗传物质的影响。方法 :采用浸提液法在体外培养鼠胚成纤维细胞 ,计算细胞的微核率 (MNF)和染色体畸变率 (CAF) ,用单细胞电泳法 (SCGEassay)检测基因组DNA的损伤程度... 目的 :研究再生丝素膜 (WL组 ,HY组 ,SD组 )对大鼠鼠胚成纤维细胞的遗传物质的影响。方法 :采用浸提液法在体外培养鼠胚成纤维细胞 ,计算细胞的微核率 (MNF)和染色体畸变率 (CAF) ,用单细胞电泳法 (SCGEassay)检测基因组DNA的损伤程度。结果 :WL组、SD组再生丝素膜和空白对照组的细胞微核率 (MNF)和染色体畸变率(CAF)无显著性差异 (P >0 0 5 ) ,无明显彗星现象 ;而HY组再生丝素膜与阴性对照比较有显著差异 (P <0 0 1)。结论 :WL组和SD组再生丝素膜对种子细胞的遗传学特性无明显影响 ,优于HY组。 展开更多
关键词 丝素蛋白膜 鼠胚成纤维细胞 微核 染色体畸变率 彗星试验
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碱性成纤维细胞生长因子对大鼠骨髓间质干细胞增殖的影响 被引量：12
14
作者 刘爱军 项平 +1 位作者 黄锦桃 李海标 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期508-511,共4页
【目的】研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对大鼠骨髓基质干细胞(MSC)增殖的影响。【方法】用α-MEM冲洗骨髓腔,收集骨髓细胞悬液,接种在塑料培养瓶中,经体外扩增、纯化,观察其生长特性,用免疫组织化学SABC法检测波形蛋白和纤粘连蛋白... 【目的】研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对大鼠骨髓基质干细胞(MSC)增殖的影响。【方法】用α-MEM冲洗骨髓腔,收集骨髓细胞悬液,接种在塑料培养瓶中,经体外扩增、纯化,观察其生长特性,用免疫组织化学SABC法检测波形蛋白和纤粘连蛋白的表达,并研究不同浓度bFGF对MSC生长曲线和克隆形成率的影响。【结果】原代培养时形成由基质干细胞组成的细胞集落,细胞集落14d时接近融合,传代后细胞体积变大,约5～7d传代1次;免疫组化显示MSC呈波形蛋白阳性,而纤粘连蛋白阴性。浓度10ng/mL和20ng/mLbFGF组的MSC的细胞数和克隆形成率比5ng/mLbFGF组和对照组(无bFGF)明显增加,具有高度显著性(P<0.01)。【结论】bFGF可明显促进MSC的增殖。 展开更多
关键词 FGF 增殖 大鼠 集落 克隆形成率 纤粘连蛋白 碱性成纤维细胞生长因子 细胞体积 传代 纯化
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氟伐他汀对大鼠肺成纤维细胞增殖的抑制作用 被引量：11
15
作者 赵峰 戚好文 叶江枫 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期185-188,共4页
目的 :观察氟伐他汀 (fluvastatin,Flu)对体外培养的大鼠肺成纤维细胞 (fibroblast,Fb)增殖的抑制作用。方法 :在体外培养的大鼠肺 Fb中 ,加入 Flu,用计数法和 MTT比色法观察并比较不同浓度的 Flu对培养细胞增殖的抑制作用、对大鼠肺 F... 目的 :观察氟伐他汀 (fluvastatin,Flu)对体外培养的大鼠肺成纤维细胞 (fibroblast,Fb)增殖的抑制作用。方法 :在体外培养的大鼠肺 Fb中 ,加入 Flu,用计数法和 MTT比色法观察并比较不同浓度的 Flu对培养细胞增殖的抑制作用、对大鼠肺 Fb分裂指数及分泌胶原的影响。 结果 :计数法和 MTT比色法均显示 ,Flu对体外培养的大鼠肺 Fb的增殖具有明显的抑制作用 (P<0 .0 1 ) ,并呈剂量依赖效应 ,1 0 - 4mol/ L 的 Flu已可使培养细胞的增殖受到完全抑制。培养的大鼠肺 Fb细胞分裂指数及胶原分泌量在 Flu的作用下也有明显降低 (P<0 .0 1 )。结论 :Flu对体外培养的大鼠肺 Fb的增殖及其胶原分泌具有明显的抑制作用 。 展开更多
关键词 氟伐他汀 大鼠 成纤维细胞 抑制作用 细胞增殖 肺间质纤维化
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高氧、维甲酸对胎鼠肺成纤维细胞c-Jun、c-Fos表达的影响 被引量：7
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作者 李文斌 常立文 +1 位作者 祝华平 容志惠 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期216-219,共4页
目的　探讨维甲酸对高氧暴露下胎鼠肺成纤维细胞 c- Jun、c- Fos表达的影响。方法　取第 2代胎鼠肺成纤维细胞作体外培养 ,待生长至接近融合状态时 ,随机分为 :空气组 ,空气 +维甲酸组 ,高氧组 ,高氧 +维甲酸组。于培养30 m in和 1、 2... 目的　探讨维甲酸对高氧暴露下胎鼠肺成纤维细胞 c- Jun、c- Fos表达的影响。方法　取第 2代胎鼠肺成纤维细胞作体外培养 ,待生长至接近融合状态时 ,随机分为 :空气组 ,空气 +维甲酸组 ,高氧组 ,高氧 +维甲酸组。于培养30 m in和 1、 2、 6、 12、 2 4、 4 8、 72 h时 ,行细胞固定后 ,应用免疫组化方法检测 c- Jun、c- Fos表达强度并结合计算机图像处理系统进行分析。结果　与空气组相比 ,高氧 1h时 c- Jun表达明显增强 (P<0 .0 1) ,6～ 12 h时达高峰 ,以后开始下降 ,但仍高于正常水平 (P<0 .0 1) ;c- Fos的表达在高氧 30 m in即增强 (P<0 .0 1) ,2～ 6 h达高峰 ,以后开始下降 ,2 4 h后恢复到正常水平。维甲酸能明显下调高氧所诱导的 c- Jun、c- Fos高表达 ,但并不能完全阻止 c- Jun、c- Fos的过度表达。结论　 c- Jun、c- Fos可能参与了高氧暴露下胎鼠肺成纤维细胞的信号转导过程 ;维甲酸可部分抑制由高氧所诱导的 c- Jun、 c- 展开更多
关键词 肺成纤维细胞 胎鼠 氧应激反应 高氧 维甲酸 C-JUN蛋白 C-FOS蛋白
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野百合碱所致肺动脉高压大鼠模型中碱性成纤维细胞生长因子、内皮素-1及其受体的表达和外源性NO的作用 被引量：12
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作者 顾勇 王治平 +2 位作者 鲁建军 张希 孙培吾 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期1416-1417,1436,共3页
目的 :探讨野百合碱 (MCT)肺动脉高压模型大鼠肺组织中碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)、内皮素 - 1(ET - 1)和内皮素A受体 (ETAR)的表达 ,并观察吸入外源性NO的作用。方法 :通过腹腔注射MCT建立肺动脉高压大鼠模型 ;使用NO吸入装置给予... 目的 :探讨野百合碱 (MCT)肺动脉高压模型大鼠肺组织中碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)、内皮素 - 1(ET - 1)和内皮素A受体 (ETAR)的表达 ,并观察吸入外源性NO的作用。方法 :通过腹腔注射MCT建立肺动脉高压大鼠模型 ;使用NO吸入装置给予大鼠外源性NO ;采用免疫组织化学方法定量检测不同组间肺组织中bFGF、ET - 1及ETA 受体的表达。结果 :模型组肺动脉压、右心室肥厚程度、bFGF、ET - 1及ETA 受体的表达明显高于对照组 ,外源性NO吸入能明显减低肺动脉压、右室肥厚程度、bFGF、ET - 1及ETA 受体的表达。结论 :bFGF、ET -1及ETA 受体可能参与了MCT所致肺动脉高压的发生发展 ,外源性NO吸入可能通过ET - 1及ETA 受体途径阻止或逆转肺动脉高压的发展 ,但如何通过bFGF起作用还有待探讨。 展开更多
关键词 肺动脉高压 成纤维细胞生长因子2 内皮缩血管肽1 一氧化氮 大鼠 野百合碱
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改构型酸性成纤维细胞生长因子对大鼠肾缺血/再灌注损伤的保护作用 被引量：15
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作者 胡文娟 黄巨恩 +1 位作者 李校堃 肖健 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期166-169,共4页
目的探讨改构型酸性成纤维细胞生长因子(modified aFGF,MaFGF)对大鼠肾缺血/再灌注损伤的影响。方法Wistar大鼠32只,随机分为4组,即假手术组、模型组、MaF-GF1组(8μg.kg-1)和MaFGF2组(16μg.kg-1),每组8只。以肾缺血/再灌注损伤为模型... 目的探讨改构型酸性成纤维细胞生长因子(modified aFGF,MaFGF)对大鼠肾缺血/再灌注损伤的影响。方法Wistar大鼠32只,随机分为4组,即假手术组、模型组、MaF-GF1组(8μg.kg-1)和MaFGF2组(16μg.kg-1),每组8只。以肾缺血/再灌注损伤为模型,通过光、电镜观察肾组织病理变化。结果MaFGF能明显减轻肾组织水肿、间质浸润以及肾小管扩张与破坏,电镜下见肾小管上皮细胞内细胞器(微绒毛、线粒体、溶酶体等)损伤较轻或基本正常。结论MaFGF对大鼠肾缺血/再灌注损伤有一定的保护作用。 展开更多
关键词 改构型酸性成纤维细胞生长因子 肾缺血/再灌注损伤 急性肾功能衰竭 大鼠
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形觉剥夺性近视模型大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1表达及Wnt/β-catenin信号通路的调控作用 被引量：9
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作者 张新 巨朝娟 +1 位作者 张剑 赵燕 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期861-866,共6页
目的:构建形觉剥夺性近视(FDM)大鼠模型,阐明FDM大鼠巩膜成纤维细胞中转化生长因子β1(TGF-β1)的表达及其与Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的关系。方法: 40只大鼠随机分为对照组和FDM模型组,每组20只,FDM模型组大鼠建立FDM模型... 目的:构建形觉剥夺性近视(FDM)大鼠模型,阐明FDM大鼠巩膜成纤维细胞中转化生长因子β1(TGF-β1)的表达及其与Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的关系。方法: 40只大鼠随机分为对照组和FDM模型组,每组20只,FDM模型组大鼠建立FDM模型。测定大鼠眼轴长度;取大鼠眼球分离巩膜组织,采用Western blotting法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定大鼠巩膜组织中TGF-β1蛋白和mNRA表达水平。分离培养对照组和FDM模型组大鼠巩膜成纤维细胞,对照组大鼠巩膜成纤维细胞作为对照组,FDM模型组大鼠巩膜成纤维细胞分为FDM组和FDM+Dickkopf相关蛋白1(DDK1)组(加入DDK1培养),采用Western blotting法和RT-PCR法测定各组大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1、3型核糖核酸酶(DCL3)、结肠腺瘤样息肉蛋白(APC)、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)、p21-GSK3β和β-catenin蛋白及mRNA表达水平。结果:与对照组比较,FDM组大鼠眼轴长度均明显增加(P<0.05),巩膜组织中TGF-β1蛋白和mRNA表达水平均明显降低(P<0.01)。对照组、FDM组和FDM+DDK1组大鼠巩膜成纤维细胞中GSK3β蛋白和mRNA表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05),TGF-β1、DCL3、APC、p21-GSK3β和β-catenin蛋白及mRNA表达水平比较差异有统计学意义(P<0.01);与对照组比较,FDM组大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1、APC蛋白和mRNA表达水平降低(P<0.05),DCL3、p21-GSK3β、β-catenin蛋白和mRNA表达水平升高(P<0.05);与FDM组比较,FDM+DDK1组大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1、APC蛋白和mRNA表达水平升高(P<0.05),DCL3、p21-GSK3β、β-catenin蛋白和mRNA表达水平降低(P<0.05)。结论: FDM模型大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1表达水平降低,其水平受Wnt/β-catenin信号通路调控。 展开更多
关键词 近视 巩膜 成纤维细胞 转化生长因子Β1 Wnt/β-连环蛋白 大鼠 SD
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ICR小鼠胚胎成纤维细胞的培养及饲养层的制作 被引量：5
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作者 招霞 孙海翔 +2 位作者 胡娅莉 张宁媛 徐志鹏 《医学研究生学报》 CAS 2006年第1期36-39,i0009,共5页
目的：建立ICR小鼠胚胎成纤维细胞饲养层培养体系，用于胚胎干细胞建系及研究。方法：选取不同胎龄的鼠胚原代细胞分离成纤维细胞，制作饲养层，使用不同浓度丝裂霉素C处理，以细胞形态、生长曲线、囊胚种植情况为饲养层评价指标。结果... 目的：建立ICR小鼠胚胎成纤维细胞饲养层培养体系，用于胚胎干细胞建系及研究。方法：选取不同胎龄的鼠胚原代细胞分离成纤维细胞，制作饲养层，使用不同浓度丝裂霉素C处理，以细胞形态、生长曲线、囊胚种植情况为饲养层评价指标。结果：ICR小鼠胚胎成纤维细胞可在胎龄12．5～14．5d进行原代细胞分离；12．5d为最佳分离时间；13．5和14．5d分离的细胞需在3代以后使用；6代以前细胞可用于饲养层制作；20mg/L丝裂霉素C作用2．5h可达到较好的处理效果。结论：ICR小鼠可用来分离、培养胚胎成纤维细胞，用于胚胎干细胞饲养层的制作。 展开更多
关键词 胚胎成纤维细胞 ICR小鼠 饲养层 胚胎干细胞
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