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GCLC基因上游AHR/ARNT元件负性调控GCLC基因在大鼠支气管上皮细胞的表达
被引量：
1
1
作者
赖宁
李冰
+3 位作者
王健
付欣
洪玮
冉丕鑫
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期429-435,共7页
研究谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位(GCLC)基因上游调控序列中2个AHR/ARNT元件的功能,从而了解γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)基因转录调节特征.分别构建缺失2个位点AHR/ARNT元件的GCLC基因上游近端序列的萤光素酶报道基因载体以及含...
研究谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位(GCLC)基因上游调控序列中2个AHR/ARNT元件的功能,从而了解γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)基因转录调节特征.分别构建缺失2个位点AHR/ARNT元件的GCLC基因上游近端序列的萤光素酶报道基因载体以及含有2个AHR/ARNT元件核心序列的萤光素酶报道基因载体.转染大鼠支气管上皮细胞(RTE),比较检测野生与缺失报道载体的基因转录调控效率;利用电泳迁移率变动实验(EMSA)和超级迁移率变动实验检测AHR/ARNT元件与AHR以及ARNT因子的特异性结合;通过转染AHR因子真核表达质粒进一步确定AHR/ARNT元件与AHR结合在GCLC基因表达中的最终作用.结果显示,相比其野生序列,缺失AHR/ARNT元件(-1 090^-1 085)和双缺失AHR/ARNT元件(-1 090^-1 085,-215^-210)的GCLC上游调控序列报道载体在RTE显著提高萤光素酶表达(均P<0.05),而缺失AHR/ARNT元件(-215^-210)则未见显著影响(P>0.05);独立AHR/ARNT元件(-1 090^-1 085)具有转录促进作用(P<0.05)而独立AHR/ARNT元件(-215^-210)无明显影响(P>0.05).转染CMV2-AHR能够抑制野生型和缺失型报道载体的萤光素酶表达(P<0.05).EMSA证实GCLC基因上游调控区域的2个AHR/ARNT元件均有核蛋白结合,并且超级迁移率变动实验显示结合的蛋白主要含有转录因子AHR以及ARNT.因此,2个AHR/ARNT元件均可以与异源二聚体AHR/ARNT结合,AHR/ARNT元件(-1 090^-1 085)是GCLC基因中重要的抑制元件.
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关键词
谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位(GCLC)
转录调控
AHR/ARNT元件
大鼠
支气管
上皮
细胞
(
rte
)
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职称材料
H_2O_2致大鼠RTE细胞系氧化应激作用及GSH保护作用的体外研究
被引量：
1
2
作者
余锦波
邹鉴
+5 位作者
朱雨晴
朱家力
杜晶
李潇潇
郭晴
杨旭
《生态毒理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第4期124-129,共6页
许多具有氧化作用的空气污染物,均能使细胞产生氧化损伤,使胸腺基质淋巴生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)含量上升。而TSLP是一种启动过敏性炎症的重要因子,会导致哮喘等疾病发生率的上升。在本研究中用过氧化氢(H_2O_2)模拟...
许多具有氧化作用的空气污染物,均能使细胞产生氧化损伤,使胸腺基质淋巴生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)含量上升。而TSLP是一种启动过敏性炎症的重要因子,会导致哮喘等疾病发生率的上升。在本研究中用过氧化氢(H_2O_2)模拟具有氧化作用的空气污染物进行染毒,研究细胞氧化应激水平的变化,并讨论还原型谷胱甘肽(GSH)对细胞受氧化损伤的保护作用。将大鼠支气管上皮细胞(RTE)分组培养,每组设置6个平行实验,分别用低、中、高剂量H_2O_2染毒3 h;高剂量设置1个重复,作为保护组,在染毒前用GSH保护2 h。结果显示,高剂量组H_2O_2(3.2 mmol·L^(^(-1)))染毒的细胞,其细胞活力下降(P<0.01),丙二醛(MDA)水平上升(P<0.01),TSLP水平上升(P<0.05),与之相比,用GSH保护后的同剂量染毒组,上述指标得到全面缓解(P<0.01)。这表明高浓度的H_2O_2会损伤细胞活力,并使MDA及TSLP水平上升,而GSH对TSLP及MDA的升高有极显著的抑制作用,即对细胞有一定的保护作用。
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关键词
过氧化氢
大鼠
支气管
上皮
细胞
rte
细胞
谷胱甘肽
胸腺基质淋巴
细胞
生成素
丙二醛
氧化损伤
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职称材料
题名
GCLC基因上游AHR/ARNT元件负性调控GCLC基因在大鼠支气管上皮细胞的表达
被引量：
1
1
作者
赖宁
李冰
王健
付欣
洪玮
冉丕鑫
机构
广州医学院实验医学研究中心
广州医学院第一附属医院广州呼吸疾病研究所、呼吸疾病国家重点实验室
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期429-435,共7页
基金
国家自然科学基金(No.30170401)
广东省自然科学基金团队项目(No.04205342)资助~~
文摘
研究谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位(GCLC)基因上游调控序列中2个AHR/ARNT元件的功能,从而了解γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)基因转录调节特征.分别构建缺失2个位点AHR/ARNT元件的GCLC基因上游近端序列的萤光素酶报道基因载体以及含有2个AHR/ARNT元件核心序列的萤光素酶报道基因载体.转染大鼠支气管上皮细胞(RTE),比较检测野生与缺失报道载体的基因转录调控效率;利用电泳迁移率变动实验(EMSA)和超级迁移率变动实验检测AHR/ARNT元件与AHR以及ARNT因子的特异性结合;通过转染AHR因子真核表达质粒进一步确定AHR/ARNT元件与AHR结合在GCLC基因表达中的最终作用.结果显示,相比其野生序列,缺失AHR/ARNT元件(-1 090^-1 085)和双缺失AHR/ARNT元件(-1 090^-1 085,-215^-210)的GCLC上游调控序列报道载体在RTE显著提高萤光素酶表达(均P<0.05),而缺失AHR/ARNT元件(-215^-210)则未见显著影响(P>0.05);独立AHR/ARNT元件(-1 090^-1 085)具有转录促进作用(P<0.05)而独立AHR/ARNT元件(-215^-210)无明显影响(P>0.05).转染CMV2-AHR能够抑制野生型和缺失型报道载体的萤光素酶表达(P<0.05).EMSA证实GCLC基因上游调控区域的2个AHR/ARNT元件均有核蛋白结合,并且超级迁移率变动实验显示结合的蛋白主要含有转录因子AHR以及ARNT.因此,2个AHR/ARNT元件均可以与异源二聚体AHR/ARNT结合,AHR/ARNT元件(-1 090^-1 085)是GCLC基因中重要的抑制元件.
关键词
谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位(GCLC)
转录调控
AHR/ARNT元件
大鼠
支气管
上皮
细胞
(
rte
)
Keywords
glutamate-cysteine ligase catalytic subunit （ GCLC ）
transcriptional regulation
AHR/ARNT element
rat bronchial epithelial cells （
rte
）
分类号
Q344.14 [生物学—遗传学]
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职称材料
题名
H_2O_2致大鼠RTE细胞系氧化应激作用及GSH保护作用的体外研究
被引量：
1
2
作者
余锦波
邹鉴
朱雨晴
朱家力
杜晶
李潇潇
郭晴
杨旭
机构
华中师范大学生命科学学院
出处
《生态毒理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第4期124-129,共6页
基金
国家自然科学基金重点项目(51136002)
文摘
许多具有氧化作用的空气污染物,均能使细胞产生氧化损伤,使胸腺基质淋巴生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)含量上升。而TSLP是一种启动过敏性炎症的重要因子,会导致哮喘等疾病发生率的上升。在本研究中用过氧化氢(H_2O_2)模拟具有氧化作用的空气污染物进行染毒,研究细胞氧化应激水平的变化,并讨论还原型谷胱甘肽(GSH)对细胞受氧化损伤的保护作用。将大鼠支气管上皮细胞(RTE)分组培养,每组设置6个平行实验,分别用低、中、高剂量H_2O_2染毒3 h;高剂量设置1个重复,作为保护组,在染毒前用GSH保护2 h。结果显示,高剂量组H_2O_2(3.2 mmol·L^(^(-1)))染毒的细胞,其细胞活力下降(P<0.01),丙二醛(MDA)水平上升(P<0.01),TSLP水平上升(P<0.05),与之相比,用GSH保护后的同剂量染毒组,上述指标得到全面缓解(P<0.01)。这表明高浓度的H_2O_2会损伤细胞活力,并使MDA及TSLP水平上升,而GSH对TSLP及MDA的升高有极显著的抑制作用,即对细胞有一定的保护作用。
关键词
过氧化氢
大鼠
支气管
上皮
细胞
rte
细胞
谷胱甘肽
胸腺基质淋巴
细胞
生成素
丙二醛
氧化损伤
Keywords
H2O2
rat tracheal epithelial cell
glutathione （GSH）
thymic stromal lymphopoietin （TSLP）
oxidative damage
分类号
X171.5 [环境科学与工程—环境科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
GCLC基因上游AHR/ARNT元件负性调控GCLC基因在大鼠支气管上皮细胞的表达
赖宁
李冰
王健
付欣
洪玮
冉丕鑫
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
1
在线阅读
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职称材料
2
H_2O_2致大鼠RTE细胞系氧化应激作用及GSH保护作用的体外研究
余锦波
邹鉴
朱雨晴
朱家力
杜晶
李潇潇
郭晴
杨旭
《生态毒理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
在线阅读
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职称材料
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