补骨脂素对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响 被引量：53

1

作者 王建华 王艳 潘永梅 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2007年第5期844-846,共3页

为探讨补骨脂素体外对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响,用改良的组织块法分离培养新生大鼠颅骨成骨细胞,补骨脂素以不同浓度加入细胞培养体系,作用不同时间后,用MTT法检测成骨细胞的增殖情况;用对硝基苯二钠基质动力学法测定细胞内碱性磷... 为探讨补骨脂素体外对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响,用改良的组织块法分离培养新生大鼠颅骨成骨细胞,补骨脂素以不同浓度加入细胞培养体系,作用不同时间后,用MTT法检测成骨细胞的增殖情况;用对硝基苯二钠基质动力学法测定细胞内碱性磷酸酶的活性,用改良的Lowry法测蛋白含量。补骨脂素浓度在1μmol/L 24 h,5～20μmol/L浓度范围内48 h,1、10、20μmol/L浓度范围内72 h促进成骨细胞增殖,在10～15μmol/L范围内48 h及72 h提高成骨细胞内碱性磷酸酶的活性。补骨脂素体外能促进成骨细胞的增殖与分化。 展开更多

关键词 补骨脂素 大鼠成骨细胞 细胞增殖 细胞分化

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绿原酸通过Shp2激活Erk1/2促进大鼠成骨细胞增殖的实验研究 被引量：9

2

作者 张立超 李士春 +2 位作者 云才 尤锡东 罗军 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期693-697,共5页

目的研究从杜仲叶中提取的绿原酸对大鼠成骨细胞的促增殖作用。方法MTT法检测分别用0、0．1、1、10μmol/L4种不同浓度梯度的绿原酸和0．1μmol/L绿原酸＋10μmol/LShp2抑制剂NSC87887处理大鼠成骨细胞增殖情况；用无血清无酚红DMEM培... 目的研究从杜仲叶中提取的绿原酸对大鼠成骨细胞的促增殖作用。方法MTT法检测分别用0、0．1、1、10μmol/L4种不同浓度梯度的绿原酸和0．1μmol/L绿原酸＋10μmol/LShp2抑制剂NSC87887处理大鼠成骨细胞增殖情况；用无血清无酚红DMEM培养基培养的饥饿大鼠成骨细胞用上述药物处理后，用Western blot检测其p-Shp2（Tyr580）、Shp2、P-Erk和Erk蛋白表达。结果MTT法结果显示绿原酸（0-1μmol/L）促进大鼠成骨细胞的增殖，呈浓度依赖性；Western blot结果显示绿原酸可以诱导大鼠成骨细胞的p-Shp2（Tyr580）和Erk磷酸化水平升高，而NSC87887可以抑制其促进作用。结论绿原酸能够促进大鼠成骨细胞的增值，并且是通过Shp2/Erk途径实现的。 展开更多

关键词 绿原酸 大鼠成骨细胞 Shp2 ERK1 2 增殖

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山萘酚对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响 被引量：10

3

作者 王建华 郑丽 +1 位作者 冀国荣 李连怀 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2008年第6期997-999,共3页

为探讨山萘酚体外对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响及中药菟丝子补肾壮骨作用的物质基础，用改良的组织块法分离培养新生大鼠颅骨成骨细胞，山萘酚以不同浓度加入细胞培养体系，作用不同时问后，用MTF法检测成骨细胞的增殖情况；用对硝... 为探讨山萘酚体外对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响及中药菟丝子补肾壮骨作用的物质基础，用改良的组织块法分离培养新生大鼠颅骨成骨细胞，山萘酚以不同浓度加入细胞培养体系，作用不同时问后，用MTF法检测成骨细胞的增殖情况；用对硝基苯二钠基质动力学法测定细胞内碱性磷酸酶的活性，用改良的Lowry法测蛋白含量。山萘酚在浓度1×10^-5mol／L24h，1×10^-5～1×10^-7mol／L浓度范围内48h促进成骨细胞增殖，在浓度1×10^-9moL／L48h及72h提高成骨细胞内碱性磷酸酶的活性。山萘酚体外能促进大鼠成骨细胞的增殖与分化，山萘酚可能是菟丝子补肾壮骨作用的活性成份之一。 展开更多

关键词 山萘酚 大鼠成骨细胞 细胞增殖 细胞分化

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脉冲电磁场促进大鼠成骨细胞成熟与矿化依赖于NO/cGMP信号途径 被引量：6

4

作者 任茜 王鸣刚 +3 位作者 陈克明 周建 石文贵 方清清 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1242-1248,共7页

脉冲电磁场(pulse electromagnetic fields,PEMFs)能够促进大鼠成骨细胞(rat osteoblast cells,ROB)成熟矿化,但是其作用机制并不明确。本实验主要研究PEMFs促进大鼠成骨细胞成熟矿化与NO/c GMP信号途径的关系,进而阐明PEMFs促进成骨细... 脉冲电磁场(pulse electromagnetic fields,PEMFs)能够促进大鼠成骨细胞(rat osteoblast cells,ROB)成熟矿化,但是其作用机制并不明确。本实验主要研究PEMFs促进大鼠成骨细胞成熟矿化与NO/c GMP信号途径的关系,进而阐明PEMFs促进成骨细胞成熟矿化的机理。首先,将成骨细胞经50 Hz、0.6 m T脉冲电磁场作用不同时间后,检测细胞培养液中一氧化氮(nitric oxide,NO)和细胞内3'-5'-环鸟苷一磷酸(3'-5'-cyclic-GMP,c GMP)的含量,以探明电磁场是否影响NO和c GMP的合成;其次,应用蛋白质印迹,检测细胞内e NOS、i NOS和PKG-1的蛋白表达量;最后,利用NOS的阻断剂L-NAME抑制NO信号通路后,检测成骨性相关指标,包括碱性磷酸酶(ALP)活性、钙化结节数量、成骨性基因Bmp-2、Collagen-1、Osterix及破骨细胞调节因子Rankl基因的表达量。结果发现,经PEMFs处理后,NO含量及c GMP含量均有明显升高;细胞内e NOS、i NOS和PKG-1蛋白表达量较空白对照组均有显著升高,说明PEMFs能够激活NO/c GMP信号途径。且经PEMFs处理的成骨细胞,ALP活性升高,BMP-2、Collagen-1和Osterix基因表达量显著增加,Rankl基因表达量下降,成骨细胞形成钙化结节的能力增强。当加入L-NAME,PEMFs引起的ALP活性增加、成骨性基因表达升高和钙化结节形成能力增强的趋势均被显著抑制。上述结果表明,经PEMFs处理成骨细胞成熟矿化过程中,NO/c GMP信号通路被激活;如该通路被抑制,则电磁场促成骨作用被抵消,说明脉冲电磁场促进成骨细胞成熟矿化依赖于NO/c GMP信号通路。 展开更多

关键词 脉冲电磁场 大鼠成骨细胞 成熟与矿化 一氧化氮 环鸟苷一磷酸

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低频脉冲电磁场对大鼠成骨细胞骨形成的影响及作用机制 被引量：7

5

作者 王媛媛 葸慧荣 +2 位作者 石文贵 周建 陈克明 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期21-27,共7页

目的观察低频脉冲电磁场(PEMFs)对大鼠成骨细胞(ROBs)骨形成的影响,探讨了环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A (PKA)/环磷腺苷效应结合蛋白(CREB)信号通路的作用机制。方法取新生Wistar大鼠颅骨,通过多次酶消化法获得ROBs并进行传代融合。采用5... 目的观察低频脉冲电磁场(PEMFs)对大鼠成骨细胞(ROBs)骨形成的影响,探讨了环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A (PKA)/环磷腺苷效应结合蛋白(CREB)信号通路的作用机制。方法取新生Wistar大鼠颅骨,通过多次酶消化法获得ROBs并进行传代融合。采用50 Hz 0. 6 m T PEMFs处理3、6、9 d后,检测ROBs内的碱性磷酸酶(ALP)浓度;处理0、15、30、60、90、120 min后,检测ROBs内骨形成相关因子(RUNX2)和成骨相关转录因子(OSX)蛋白表达,cAMP浓度,p-PKA、p-CREB和CREB蛋白表达。观察p-CREB核转位情况。采用RNA干扰法干扰IFT88后,检测ROBs内RUNX2、OSX、p-PKA和p-CREB蛋白表达情况。结果 PEMFs处理ROBs 3、6、9 d后,ALP活性值分别为24. 356±4. 911、37. 688±2. 151和39. 922±5. 486,均明显高于相应对照组的18. 531±2. 401 (P=0. 0121)、33. 675±4. 366 (P=0. 0324)和36. 574±1. 339 (P=0. 0134)。PEMFs处理30 (P=0. 0042和P=0. 0058)、60 (P=0. 0097和P=0. 0079)、90 min (P=0. 0083和P=0. 0098)时,ROBs内的RUNX2和OSX活性均显著高于未处理组; PEMFs处理30(P=0. 0012)和60 min (P=0. 0035)时,ROBs内的cAMP浓度明显高于未处理时; PEMFs处理15 (P=0. 0018)、30 (P=0. 0087)、90 (P=0. 0250)和120 min (P=0. 0350)时,ROBs内的p-PKA水平明显高于未处理组; PEMFs处理15 (P=0. 0075)、30 (P=0. 0017)、60 (P=0. 0074)和90 min (P=0. 0096)时,ROBs内的p-CREB水平明显高于未处理组。PEMFs处理ROBs 15 min后,CREB发生磷酸化并聚集于细胞核内。将PKA、p-PKA与初级纤毛共定位染色,结果发现p-PKA定位于初级纤毛上。RNA干扰去除初级纤毛后,干扰组的p-PKA (F=78. 602,P=0. 0270)和p-CREB (F=76. 082,P=0. 0089)蛋白表达量及RUNX2 (F=41. 064,P=0. 0230)和OSX (F=57. 524,P=0. 0310)蛋白表达量均明显低于未干扰组。结论 PEMFs可能是通过初级纤毛相关的cAMP/PKA/CREB信号通路促进ROBs骨形成。 展开更多

关键词 低频脉冲电磁场 大鼠成骨细胞 初级纤毛 环磷酸腺苷 蛋白激酶A 环磷腺苷效应结合蛋白

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骨碎补水提液对大鼠成骨细胞OPG mRNA表达的影响 被引量：7

6

作者 赵晓燕 刘钟杰 +4 位作者 李彩虹 李琴 邢晓旭 田丹 韩博 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2012年第6期10-12,共3页

通过探讨骨碎补水提液对大鼠成骨细胞中OPG mRNA水平表达的影响,来研究骨碎补对成骨细胞产生作用的分子机制。细胞培养48h后,应用荧光定量RT-PCR方法检测不同浓度骨碎补水提液及雌激素受体抑制剂ICI 182780作用后,细胞中OPG mRNA水平表... 通过探讨骨碎补水提液对大鼠成骨细胞中OPG mRNA水平表达的影响,来研究骨碎补对成骨细胞产生作用的分子机制。细胞培养48h后,应用荧光定量RT-PCR方法检测不同浓度骨碎补水提液及雌激素受体抑制剂ICI 182780作用后,细胞中OPG mRNA水平表达的变化。结果显示,骨碎补水提液作用于大鼠成骨细胞48h后,与对照组相比,高浓度骨碎补水提液显著上调OPG mRNA的比值,而低浓度组与对照组无显著差异。加入雌激素受体抑制剂ICI 182780后,骨碎补对OPG mRNA水平的促进作用消失。表明骨碎补水提液能上调OPG mRNA水平的表达,且呈剂量依赖性。上述促进作用能被雌激素受体抑制剂阻断,因而可以推测这个过程与雌激素受体通路有关。 展开更多

关键词 骨碎补水提液 骨保护素 大鼠成骨细胞 荧光定量RT-PCR 雌激素受体

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柚皮苷对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响 被引量：1

7

作者 武密山 赵素芝 白霞 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2010年第B08期216-218,59,共4页

为探讨柚皮苷对体外培养大鼠成骨细胞（ROB）增殖和分化的影响，将柚皮苷以不同浓度分别加入新生大鼠颅骨成骨细胞培养液中，作用不同时间后，研究它们对细胞增殖和分化的影响，用MTT法测定不同浓度的柚皮苷的促细胞增殖作用；采用ALP... 为探讨柚皮苷对体外培养大鼠成骨细胞（ROB）增殖和分化的影响，将柚皮苷以不同浓度分别加入新生大鼠颅骨成骨细胞培养液中，作用不同时间后，研究它们对细胞增殖和分化的影响，用MTT法测定不同浓度的柚皮苷的促细胞增殖作用；采用ALP活性和骨钙素定量检测分别观察不同浓度的柚皮苷的促细胞分化作用；柚皮苷在浓度1×10^-5mol／L 24h，1×10^-5-1×10^-7mol／L浓度范围内48h促进成骨细胞增殖，在浓度1×10^-9mol／L48h能提高成骨细胞内碱性磷酸酶的活性。在浓度1×10^-5mol／L10d能明显促进成骨细胞骨钙素合成和分泌。柚皮苷体外能促进大鼠成骨细胞的增殖与分化。 展开更多

关键词 柚皮苷 大鼠成骨细胞 细胞增殖 细胞分化

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黄芪总黄酮对大鼠原代成骨细胞的影响及其机制研究 被引量：3

8

作者 孔祥鹤 牛银波 +4 位作者 武祥龙 翟远坤 潘亚磊 李晨睿 梅其炳 《化学与生物工程》 CAS 2012年第6期26-30,45,共6页

在大鼠颅骨原代成骨细胞中加入不同浓度的黄芪总黄酮(ATF),用MTT法检测细胞增殖,用碱性磷酸酶(ALP)活性、Ⅰ型胶原及骨钙素水平检测细胞分化,用茜素红染色法检测细胞矿化,用ELISA法和Western blot方法检测成骨细胞中骨形成蛋白(BMP-2)... 在大鼠颅骨原代成骨细胞中加入不同浓度的黄芪总黄酮(ATF),用MTT法检测细胞增殖,用碱性磷酸酶(ALP)活性、Ⅰ型胶原及骨钙素水平检测细胞分化,用茜素红染色法检测细胞矿化,用ELISA法和Western blot方法检测成骨细胞中骨形成蛋白(BMP-2)及核心结合因子(Runx-2)的表达。结果表明,ATF能剂量依赖性地促进大鼠原代成骨细胞的增殖、分化及矿化,同时上调成骨细胞中BMP-2和Runx-2蛋白的表达。提示ATF可能通过上调成骨细胞中BMP-2和Runx-2的表达来促进成骨细胞的成骨活性。 展开更多

关键词 黄芪总黄酮 大鼠原代成骨细胞 增殖 分化 矿化 BMP-2 Runx-2

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淡豆豉和黑豆乙醇提取物的促成骨细胞增殖活性及HPLC-MS分析 被引量：8

9

作者 冯薇 孙佳明 +4 位作者 李琛 牛丽颖 刘姣 张凯 王鑫国 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1651-1655,共5页

目的比较分析淡豆豉和黑豆乙醇提取物促大鼠颅骨成骨细胞增殖活性及二者的化学成分。方法采用MTT法对淡豆豉和黑豆的乙醇提取物进行促大鼠颅骨成骨细胞增殖活性的研究,并通过高效液相色谱-质谱联用技术对二者化学成分进行比较分析。结... 目的比较分析淡豆豉和黑豆乙醇提取物促大鼠颅骨成骨细胞增殖活性及二者的化学成分。方法采用MTT法对淡豆豉和黑豆的乙醇提取物进行促大鼠颅骨成骨细胞增殖活性的研究,并通过高效液相色谱-质谱联用技术对二者化学成分进行比较分析。结果淡豆豉和黑豆的乙醇提取物对大鼠成骨细胞的促增殖率分别可达到36.5%和28.2%,其主要有效成分为异黄酮类化合物,经液质联用分析共鉴定出15个黄酮类成分。结论黑豆发酵成淡豆豉后的成分变化主要体现在由苷类成分脱糖转化为苷元,含有量显著增加的大豆苷元和染料木素两种苷元主要由丙二酰大豆苷(大豆苷元-G-M)和丙二酰染料木苷(染料木素-G-M)脱丙二酰基和葡萄糖转化而来。 展开更多

关键词 淡豆豉 黑豆 黄酮类成分 大鼠颅骨成骨细胞 液质联用

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三维多孔支架材料PLLA／n-HA的体外生物相容性研究 被引量：1

10

作者 黄江鸿 陈洁琳 +4 位作者 段莉 张巨峰 熊建义 朱伟民 王大平 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2015年第1期55-59,63,共6页

目的研究三维多孔支架材料聚乳酸/纳米羟基磷灰石(PLLA/n-HA)的体外生物相容性,探讨其作为细胞培养材料和骨组织工程支架的可行性。方法将大鼠成骨细胞接种于PLLA/nHA复合支架上,体外共同培养后,CCK-8法检测大鼠成骨细胞增殖活性,荧光... 目的研究三维多孔支架材料聚乳酸/纳米羟基磷灰石(PLLA/n-HA)的体外生物相容性,探讨其作为细胞培养材料和骨组织工程支架的可行性。方法将大鼠成骨细胞接种于PLLA/nHA复合支架上,体外共同培养后,CCK-8法检测大鼠成骨细胞增殖活性,荧光倒置显微镜、扫描电子显微镜下观察PLLA/n-HA复合支架材料表面和孔隙内细胞粘附情况。结果 CCK-8法检测显示实验组复合支架材料上细胞的增殖与空白对照组的差异无统计学意义(P>0.05);电镜观察到细胞在复合支架材料表面和孔隙内大量黏附、生长,并且随着共培养时间的增加,材料表面的细胞数量呈几何级增长。结论三维多孔支架材料PLLA/n-HA的生物相容性较好,可望成为一种性能良好的骨组织工程支架材料。 展开更多

关键词 三维多孔 聚乳酸 纳米羟基磷灰石 大鼠成骨细胞

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《天然产物研究与开发》第23卷(2011)总目录

11

《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2011年第6期1172-1175,共4页

关键词 化学成分 化学组成 海洋链霉菌 高速逆流色谱法 天然产物 英文 内生真菌 抗氧化活性 大鼠成骨细胞 植物提取物 猪苓多糖 挥发性成分 次生代谢产物 次级代谢产物 研究与开发 研究与发展 目录 检索工具

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补肾健骨方含药血清对ROBs和rBMSCs增殖、分化和矿化的影响 被引量：6

12

作者 周湘琳 王冬含 +2 位作者 施根根 赵良功 封士兰 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期958-963,共6页

目的观察补肾健骨方含药血清对大鼠颅骨成骨细胞(rat calvarial osteoblasts,ROBs)和大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow mesenchymal stem cells,r BMSCs)细胞活性及分化、矿化的影响。方法制备补肾健骨方含药血清,将ROBs和r BMSCs... 目的观察补肾健骨方含药血清对大鼠颅骨成骨细胞(rat calvarial osteoblasts,ROBs)和大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow mesenchymal stem cells,r BMSCs)细胞活性及分化、矿化的影响。方法制备补肾健骨方含药血清,将ROBs和r BMSCs分为5%、10%、15%、20%、25%浓度含药血清组、无药血清组及传统诱导组,分别对各组ROBs和r BMSCs进行成骨诱导。MTT法检测ROBs和r BMSCs细胞的增殖情况;用试剂盒检测ROBs和r BMSCs的碱性磷酸酶(ALP)活性;茜素红染色法检测矿化结节形成。结果不同浓度含药血清组与空白无药血清组、传统诱导组相比,均不同程度地促进ROBs和r BMSCs的增殖,使ALP活性提高,增加钙化结节数量和面积。其中含药血清浓度为20%时促进ROBs增殖分化作用最佳,浓度为10%时促进r BMSCs增殖分化效果最为显著。结论不同浓度补肾健骨方含药血清均能够促进ROBs和r BMSCs的成骨增殖、分化和矿化,分别在浓度为20%和10%时最佳。 展开更多

关键词 中医中药 含药血清 大鼠颅骨成骨细胞 大鼠骨髓间充质干细胞 细胞增殖 成骨分化

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