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枯草芽孢杆菌表面展示氨肽酶的构建及协同水解大豆蛋白 被引量：1
1
作者 袁晓黎 李青云 +3 位作者 刘幽燕 李进 白雪 唐爱星 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1466-1473,共8页
氨肽酶是蛋白质深度水解的重要协同酶,但游离酶使用成本高且稳定性差,限制了其工业化应用。本研究利用表面展示技术将来源于铜绿假单胞菌GF31的氨肽酶基因Aps展示到Bacillus subtilis WB800N芽孢的表面,构建了一种易分离且稳定性好的新... 氨肽酶是蛋白质深度水解的重要协同酶,但游离酶使用成本高且稳定性差,限制了其工业化应用。本研究利用表面展示技术将来源于铜绿假单胞菌GF31的氨肽酶基因Aps展示到Bacillus subtilis WB800N芽孢的表面,构建了一种易分离且稳定性好的新型全细胞生物催化剂。通过免疫荧光分析,证明氨肽酶在芽孢表面正确表达。在最适反应温度60℃、pH=9.0的条件下,氨肽酶活力最高可达75.61U/g芽孢。将表面展示氨肽酶协同碱性蛋白酶水解大豆蛋白,在60℃、碱性蛋白酶与表面展示氨肽酶加入比例为2∶1、水解pH先为10.0后为9.0的条件下,水解5.0%的大豆蛋白8h,水解度最高可达55.50%,分别是表面展示氨肽酶与碱性蛋白酶单独水解时的3.3倍、1.5倍。同时16种游离氨基酸含量大幅度提升,其中疏水性氨基酸亮氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸含量分别增加19.21mg/L、8.59mg/L和16.77mg/L,鲜味氨基酸谷氨酸、天冬氨酸含量增加13.98mg/L和4.11mg/L,说明表面展示氨肽酶在蛋白质的深度水解及对蛋白水解液脱苦、增鲜方面具有显著的作用,具有良好的工业应用前景。 展开更多
关键词 氨肽酶 表面展示 枯草芽孢杆菌 大豆蛋白 协同水解
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枯草芽孢杆菌源抗菌肽发酵条件优化及其对雏鸡的抗炎作用 被引量：3
2
作者 于天明 田玉虎 +3 位作者 刘春青 李建喜 王磊 李凤华 《现代畜牧兽医》 2024年第6期19-23,共5页
研究旨在优化枯草芽孢杆菌源抗菌肽发酵条件并探究其对雏鸡的抗炎作用。试验采用单因素方法筛选出适合枯草芽孢杆菌K4发酵的最佳氮源、碳源及初始pH值、温度、接种量。用筛选出的最佳发酵培养基和条件在50 L发酵罐内发酵1株能产抗菌肽... 研究旨在优化枯草芽孢杆菌源抗菌肽发酵条件并探究其对雏鸡的抗炎作用。试验采用单因素方法筛选出适合枯草芽孢杆菌K4发酵的最佳氮源、碳源及初始pH值、温度、接种量。用筛选出的最佳发酵培养基和条件在50 L发酵罐内发酵1株能产抗菌肽的枯草芽孢杆菌K4,并将最终发酵液添加20%水溶性淀粉进行喷雾干燥。喷干后的菌粉使用大肠杆菌O2作为指示菌进行体外抑菌试验和雏鸡抗炎试验。结果显示,试验筛选出的最佳氮源为蛋白胨,最佳碳源为葡萄糖,培养基初始pH值为7.0,发酵温度为37℃,接种量为5%。喷干后的菌粉活菌数为4.60×10^(10)CFU/g。体外抑菌试验结果显示喷干菌粉对O2的抑菌圈为30 mm。雏鸡抗炎试验结果显示,大肠杆菌感染后的雏鸡灌服抗菌肽K4后的存活率为65%,比药物对照组高18.18%,说明枯草芽孢杆菌K4具有抑制大肠杆菌、降低雏鸡感染大肠杆菌后的死亡率的作用。 展开更多
关键词 抗菌肽 枯草芽孢杆菌K4 体外抑菌 抗炎
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枯草芽孢杆菌生产大豆多肽溶液的加工功能特性研究 被引量：20
3
作者 万琦 陆兆新 +1 位作者 吕凤霞 高宏 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第11期99-102,共4页
枯草芽孢杆菌B.s.Shi HeziIII发酵豆粕粉产生多肽溶液。不同发酵时间的多肽溶液有着不同的加工特性。水解度DH随着发酵时间的延长而上升;可溶性氮指数(NSI)与发酵时间和pH值均有关,总体上发酵时间越长,NSI越大,pH值在中性条件下NSI较高... 枯草芽孢杆菌B.s.Shi HeziIII发酵豆粕粉产生多肽溶液。不同发酵时间的多肽溶液有着不同的加工特性。水解度DH随着发酵时间的延长而上升;可溶性氮指数(NSI)与发酵时间和pH值均有关,总体上发酵时间越长,NSI越大,pH值在中性条件下NSI较高;浊度受pH值影响,pH值越低,浊度越高,36h的多肽溶液在pH3.0～7.0范围内,浊度较低;多肽溶液均有着较好的乳化性,但乳化稳定性较差。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 大豆多肽溶液 豆粕粉 发酵生产 浊度 乳化活性 乳化稳定性 水解度
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枯草芽孢杆菌G10合成表面活性素的发酵条件优化 被引量：4
4
作者 王俊芳 张飘丹 《中国酿造》 CAS 北大核心 2024年第3期157-162,共6页
为提高表面活性素的产量,该研究以具有合成表面活性素能力的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)G10菌株为研究对象,利用酸沉淀和甲醇抽提法相结合提取表面活性素,对其表面活性及抑菌性能进行测定,并通过单因素试验和正交试验优化枯草芽孢... 为提高表面活性素的产量,该研究以具有合成表面活性素能力的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)G10菌株为研究对象,利用酸沉淀和甲醇抽提法相结合提取表面活性素,对其表面活性及抑菌性能进行测定,并通过单因素试验和正交试验优化枯草芽孢杆菌G10合成表面活性素的发酵条件及培养基组成。结果表明,表面活性素具有明显的表面活性和抑菌活性,其对大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的抑菌圈直径分别为1.8 cm、1.9 cm、1.4 cm。合成表面活性素最优发酵条件为:转速200 r/min,发酵温度30℃,发酵培养基初始pH值为7.5;最优发酵培养基组分为:葡萄糖22 g/L,L-谷氨酸5.0 g/L,Mg SO_(4)0.5 g/L,KCl 0.5 g/L,KH_(2)PO_(4)1 g/L,Fe SO_(4)·7H_(2)O 0.15 g/L,MnSO_(4)0.65 g/L,CuSO_(4)·5H_(2)O 0.16 g/L。在此优化条件下,枯草芽孢杆菌G10发酵表面活性素平均产量为9.89 g/L,表面活性素产量较优化前提高了46.7%。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 表面活性素 脂肽 生防菌 发酵条件优化
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枯草芽孢杆菌脂肽类抗生素发酵和提取条件 被引量：55
5
作者 王帅 高圣风 +2 位作者 高学文 王娜 王光强 《中国生物防治》 CSCD 北大核心 2007年第4期342-347,共6页
以枯草芽孢杆菌G1为出发菌株,研究了发酵过程中不同培养条件和培养基对该菌株产生脂肽类抗生素的影响。结果表明:最有利于脂肽类抗生素产生的发酵条件是初始pH7.0,接种量3%,发酵培养温度30℃,发酵时间38h时,而最佳培养基为Landy培养基... 以枯草芽孢杆菌G1为出发菌株,研究了发酵过程中不同培养条件和培养基对该菌株产生脂肽类抗生素的影响。结果表明:最有利于脂肽类抗生素产生的发酵条件是初始pH7.0,接种量3%,发酵培养温度30℃,发酵时间38h时,而最佳培养基为Landy培养基。在提取脂肽类抗生素粗提物的过程中发现,加酸至pH4.0时脂肽类抗生素能够完全沉淀。在Landy培养基和上述发酵条件下,最多能产生脂肽类抗生素粗提物6.5g/L。利用HPLC技术对产生的脂肽类抗生素进行定量分析,结果表明产生纯的脂肽类抗生素最高达2.4g/L。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 脂肽类抗生素 发酵 提取
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枯草芽孢杆菌BSD-2产抗菌肽发酵培养基的优化 被引量：21
6
作者 张蕾 张铎 +3 位作者 张丽萍 程辉彩 胡瑞萍 张根伟 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第3期189-192,共4页
为了提高枯草芽孢杆菌BSD-2抗菌肽的产量,应用响应面法对发酵培养基进行优化。采用Plackett-Bur-man设计对培养基中相关影响因素的效应进行评价,筛选出3个重要因素依次为蛋白胨、淀粉和豆饼粉;然后进行最陡爬坡试验逼近最佳响应面区域;... 为了提高枯草芽孢杆菌BSD-2抗菌肽的产量,应用响应面法对发酵培养基进行优化。采用Plackett-Bur-man设计对培养基中相关影响因素的效应进行评价,筛选出3个重要因素依次为蛋白胨、淀粉和豆饼粉;然后进行最陡爬坡试验逼近最佳响应面区域;最后通过Box-Behnken设计及响应面分析法确定最佳培养基配方为:蛋白胨14.29g/L、淀粉14.07g/L、豆饼粉6.49g/L、CaCO3 2.0g/L、MgSO4 1.0g/L。拟合实验模型结果显示,发酵液抗菌肽的产量增加为原来的1.77倍。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 响应面分析 Minitab软件 培养基优化 抗菌肽
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枯草芽孢杆菌发酵小米糠对其抗氧化肽含量与抗氧化活性的影响 被引量：14
7
作者 郭利娜 朱玉 +3 位作者 刁明明 陆兆新 吕凤霞 赵海珍 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第13期196-201,共6页
为提高小米糠的附加值,本实验以多个枯草芽孢杆菌为起始菌株,透明圈直径与菌落直径之比(HC值)为初筛指标,通过酪蛋白平板培养法进行高产蛋白酶菌株的初步筛选。将初筛所获得菌株在小米糠基础培养基上进行发酵,对其发酵上清液的总蛋白酶... 为提高小米糠的附加值,本实验以多个枯草芽孢杆菌为起始菌株,透明圈直径与菌落直径之比(HC值)为初筛指标,通过酪蛋白平板培养法进行高产蛋白酶菌株的初步筛选。将初筛所获得菌株在小米糠基础培养基上进行发酵,对其发酵上清液的总蛋白酶活力、多肽含量及总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)进行测定,进一步筛选出最适菌株。用此菌株对小米糠进行发酵,并对其最适发酵时间及上清液的抗氧化活性进行测定。结果表明:Natto D-3为最佳发酵菌株,其产蛋白酶活力为90.22 IU/m L,发酵小米糠72 h时所获得发酵上清液4种体外抗氧化活性相对最高,分别为T-AOC值38.04 U/m L、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率75.37%、总还原力0.18及Fe2+螯合能力44.34%,最终发酵上清液的多肽含量为4.28 mg/m L,纤溶酶活力为522.64 IU/m L。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 发酵 小米糠 抗氧化肽
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一株枯草芽孢杆菌产抗菌肽培养基筛选及发酵工艺优化的研究 被引量：21
8
作者 张志焱 赵倩 +3 位作者 于佳民 刘长庆 徐海燕 谷巍 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第4期1217-1226,共10页
试验旨在对一株产抗菌肽枯草芽孢杆菌BL0006的发酵培养基和发酵条件进行优化,以提高发酵液中抗菌肽的效价。首先通过单因子试验筛选出培养基的最适碳源、氮源与无机盐分别为葡萄糖、蛋白胨和K_2HPO_4;在此基础上采用最陡爬坡路径逼近最... 试验旨在对一株产抗菌肽枯草芽孢杆菌BL0006的发酵培养基和发酵条件进行优化,以提高发酵液中抗菌肽的效价。首先通过单因子试验筛选出培养基的最适碳源、氮源与无机盐分别为葡萄糖、蛋白胨和K_2HPO_4;在此基础上采用最陡爬坡路径逼近最大响应区域,再利用Box-Behnken试验设计及响应面分析法得到培养基最佳配方:通过摇瓶单因素试验对发酵条件、温度、接种量、转速进行了优化,优化后的发酵培养基为葡萄糖47.7 g/L、蛋白胨29.0 g/L、K_2HPO_4 3.3 g/L,摇瓶发酵工艺为接种量30 mL/L、初始pH 7.5、摇床转速220 r/min、培养温度37℃。优化后抗菌肽的效价提高到了4.25×10~4 U/mL,是优化前的3.51倍。综合试验结果,本研究筛选的培养基和优化后的发酵工艺可达到高产、降低成本、缩短发酵时间的效果。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 抗菌肽 培养基 发酵工艺 优化
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枯草芽孢杆菌ls-45发酵法制取玉米肽的研究 被引量：12
9
作者 张智 黄放 +4 位作者 朱宏亮 宋静 汤倩倩 王婷婷 麻名汉 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第12期36-41,共6页
经过单因素试验和响应面综合试验,确定了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ls-45发酵生产玉米多肽的最佳发酵条件:接种量12%,40目玉米蛋白粉,底物浓度5%,初始pH8.0,装液量100 mL/500 mL三角瓶,培养温度41℃,摇床转速180 r/min,发酵时间6... 经过单因素试验和响应面综合试验,确定了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ls-45发酵生产玉米多肽的最佳发酵条件:接种量12%,40目玉米蛋白粉,底物浓度5%,初始pH8.0,装液量100 mL/500 mL三角瓶,培养温度41℃,摇床转速180 r/min,发酵时间63 h。在此条件下玉米肽得率达到最大为82.7%。并对制得的玉米肽进行了初步的分离纯化,经截留分子质量104u的中空纤维柱超滤,得到分子质量在104u左右的超滤液,其回收率为86.3%,超滤液经SephadexG-25柱分离纯化和相对分子质量分布的测定,共洗脱出4个峰,其玉米肽各级分的相对分子质量分别大致为5128、3715和1513。 展开更多
关键词 发酵 枯草芽孢杆菌 玉米肽 响应面法
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枯草芽孢杆菌固态发酵菜籽粕生产多肽及降解硫苷的研究 被引量：13
10
作者 何荣海 蒋边 +2 位作者 朱培培 丁文慧 马海乐 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期228-233,共6页
实验以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)为发酵菌株、菜籽粕为原料,菜籽多肽得率和硫代葡萄糖苷(硫苷)降解率为发酵菜籽粕品质的主要评价指标,通过单因素实验及Box-Behnken响应面分析法对固态发酵制备菜籽多肽的工艺进行研究,得到最佳... 实验以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)为发酵菌株、菜籽粕为原料,菜籽多肽得率和硫代葡萄糖苷(硫苷)降解率为发酵菜籽粕品质的主要评价指标,通过单因素实验及Box-Behnken响应面分析法对固态发酵制备菜籽多肽的工艺进行研究,得到最佳发酵工艺条件为:发酵时间为70h,液料比为1.3∶1mL/g,接种量为15%,发酵温度为31℃,此时多肽得率、硫苷降解率可达15.94%、62.14%,两者的综合评分达到最高值,与响应面理论值吻合性良好。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 固态发酵 多肽 响应面分析
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枯草芽孢杆菌A30菌株产生的拮抗肽的分离纯化与理化性质研究 被引量：34
11
作者 何青芳 陈卫良 马志超 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期361-365,共5页
平皿测试表明 Bacillussubtilis A30菌株对多种植物病原真菌 ,例如水稻纹枯病菌 (Rhizoctonia solani)、稻瘟病菌 (Magnaporthegrisea)等有强烈抑制作用。在小区试验中 A30菌液对水稻纹枯病也表现出了较好的防治效果。 A30菌株培养液经... 平皿测试表明 Bacillussubtilis A30菌株对多种植物病原真菌 ,例如水稻纹枯病菌 (Rhizoctonia solani)、稻瘟病菌 (Magnaporthegrisea)等有强烈抑制作用。在小区试验中 A30菌液对水稻纹枯病也表现出了较好的防治效果。 A30菌株培养液经硫酸铵沉淀、FPL C疏水色谱、HPLC反相色谱后 ,纯化得到一种拮抗活性物质 ,命名为 P1。 P1对热稳定 ,对蛋白酶不敏感 ;茚三酮反应呈阴性 ,用酸水解后茚三酮反应和双缩脲反应呈阳性。经 L C- ESI- MS分析初步判断 P1的分子量为14 76 . 展开更多
关键词 分离 纯化 理化性质 枯草芽孢杆菌 拮抗肽 水稻 纹枯病菌 拮抗菌 纹枯病
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枯草芽孢杆菌发酵制备花生多肽及其自由基清除活力的研究 被引量：12
12
作者 张友维 张晖 +3 位作者 王立 郭晓娜 齐希光 钱海峰 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期25-29,共5页
为优化枯草芽孢杆菌发酵制备花生多肽的条件,采用响应面法,以水解度为响应值,研究了pH、接种量、发酵时间和发酵温度对制备高水解度花生多肽的影响。最终确定最佳发酵条件为:pH7.2,接种量2%,发酵时间3.97 d,发酵温度32.6℃。在此条件下... 为优化枯草芽孢杆菌发酵制备花生多肽的条件,采用响应面法,以水解度为响应值,研究了pH、接种量、发酵时间和发酵温度对制备高水解度花生多肽的影响。最终确定最佳发酵条件为:pH7.2,接种量2%,发酵时间3.97 d,发酵温度32.6℃。在此条件下发酵制得的花生多肽水解度为22.42%,与理论预测值的误差在1%以内,说明利用建立的模型在实践中进行预测是可行的。并对制备的花生多肽进行自由基清除试验,发现该条件下制备的花生多肽具有较好的DPPH自由基清除能力和超氧阴离子自由基清除能力。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 响应面 水解度 花生多肽
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饲料中添加抗菌肽和枯草芽孢杆菌对花鲈生长和非特异性免疫功能的影响 被引量：23
13
作者 夏耘 余德光 +4 位作者 郁二蒙 谢骏 王广军 王海英 龚望宝 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2012年第1期52-57,共6页
在基础饲料中分别添加300 mg/kg的抗菌肽和200 mg/kg的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),连续投喂花鲈(Lateolabrax japonicus)60 d,测定其特定生长率、存活率,并分别于试验的20 d、40 d和60 d测定肝胰脏、头肾、鳃的过氧化氢酶(CAT)、... 在基础饲料中分别添加300 mg/kg的抗菌肽和200 mg/kg的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),连续投喂花鲈(Lateolabrax japonicus)60 d,测定其特定生长率、存活率,并分别于试验的20 d、40 d和60 d测定肝胰脏、头肾、鳃的过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)以及血清溶菌酶(LSZ)和一氧化氮合酶(NOS)活力水平。结果显示:试验组花鲈的特定生长率和存活率与对照组间均无显著差异(P>0.05)。抗菌肽组所测组织CAT、SOD以及血清LSZ、NOS活性水平在20 d时均显著高于对照组(P<0.05),40 d时以上指标(头肾SOD除外)与对照组间差异不显著(P>0.05)。枯草芽孢杆菌组所测组织CAT、SOD以及血清LSZ活性水平在20 d时均显著高于对照组(P<0.05),60 d时以上指标(头肾SOD除外)与对照组间差异不显著(P>0.05),而整个过程血清NOS活性水平与对照组不存在显著性差异(P>0.05)。结果表明:两种添加剂可增强机体消除活性氧自由基的能力,提高机体血清溶菌酶活性水平。此外,抗菌肽对花鲈血清一氧化氮合酶系统具有诱导调节作用。 展开更多
关键词 花鲈(Lateolabraxjaponicus) 抗菌肽 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) 非特异性免疫
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海洋枯草芽孢杆菌3512A抗真菌脂肽的分离纯化及结构特性鉴定 被引量：17
14
作者 徐杨 王楠 +4 位作者 李伟 胡江春 胡芳欣 刘丽 王书锦 《中国生物防治》 CSCD 北大核心 2009年第4期328-333,共6页
海洋枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis菌株3512A分离自中国南海柳珊瑚。抗菌谱研究表明,该菌对多种动植物病原菌都有很强的抑制作用。稳定性试验表明该菌株产生的抗真菌活性物质对高温、酸和弱碱具有一定耐受性。利用玉米纹枯病菌Rhizocto... 海洋枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis菌株3512A分离自中国南海柳珊瑚。抗菌谱研究表明,该菌对多种动植物病原菌都有很强的抑制作用。稳定性试验表明该菌株产生的抗真菌活性物质对高温、酸和弱碱具有一定耐受性。利用玉米纹枯病菌Rhizoctonia solani作为靶标菌,结合酸沉淀、快速柱色谱、HPLC等现代色谱手段,对菌发酵液中的抗真菌活性物质进行分离纯化,获得两个活性强的单一化合物,化合物1和3。排油圈试验、甲苯乳化试验、TLC原位酸水解,以及一维核磁共振氢谱1H-NMR等多种研究结果表明,化合物1和化合物3均为脂肽类化合物衍生物。 展开更多
关键词 海洋枯草芽孢杆菌 抗真菌活性 脂肽 分离纯化
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植物内生枯草芽孢杆菌E1R-j脂肽类化合物的分离鉴定及抑菌作用 被引量：14
15
作者 姬婧媛 杨洁 +2 位作者 高小宁 黄丽丽 康振生 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期172-178,共7页
植物内生枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis菌株E1R-j分离自小麦根部。以小麦全蚀病菌作为靶标菌,采用酸沉淀、快速蛋白液相色谱(FPLC)和基质辅助激光解吸附飞行时间质谱(MALDITOF/TOF-M S)技术,对该菌发酵液中的抗真菌活性物质进行分离鉴... 植物内生枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis菌株E1R-j分离自小麦根部。以小麦全蚀病菌作为靶标菌,采用酸沉淀、快速蛋白液相色谱(FPLC)和基质辅助激光解吸附飞行时间质谱(MALDITOF/TOF-M S)技术,对该菌发酵液中的抗真菌活性物质进行分离鉴定和抑菌活性研究。结果表明:菌株E1R-j产生的抗菌活性物质由P1、P2、P3和P4 4类组分组成,其中P3起主要抑菌作用。M ALDI-TOF/TOF-M S分析结果显示,P3为fengycins。经试验发现,P3对温度稳定,121℃下放置30 min仍可保持抑菌活性。电子显微境观察发现,P3对小麦全蚀病菌菌丝生长有强烈的抑制作用,同时还可造成菌丝细胞畸形、细胞壁溃解、细胞质外渗等。 展开更多
关键词 植物内生细菌 枯草芽孢杆菌 脂肽类化合物 分离鉴定 抑菌活性
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枯草芽孢杆菌BSD-2一种抗菌肽的分离纯化与鉴定 被引量：14
16
作者 胡瑞萍 张铎 +3 位作者 张丽萍 张根伟 张蕾 赵宝华 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2011年第6期201-206,共6页
为了分离纯化及鉴定枯草芽孢杆菌BSD-2代谢产物中抗菌肽,采用盐酸沉淀、Sephadex G-50层析以及反相HPLC对其进行分离纯化,并利用Tricine-SDS-PAGE、MAIDL-TOF-MS、红外光谱和核磁共振技术对其分子量、氨基酸序列以及结构进行初步解析。... 为了分离纯化及鉴定枯草芽孢杆菌BSD-2代谢产物中抗菌肽,采用盐酸沉淀、Sephadex G-50层析以及反相HPLC对其进行分离纯化,并利用Tricine-SDS-PAGE、MAIDL-TOF-MS、红外光谱和核磁共振技术对其分子量、氨基酸序列以及结构进行初步解析。结果显示该抗菌肽是由29个氨基酸组成,分子量为3 514 Da,等电点为10.46。红外光谱和核磁共振分析其结构中含有-CH2-、-CH3、-OH、-NH2、-CH、-CO-以及苯环等官能团。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 抗菌肽 生物自显影 红外光谱 核磁共振
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枯草芽孢杆菌菌株B_3抗菌肽的分离纯化与鉴定 被引量：15
17
作者 白杰 贠建民 +3 位作者 祝发明 严海娇 张紊玮 艾对元 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期78-85,共8页
针对1株分离自甘肃河西盐碱土壤的具有产抗菌肽潜质的枯草芽孢杆菌B_3菌株(Bacillus subtilis B_3),拟构建一种有效的抗菌肽分离纯化方法,旨在为获得该抗菌肽纯品及其结构信息,并为抗菌肽制备及其制品检测提供方法参考。采用由阳离子交... 针对1株分离自甘肃河西盐碱土壤的具有产抗菌肽潜质的枯草芽孢杆菌B_3菌株(Bacillus subtilis B_3),拟构建一种有效的抗菌肽分离纯化方法,旨在为获得该抗菌肽纯品及其结构信息,并为抗菌肽制备及其制品检测提供方法参考。采用由阳离子交换层析、疏水层析和尺寸排阻层析单元组成的串联柱层析系统对B_3菌株液态发酵产物进行初步分离,对不同时段的收集液做抑菌实验,比较评价分步层析效果;再通过反相HPLC进一步分离纯化后用质谱分析检测,以获得具有抑菌活性多肽的分子质量及结构信息。经串联层析法分离的具有抑菌活物质是一种小分子富脯氨酸抗菌肽,其氨基酸序列Pro-Tyr-Ile-Pro-Gln-Pro-Arg-Pro-Pro-His-Pro-Arg-Leu,分子质量为1 567.86 Da,等电点为10.84。经美国国立生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI)数据库比对,发现其为一种未报道的多肽。经抑菌活性检测表明,该抗菌肽对大肠杆菌(Escherichia coli)和沙门氏杆菌(Salmonella enterica subsp.enterica)均有抑菌作用,其最小抑菌质量浓度均为0.020 312μg/mL。同时,该抗菌肽表现出较强的耐热性、耐酸碱性和光照稳定性,是一种对供试靶标菌具有抑菌活性的新抗菌肽。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌B3 抗菌肽 分离纯化 抑菌活性
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枯草芽孢杆菌发酵牦牛血制备抗氧化肽工艺优化 被引量：7
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作者 杜昕 肖岚 +6 位作者 李诚 温馨 田甜 周恒量 宋丽坤 刘静 范尹译 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2016年第3期165-168,205,共5页
为优化枯草芽孢杆菌液态发酵制备牦牛血抗氧化肽工艺,以酵解液的羟基自由基(·OH)清除率为主要指标,研究发酵时间、接种量、底物浓度对酵解液抗氧化效果的影响,在该基础上进行响应面优化试验。确定最佳发酵条件为:底物浓度75g/L,接... 为优化枯草芽孢杆菌液态发酵制备牦牛血抗氧化肽工艺,以酵解液的羟基自由基(·OH)清除率为主要指标,研究发酵时间、接种量、底物浓度对酵解液抗氧化效果的影响,在该基础上进行响应面优化试验。确定最佳发酵条件为:底物浓度75g/L,接种量2.5%(V/V),发酵时间69.5h。在该条件下制备出·OH清除率为74.48%的牦牛血抗氧化肽,·OH清除率理论值为75.78%,最终发酵上清液多肽含量为2.31mg/mL。 展开更多
关键词 牦牛血 抗氧化肽 发酵 枯草芽孢杆菌
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高效液相色谱-电喷雾质谱法分离和鉴别枯草芽孢杆菌产生的脂肽类化合物 被引量：9
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作者 陈华 王丽 +2 位作者 袁成凌 郑之明 余增亮 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期343-347,共5页
枯草芽孢杆菌JA因产生多种脂肽类化合物而具有广阔的开发前景。JA发酵液经过离心、酸沉淀、甲醇抽提等步骤得到脂肽类化合物的粗提物。将粗提物溶于流动相,采用反相高效液相色谱分离,对收集的洗脱峰组分进行电喷雾质谱(ESI-MS)分析。根... 枯草芽孢杆菌JA因产生多种脂肽类化合物而具有广阔的开发前景。JA发酵液经过离心、酸沉淀、甲醇抽提等步骤得到脂肽类化合物的粗提物。将粗提物溶于流动相,采用反相高效液相色谱分离,对收集的洗脱峰组分进行电喷雾质谱(ESI-MS)分析。根据质荷比推断JA菌株产生的脂肽类化合物属于3个家族,分别为surfactin,iturin和fengycin,是枯草芽孢杆菌合成的重要生物表面活性素。对一级质谱中的主成分进行串联质谱分析,进一步确定了3种脂肽类化合物的分子结构。实验证明ESI-MS是一种鉴定脂肽类化合物及其同系物的可靠方法。 展开更多
关键词 高效液相色谱-电喷雾质谱法 枯草芽孢杆菌 脂肽类化合物
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一株地衣芽孢杆菌的分离及在大豆肽发酵中的应用 被引量：4
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作者 乐超银 邵伟 +3 位作者 刘海军 段宗宝 张自安 李盘欣 《中国酿造》 CAS 北大核心 2008年第12期41-44,共4页
从土壤中分离得到1株蛋白酶高产菌株,经鉴定为地衣芽孢杆菌。以大豆分离蛋白为原料,用地衣芽孢杆菌来发酵生产大豆多肽,通过对发酵液中大豆蛋白起始浓度、发酵液初始pH值、发酵温度、摇瓶转速、发酵时间等因素进行研究,以多肽得率为指... 从土壤中分离得到1株蛋白酶高产菌株,经鉴定为地衣芽孢杆菌。以大豆分离蛋白为原料,用地衣芽孢杆菌来发酵生产大豆多肽,通过对发酵液中大豆蛋白起始浓度、发酵液初始pH值、发酵温度、摇瓶转速、发酵时间等因素进行研究,以多肽得率为指标初步探索了发酵工艺条件,并以大豆多肽含量为指标,采用响应面分析法,对发酵法制备大豆多肽的生产工艺进行了优化。结果表明,在大豆蛋白起始浓度为3%,初始pH值为6.5,发酵培养温度34.0℃,摇瓶转速180r/min,发酵时间为18h～21h的条件下,发酵大豆蛋白所得多肽的含量可达19.2mg/mL,多肽得率达到70%,且所得到的大豆多肽发酵液具有良好的口感。 展开更多
关键词 地衣芽孢杆菌 大豆肽 多肽得率 大豆分离蛋白 响应面法 优化
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