草鱼细胞和病毒的大规模培养研究 被引量：1

1

作者 曾令兵 高梦雪 蒋勇华 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 1995年第6期6-9,共4页

本文对草鱼细胞和病毒的两种大规模培养方式进行了研究和比较。静置培养条件下，细胞生长速度快，２—３天内可形成单层，单层均匀而稳定；旋转培养条件下，细胞７天左右长成单层，细胞单层面积大，病毒培养产量高。这两种培养方式所观... 本文对草鱼细胞和病毒的两种大规模培养方式进行了研究和比较。静置培养条件下，细胞生长速度快，２—３天内可形成单层，单层均匀而稳定；旋转培养条件下，细胞７天左右长成单层，细胞单层面积大，病毒培养产量高。这两种培养方式所观察到的细胞病变过程及表征基本相同，病毒的ＴＣＩＤ５０／ｍｌ值稳定在６．０左右。采用这两种培养方式，可实现草鱼细胞和病毒的大规模培养。 展开更多

关键词 草鱼 细胞 病毒 大规模培养 出血病

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暗纹东方鲀开口饵料的室内大规模培养

2

作者 王笑 杨家新 陆正和 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2001年第4期47-49,共3页

关键词 暗纹东方tun 开口饵料 室内大规模培养 轮虫

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动物细胞大规模培养中细胞凋亡检测方法的研究 被引量：4

3

作者 武发菊 刘学荣 +6 位作者 尚勇良 安芳兰 董文教 宋玉霞 董金杰 陈苗苗 牟克斌 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第12期235-239,共5页

为了探讨动物细胞大规模培养中细胞凋亡的检测方法,以不同浓度氯化铵诱导BHK-21细胞凋亡,每隔12 h收集细胞,采用台盼兰形态学排染法、吖啶橙和溴化乙锭双重荧光染色法、FITC-Annexin V/PI双染色荧光显微镜观察法、原位缺口末端标记法(TU... 为了探讨动物细胞大规模培养中细胞凋亡的检测方法,以不同浓度氯化铵诱导BHK-21细胞凋亡,每隔12 h收集细胞,采用台盼兰形态学排染法、吖啶橙和溴化乙锭双重荧光染色法、FITC-Annexin V/PI双染色荧光显微镜观察法、原位缺口末端标记法(TUNEL)、DNA凝胶电泳、流式细胞术(FCM)法进行细胞凋亡的检测。通过比较发现,不同方法检测结果都存在着显著性差异,但吖啶橙和溴化乙锭双重荧光染色法是一种简单、易行、准确、全面定性细胞凋亡的较为可靠的方法,而FITC-Annexin V/PI双染色流式细胞仪能特异地、准确地检出早期凋亡的细胞,是较为理想的凋亡定量检测方法。这2种方法的联合运用更适应于动物细胞大规模培养过程中细胞凋亡的检测。 展开更多

关键词 BHK-21细胞 大规模培养 细胞凋亡 检测方法

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植物细胞大规模培养技术产业化浅谈

4

作者 郭志刚 《生物产业技术》 2012年第1期42-46,共5页

植物细胞培养技术诞生于20世纪初，随着研究的不断进步，逐步发展出植物组织培养、植物器官培养、原生质体培养、细胞培养、冠瘿瘤培养以及不定根或毛状根培养等技术。20世纪80年代前后，利用植物细胞培养生产植物次生代谢产物的研究成... 植物细胞培养技术诞生于20世纪初，随着研究的不断进步，逐步发展出植物组织培养、植物器官培养、原生质体培养、细胞培养、冠瘿瘤培养以及不定根或毛状根培养等技术。20世纪80年代前后，利用植物细胞培养生产植物次生代谢产物的研究成为热点。 展开更多

关键词 植物细胞培养技术 技术产业化 大规模培养 植物次生代谢产物 植物组织培养 原生质体培养 毛状根培养 器官培养

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动物细胞大规模培养的主流技术 被引量：10

5

作者 魏明旺 张淑香 《生物产业技术》 2009年第4期85-89,共5页

随着对单克隆抗体等产品需求量的不断增加，2000年以后，动物细胞培养的产能迅速增加．现在全球的反应器总容量超过2000000L，比8年前增加了约4倍。产物浓度也比15年前提高了约100倍。达到了5g／L以上。动物细胞大规模培养产业，在规模... 随着对单克隆抗体等产品需求量的不断增加，2000年以后，动物细胞培养的产能迅速增加．现在全球的反应器总容量超过2000000L，比8年前增加了约4倍。产物浓度也比15年前提高了约100倍。达到了5g／L以上。动物细胞大规模培养产业，在规模和技术方法上，越来越与微生物发酵产业类似。在重组蛋白的生产中，当今的主流技术是．在大型机械搅拌式反应器中，用无血清培养基和流加培养工艺悬浮培养细胞， 展开更多

关键词 动物细胞培养 大规模培养 流技术 搅拌式反应器 悬浮培养细胞 无血清培养基 单克隆抗体 微生物发酵

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关于大规模培养单细胞绿藻Scenedesmus quadricauda和对淡水轮虫的饵料有效性

6

作者 柳田洋一 刘宝成 《黑龙江水产》 1996年第4期38-41,共4页

前言 在该内河水面水产试验场中,目前当生产若鹭鱼、鲫鱼等苗种时,作为初期培养饵料生物的方法来说,是在养鱼池中施有机肥料,期望轮虫类、鳃足甲壳类、桡足亚纲类等浮游生物的自然繁殖,即采用粗放的方法。 但是,我们认为粗放培养方法的... 前言 在该内河水面水产试验场中,目前当生产若鹭鱼、鲫鱼等苗种时,作为初期培养饵料生物的方法来说,是在养鱼池中施有机肥料,期望轮虫类、鳃足甲壳类、桡足亚纲类等浮游生物的自然繁殖,即采用粗放的方法。 但是,我们认为粗放培养方法的现状是饵料生物的繁殖量每个鱼池都有差异,鱼苗的产量不稳定,为了进行稳定的苗种生产,特别需要有计划地开发培养所需淡水轮虫的技术,作为养鱼初期的饵料生物。 展开更多

关键词 淡水轮虫 大规模培养 单细胞绿藻 轮虫类 复合肥料 繁殖率 培养液 有效性 繁殖量 饵料生物

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大规模动物细胞培养的问题及对策 被引量：28

7

作者 林福玉 陈昭烈 +1 位作者 刘红 黄培堂 《生物技术通报》 CAS CSCD 1999年第1期32-35,共4页

大规模动物细胞培养在生物技术产业化进程中显示出强大的潜力。本文综述了大规模动物细胞培养过程中出现的问题及其解决办法，包括细胞培养环境、基因工程途径改建细胞系及过程监控等。对于这些进展的充分了解对优化细胞培养工艺。

关键词 细胞培养 动物细胞 大规模培养

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山东地区采用光生物反应器进行大规模螺旋藻培养探讨 被引量：1

8

作者 潘曰磊 邹宁 +2 位作者 梁妍 孙东红 刘林德 《现代农业科技》 2008年第20期234-235,237,共3页

在山东烟台采用直立平板式光合生物反应器对螺旋藻(Spirulina platensis)进行大规模培养过程中,对反应器光径(宽度)、培养条件控制、培养密度、采收量、单位面积产量(生物量产率)进行了研究。结果表明:在秋季反应器光径为5cm时,能达到... 在山东烟台采用直立平板式光合生物反应器对螺旋藻(Spirulina platensis)进行大规模培养过程中,对反应器光径(宽度)、培养条件控制、培养密度、采收量、单位面积产量(生物量产率)进行了研究。结果表明:在秋季反应器光径为5cm时,能达到最大细胞密度为1.51g/L,即反应器光径越小,培养能达到的细胞密度越高。半连续采收情况下,反应器光径为20cm、采收比例为20%时,单位面积产量最大达到了13.76g/m2.d。 展开更多

关键词 螺旋藻 大规模培养 光合生物反应器 山东烟台

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发酵罐葡萄糖流加大规模异养培养小球藻 被引量：3

9

作者 梁世中 孟海华 等 《华南理工大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2000年第12期66-70,共5页

应用流加工艺在5，50，200，800，4000L机械搅拌发酵罐中大规模异养培养小球藻，与间歇异养或光照自养相比，流加培养大大地提高了细胞密度和生产率，最高细胞质量浓度达到43.31g/L，比生长速率达到0．069h^-1，细胞生产率达到0．62g/(L... 应用流加工艺在5，50，200，800，4000L机械搅拌发酵罐中大规模异养培养小球藻，与间歇异养或光照自养相比，流加培养大大地提高了细胞密度和生产率，最高细胞质量浓度达到43.31g/L，比生长速率达到0．069h^-1，细胞生产率达到0．62g/(L.h)，结果表明，利用传统的机械搅拌发酵罐大规模生产小球有良好的商业化前景。 展开更多

关键词 小球藻 搅拌发酵罐 大规模异常培养 葡萄糖

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大规模细胞培养中控制污染的举措 被引量：2

10

作者 曹忠玲 《中国兽药杂志》 2010年第2期56-58,共3页

从人员培训、环境控制、百级台的无菌操作、原辅材料的管理等方面介绍了大规模细胞培养中避免污染的举措。

关键词 大规模细胞培养 污染 人员培训 环境控制 无菌操作 原辅材料管理

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微载体规模化培养草鱼细胞与病毒的工艺及优化 被引量：6

11

作者 刘秋凤 曾令兵 +4 位作者 周勇 马杰 范玉顶 张辉 李瑞伟 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2013年第4期69-75,共7页

研究了在悬浮培养系统中使用微载体Cephodex规模化培养草鱼肾脏组织细胞CIK和草鱼呼肠孤病毒(GCRV)的条件并进行了优化。结果表明,Cephodex是一种适合CIK细胞贴壁生长的微载体,搅拌方式(搅拌时间/静止时间)及血清浓度(0%、5%、10%、15%)... 研究了在悬浮培养系统中使用微载体Cephodex规模化培养草鱼肾脏组织细胞CIK和草鱼呼肠孤病毒(GCRV)的条件并进行了优化。结果表明,Cephodex是一种适合CIK细胞贴壁生长的微载体,搅拌方式(搅拌时间/静止时间)及血清浓度(0%、5%、10%、15%)对CIK细胞在Cephodex微载体上的贴附效率有影响。贴附期以转速35 r/min、每静置45 min搅拌2 min的间歇搅拌方式最佳,8 h后细胞贴附率可达90%以上;细胞贴附期培养基中的血清浓度为5%。当Cephodex微载体用量10 mg/mL、细胞初始接种密度2.5×105cells/mL、连续搅拌速度40 r/min时可获得最佳的细胞生长效能。用优化的最佳工艺条件大规模培养CIK细胞,接种感染复数为0.1的GCRV病毒3 d后,培养细胞出现典型细胞病变效应,病毒滴度(lgTCID50/mL)为8.5。本项研究为草鱼出血病疫苗规模化制备技术研究奠定了基础。 展开更多

关键词 草鱼肾脏组织细胞系（CIK） 草鱼呼肠孤病毒（GCRV） 微载体 大规模培养 工艺与优化

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动物细胞规模化培养及生物反应器研究进展 被引量：3

12

作者 郑朝朝 《今日畜牧兽医》 2011年第S1期48-50,共3页

哺乳动物细胞培养已经发展到能够自由扩大培养并且用于工业化生产。许多生物活性物质、疫苗、载体、药用蛋白,等都可以通过动物细胞大规模培养获得。生物反应器是细胞大规模培养的关键,其能够有效的增加细胞单位体积的培养密度,从而为... 哺乳动物细胞培养已经发展到能够自由扩大培养并且用于工业化生产。许多生物活性物质、疫苗、载体、药用蛋白,等都可以通过动物细胞大规模培养获得。生物反应器是细胞大规模培养的关键,其能够有效的增加细胞单位体积的培养密度,从而为病毒性疫苗大规模生产奠定坚实的基础。通过细胞培养生产生物制品既能提高生物制品的质量,又能促进细胞培养技术、蛋白质表达纯化技术。 展开更多

关键词 流化床生物反应器 哺乳动物细胞 规模化 培养基 生物制品 动物细胞大规模培养 细胞培养技术 细胞附着 悬浮培养 气升式生物反应器

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长春花细胞大型生物反应器培养的初步研究 被引量：6

13

作者 曹阳 侯军 +2 位作者 郑珍贵 刘涤 张兴 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2002年第2期87-90,共4页

采用 70 L环形通气搅拌生物反应器对长春花细胞的大规模悬浮培养进行了初步的研究 ,2次培养取得成功 ,培养周期 15 d,最大 PCV值达 5 2 % ,生物量鲜重 2 0 5 .6 g/ L。研究结果表明 ,“种子”细胞的接种时期和培养基中的蔗糖质量浓度对... 采用 70 L环形通气搅拌生物反应器对长春花细胞的大规模悬浮培养进行了初步的研究 ,2次培养取得成功 ,培养周期 15 d,最大 PCV值达 5 2 % ,生物量鲜重 2 0 5 .6 g/ L。研究结果表明 ,“种子”细胞的接种时期和培养基中的蔗糖质量浓度对培养细胞在 70 L反应器中的生长影响很大。从所做的 2次成功培养分析 ,将培养基的蔗糖质量浓度由 2 0 g/ L提高到 2 5 g/ L ,按 15 %的接种量接种正处于生长指数初期的细胞 ,在 70 L反应器中培养的长春花细胞长势最好 ,最大 PCV值为 5 2 % ,最终生物鲜重 2 0 5 .6 g/ L。 展开更多

关键词 长春花细胞 大型生物反应器 大规模培养 次生代谢物

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室内外培养海洋单细胞微藻的生长及生化组分 被引量：19

14

作者 戴俊彪 吴庆余 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期29-32,共4页

利用现有的螺旋藻培养基地 ,初步尝试了对海洋单细胞微藻(球等鞭金藻Isochrysisgalbana)的大规模室外培养 ,研究了藻细胞在室内外不同培养条件下的生长规律 ,并对其生化成分进行了分析 ,发现实验藻种对培养条件表现出一定的适应性。在... 利用现有的螺旋藻培养基地 ,初步尝试了对海洋单细胞微藻(球等鞭金藻Isochrysisgalbana)的大规模室外培养 ,研究了藻细胞在室内外不同培养条件下的生长规律 ,并对其生化成分进行了分析 ,发现实验藻种对培养条件表现出一定的适应性。在室外条件下 ,细胞内脂类、蛋白质的含量都有较大的下降 ,分别从细胞干重的17.045%和4.412%下降为9.746%和2.254 %。与此同时 ,细胞内糖类含量却大大增加 ,高达干重的30.067 % ,比室内培养增加了25.08 % ,且是所有组分中最高的。室外培养细胞内灰分的含量也高于室内。 展开更多

关键词 球等鞭金藻 大规模培养 单细胞微灌 生化组分

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生物反应器悬浮培养Vero细胞制备水貂犬瘟热活疫苗 被引量：11

15

作者 冯二凯 程悦宁 +5 位作者 罗国良 易立 王振军 郭利 陈立志 程世鹏 《中国兽药杂志》 2019年第6期41-47,共7页

为实现利用生物反应器制备规模化、自动化生产水貂犬瘟热Vero活疫苗,在7 L生物反应器中悬浮培养Vero细胞,并考察培养基、细胞初始接种密度、培养方式、病毒感染复数和感染时间等参数对细胞增殖、病毒滴度以及细胞代谢的影响。结果显示,... 为实现利用生物反应器制备规模化、自动化生产水貂犬瘟热Vero活疫苗,在7 L生物反应器中悬浮培养Vero细胞,并考察培养基、细胞初始接种密度、培养方式、病毒感染复数和感染时间等参数对细胞增殖、病毒滴度以及细胞代谢的影响。结果显示,在含有5 g/L微载体的DMEM培养基中接种Vero细胞(30~40 cells/球),设定p H、温度、溶氧值和转速分别为7.2、37℃、50%和55 r/min,培养方式为批次培养(0~48 h)+灌流培养(48~96 h)组合方式,培养Vero细胞3~4 d或细胞密度达到200 cells/球以上时,按照MOI=0.0001~0.001吸附接毒,调低温度(33℃)继续培养100~120 h,即可获得高滴度病毒液(106.5~107.2TCID50/0.1 m L),经无菌检验合格后,配制水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗(CDV3-CL株,悬浮培养),疫苗符合《中国兽药典》三部(2015版)的规定。试验建立了7 L生物反应器悬浮培养Vero细胞制备水貂犬瘟热活疫苗的新工艺,为进一步规模化生产奠定了基础。 展开更多

关键词 VERO细胞 大规模培养 微载体 悬浮培养 生物反应器

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富含EPA的海洋微藻的规模化生产 被引量：4

16

作者 胡长伟 刘志礼 《水产科学》 CAS 北大核心 2007年第8期475-477,共3页

关键词 EPA 海洋微藻 大规模培养

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细胞规模化生产过程中的质量控制

17

作者 赵蕾 管宇 +2 位作者 梅建国 唐娜 李坤林 《山东畜牧兽医》 2010年第6期78-80,共3页

细胞大规模培养在生物制药和疫苗生产领域是一项基础工作,是整个生产工艺过程中的中心环节,具有十分重要的地位。细胞培养基质的优劣直接决定终端产品的质量与疗效,因此严格做好细胞培养过程的质量控制显得尤为重要。笔者从事细胞培养... 细胞大规模培养在生物制药和疫苗生产领域是一项基础工作,是整个生产工艺过程中的中心环节,具有十分重要的地位。细胞培养基质的优劣直接决定终端产品的质量与疗效,因此严格做好细胞培养过程的质量控制显得尤为重要。笔者从事细胞培养及规模化生产多年，对细胞培养和规模化生产过程中的技术环节有着较为深刻的体会。现就这些相关问题和注意事项进行简述和探讨。 展开更多

关键词 规模化生产 细胞培养 质量控制 生产过程 生产工艺过程 大规模培养 疫苗生产 生物制药

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转兔防御素基因小球藻生物反应器异养培养工艺研究

18

作者 韩兴梅 李元广 +4 位作者 李兴武 万俊芬 魏晓东 孙勇如 王义琴 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期73-77,共5页

根据5L生物反应器中转兔防御素(NP-1)基因小球藻培养过程特征,建立了基于在补糖、补KNO3、Ph和溶氧(DO)控制的5L生物反应器中进行转NP-1基因小球藻异养培养的工艺,同时将此培养工艺放大到15L生物反应器中.转NP-1基因小球藻在15L反应器... 根据5L生物反应器中转兔防御素(NP-1)基因小球藻培养过程特征,建立了基于在补糖、补KNO3、Ph和溶氧(DO)控制的5L生物反应器中进行转NP-1基因小球藻异养培养的工艺,同时将此培养工艺放大到15L生物反应器中.转NP-1基因小球藻在15L反应器中培养133h的细胞密度可达34.2g/L,平均生长速率为0.257g/(L·h),比5L生物反应器中培养131h的细胞密度27.8g/L和平均生长速率0.21g/(L·h)分别提高了23%和22%.研究结果证实了转NP-1基因小球藻放大培养的可行性,为实现高密度、高表达的大规模培养奠定了基础. 展开更多

关键词 生物反应器 异养培养 小球藻 兔防御素基因 工艺研究 NP-1 细胞密度 生长速率 大规模培养 过程特征 KNO3 工艺放大 放大培养 研究结果 高密度 高表达 平均

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细胞培养肉产业技术发展态势及建议 被引量：9

19

作者 关欣 周景文 +1 位作者 堵国成 陈坚 《中国工程科学》 CSCD 北大核心 2023年第3期251-262,共12页

细胞培养肉是融合先进生物技术、食品技术的战略性新兴产业,未来有可能带动农业领域的产业结构调整和发展模式转变;细胞培养肉技术正处于向商品化迈进的阶段,开展相关产业技术发展态势分析具有价值。本文梳理了细胞培养肉生产核心原料... 细胞培养肉是融合先进生物技术、食品技术的战略性新兴产业,未来有可能带动农业领域的产业结构调整和发展模式转变;细胞培养肉技术正处于向商品化迈进的阶段,开展相关产业技术发展态势分析具有价值。本文梳理了细胞培养肉生产核心原料和试剂的产业态势及研究进展,涵盖良种动物、种子细胞、培养基、支架材料;分析了支持细胞培养肉生产的基础装备设施(生物安全柜、生物反应器及其他常用装备)制造技术瓶颈与行业竞争格局;剖析了细胞培养肉规模化生产的核心技术体系及发展动态,涉及种子细胞库建立、低成本培养基研制、大规模培养工艺、食品化加工技术。针对我国细胞培养肉产业基础的薄弱之处,提出了针对性发展建议:加快试剂装备国产化进程、完善细胞培养肉产业链,完善培养肉技术体系、加强知识产权国际布局,优化学科专业布局、校企融合双元育人,完善产品风险评估、论证和发布团体标准,加强科学知识普及、提高公众接受度。 展开更多

关键词 细胞培养肉 种子细胞 生物反应器 大规模培养工艺 培养基研制 食品化加工

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应用有机肥进行金藻规模化培育 被引量：1

20

作者 陈怀定 《中国水产》 北大核心 2011年第5期44-45,共2页

金藻由于个体小、营养价值高,是近江牡蛎、青蛤等贝类幼虫理想的开口饵料,但由于对培养条件要求较高,特别容易被污染,大型培养往往无法稳定地进行。笔者在2008年的5月～7月,采用敞开式的培养方式成功地连续进行金藻的生产性大规模培养,... 金藻由于个体小、营养价值高,是近江牡蛎、青蛤等贝类幼虫理想的开口饵料,但由于对培养条件要求较高,特别容易被污染,大型培养往往无法稳定地进行。笔者在2008年的5月～7月,采用敞开式的培养方式成功地连续进行金藻的生产性大规模培养,每日供藻量约为10m3,藻液浓度约为（200～300）×106个/mL,供藻水体占金藻培养水体的1/6。培养期间虽有阴天、下雨天等不良天气（所遇到连续的阴雨天最长不超过5天）, 展开更多

关键词 金藻 规模化 有机肥 培养条件 培育 应用 大规模培养 营养价值

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