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大肠杆菌表达系统和酵母表达系统的研究进展被引量：34: 1; 作者祁浩刘新利《安徽农业科学》 CAS 2016年第17期4-6,52,共4页; 由于DNA重组技术和蛋白组技术的发展与成熟,外源基因表达技术备受关注。其在生物、食品、工业以及医学领域发挥着举足轻重的作用。以原核生物细胞及真核生物细胞作为表达系统,进行目的基因序列的表达以生产蛋白疫苗、核酸疫苗和生物酶... 展开更多; 关键词大肠杆菌表达系统酵母表达系统表达载体外源基因宿主菌株; 在线阅读下载PDF 职称材料

PD0721单链抗体的体外原核表达条件优化及蛋白质鉴定被引量：4: 2; 作者张煜彬叶路芬 +6 位作者吴忠秀薛维娜何彬杨畅李勇军王永林刘亭《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期42-49,共8页; 为了构建抗表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(epidermal growth factor receptor variant typeⅢ,EGFRvⅢ)的单链抗体PD0721的大肠杆菌(Escherichia coli)表达系统,作者研究了PD0721重组蛋白在大肠杆菌BL21中的最佳表达条件,并建立相应的重... 展开更多; 关键词大肠杆菌表达系统 EGFRvⅢ 表达条件优化亲和层析蛋白质印迹法; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪传染性胃肠炎病毒YK株N基因的原核表达与N蛋白的生物学活性检测: 3; 作者张雷卫广森《中国兽药杂志》 2005年第5期10-12,19,共4页; 将猪传染性胃肠炎病毒的N基因克隆到表达载体pET28a后,转化到BL21(DE3)大肠杆菌表达系统中。通过筛选表达温度和IPTG的浓度,使N基因在原核表达系统中表达并使目的表达产物产量达到最高值。将诱导表达的产物进行SDS-PAGE蛋白电泳和Wester... 展开更多; 关键词猪传染性胃肠炎病毒 N基因 N蛋白活性检测大肠杆菌表达系统原核表达系统 Western 表达产物生物学活性表达载体基因克隆 IPTG 蛋白电泳 PAGE 诱导表达试验结果 SDS 蛋白质; 在线阅读下载PDF 职称材料

红鳍东方鲀组织蛋白酶L表达载体的构建及表达结果验证: 4; 作者李妍钰汤奇龙 +3 位作者张鲁嘉谢静莉王文利刘源《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第20期1-5,共5页; 红鳍东方鲀味道鲜美,已从其体内发掘了系列鲜味肽,但其形成机制尚未明确。组织蛋白酶L可通过降解肌原纤维蛋白及肌钙蛋白发挥着重要的滋味形成作用。为了探索其对红鳍东方鲀呈味肽的形成机制,本研究通过查找NCBI数据库得到一条全长为1 3... 展开更多; 关键词红鳍东方鲀组织蛋白酶L 呈味肽大肠杆菌表达系统; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白特异性纳米抗体的原核表达及鉴定: 5; 作者王鑫张洪亮 +6 位作者秦志华郑乾坤黄娟董绍明杨瑞梅曲光刚单虎《中国动物检疫》 CAS 2023年第10期106-111,共6页; 为获得针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)GP5蛋白的特异性纳米抗体,并鉴定其抗原结合活性,以本实验室前期获得的PRRSV GP5蛋白特异性纳米抗体VHHGP5基因片段为模板,使用PCR对目... 展开更多; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5蛋白大肠杆菌表达系统纳米抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

非洲猪瘟病毒(ASFV)结构蛋白p54的表位定位研究被引量：4: 6; 作者张爱琼贺志昊《猪业科学》 2020年第5期18-19,共2页; 非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种急性、热性、高度接触性传染病,对全球养猪业造成严重威胁,给中国以及东南亚在内的一些国家造成了严重的经济损失。急性型ASF感染的猪只在感染后的临床表现为昏睡、厌食、高烧和死亡;在... 展开更多; 关键词非洲猪瘟病毒结构蛋白 p54 糖基化位点抗原捕获酶联免疫吸附试验大肠杆菌表达系统定位研究; 在线阅读下载PDF 职称材料

解密圆环疫苗新时代风向标——圆柯欣被引量：2: 7; 作者周盼伊《中国动物保健》 2018年第2期20-22,共3页; 猪圆环病毒（Porcine circoviruses,PCV）是单股环状的DNA病毒,基因组长度约为1.7kb长,是最小的动物病毒之一。已经确定有两种类型的PCV,即圆环病毒1型（PCV1）和圆环病毒2型（PCV2）。PCV1对猪只没有致病性,PCV2于1998年首次报道,其在... 展开更多; 关键词灭活疫苗圆环病毒病毒样颗粒大肠杆菌表达系统 PCVAD 基因工程亚单位疫苗风向标; 在线阅读下载PDF 职称材料

药品: 8; 《中国医院院长》 2012年第18期23-23,共1页; 世界首支戊肝疫苗即将上市据悉，由厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心耗时约14年、投入约5亿元，研发而成的世界首支戌旰疫苗“益可宁”，预计在今年10月实现商品化上市。疫苗研制利用的大肠杆菌表达系统，不仅安全... 展开更多; 关键词工程技术研究中心大肠杆菌表达系统药品诊断试剂厦门大学昆虫细胞疫苗传染病; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪圆环病毒基因工程亚单位苗上市: 9; 《猪业科学》 2017年第10期18-18,共1页; 记者9月12日从洛阳普莱柯生物工程有限公司获悉，该公司以国家兽用药品工程技术研究中心为平台，利用大肠杆菌表达系统成功制备PCV2VLPs（病毒样颗粒virus-like particles，VLPs）。; 关键词猪圆环病毒亚单位苗基因工程工程技术研究中心大肠杆菌表达系统上市病毒样颗粒生物工程; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大肠杆菌表达系统和酵母表达系统的研究进展被引量：34: 1; 作者祁浩刘新利; 机构齐鲁工业大学生物工程学院; 出处《安徽农业科学》 CAS 2016年第17期4-6,52,共4页; 基金国家自然科学基金项目(31370110) "泰山学者"建设工程专项; 文摘由于DNA重组技术和蛋白组技术的发展与成熟,外源基因表达技术备受关注。其在生物、食品、工业以及医学领域发挥着举足轻重的作用。以原核生物细胞及真核生物细胞作为表达系统,进行目的基因序列的表达以生产蛋白疫苗、核酸疫苗和生物酶制剂等是近年来发酵工业的新型领域。原核和真核表达系统是近年来研究和应用最广泛和最成熟的外源基因表达系统。对近年来关于大肠杆菌表达系统和酵母表达系统的研究进展进行了综述。; 关键词大肠杆菌表达系统酵母表达系统表达载体外源基因宿主菌株; Keywords E.coli expression system Yeast expression system Expression vectors Exogenous gene Host bacteria; 分类号 Q93 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名PD0721单链抗体的体外原核表达条件优化及蛋白质鉴定被引量：4: 2; 作者张煜彬叶路芬吴忠秀薛维娜何彬杨畅李勇军王永林刘亭; 机构贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州医科大学医药卫生管理学院贵州医科大学药学院; 出处《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期42-49,共8页; 基金国家自然科学基金项目(81603189) 贵阳医学院院基金项目([2013]12) +2 种基金黔科中引地项目([2018]4006) 黔科合平台人才项目([2016]5613/5677)。; 文摘为了构建抗表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(epidermal growth factor receptor variant typeⅢ,EGFRvⅢ)的单链抗体PD0721的大肠杆菌(Escherichia coli)表达系统,作者研究了PD0721重组蛋白在大肠杆菌BL21中的最佳表达条件,并建立相应的重组蛋白质纯化方法。首先构建重组表达质粒PD0721-pET-22b(+)并转化至大肠杆菌BL21中,再利用SDS-PAGE研究不同诱导剂IPTG浓度、不同诱导温度、不同诱导时间和不同菌体浓度对PD0721重组蛋白表达的影响。利用镍柱亲和层析开发PD0721重组蛋白的纯化方法,并使用蛋白质印迹法以及N端测序法对纯化后的蛋白质进行鉴定。菌落PCR及琼脂糖凝胶电泳表明,PD0721-pET-22b(+)重组质粒及PD0721重组大肠杆菌BL21构建成功.PD0721重组蛋白在体外原核表达的最佳诱导剂浓度为0.6μmol/L,最佳温度为15℃,最佳诱导时间为12 h,最佳菌体浓度OD600约为0.6。经过Ni2+柱亲和层析后,当咪唑的浓度为150 mmol/L,可以得到纯度较高的PD0721重组蛋白。SDS-PAGE电泳和Western Blotting结果表明,重组蛋白质产物的相对分子质量约为31000,与理论相对分子质量一致,蛋白质的N端测序也与设计序列一致。作者成功构建了抗EGFRvⅢ抗体PD0721重组蛋白的体外原核表达体系,优化了最佳表达条件,并提供了纯化重组PD0721蛋白的可行方法。; 关键词大肠杆菌表达系统 EGFRvⅢ 表达条件优化亲和层析蛋白质印迹法; Keywords E.coli expression system EGFRvⅢ optimization of expression conditions affinity chromatography western blotting; 分类号 Q511 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪传染性胃肠炎病毒YK株N基因的原核表达与N蛋白的生物学活性检测: 3; 作者张雷卫广森; 机构沈阳农业大学畜牧兽医学院辽宁省动物防疫站; 出处《中国兽药杂志》 2005年第5期10-12,19,共4页; 文摘将猪传染性胃肠炎病毒的N基因克隆到表达载体pET28a后,转化到BL21(DE3)大肠杆菌表达系统中。通过筛选表达温度和IPTG的浓度,使N基因在原核表达系统中表达并使目的表达产物产量达到最高值。将诱导表达的产物进行SDS-PAGE蛋白电泳和Western检验,证明该表达产物是猪传染性胃肠炎病毒的N蛋白。试验结果说明,猪传染性胃肠炎病毒N基因能够在原核表达系统中大量表达,而且表达的蛋白质具有生物学活性。; 关键词猪传染性胃肠炎病毒 N基因 N蛋白活性检测大肠杆菌表达系统原核表达系统 Western 表达产物生物学活性表达载体基因克隆 IPTG 蛋白电泳 PAGE 诱导表达试验结果 SDS 蛋白质; Keywords N gene prokaryotic expression SDS-PAGE Western-blot; 分类号 S852.659.6 [农业科学—基础兽医学] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名红鳍东方鲀组织蛋白酶L表达载体的构建及表达结果验证: 4; 作者李妍钰汤奇龙张鲁嘉谢静莉王文利刘源; 机构上海海洋大学食品学院华东理工大学生物工程学院上海交通大学农业与生物学院; 出处《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第20期1-5,共5页; 基金国家自然科学基金青年科学基金项目(31622042 31371790 +1 种基金 31271900) "十三五"国家重点研发计划重点专项(2016YFD040083); 文摘红鳍东方鲀味道鲜美,已从其体内发掘了系列鲜味肽,但其形成机制尚未明确。组织蛋白酶L可通过降解肌原纤维蛋白及肌钙蛋白发挥着重要的滋味形成作用。为了探索其对红鳍东方鲀呈味肽的形成机制,本研究通过查找NCBI数据库得到一条全长为1 336 bp的红鳍东方鲀组织蛋白酶L的序列,从红鳍东方鲀肌肉中提取RNA并转录为cDNA作为模板克隆,选择p ET-28a(+)作为表达载体、E.coli BL21作为重组工程菌进行克隆表达,成功得到大小为36 k D的重组组织蛋白酶L,并验证了其可在大肠杆菌表达系统中成功克隆表达。本研究为进一步研究红鳍东方鲀组织蛋白酶L酶学特性及其对滋味形成提供了理论支持。; 关键词红鳍东方鲀组织蛋白酶L 呈味肽大肠杆菌表达系统; Keywords Takifugu rubripes cathepsin L flavor peptide E. coli expression system; 分类号 TS254.5 [轻工技术与工程—水产品加工及贮藏工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白特异性纳米抗体的原核表达及鉴定: 5; 作者王鑫张洪亮秦志华郑乾坤黄娟董绍明杨瑞梅曲光刚单虎; 机构山东省预防兽医学重点实验室山东省滨州畜牧兽医研究院得利斯集团有限公司; 出处《中国动物检疫》 CAS 2023年第10期106-111,共6页; 基金山东省外专双百计划项目(WST2019013) 青岛市科技惠民示范专项项目(23-2-8-xdny-14-nsh) 山东省科技成果转移转化补助(鲁渝科技协作)项目(2021LYXZ020)。; 文摘为获得针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)GP5蛋白的特异性纳米抗体,并鉴定其抗原结合活性,以本实验室前期获得的PRRSV GP5蛋白特异性纳米抗体VHHGP5基因片段为模板,使用PCR对目的片段进行扩增,将扩增的片段经双酶切处理后连接到pColdSUMO-FLAG载体上,随后转化至E.coli TOP 10感受态细胞。经菌液PCR鉴定,将构建成功的重组质粒转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG作为诱导剂对目的蛋白进行诱导表达,表达产物通过Ni-NTA亲和层析柱纯化。通过SDA-PAGE凝胶电泳分析表达及纯化后的蛋白,同时使用ELISA方法检测纯化后的纳米抗体效价,并使用Western blot鉴定纯化后的蛋白。SDS-PAGE结果显示,成功获得了大小约36 kDa的重组蛋白,利用原核表达系统制备的PRRSV GP5特异性纳米抗体重组蛋白以可溶性形式表达;ELISA结果显示,该纳米抗体结合抗原的效价为1:50000;Western blot结果显示,该纳米抗体具有较好的反应性和特异性。本试验为PRRSV检测用及治疗用新型抗体开发奠定了基础。; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5蛋白大肠杆菌表达系统纳米抗体; Keywords PRRSV GP5 protein E.coli expression system nanobody; 分类号 S852.43 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名非洲猪瘟病毒(ASFV)结构蛋白p54的表位定位研究被引量：4: 6; 作者张爱琼贺志昊; 机构毕节市动物疫病预防控制中心; 出处《猪业科学》 2020年第5期18-19,共2页; 文摘非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种急性、热性、高度接触性传染病,对全球养猪业造成严重威胁,给中国以及东南亚在内的一些国家造成了严重的经济损失。急性型ASF感染的猪只在感染后的临床表现为昏睡、厌食、高烧和死亡;在慢性型ASF中,猪只临床症状要轻得多。由于现今没有有效的非洲猪瘟疫苗对猪只进行免疫来避免该病毒的感染。; 关键词非洲猪瘟病毒结构蛋白 p54 糖基化位点抗原捕获酶联免疫吸附试验大肠杆菌表达系统定位研究; 分类号 S852.651 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名解密圆环疫苗新时代风向标——圆柯欣被引量：2: 7; 作者周盼伊; 出处《中国动物保健》 2018年第2期20-22,共3页; 文摘猪圆环病毒（Porcine circoviruses,PCV）是单股环状的DNA病毒,基因组长度约为1.7kb长,是最小的动物病毒之一。已经确定有两种类型的PCV,即圆环病毒1型（PCV1）和圆环病毒2型（PCV2）。PCV1对猪只没有致病性,PCV2于1998年首次报道,其在临床条件下能引起猪只的猪圆环病毒相关疾病（Porcine circovirus associated diseases,PCVAD）,主要引起断奶仔猪多系统衰竭综合征、肺炎、; 关键词灭活疫苗圆环病毒病毒样颗粒大肠杆菌表达系统 PCVAD 基因工程亚单位疫苗风向标; 分类号 S859.797 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名药品: 8; 出处《中国医院院长》 2012年第18期23-23,共1页; 文摘世界首支戊肝疫苗即将上市据悉，由厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心耗时约14年、投入约5亿元，研发而成的世界首支戌旰疫苗“益可宁”，预计在今年10月实现商品化上市。疫苗研制利用的大肠杆菌表达系统，不仅安全有效，而且较其他利用昆虫细胞培养生产的疫苗具有明显的成本优势。; 关键词工程技术研究中心大肠杆菌表达系统药品诊断试剂厦门大学昆虫细胞疫苗传染病; 分类号 R446 [医药卫生—诊断学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪圆环病毒基因工程亚单位苗上市: 9; 出处《猪业科学》 2017年第10期18-18,共1页; 文摘记者9月12日从洛阳普莱柯生物工程有限公司获悉，该公司以国家兽用药品工程技术研究中心为平台，利用大肠杆菌表达系统成功制备PCV2VLPs（病毒样颗粒virus-like particles，VLPs）。; 关键词猪圆环病毒亚单位苗基因工程工程技术研究中心大肠杆菌表达系统上市病毒样颗粒生物工程; 分类号 S858.285.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	大肠杆菌表达系统和酵母表达系统的研究进展	祁浩刘新利	《安徽农业科学》 CAS	2016	34	在线阅读下载PDF 职称材料
2	PD0721单链抗体的体外原核表达条件优化及蛋白质鉴定	张煜彬叶路芬吴忠秀薛维娜何彬杨畅李勇军王永林刘亭	《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心	2021	4	在线阅读下载PDF 职称材料
3	猪传染性胃肠炎病毒YK株N基因的原核表达与N蛋白的生物学活性检测	张雷卫广森	《中国兽药杂志》	2005	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	红鳍东方鲀组织蛋白酶L表达载体的构建及表达结果验证	李妍钰汤奇龙张鲁嘉谢静莉王文利刘源	《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2017	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白特异性纳米抗体的原核表达及鉴定	王鑫张洪亮秦志华郑乾坤黄娟董绍明杨瑞梅曲光刚单虎	《中国动物检疫》 CAS	2023	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	非洲猪瘟病毒(ASFV)结构蛋白p54的表位定位研究	张爱琼贺志昊	《猪业科学》	2020	4	在线阅读下载PDF 职称材料
7	解密圆环疫苗新时代风向标——圆柯欣	周盼伊	《中国动物保健》	2018	2	在线阅读下载PDF 职称材料
8	药品		《中国医院院长》	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料
9	猪圆环病毒基因工程亚单位苗上市		《猪业科学》	2017	0	在线阅读下载PDF 职称材料