基于重组大肠杆菌无细胞体系生产吡咯喹啉醌 被引量：4

1

作者 孙继国 韩增叶 +1 位作者 葛喜珍 田平芳 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期164-168,共5页

采用无细胞体系生产吡咯喹啉醌(pyrroloquinoline quinone,PQQ)。首先将肺炎克雷伯氏菌PQQ基因簇pqqABCDEF置于半乳糖苷酶启动子之下,构建表达载体,经转化筛选获得重组大肠杆菌。制备重组菌的细胞匀浆,体外反应后测定PQQ产量。结果显示... 采用无细胞体系生产吡咯喹啉醌(pyrroloquinoline quinone,PQQ)。首先将肺炎克雷伯氏菌PQQ基因簇pqqABCDEF置于半乳糖苷酶启动子之下,构建表达载体,经转化筛选获得重组大肠杆菌。制备重组菌的细胞匀浆,体外反应后测定PQQ产量。结果显示,与活体重组菌相比,无细胞体系的PQQ产量提高约30%,表明胞内存在PQQ合成的限速反应,而无细胞体系可解除此限速反应。 展开更多

关键词 大肠杆菌 无细胞体系 吡咯喹啉醌 限速反应

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N-端改造植物P450酶实现工程大肠杆菌合成甜菜黄素

2

作者 赵广荣 侯亚男 《天津大学学报（自然科学与工程技术版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第9期934-941,共8页

甜菜黄素是安全的植物源水溶性天然色素,主要应用于食品行业.甜菜黄素还具有抗氧化活性和光学特性,在医疗保健、荧光成像等领域具有潜在应用价值.目前,甜菜黄素的主要来源是植物提取分离,但存在甜菜黄素含量低、种类少等问题.本文改造植... 甜菜黄素是安全的植物源水溶性天然色素,主要应用于食品行业.甜菜黄素还具有抗氧化活性和光学特性,在医疗保健、荧光成像等领域具有潜在应用价值.目前,甜菜黄素的主要来源是植物提取分离,但存在甜菜黄素含量低、种类少等问题.本文改造植物P450氧化酶,研发大肠杆菌异源合成甜菜黄素的新方法.首先,对甜菜的P450氧化酶CYP76AD1^(LL)和P450还原酶(cytochrome P450 reductase,CPR)进行N-端截短和改造,研究不同改造序列和表达策略对合成L-多巴的影响.结果表明,截去N-端跨膜序列,利用3种不同N-端序列修饰P450氧化酶,MA序列修饰CPR(MA-tCPR),工程大肠杆菌中均能以L-酪氨酸为底物合成L-多巴.其中亲水性2B1序列(MAKKTSS)修饰P450氧化酶,采用双顺反子表达策略优于单顺反子,工程大肠杆菌BDP10合成L-多巴的产量最高,为40.42 mg/L.进一步表达紫茉莉的4,5-多巴双加氧酶基因,构建了工程大肠杆菌BTA11,利用L-酪氨酸为前体,合成了甜菜醛氨酸.最后,在培养基添加3种氨基酸(对氨基苯甲酸、L-组氨酸、L-亮氨酸)和3种胺类化合物(酪胺、吡咯烷、吲哚啉),工程大肠杆BTA11合成了6种对应的甜菜黄素.研究结果表明,采用N-端改造策略赋予植物P450氧化酶在大肠杆菌中具有催化功能,能合成天然和非天然的颜色多样、结构丰富的多种甜菜素. 展开更多

关键词 细胞色素P450酶 甜菜黄素 大肠杆菌 合成生物学 酶的改造

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β_2肾上腺素受体基因的改造及在无细胞合成体系中的表达

3

作者 王健 刘媛 +5 位作者 王玮 刘洋 韩正政 曲丽洁 杨立亭 王若敏 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第12期179-184,共6页

依据大肠杆菌密码子偏好性,设计合成β_2肾上腺素受体(β_2 adrenergic receptor,β_2AR)基因序列,应用大肠杆菌无细胞系统对其进行高效表达,经负载镍离子的顺磁颗粒Magne His?Ni-Particles纯化后,对受体蛋白进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯... 依据大肠杆菌密码子偏好性,设计合成β_2肾上腺素受体(β_2 adrenergic receptor,β_2AR)基因序列,应用大肠杆菌无细胞系统对其进行高效表达,经负载镍离子的顺磁颗粒Magne His?Ni-Particles纯化后,对受体蛋白进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)和活性鉴定。结果表明:改造后的β_2AR基因密码子适应指数(codon adaptation index,CAI)为0.96,GC含量从58%降低到46.17%,更有利于该基因在大肠杆菌系统中的表达。表达体系中优化后的Mg^(2+)浓度为22 mmol/L,此时表达量为1 250μg/mL。SDS-PAGE分析显示,纯化蛋白在47 k Da左右出现清晰的特异性条带,与预期结果一致,纯度大于90%。直接酶受体分析检测结果显示,当纯化受体蛋白1∶500稀释包被时,该重组受体与盐酸克伦特罗、沙丁胺醇及莱克多巴胺的酶标记物结合的OD值分别为0.976、0.836和0.728,亲和活性依次降低。β_2AR蛋白在无细胞体系中的成功表达,为研发基于受体的β激动剂多残留快速检测技术提供了理论支持。 展开更多

关键词 Β2肾上腺素受体 密码子优化 大肠杆菌无细胞合成体系 表达 β激动剂检测

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人参细胞生物合成熊果苷转化体系的建立 被引量：2

4

作者 栗建明 丁家宜 +2 位作者 李正 蔡洁 张媛媛 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 2004年第2期14-16,共3页

　以人参(PanaxginsengC.A.Mey.)培养细胞为生物反应体系,利用外源氢醌为底物,对熊果苷的生物合成进行了研究。TLC鉴别表明,人参细胞可以将外源的氢醌转化为熊果苷;以熊果苷含量和氢醌的转化率为指标,对人参细胞生物合成熊果苷的基本条... 　以人参(PanaxginsengC.A.Mey.)培养细胞为生物反应体系,利用外源氢醌为底物,对熊果苷的生物合成进行了研究。TLC鉴别表明,人参细胞可以将外源的氢醌转化为熊果苷;以熊果苷含量和氢醌的转化率为指标,对人参细胞生物合成熊果苷的基本条件(氢醌浓度、转化持续时间、细胞培养阶段)进行了探讨,结果表明,MS固体培养基上培养32d的人参细胞,在含有2mmol·L-1氢醌的生物合成培养基中转化24h后,合成的熊果苷含量占细胞干重的7.176%,氢醌转化率也达到79.15%。 展开更多

关键词 人参 细胞 生物合成 熊果苷 氢醌 转化体系

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大肠杆菌生产饲用氨基酸的研究进展 被引量：6

5

作者 郭亮 高聪 +2 位作者 柳亚迪 陈修来 刘立明 《合成生物学》 CSCD 2021年第6期964-981,共18页

随着畜牧业的快速发展,人们对畜牧饲料蛋白的需求日益剧增。由于人们对食品安全意识的增强,迫切需要开发安全、高效、可持续动物饲料蛋白的供应途径。由于氨基酸是组成蛋白质的基本单元,所以在饲料中添加氨基酸可以替代饲料中的蛋白质,... 随着畜牧业的快速发展,人们对畜牧饲料蛋白的需求日益剧增。由于人们对食品安全意识的增强,迫切需要开发安全、高效、可持续动物饲料蛋白的供应途径。由于氨基酸是组成蛋白质的基本单元,所以在饲料中添加氨基酸可以替代饲料中的蛋白质,为动物细胞生长发育提供足够的营养。因此,饲用氨基酸作为动物饲料食品添加剂被广泛应用,具有广阔的市场应用前景。利用合成生物学技术,工程化改造大肠杆菌,构建的细胞工厂,以生物质为原料可绿色高效合成饲用氨基酸,而且其具有原料可再生、成本低廉、反应条件温和、环境污染小等优点,为解决动植物提取和化学炼制引起的环境污染问题提供了一种有效解决方案。本文针对饲用氨基酸(赖氨酸、甲硫氨酸、色氨酸、苏氨酸、缬氨酸和精氨酸)的生物合成途径,介绍了大肠杆菌合成饲用氨基酸的生产瓶颈,并从饲用氨基酸大肠杆菌细胞工厂的构建与优化,综述了利用合成生物学技术改造大肠杆菌细胞工厂合成饲用氨基酸的研究现状。提升饲用氨基酸的生产技术水平、提高大肠杆菌细胞的鲁棒性和增强大肠杆菌细胞对不利环境的耐受能力,可以提升饲用氨基酸发酵性能,简化发酵过程控制,降低饲用氨基酸的生产成本,是未来饲用氨基酸生产菌株工程化改造的方向。 展开更多

关键词 饲用氨基酸 大肠杆菌 微生物细胞工厂 合成生物学 代谢工程

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印楝素A无细胞合成体系构建及其合成前体 被引量：1

6

作者 谢婷婷 汤锋 +2 位作者 高全 王煜炜 王越 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第9期50-60,共11页

【目的】印楝素是一种植物源杀虫剂,印楝素A是印楝素的主要活性成分。本研究通过对印楝素A无细胞合成体系制备条件和反应条件的优化,以及印楝素A合成前体的筛选,探讨印楝素A的离体生物合成途径,以为指导构建印楝素异源生物合成平台,实... 【目的】印楝素是一种植物源杀虫剂,印楝素A是印楝素的主要活性成分。本研究通过对印楝素A无细胞合成体系制备条件和反应条件的优化,以及印楝素A合成前体的筛选,探讨印楝素A的离体生物合成途径,以为指导构建印楝素异源生物合成平台,实现印楝素的异源生物合成奠定基础。【方法】通过对缓冲液类型、浓度、起始pH、提取时间及料液比进行单因素试验及正交试验优化,构建印楝素A无细胞合成体系;从反应终止试剂及稳定剂、反应温度、反应时间、底物浓度以及辅助因子5个方面优化无细胞合成体系的反应条件。利用印楝素A无细胞合成体系分别以2,3-环氧鲨烯、羊毛甾醇、大戟二烯醇、丁酰鲸鱼醇、nimbin、茄碱苷和脱乙酰茄碱苷为底物,以印楝素A相对产量为评价标准,探讨印楝素A合成前体。【结果】印楝素A无细胞合成体系的构建:以pH7.0的200 mmol·L^-1 Tris-HCl缓冲液,按1∶20(g·mL^-1)料液比加入印楝叶片,提取1 h。优化的印楝素A无细胞合成条件为:反应总体积800μL,其中含印楝无细胞提取物300μL(相当于印楝叶0.015 g),100μL 250μmol·L^-1的底物(鲨烯)和400μL含有1 mmol·L^-1 Mg2+、1 mmol·L^-1 Mn2+、0.1 mmol·L^-1 ATP、0.1 mmol·L^-1 NADPH+和5 mmol·L^-1抗坏血酸的缓冲液,在30℃下反应60 min,迅速加入200μL乙酸终止反应。分别以2,3-环氧鲨烯、丁酰鲸鱼醇、大戟二烯醇、nimbin、茄碱苷和脱乙酰茄碱苷为底物,反应完成后,印楝素A含量均有不同程度的增加;羊毛甾醇抑制体系中印楝素A的合成。【结论】羊毛甾醇不是印楝素A的合成前体,2,3-环氧鲨烯和丁酰鲸鱼醇是印楝素A的前体,nimbin、大戟二烯醇、脱乙酰茄碱苷和茄碱苷极可能是印楝素A的合成前体,且茄碱苷位于合成途径较下游的位置。 展开更多

关键词 印楝素A 无细胞合成体系 前体筛选 生物合成途径

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固定化E.coliBL21(pTrc-gsh)细胞催化合成谷胱甘肽 被引量：11

7

作者 沈立新 魏东芝 +1 位作者 张嗣良 王二力 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期24-27,50,共5页

分别以卡拉胶、明胶、海藻酸钠包埋 E.coli BL 2 1 ( p Trc- gsh)细胞催化合成谷胱甘肽( GSH)。从酶活收率及机械强度方面进行比较 ,选择卡拉胶为包埋载体 ,其最适 p H为 7.0 ,最适温度为 40°C。相关物质对 GSH的合成均有影响 :半... 分别以卡拉胶、明胶、海藻酸钠包埋 E.coli BL 2 1 ( p Trc- gsh)细胞催化合成谷胱甘肽( GSH)。从酶活收率及机械强度方面进行比较 ,选择卡拉胶为包埋载体 ,其最适 p H为 7.0 ,最适温度为 40°C。相关物质对 GSH的合成均有影响 :半胱氨酸、甘氨酸的最适浓度为 2 0 mmol/ L,谷氨酸的最适浓度为 60 mmol/ L;Mg2 + / ATP为 1～ 5 ( V/ V)较合适 ;腺苷二磷酸 ( ADP)浓度为 5 mmol/ L时对酶活的抑制为 2 0 %。优化条件下罐式反应器中 GSH的产量为 0 .84g/ L,操作稳定性较好 ;延迟加入甘氨酸时 GSH产量可提高 1 7.5 % ;与酵母生产 ATP体系相耦联的共固定化体系在填充床中反应 ,GSH合成量达 1 .2 4 g/ L,收率比直接加入 ATP提高 2 4 .2 % 展开更多

关键词 重组大肠杆菌 生物催化 谷胱甘肽 固定化细胞 合成 巯基化合物

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人工合成微生物混菌体系的研究进展 被引量：6

8

作者 杜瑾 贾晓强 元英进 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第2期390-395,共6页

合成生物学正在从设计构建基本功能元件和模块,逐步向着从头设计人工细胞及构建人工生物群落的方向发展,人工合成微生物混菌体系已经成为未来合成生物学研究的重要方向。本文综述了人工构建微生物群落生态关系、群落时空动态和分布式计... 合成生物学正在从设计构建基本功能元件和模块,逐步向着从头设计人工细胞及构建人工生物群落的方向发展,人工合成微生物混菌体系已经成为未来合成生物学研究的重要方向。本文综述了人工构建微生物群落生态关系、群落时空动态和分布式计算等基础研究的进展。同时,微生物混菌体系在医药、环境、能源等领域发挥着不可替代的作用,人工合成混菌体系在相关领域也表现出巨大的应用潜力。 展开更多

关键词 合成生物学 混菌体系 细胞间通讯 菌群生态关系 合成生物技术

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新型阴离子表面活性剂的合成及其反胶束体系对cyt-C的提取 被引量：6

9

作者 孟凡涛 林毅 褚莹 《东北师大学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期22-26,共5页

合成了未见报道的阴离子型表面活性剂二 ( 2 -乙基己基 )羟基丁二酸酯磺酸钠 (AHOT) ,并对其结构进行了表征 .考察了AHOT/异辛烷反胶束体系提取细胞色素C(cyt-C)的性能 ,并与目前公认的优良的表面活性剂AOT进行了比较 .结果表明 ,AHOT与... 合成了未见报道的阴离子型表面活性剂二 ( 2 -乙基己基 )羟基丁二酸酯磺酸钠 (AHOT) ,并对其结构进行了表征 .考察了AHOT/异辛烷反胶束体系提取细胞色素C(cyt-C)的性能 ,并与目前公认的优良的表面活性剂AOT进行了比较 .结果表明 ,AHOT与AOT具有相似的表面活性 ,AHOT反胶束体系的综合性能优于AOT反胶束体系 . 展开更多

关键词 阴离子表面活性剂 合成 反胶束体系 CYT-C 细胞色素C 结构表征 二(2-乙基已基)羟基丁二酸酯磺酸钠

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一种简单快速微量的无细胞蛋白合成系统 被引量：3

10

作者 王润华 沈培奋 李钰云 《生物化学杂志》 CSCD 1995年第4期430-433,共4页

建立了一种简单快速微量的无细胞体系检测蛋白质合成的方法，在总体积５５μｌ的体系中加２０μｌ兔网织红细胞裂解液，在３７℃培养３０ｍｉｎ能使其中的３Ｈ－Ｌｅｕ参入量达到最大，运用该方法可以筛选出植物组织中对真核细胞蛋白质... 建立了一种简单快速微量的无细胞体系检测蛋白质合成的方法，在总体积５５μｌ的体系中加２０μｌ兔网织红细胞裂解液，在３７℃培养３０ｍｉｎ能使其中的３Ｈ－Ｌｅｕ参入量达到最大，运用该方法可以筛选出植物组织中对真核细胞蛋白质生物合成具有强烈抑制作用的单链核糖体失活蛋白（单链毒素）。 展开更多

关键词 蛋白 生物合成 无细胞体系

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人工多细胞体系设计与构建研究进展 被引量：2

11

作者 钱秀娟 陈琳 +4 位作者 章文明 周杰 董维亮 信丰学 姜岷 《合成生物学》 2020年第3期267-284,共18页

合成生物学的发展正从优化基因元件与模块走向从头设计复杂代谢线路。多细胞体系因可实现代谢功能分工、复杂底物多组分利用及耐受复杂环境等,在医药、食品、化工、环境及能源等领域发挥着不可替代的作用,并已成为合成生物学发展的新方... 合成生物学的发展正从优化基因元件与模块走向从头设计复杂代谢线路。多细胞体系因可实现代谢功能分工、复杂底物多组分利用及耐受复杂环境等,在医药、食品、化工、环境及能源等领域发挥着不可替代的作用,并已成为合成生物学发展的新方向。然而,多细胞体系的研究还处于起步阶段,理性设计与构建人工多细胞体系、解析细胞间信息互作机制及调控多细胞体系结构等方面还面临诸多挑战。本文综述了人工多细胞体系在医药开发与医疗健康、天然产物合成、木质纤维素一体化生物加工以及环境修复等领域的应用,总结了人工多细胞体系的构建原理,阐述了多细胞体系内细胞间的交流机制,并剖析了人工多细胞体系面临的诸多挑战以及针对性的解决方案,为构建系统鲁棒、稳定、可控的人工多细胞体系提供理论指导。 展开更多

关键词 人工多细胞体系 医疗健康 天然产物合成 一体化生物加工 环境修复 交流机制 菌群结构

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多酶催化体系在医药化学品合成中的应用 被引量：5

12

作者 汤恒 韩鑫 +1 位作者 邹树平 郑裕国 《合成生物学》 CSCD 2021年第4期559-576,共18页

多酶催化体系成为近年来生物催化领域的研究热点。由于过程可控性及下游易分离的特性,越来越多的体外多酶催化体系已成功构建,部分体系还可耦合化学催化步骤,应用于精细化学品的合成。随着多酶催化体系构建技术的逐步成熟,将会给未来化... 多酶催化体系成为近年来生物催化领域的研究热点。由于过程可控性及下游易分离的特性,越来越多的体外多酶催化体系已成功构建,部分体系还可耦合化学催化步骤,应用于精细化学品的合成。随着多酶催化体系构建技术的逐步成熟,将会给未来化工与医药类产品的生物制造带来广阔的应用前景。本文介绍了多酶催化体系的相关设计原则,通过对反应过程和合成路径进行热力学和动力学分析,设计高价值产物的生物合成路径,挖掘路径中的关键酶,结合各类新型组装策略将功能各异的酶级联组装成一个结构和功能整体,形成“底物通道”,减少中间体损失和降低副反应,实现从简单底物向复杂产物的高效生物转化。系统分析了多酶催化体系在医药化学品(如抗生素、抗癌药物、心血管疾病治疗药物、肝病治疗药物和精神疾病治疗药物及各类活性成分如D-葡萄糖二酸、萜类化合物和5-氨基乙酰丙酸)合成中的应用实例,并总结多酶催化体系仍存在的问题及可能的解决方法。 展开更多

关键词 生物催化 多酶催化体系 逆合成分析 无细胞 底物通道 固定化

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合成生物学重要研究方向进展 被引量：38

13

作者 丁明珠 李炳志 +3 位作者 王颖 谢泽雄 刘夺 元英进 《合成生物学》 2020年第1期7-28,共22页

合成生物学作为一个新兴的交叉学科领域,随着DNA合成技术的进步和合成生物学理念的深入,多个研究方向取得了长足发展。本文主要对基因回路、基因组设计合成、细胞工厂和人工多细胞体系的进展进行了综述。可设计构建的人工基因线路的复... 合成生物学作为一个新兴的交叉学科领域,随着DNA合成技术的进步和合成生物学理念的深入,多个研究方向取得了长足发展。本文主要对基因回路、基因组设计合成、细胞工厂和人工多细胞体系的进展进行了综述。可设计构建的人工基因线路的复杂度逐步提升,人工控制更加精细;组装技术取得快速进展的同时,人工基因组的设计深度也在不断拓展,设计合成的人工基因组由支原体拓展向大肠杆菌,甚至真核生物酿酒酵母,推动了生物进化演化的研究;细胞工厂的设计构建在逐步挑战代谢途径更长、复杂程度更高的化合物的合成,模块化和正交化策略对复杂细胞工厂构建的支撑作用日益明显,鲁棒性和适配性成为细胞工厂构建需要考虑的重要问题;人工多细胞体系的设计构建已经从设计构建两菌体系向多菌体系扩展,通过多种原则进行设计,实现更加复杂的预期功能。本文也对合成生物学与其他学科交叉融合产生的一些新研究方向进行了简介。 展开更多

关键词 合成生物学 基因回路 基因组设计合成 细胞工厂 人工多细胞体系

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表达纯化糖原合成酶激酶3β的两种方法比较 被引量：1

14

作者 许少飞 徐杰 黎明涛 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期397-402,共6页

目的建立一套高纯度、高活性表达糖原合成酶激酶3β的技术。方法分别采用大肠杆菌和杆状病毒昆虫细胞蛋白表达系统表达糖原合成酶激酶3β,通过His和GST标签两步纯化目的蛋白,SDS-PAGE观察目的蛋白的纯度,激酶反应观察目的蛋白的活性。... 目的建立一套高纯度、高活性表达糖原合成酶激酶3β的技术。方法分别采用大肠杆菌和杆状病毒昆虫细胞蛋白表达系统表达糖原合成酶激酶3β,通过His和GST标签两步纯化目的蛋白,SDS-PAGE观察目的蛋白的纯度,激酶反应观察目的蛋白的活性。结果大肠杆菌表达纯化的糖原合成酶激酶3β占纯化后总蛋白的量为54%,昆虫细胞表达纯化的糖原合成酶激酶3β占纯化后总蛋白的量为96%;昆虫细胞来源的目的蛋白比大肠杆菌来源的目的蛋白活性高一倍左右。结论相比大肠杆菌表达的糖原合成酶激酶3β,昆虫细胞表达的目的蛋白具有更高的纯度和活性。 展开更多

关键词 糖原合成酶激酶3Β 大肠杆菌表达系统 杆状病毒昆虫细胞表达系统

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底盘-回路耦合:合成基因回路设计新挑战 被引量：1

15

作者 储攀 朱静雯 +2 位作者 黄文琦 刘陈立 傅雄飞 《合成生物学》 CSCD 2021年第1期91-105,共15页

随着合成生物学研究领域的发展以及对人工生命系统设计复杂程度的需求增加,合成基因回路设计呈现复杂化、规模化的发展趋势,导致合成基因回路行为变得难以预测。传统的基因回路设计框架注重回路内部元件作用关系的刻画和元件自身性能的... 随着合成生物学研究领域的发展以及对人工生命系统设计复杂程度的需求增加,合成基因回路设计呈现复杂化、规模化的发展趋势,导致合成基因回路行为变得难以预测。传统的基因回路设计框架注重回路内部元件作用关系的刻画和元件自身性能的参数调试,通过大量的试错,使回路功能达到次优化。近年来大量的工作表明,基因回路和底盘细胞存在难以避免的耦合:合成回路的基因表达受底盘细胞的资源调配机制调控,而合成基因回路的表达消耗底盘细胞的资源。这种相互作用往往导致底盘细胞生理状态的改变并影响回路功能。因此,将底盘细胞生理参数纳入到基因回路的设计框架中将有望提高基因回路设计的可预测性,提高理性设计能力。面对底盘-回路耦合带来的设计挑战,近年来,涌现出了大量基因回路正交化、模块化的设计思路,成功减弱或规避耦合效应。本文回顾了近年来微生物细胞生理与基因回路的相互作用机制研究的进展;进一步介绍了两类生物物理模型的建立思路,展现物理模型如何帮助我们理解、预测和评估底盘-回路耦合带来的效应;总结了模块化和正交化的设计范式,展现了它们对解决底盘-回路耦合效应的潜力。随着基因“读-改-写”能力提升,以及自动化实验的大规模应用,未来基因线路的设计应当着重于以下几个方面:①高质量元件挖掘;②高质量定量数据刻画;③多维度组学数据的整合,全面评估底盘细胞-基因线路作用程度;④精准的模型预测框架建立。 展开更多

关键词 大肠杆菌 合成生物学 系统生物学 底盘细胞 基因回路 生物物理模型 正交化 模块化

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青霉素及头孢菌素的生物合成 被引量：1

16

作者 E.P.Abraham 虞悝 《微生物学杂志》 CAS CSCD 1989年第4期71-73,共3页

引言一、青霉素G及青霉素V 第二次世界大战期间,由于英美工作者的巨大努力,取得了大量青霉素,确定了结构,并在可能情况下进行化学合成,用P.notatum及P.chrysogenum发酵得到的英国青霉素和美国青霉素不同,前者（青霉素F,2戊烯基青霉素）... 引言一、青霉素G及青霉素V 第二次世界大战期间,由于英美工作者的巨大努力,取得了大量青霉素,确定了结构,并在可能情况下进行化学合成,用P.notatum及P.chrysogenum发酵得到的英国青霉素和美国青霉素不同,前者（青霉素F,2戊烯基青霉素）具有已烯酰侧链（图1中R=CH₃CH₂CH=CHCH₂）,后者（青霉素G,苄青霉素）具有苯乙酰侧链（[1]中R=C₆H₅CH₂）。 展开更多

关键词 青霉素类 生物合成 头抱菌素 苄青霉素 无细胞体系 头霉素 可能情况 半胧氨酸 触酶 内酞胺

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天津工生所探索丁二酸合成新途径

17

《石油化工》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1355-1355,共1页

中科院天津工业生物技术研究所结合理性遗传改造和进化代谢技术，构建高效生产丁二酸的微生物细胞工厂，将可再生的生物质资源高效转化为丁二酸，在丁二酸细胞工厂构建及高效合成机制解析上取得进展。该所构建出高效生产丁二酸的大肠杆... 中科院天津工业生物技术研究所结合理性遗传改造和进化代谢技术，构建高效生产丁二酸的微生物细胞工厂，将可再生的生物质资源高效转化为丁二酸，在丁二酸细胞工厂构建及高效合成机制解析上取得进展。该所构建出高效生产丁二酸的大肠杆菌细胞工厂HX024，并在此基础上，通过使用反向代谢工程技术，将丁二酸的糖酸转化率从1．12mol／mol提高到1．5mol／mol（理论最大转化率的88％），并在国际上提出了以NADPH酶为还原力的丁二酸合成新途径。 展开更多

关键词 合成机制 丁二酸 天津 工业生物技术 微生物细胞 最大转化率 大肠杆菌细胞 生物质资源

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核酸及蛋白质合成、提取、纯化

18

《生物技术通报》 CAS CSCD 1992年第11期20-21,共2页

关键词 蛋白质合成 大肠杆菌素 绿色木霉 DNA 人食管癌细胞系 食管癌细胞 碱基序列 Eppendorf 启动子 脉冲场凝胶电泳

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核酸及蛋白质合成、提取、纯化

19

《生物技术通报》 CAS CSCD 1992年第9期20-21,共2页

关键词 蛋白质合成 大肠杆菌细胞 操纵子 同聚物 基因组文库 克隆基因 BamHI 操纵基因 重组蛋白 克隆载体

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激素和活性多肽

20

《生物技术通报》 CAS CSCD 1989年第3期83-84,共2页

关键词 活性多肽 促生长因子 深层通气发酵 穿梭载体 大肠杆菌细胞 条件培养基 转化细胞 受体活性 合成基因 游离细胞

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