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猪源致病性大肠杆菌bla_(CTX-M-123)基因的传播特性和适应性代价研究 被引量:1
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作者 李琼 胡紫微 +4 位作者 金钢铸 陈峥 刘伟成 韩生义 许春燕 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第6期2884-2892,共9页
【目的】阐明猪源大肠杆菌中bla_(CTX-M-123)基因的位置,同时探究其携带的移动遗传元件的传播能力与适应性代价。【方法】通过化学转化试验评估bla_(CTX-M-123)基因的种内转移能力,并利用全基因组测序确定bla_(CTX-M-123)基因的位置,分... 【目的】阐明猪源大肠杆菌中bla_(CTX-M-123)基因的位置,同时探究其携带的移动遗传元件的传播能力与适应性代价。【方法】通过化学转化试验评估bla_(CTX-M-123)基因的种内转移能力,并利用全基因组测序确定bla_(CTX-M-123)基因的位置,分析大肠杆菌中bla_(CTX-M-123)基因的遗传环境;使用微量肉汤稀释法测定大肠杆菌911菌株、大肠杆菌DH5α感受态细胞及转化子的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)。此外,通过竞争试验评估携带bla_(CTX-M-123)基因质粒的适应性代价,并使用大蜡螟感染模型进行致病性评价。【结果】通过转化试验得到了1株转化子DH5α-pL1,其对头孢噻呋的MIC值为256μg/mL,生长速率高于受体菌大肠杆菌DH5α感受态细胞,但低于野生型菌株911。DH5α-pL1在培养7 d后,质粒留存率逐渐下降,培养24 h后表现出一定的适应性代价,相对竞争指数<1。致病性试验结果显示,对照组及大肠杆菌DH5α感受态细胞组大蜡螟幼虫存活率为100%;注射菌株911和DH5α-pL1 120 h后,幼虫存活率分别为50%和70%。【结论】携带bla_(CTX-M-123)基因的质粒可在种内转移并介导转化子耐药,且该质粒的稳定性弱,具有一定的适应性代价。此外,携带bla_(CTX-M-123)基因的质粒具有增强受体菌致病力的作用,增加了感染的几率和治疗难度。研究结果为细菌的耐药机制研究和防控提供理论依据。 展开更多
关键词 大肠杆菌 bla_(CTX-M-123)基因 转化试验 适应性代价 致病性
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一株猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7的全基因组测序及毒力和耐药基因分析
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作者 周艳 万启旸 +3 位作者 朱树娇 张辉 包红朵 王冉 《广东农业科学》 2025年第2期58-70,共13页
[目的]分析一株猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1的全基因组信息及其毒力和耐药基因。[方法]基于Nanopore三代测序技术平台和Illumina二代测序技术平台对猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1进行全基因组测序,利用Prokka软... [目的]分析一株猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1的全基因组信息及其毒力和耐药基因。[方法]基于Nanopore三代测序技术平台和Illumina二代测序技术平台对猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1进行全基因组测序,利用Prokka软件预测基因组序列信息,并通过UniProt、KEGG、KEGG Pathway、GO、Pfam、COG、TIGERfams、RefSeq和NR数据库进行基因预测和注释,再利用碳水化合物酶(CAZy)、病原与宿主互作(PHI)、毒力因子(VFDB)和耐药基因(CARD)数据库进行基因功能分析。[结果]肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1基因组大小为5404747 bp,GC含量为50.49%,该菌株含有3个质粒;共预测到5674个蛋白质编码基因,包含22个rRNA(7个23S rRNA、7个16S rRNA、8个5S rRNA)、1个tmRNA、102个tRNA基因和282个小RNA分子;预测出9个CRISPR序列、273个重复序列;KEGG、KEGG Pathway、NR、UniProt、GO、COG、Pfam、RefSeq和TIGERfams数据库分别注释到1712、1693、5265、5264、4029、4294、4688、5252和2741个基因;CAZy数据库注释筛选出100个基因,PHI数据库注释筛选出2354个基因,VFDB数据库注释筛选出的毒力基因主要包括菌毛、鞭毛、Ⅱ型分泌系统、Ⅲ型分泌系统、Ⅵ型分泌系统、紧密黏附素、铁转运系统、脂多糖、荚膜、侵袭素和外毒素;CARD数据库注释筛选出的耐药基因与多重耐药外排泵、大环内酯类抗生素、四环素、多粘菌素、杆菌肽、氨基糖苷类抗生素、肽类抗生素及甲硝唑相关。[结论]获得一株肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1全基因组序列,序列分析表明该菌株携带大量毒力基因与耐药基因。 展开更多
关键词 肠出血性大肠杆菌O157∶H7 食源性人兽共患病 基因组测序 基因 功能注释
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鸡源携带多黏菌素耐药基因mcr-1大肠杆菌耐药性与毒力基因相关性分析 被引量:1
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作者 戴婷婷 陈海玉 +10 位作者 段楚楚 刘荣昌 李宇蓉 严淑涵 陈梦诗 刘露薇 包银莉 程艳青 林炜明 黄翠琴 郑新添 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第3期1393-1404,共12页
【目的】分析福建省鸡源携带多黏菌素耐药基因mcr-1大肠杆菌的耐药性与毒力基因之间的相关性,并对mcr-1耐药基因质粒转移特性进行研究。【方法】以临床分离的87株鸡源携带mcr-1基因大肠杆菌为研究对象,通过微量肉汤稀释法检测其对6大类1... 【目的】分析福建省鸡源携带多黏菌素耐药基因mcr-1大肠杆菌的耐药性与毒力基因之间的相关性,并对mcr-1耐药基因质粒转移特性进行研究。【方法】以临床分离的87株鸡源携带mcr-1基因大肠杆菌为研究对象,通过微量肉汤稀释法检测其对6大类11种抗菌药物的敏感性,利用PCR方法检测分离株耐药基因、毒力基因和质粒类型,分析mcr-1基因阳性菌耐药表型和耐药基因以及耐药基因和毒力基因之间的相关性;利用质粒接合试验,探究mcr-1基因的转移情况。【结果】药敏试验结果显示,96.55%(85/87)分离株为多重耐药菌,其中对四环素类的耐药最严重,多西环素和四环素耐药率分别为88.51%(77/87)和82.76%(72/87)。分离株中检出11种耐药基因,其中以四环素类耐药基因tet(A)检出率最高,为95.40%(83/87);共检测出18种毒力基因,其中侵袭素类mat为优势毒力基因,检出率为85.06%(74/87);部分耐药基因和耐药表型、耐药基因与毒力基因之间具有相关性。分离株携带12种质粒,主要类型为IncFIB(77.01%,67/87)。接合试验结果显示,共有42株分离菌接合成功,接合转移率为48.28%(42/87),IncI2、IncHI2、IncX4质粒均成功转移至接合子中,其中IncI2质粒检出率最高(57.14%)。【结论】87株鸡源携带mcr-1基因大肠杆菌多重耐药严重,其耐药基因检出率高,毒力基因种类多样,且部分耐药基因和耐药表型、毒力基因之间存在相关性;48.28%(42/87)菌株的mcr-1基因可以利用IncI2、IncHI2、IncX4质粒作为载体进行传播。研究结果为深入了解福建省鸡源mcr-1基因阳性大肠杆菌的多重耐药情况、毒力特性以及传播机制提供了科学依据。 展开更多
关键词 大肠杆菌 多黏菌素 mcr-1基因 耐药性 毒力基因 接合试验
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福建省多黏菌素耐药基因mcr-1阳性鸡源大肠杆菌的流行性及耐药性分析 被引量:1
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作者 戴婷婷 陈海玉 +11 位作者 段楚楚 庄丽云 刘荣昌 陈慧慧 余小珍 杨欣 陈梦诗 包银莉 程艳青 华宝玉 黄翠琴 郑新添 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第1期9-16,共8页
为了解福建省多黏菌素耐药基因mcr-1阳性大肠杆菌的流行情况和耐药性,本研究于2022年~2024年从福建省4个不同地区养殖场、屠宰场、菜市场的肉鸡和蛋鸡中分离到786株鸡源大肠杆菌,采用PCR鉴定mcr-1阳性大肠杆菌,统计不同地区、不同来源... 为了解福建省多黏菌素耐药基因mcr-1阳性大肠杆菌的流行情况和耐药性,本研究于2022年~2024年从福建省4个不同地区养殖场、屠宰场、菜市场的肉鸡和蛋鸡中分离到786株鸡源大肠杆菌,采用PCR鉴定mcr-1阳性大肠杆菌,统计不同地区、不同来源及不同种类鸡源mcr-1阳性大肠杆菌的检出率;采用微量肉汤稀释法测定mcr-1阳性大肠杆菌对7大类12种抗菌药物的敏感性;通过PCR检测mcr-1阳性菌的6大类12种耐药基因,利用卡方检验分析分离菌耐药表型和耐药基因之间的相关性;通过PCR鉴定分离菌中质粒的类型。结果显示,786株鸡源大肠杆菌中mcr-1基因的检出率为21.25%(167/786),以闽东地区(24.28%,42/173)、菜市场(25.41%,47/185)和蛋鸡(27.95%,64/229)中分离的mcr-1阳性大肠杆菌的检出率最高。药敏试验结果显示,分离菌对四环素类的多西环素(DOX)和四环素(TE)耐药的mcr-1基因阳性菌占比最高,分别为92.22%(154/167)和89.82%(150/167);对氨基糖苷类的庆大霉素(GEN)和氟喹诺酮类的环丙沙星(CIP)耐药的菌株最少,分别占44.91%(75/167)和56.29%(94/167);对氨基糖苷类、磺胺类、酰胺醇类、氟喹诺酮类、多黏菌素类、β-内酰胺类耐药的菌株占57.49%~73.65%。85.63%(143/167)的菌株为多重耐药菌(MDR)。不同地区、不同来源和不同种类鸡中分离的mcr-1阳性大肠杆菌的耐药性有差异;所测12种耐药基因均在mcr-1阳性菌中检出,其中四环素类的tet(A)(97.6%,163/167)、氨基糖苷类的aadA1(87.43%,146/167)、磺胺类的sul2(84.43%,141/167)、β-内酰胺类的blaTEM(81.44%,136/167)、氟喹诺酮类的qnrS(72.46%,121/167)及酰胺醇类的floK(67.66%,113/167)耐药基因的检出率均在50%以上;相关性分析显示,分离菌对氧氟沙星与其耐药基因qnrA、对环丙沙星与其耐药基因qnrS、对氨曲南和头孢他啶与其耐药基因blaTEM等均显著和极显著相关。分离菌主要携带IncI2型质粒(50.30%,84/167)、IncHI2型质粒(25.15%,42/167)和IncX4型质粒(19.76%,33/167)。目前福建省mcr-1阳性鸡源大肠杆菌的检出率较高,且多为多重耐药菌株,耐药现象非常严重。本研究为深入了解福建省mcr-1阳性鸡源大肠杆菌的耐药性以及抗菌药物的合理使用提供科学参考依据。 展开更多
关键词 大肠杆菌 多黏菌素 耐药基因 mcr-1 福建
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奶牛场环境中耐药大肠杆菌的分离及耐药基因遗传环境分析 被引量:1
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作者 王灵舸 沈留红 +4 位作者 唐俊妮 韩新锋 朱成林 赵珂 邹立扣 《生态毒理学报》 北大核心 2025年第1期329-343,共15页
为了解四川某奶牛场环境中大肠杆菌的耐药情况及耐药基因(antibiotic resistance genes,ARGs)的遗传环境,对从养殖场采集的样品进行大肠杆菌的分离鉴定,进行最小抑菌浓度(the minimum inhibitory concentrations,MICs)测定,并选择多重... 为了解四川某奶牛场环境中大肠杆菌的耐药情况及耐药基因(antibiotic resistance genes,ARGs)的遗传环境,对从养殖场采集的样品进行大肠杆菌的分离鉴定,进行最小抑菌浓度(the minimum inhibitory concentrations,MICs)测定,并选择多重耐药大肠杆菌进行全基因组测序分析。共采集36份样品,分离得到18株大肠杆菌。药敏试验显示大肠杆菌对四环素、阿莫西林的耐药率较高,且大部分表现为多重耐药。耐药基因检测发现所有大肠杆菌均携带耐药基因blaTEM、ampC、tetA和qnrA,53.33%的大肠杆菌携带blaCTX-M基因,55.55%的大肠杆菌携带tetM基因。通过二代全基因组测序,8株多重耐药大肠杆菌均检测到大量耐药基因及毒力基因,对其耐药基因环境进行分析,发现大肠杆菌β-内酰胺类耐药基因、四环素类耐药基因上下游环境高度一致,并存在转座子、插入序列(insertion sequences,ISs)等可移动遗传元件(mobile genetic elements,MGEs),有助于耐药基因在环境中的传播。其中,发现bla_(CTX-M-15)基因上下游存在与WbuC家族杯状折叠金属蛋白基因关联的保守结构。该研究对奶牛场科学合理使用抗生素,以及对养殖环境中耐药菌(antibiotic resistant bacteria,ARB)和耐药基因的监测具有重要意义。 展开更多
关键词 奶牛场 大肠杆菌 耐药性 耐药基因环境
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黑龙江省地区犊牛腹泻源致病性大肠杆菌流行情况调查、毒力基因及耐药性分析 被引量:1
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作者 孔祥鹤 苏欣雨 +7 位作者 钟一铭 卢赵梓暄 廖献茂 张哲 张旭 高萌萌 周玉龙 樊祜卿 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第7期3390-3398,共9页
大肠杆菌是引起新生犊牛腹泻和死亡的主要病原之一,本研究旨在探明黑龙江省犊牛腹泻源大肠杆菌致病性、携带毒力基因和耐药的流行情况。对2020年1月至2023年7月收集的黑龙江省8个城市35个牛群252份犊牛腹泻样品,进行细菌分离、革兰染色... 大肠杆菌是引起新生犊牛腹泻和死亡的主要病原之一,本研究旨在探明黑龙江省犊牛腹泻源大肠杆菌致病性、携带毒力基因和耐药的流行情况。对2020年1月至2023年7月收集的黑龙江省8个城市35个牛群252份犊牛腹泻样品,进行细菌分离、革兰染色、鉴别培养基鉴定、生化试验、16S rRNA鉴定、小鼠致病性试验和药敏试验,通过PCR方法检测15种毒力基因,试验数据应用SPSS 22.0软件卡方检验方法对致病性大肠杆菌的地区流行情况、不同年限和不同季节因素进行分析。结果显示:共分离鉴定出153株致病性大肠杆菌,其中49.02%(75/153)携带毒力基因,其中Irp-2阳性率最高为37.25%(57/153),FyuA、K99、F41、F17、STa、HlyA、Stxl、Stx2和Eaea阳性率依次为19.61%(30/153)、4.58%(7/153)、4.58%(7/153)、3.92%(6/153)、2.61%(4/153)、3.27%(5/153)、0.65%(1/153)、0.65%(1/153)和0.65%(1/153)。药敏试验结果显示153株分离菌对磷霉素敏感率最高56.21%(86/153),而对磺胺异噁唑、阿莫西林等耐药严重,所有菌株都耐2重及以上药物,部分菌株最高达到11重耐药。通过统计分析发现2020年致病性大肠杆菌分离率77.59%(45/58)显著高于2021年与2022年(P<0.001)。在一年四季中夏季致病性大肠杆菌分离率最低(P<0.05),各地区之间致病性大肠杆菌分离率有统计学差异,其中鸡西市最高,齐齐哈尔市最低(P<0.001)。以上结果表明黑龙江省犊牛腹泻源牛致病性大肠杆菌携带毒力基因种类具有多样性,普遍多重耐药,致病性大肠杆菌的流行与地区、年限和季节均有一定的相关性。本研究为黑龙江地区牛大肠杆菌感染的防治提供了理论依据。 展开更多
关键词 犊牛腹泻 大肠杆菌 毒力基因 耐药性 流行病学
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赛鸽源大肠杆菌耐药性检测及多重耐药菌株的全基因组测序分析 被引量:1
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作者 石金川 孙淼 +6 位作者 孟令浩 王永强 耿超 齐朝鲁蒙 陈亨利 王梓 刘锴 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第5期2372-2382,共11页
赛鸽养殖中,普遍存在抗生素滥用现象,造成耐药菌株增加,多重耐药性加剧。本研究旨在了解通辽市赛鸽源大肠杆菌耐药性及耐药基因流行情况,为赛鸽源大肠杆菌病临床治疗提供参考。使用大肠杆菌鉴别培养基,16S rRNA测序等方法对通辽地区送... 赛鸽养殖中,普遍存在抗生素滥用现象,造成耐药菌株增加,多重耐药性加剧。本研究旨在了解通辽市赛鸽源大肠杆菌耐药性及耐药基因流行情况,为赛鸽源大肠杆菌病临床治疗提供参考。使用大肠杆菌鉴别培养基,16S rRNA测序等方法对通辽地区送检腹泻赛鸽粪便病原菌进行分离纯化。通过药敏试验及耐药基因的PCR检测了解分离菌株的耐药性及耐药基因分布情况。对两株耐药性较强的大肠杆菌进行全基因组测序分析。结果显示:分离得到8株赛鸽源大肠杆菌,均为多重耐药菌株,其中卡那霉素和链霉素耐药率均为100%,全部菌株对头孢哌酮/舒巴坦敏感。E-ge1,E-ge2耐药性严重,对两株菌进行全基因组测序分析,获得完整基因组序列,两株菌基因组长度分别为4680817 bp与4691799 bp,分别编码4888与5070个基因,两菌株均携带3个质粒。E-ge1共携带81个耐药基因,E-ge2携带74个耐药基因。通辽地区赛鸽源大肠杆菌耐药形势严峻,菌株携带大量耐药基因,应优化用药策略,控制耐药性的加剧和耐药基因的传播。 展开更多
关键词 赛鸽 大肠杆菌 耐药性 耐药基因 基因组测序
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河北部分地区犊牛致病性大肠杆菌的分离鉴定、耐药性及毒力基因的检测与分析
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作者 韩平 王小立 +9 位作者 赵允清 苏蒙蒙 李涵 候蔷 李彬 郑百芹 张洪军 吴同垒 张香斋 张艳英 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第6期568-576,共9页
为了解河北地区犊牛源致病性大肠杆菌的优势血清型、ST型、毒力基因及耐药特性,本研究对河北4个地区(保定、衡水、承德和秦皇岛)采集的128份腹泻犊牛粪便样品进行细菌分离,并采用特异性引物经PCR鉴定,结果显示,在各培养基均生长出具有... 为了解河北地区犊牛源致病性大肠杆菌的优势血清型、ST型、毒力基因及耐药特性,本研究对河北4个地区(保定、衡水、承德和秦皇岛)采集的128份腹泻犊牛粪便样品进行细菌分离,并采用特异性引物经PCR鉴定,结果显示,在各培养基均生长出具有大肠杆菌特征的菌落,进一步经16S rRNA基因的PCR鉴定后确定分离到76株致病性大肠杆菌。采用PCR检测分离菌的毒力基因,采用玻片凝集法鉴定致病性大肠杆菌血清型,通过K-B纸片扩散法检测分离菌的耐药性,采用PCR检测分离菌共8类41种耐药基因。根据药敏试验与耐药基因检测结果分析二者之间的相关性,采用多位点序列分型(MLST)技术对分离菌分型。结果显示,76株致病性大肠杆菌分离株优势血清型为O29;共检测出15种毒力基因,其中irp2、hlyF、iucD基因的检出率相对较高,分别为36.84%(28/76)、21.05%(16/76)、21.05%(16/76);大部分(80.26%,61/76)大肠杆菌携带1种~2种毒力基因;药敏试验结果显示76株致病性大肠杆菌均至少对4种药物耐药,对链霉素、大观霉素、青霉素等11种药物耐药率均在50%以上,对丁胺卡那、庆大霉素、氟苯尼考等12种药物的敏感率在50%以上;共检出31种耐药基因,其中喹诺酮类耐药基因总检出率最高(gyrA:97.37%,74/76),其次为磺胺类耐药基因(dhpS:96.05%,73/76)和氨基糖苷类耐药基因(aac2:84.21%,64/76),76株致病性大肠杆菌均至少携带5种耐药基因;且耐药表型与耐药基因间无明显相关性;MLST分型结果显示河北保定等地区致病性大肠杆菌优势ST型为ST101。本研究结果表明河北保定、衡水、承德和秦皇岛4个地区致病性大肠杆菌的毒力基因、血清型和ST型分布均表现出较高的多样性,尽管携带毒力基因数量较少,但耐药性严重。本研究为河北地区养牛业合理使用抗生素防控致病性大肠杆菌病提供了参考依据。 展开更多
关键词 大肠杆菌 毒力基因 耐药基因 耐药性 优势血清型
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11株禽源大肠杆菌的分离及耐药基因和毒力基因检测
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作者 鞠诗婷 王海龙 +5 位作者 张航 徐洁 马佰贺 王紫苇 李文超 郭伟娜 《北京农学院学报》 2025年第3期39-47,共9页
【目的】分离禽源大肠杆菌及其耐药基因和毒力基因检测旨在有效防控禽大肠杆菌病。【方法】无菌采集肝脏组织样品11份(鸡2份、鸭2份、鹅7份),用麦康凯培养基进行细菌的分离纯化,之后进行染色镜检和16S rRNA的PCR扩增及测序分析;测定分... 【目的】分离禽源大肠杆菌及其耐药基因和毒力基因检测旨在有效防控禽大肠杆菌病。【方法】无菌采集肝脏组织样品11份(鸡2份、鸭2份、鹅7份),用麦康凯培养基进行细菌的分离纯化,之后进行染色镜检和16S rRNA的PCR扩增及测序分析;测定分离菌株对19种抗菌药物的敏感性,以及17种耐药基因和14种毒力基因的检测,最后进行小鼠致病性试验。【结果】从肝脏组织样品中分离出11个不同菌株,革兰染色呈红色的短杆菌,麦康凯选择性培养基上为红色菌落;PCR扩增16S rRNA均有1500 bp的目的条带,测序结果与大肠杆菌参考菌株的相似性介于97.93%~100%之间;药敏试验结果显示,分离菌株对林可霉素、强力霉素、四环素、链霉素均表现耐药(100%),对多粘菌素的耐药率最低(9%)。分离菌株耐药基因的PCR检测结果显示,耐药基因bla CMY-2(100%)的检出率最高,其次为tetA(72.73%)。毒力基因检测发现10种毒力基因,其中fimC基因(81.8%)检出率最高。小鼠致病性试验显示携带毒力基因较多的7个分离菌株在攻毒后24 h内均有4只或5只小鼠死亡,致病性较强。【结论】分离得到11株禽源大肠杆菌,其多重耐药现象较严重,且携带不同种类的耐药基因和毒力基因,其中7个菌株致病性较强。 展开更多
关键词 大肠杆菌 分离 鉴定 药敏试验 耐药 毒力 基因 检测
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仔猪肠源溶血性大肠杆菌的分离鉴定、毒力基因检测及耐药性分析
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作者 李贺 唐阳 +2 位作者 刘春燕 李湘 余兴龙 《猪业科学》 2025年第9期90-93,共4页
大肠杆菌(Escherichia coli)是人类和动物胃肠道中普遍存在的重要共生微生物,可分为致病性大肠杆菌和共生型大肠杆菌。致病性大肠杆菌是引发仔猪大肠杆菌病的主要病原,临床表现以腹泻和水肿病为主,具有较高的发病率和死亡率,给国内养猪... 大肠杆菌(Escherichia coli)是人类和动物胃肠道中普遍存在的重要共生微生物,可分为致病性大肠杆菌和共生型大肠杆菌。致病性大肠杆菌是引发仔猪大肠杆菌病的主要病原,临床表现以腹泻和水肿病为主,具有较高的发病率和死亡率,给国内养猪业造成了严重的经济损失。Barbau-Piednoir等人将致病性大肠杆菌分为致腹泻性大肠杆菌(DEC)和肠外大肠杆菌(ExPEC)。 展开更多
关键词 肠源溶血性大肠杆菌 毒力基因
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motB和fliC基因在大肠杆菌运动中的作用
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作者 黄承允 刘健 王芳彬 《合肥工业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第7期938-944,950,共8页
周身含有鞭毛的细菌可通过鞭毛马达带动鞭毛转动,为自身运动提供动力。文章以大肠杆菌为模式生物,通过CRISPR-Cas9基因编辑技术对大肠杆菌基因组进行改造,分别构建motB和fliC基因缺失的大肠杆菌菌株;利用明场显微技术研究单个鞭毛马达... 周身含有鞭毛的细菌可通过鞭毛马达带动鞭毛转动,为自身运动提供动力。文章以大肠杆菌为模式生物,通过CRISPR-Cas9基因编辑技术对大肠杆菌基因组进行改造,分别构建motB和fliC基因缺失的大肠杆菌菌株;利用明场显微技术研究单个鞭毛马达的转动,利用暗场显微技术研究单个细菌的游动,利用软琼脂平板研究细菌的群体游动。结果表明:motB和fliC基因缺失的大肠杆菌失去了马达转动和细胞运动的能力;通过质粒pJY7和pKAF131分别回补motB和fliC基因,恢复了大肠杆菌的运动能力,进一步明确了motB和fliC基因在大肠杆菌运动中的作用。 展开更多
关键词 大肠杆菌 鞭毛 鞭毛马达 motB基因 fliC基因 CRISPR-Cas9基因编辑技术
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西藏地区藏猪源大肠杆菌耐药性及耐药基因检测与分析
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作者 吴茜 张翔峰 +5 位作者 李海洋 罗侣 韦明邦 张辉 叶幼荣 商鹏 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第10期5212-5221,共10页
旨在探究西藏地区藏猪源大肠杆菌的耐药情况。本研究采集西藏山南、昌都和林芝地区共180份藏猪粪便样本,通过细菌分离培养、革兰染色和16S rRNA基因扩增鉴定菌株,采用K-B纸片扩散法检测耐药性,并通过PCR扩增检测毒力基因及耐药基因携带... 旨在探究西藏地区藏猪源大肠杆菌的耐药情况。本研究采集西藏山南、昌都和林芝地区共180份藏猪粪便样本,通过细菌分离培养、革兰染色和16S rRNA基因扩增鉴定菌株,采用K-B纸片扩散法检测耐药性,并通过PCR扩增检测毒力基因及耐药基因携带情况。结果表明:从180份藏猪粪便中分得42株致泻大肠杆菌,其中肠聚集性大肠杆菌(Enteroaggregative Escherichia coli,EAEC)和非典型肠道致病性大肠杆菌(Enteropathogenic Escherichia coli,EPEC)的总分离率分别为25.36%和5.07%。耐药性分析显示,EAEC和非典型EPEC对亚胺培南的耐药率分别为97.14%和100%,且最常见的耐药表型分别为TE+DX+MI+AM+IPM+SIZ和TE+DX+AM+IPM+SIZ。所有菌株中,β-内酰胺类bla_(TEM)基因检出率均为100.00%。综上,西藏地区藏猪源致泻大肠杆菌具有较高的流行率和多重耐药性,且耐药谱型多样,耐药基因均有不同程度检出,EAEC为主要流行菌株。本研究为西藏地区藏猪源致泻大肠杆菌的防控提供数据参考,有助于提升公共卫生水平和优化临床实践。 展开更多
关键词 藏猪 致泻大肠杆菌 耐药基因
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辽宁禽大肠杆菌病血清型、毒力基因及耐药基因调查
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作者 程安琪 陈宇山 +4 位作者 许大伟 朱琪 宋青 李德生 李冰 《现代畜牧兽医》 2025年第3期66-69,共4页
研究旨在了解辽宁地区禽致病性大肠杆菌(APEC)的流行情况,为防控临床鸡大肠杆菌病提供指导。从辽宁某规模化鸡场采集106株APEC,通过PCR方法对大肠杆菌9种毒力基因、8种血清型及8种耐药基因进行检测。结果显示,在106株鸡源APEC中,优势抗... 研究旨在了解辽宁地区禽致病性大肠杆菌(APEC)的流行情况,为防控临床鸡大肠杆菌病提供指导。从辽宁某规模化鸡场采集106株APEC,通过PCR方法对大肠杆菌9种毒力基因、8种血清型及8种耐药基因进行检测。结果显示,在106株鸡源APEC中,优势抗原为O1(33.96%,36/106)、O78(19.81%,21/106);携带ibeB(检出率96.23%,102/106)、FimH(检出率86.79%,92/106)、FimC(检出率83.96%,89/106)、YijP(检出率69.81%,74/106)等毒力基因;耐药基因gyrA、tetA、blaTEM、blaCTX-M、aac、sul1的检出率均在57%以上。研究表明,辽宁地区鸡源APEC的血清型复杂多样,且携带多种毒力基因和耐药基因。研究结果为辽宁地区鸡大肠杆菌病的防治提供了一定参考。 展开更多
关键词 禽致病性大肠杆菌 血清型 毒力基因 耐药基因
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河南汝南县禽源致病性大肠杆菌血清型鉴定和毒力基因分布
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作者 冯笑丽 《家禽科学》 2025年第3期22-26,共5页
本研究旨在了解汝南县禽源致病性大肠杆菌(APEC)血清型和毒力基因分布情况,采集来自汝南县部分家禽养殖场疑似感染APEC家禽的脑、心脏、肝脏等病料,利用细菌分离培养、血清型PCR和凝集试验鉴定及毒力基因检测。结果显示,O1、O2、O18、O7... 本研究旨在了解汝南县禽源致病性大肠杆菌(APEC)血清型和毒力基因分布情况,采集来自汝南县部分家禽养殖场疑似感染APEC家禽的脑、心脏、肝脏等病料,利用细菌分离培养、血清型PCR和凝集试验鉴定及毒力基因检测。结果显示,O1、O2、O18、O78血清型占比分别为43.2%、21.5%、15.8%、12.5%,其它血清型为7.0%。毒力基因iucD、tsh、iss、irp2检出率较高,分别为100.0%、95.4%、87.1%、82.3%。所有菌株至少携带2种毒力因子,以携带3~5种最多。研究结果为开展汝南县禽大肠杆菌病的防控提供参考。 展开更多
关键词 禽致病性大肠杆菌 PCR 血清型 毒力基因
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一株产ESBLs犊牛腹泻大肠杆菌耐药基因检测
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作者 朱启涛 王放 +3 位作者 温巍 万继文 武超 袁俊珍 《福建畜牧兽医》 2025年第4期23-25,共3页
本研究旨在检测一株从犊牛腹泻病例中分离出的大肠杆菌携带的耐药基因,特别是超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)相关基因。通过药敏试验、PCR基因检测等方法,对该菌株的耐药性及其携带的耐药基因进行系统研究。结果显示,该大肠杆菌菌株对多种β... 本研究旨在检测一株从犊牛腹泻病例中分离出的大肠杆菌携带的耐药基因,特别是超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)相关基因。通过药敏试验、PCR基因检测等方法,对该菌株的耐药性及其携带的耐药基因进行系统研究。结果显示,该大肠杆菌菌株对多种β-内酰胺类抗生素表现出高度耐药性,且对多种抗生素产生了耐药性。通过PCR扩增,检测到该菌株携带blaCTX-M和qnrS耐药基因。本研究揭示了该犊牛腹泻大肠杆菌菌株的多重耐药性及其携带的耐药基因,为临床中合理使用抗生素提供了重要依据,也为防治产ESBLs大肠杆菌引起的犊牛腹泻提供依据。 展开更多
关键词 犊牛 大肠杆菌 腹泻 超广谱Β-内酰胺酶 耐药基因
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2021—2023年江苏省部分地区鹅源禽致病性大肠杆菌的分离鉴定及生物学特性分析
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作者 郭长明 袁橙 +3 位作者 封琦 杨静静 朱善元 于圣青 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第10期4989-4999,共11页
【目的】了解鹅源禽致病性大肠杆菌(APEC)的分子流行特点及耐药性,为水禽大肠杆菌病的预防与控制提供参考。【方法】从江苏省不同地区采集病鹅病料240份,采用平板划线法分离纯化细菌,通过16S rDNA PCR扩增鉴定阳性菌株,并检测分离株O抗... 【目的】了解鹅源禽致病性大肠杆菌(APEC)的分子流行特点及耐药性,为水禽大肠杆菌病的预防与控制提供参考。【方法】从江苏省不同地区采集病鹅病料240份,采用平板划线法分离纯化细菌,通过16S rDNA PCR扩增鉴定阳性菌株,并检测分离株O抗原血清型、系统进化分群和毒力基因携带情况,通过药敏试验检测其耐药情况,并进行多重耐药分析。【结果】从240份病料中分离获得31株APEC分离株。血清型检测结果显示,O145血清型检出率最高,为19.35%,其次为O1(6.45%)、O78(6.45%)和O2(3.23%)血清型。系统进化分群分析结果显示,分离株属于A、B1、B2和D进化分群的比例分别为38.71%、22.58%、9.68%和29.03%。毒力基因检测结果显示,fimA和hlyF基因检出率均>90%,iroN、ompT、iucD、ECs 3737、ECs 3703基因检出率为60%~90%,iss、tsh、irp 2、cvaC、papC和hlyE基因检出率<50%,eaeA基因未检出,且所有分离株均至少含有4个毒力基因。药敏试验结果显示,分离株对强力霉素、林可霉素、氨苄青霉素和阿莫西林的耐药率均>80%,对新霉素、氟苯尼考、恩诺沙星等5种抗菌药的耐药率达50%~70%,而大观霉素(74.19%)和庆大霉素(54.84%)敏感率较高,14重耐药的菌株占比最高(19.35%),7重以上耐药菌株占64.52%。【结论】江苏省鹅源APEC分离株血清型复杂,携带多种毒力基因,多重耐药严重。研究结果为该地区水禽大肠杆菌病的防治提供了数据支撑。 展开更多
关键词 禽致病性大肠杆菌 血清型 进化分群 毒力基因 耐药
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江苏部分地区鸡源大肠杆菌的分离鉴定及生物学特性研究 被引量:1
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作者 张萍 王静悦 +5 位作者 刘海侠 徐孝宙 陈栋 薛媚 蔡璨宇 方光远 《中国家禽》 北大核心 2025年第1期119-126,共8页
为研究江苏地区鸡源大肠杆菌的血清型、毒力基因分布、进化分群及耐药性等生物学特性,试验从江苏部分地区养鸡场的疑似大肠杆菌感染病例中,分离并鉴定出鸡大肠杆菌44株,采用平板凝集法检测分离菌O抗原血清型,PCR法检测分离菌的毒力基因... 为研究江苏地区鸡源大肠杆菌的血清型、毒力基因分布、进化分群及耐药性等生物学特性,试验从江苏部分地区养鸡场的疑似大肠杆菌感染病例中,分离并鉴定出鸡大肠杆菌44株,采用平板凝集法检测分离菌O抗原血清型,PCR法检测分离菌的毒力基因分布、系统进化分类,Kirby-Bauer纸片扩散法检测分离菌的耐药情况。结果显示:44株分离菌中O抗原血清型菌株有38株,共有17种血清型,其中O138(15.8%)、O86(13.2%)、O54(10.5%)和O14(10.5%)为优势血清型;fimC、yijp检出率最高,均为100%(44/44)携带,其次为mat、iucD、ompA、iss,分别为97.73%(43/44)、84.09%(37/44)、79.55%(35/44)、59.09%(26/44),且分离菌全部同时含有3种或以上的毒力基因;分离菌主要属于A、D群,占比分别为38.64%和31.83%,少数为B1、B2群,占比分别为11.36%和18.18%;44株分离菌均对红霉素、克林霉素、万古霉素100%耐药,对四环素、复方新诺明的耐药率均为86.36%,且多重耐药现象明显。研究提示,江苏部分地区鸡源大肠杆菌血清型复杂多样,携带多种毒力基因,且耐药问题比较严重,应加强当地耐药菌的监测,从而选择合适的药物防治鸡大肠杆菌病。 展开更多
关键词 大肠杆菌 毒力基因 耐药性 江苏
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新疆部分地区奶牛源大肠杆菌的流行性与耐药性分析 被引量:2
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作者 马洪鹏 邵伟 +5 位作者 娄肖肖 高姣姣 马宪兰 陈贺 郑楠 赵艳坤 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第1期470-480,共11页
[目的]探明新疆部分地区奶牛养殖场患病奶牛乳和环境中大肠杆菌流行情况及耐药性,为该地区大肠杆菌的临床合理用药提供依据。[方法]试验采用平板划线法对新疆部分地区的4个集约化养殖场171份样本(55份患病奶牛乳样本、116份环境样本)进... [目的]探明新疆部分地区奶牛养殖场患病奶牛乳和环境中大肠杆菌流行情况及耐药性,为该地区大肠杆菌的临床合理用药提供依据。[方法]试验采用平板划线法对新疆部分地区的4个集约化养殖场171份样本(55份患病奶牛乳样本、116份环境样本)进行细菌分离纯化,采用形态学观察、革兰染色镜检、生化鉴定及分子生物学方法对大肠杆菌分离株进行鉴定,并利用微量肉汤稀释法及PCR法对大肠杆菌分离株进行16种抗菌药物的耐药表型及耐药基因分析。[结果]从171份样本中共分离出45株大肠杆菌,其中8株来自患病奶牛乳样本,分离率为14.55%(8/55),37株来自环境样本,分离率为31.90%(37/116)。所有分离株均呈粉红色圆形菌落,革兰染色镜检呈红色、短杆的革兰阴性菌。生化鉴定结果显示,分离菌乳糖、甘露醇、靛基质与MR检测呈阳性,氧化酶、H_2S、VP和西蒙氏柠檬酸盐检测呈阴性,符合大肠杆菌生化特点。药敏试验结果显示,大肠杆菌分离株对头孢噻吩、氨苄西林、链霉素和四环素表现不同程度的耐药性,耐药率分别为82.22%、48.89%、33.33%和33.33%,而对美罗培南、卡那霉素、庆大霉素、环丙沙星和复方新诺明表现较高的敏感性,敏感率均在85.00%以上,其中有16株大肠杆菌为多重耐药菌,多重耐药率为35.56%。耐药基因检测结果显示,大肠杆菌分离株β-内酰胺类耐药基因bla_(TEM)的阳性率为13.33%,氨基糖苷类耐药基因addA1和strA的阳性率分别为6.66%和11.11%,四环素类耐药基因tetA和tetC的阳性率分别为13.33%和33.33%。[结论]新疆部分地区奶牛养殖场分离的大肠杆菌主要对β-内酰胺类抗生素高度耐药,且多重耐药情况严重。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 大肠杆菌 药敏试验 耐药基因
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江苏省、山东省和安徽省禽致病性大肠杆菌的分子流行病学调查 被引量:1
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作者 邵立志 吉星 +5 位作者 孙利厂 朱树娇 王佳芸 何涛 王冉 杨章平 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第2期1-9,共9页
为了探明江苏省、山东省和安徽省鸡源禽致病性大肠杆菌(APEC)的分子流行病学特征,本试验于2023年从三省部分规模化鸡养殖场采集鸡粪便、鸡毛蛋、鸡卵黄以及病死鸡的鸡腿、骨髓、关节、心脏、脾脏、肺脏和肠道内容物样品共918份,使用选... 为了探明江苏省、山东省和安徽省鸡源禽致病性大肠杆菌(APEC)的分子流行病学特征,本试验于2023年从三省部分规模化鸡养殖场采集鸡粪便、鸡毛蛋、鸡卵黄以及病死鸡的鸡腿、骨髓、关节、心脏、脾脏、肺脏和肠道内容物样品共918份,使用选择性培养基分离APEC;利用微量肉汤稀释法测定分离菌株对常用抗菌药物的敏感性;基于全基因组测序分析分离菌株的耐药基因和毒力基因携带情况;通过多位点序列分型(MLST分型)、菌体(O)抗原分型和系统发育树分析分离菌株的主要流行特征。结果显示,共分离获得390株APEC,分离率为42.48%;分离菌株对氨苄西林(91.03%,355/390)、头孢噻呋(82.82%,323/390)、庆大霉素(81.03%,316/390)和四环素(77.95%,304/390)的耐药率较高,对美罗培南(0.51%,2/390)和黏菌素(3.08%,12/390)比较敏感,耐药基因以blaEC(98.97%,386/390)、blaTEM(80.00%,312/390)、aph(6)-Id(54.10%,211/390)、erm(D)(98.46%,384/390)、tet(A)(81.79%,319/390)和floR(63.33%,247/390)为主;毒力基因分析发现,所有分离菌株至少含有4种毒力基因。共鉴定出68种血清型,其中优势血清型为O78(11.03%,43/390)、O180(7.95%,31/390)和O15(7.18%,28/390),MLST共鉴定出71种ST型,主要的ST型为ST117(15.90%,62/390)、ST155(8.46%,33/390)和ST162(8.21%,32/390);系统发育树结果显示,分离菌株共分为4个进化分支,不同省份鸡养殖场分离菌株之间的遗传进化关系相距较远。结果表明,江苏省、山东省和安徽省鸡源APEC的流行血清型为O78、O180和O15,主要流行ST型为ST117,携带的耐药基因和毒力基因较多,鸡养殖场应当继续加强APEC的流行病学监测。 展开更多
关键词 禽致病性大肠杆菌(APEC) 耐药基因 毒力基因 血清型 流行病学调查
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猪源大肠杆菌耐药机制及流行特征的探讨 被引量:2
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作者 高英 卢军霞 +5 位作者 韩昱 胡晓悦 杨威 孙泰然 胡连霞 张宁 《国外畜牧学(猪与禽)》 2025年第2期48-53,共6页
大肠杆菌是一种常见的条件致病菌,广泛存在于人和动物的肠道中。本文对猪源大肠杆菌耐药特点、流行特征及耐药机制等进行了综述,以期为猪源大肠杆菌耐药控制提供参考。
关键词 大肠杆菌 耐药基因 耐药机制
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