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苦杏仁粕抑制产肠毒素性大肠埃希菌的作用机制
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作者 朱亚南 吴文婷 +4 位作者 王馨怡 张露 邱雪辉 王虎玄 易建华 《陕西科技大学学报》 北大核心 2025年第2期73-80,共8页
产肠毒素性大肠埃希菌(ETEC)是导致人畜腹泻的主要病原菌.本文以苦杏仁粕为原料,将其1%的提取液与ETEC H10407共同培养,研究苦杏仁粕对ETEC生长、形态等的影响,并利用转录组测序技术,探究苦杏仁粕提取液对ETEC中基因的转录表达的作用.... 产肠毒素性大肠埃希菌(ETEC)是导致人畜腹泻的主要病原菌.本文以苦杏仁粕为原料,将其1%的提取液与ETEC H10407共同培养,研究苦杏仁粕对ETEC生长、形态等的影响,并利用转录组测序技术,探究苦杏仁粕提取液对ETEC中基因的转录表达的作用.结果表明:1%的苦杏仁粕提取液可以显著抑制ETEC的生长,破坏菌体细胞形态,减少了脂肪酸合成、蛋白质翻译通路相关基因的表达,增加了细菌趋化性信号通路相关基因cheB、cheR,ABC转运蛋白途径中铁元素转运相关基因fecB、fecC、fecD等的表达.苦杏仁粕可能引发了ETEC的代谢紊乱,从而抑制了其生长.研究结果将为开发利用苦杏仁,用于ETEC的防治提供参考. 展开更多
关键词 苦杏仁粕 肠毒素大肠 差异基因表达
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大肠埃希菌不耐热肠毒素作为黏膜免疫佐剂的研究进展 被引量:11
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作者 赵艳敏 刘惠莉 《动物医学进展》 CSCD 2007年第3期46-50,共5页
免疫佐剂是一类通过刺激机体免疫系统而非特异性地增强机体对抗原免疫应答的活性物质,也是近年来研究的热点。免疫佐剂种类众多,利用细菌及其代谢产物作为黏膜免疫佐剂具有很好的发展前景,研究较多的是霍乱毒素(CT)和大肠埃希菌不耐热... 免疫佐剂是一类通过刺激机体免疫系统而非特异性地增强机体对抗原免疫应答的活性物质,也是近年来研究的热点。免疫佐剂种类众多,利用细菌及其代谢产物作为黏膜免疫佐剂具有很好的发展前景,研究较多的是霍乱毒素(CT)和大肠埃希菌不耐热肠毒素(LT),从研究效果看,LT比CT更为理想。但是LT和CT一样本身具有毒性,这是其作为黏膜佐剂的主要缺点。目前,国内外研究工作者对其突变体做了大量研究,以期找到具有黏膜佐剂活性但低毒或无毒的大肠埃希菌不耐热肠毒素突变体。文章对大肠埃希菌不耐热肠毒素分子及其突变体的研究做一综述。 展开更多
关键词 大肠埃希菌不耐热性肠毒素 黏膜免疫佐剂 突变体
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兔源肺炎克雷伯氏菌和大肠埃希氏菌的分离鉴定及小鼠感染试验
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作者 张鲁星 石晴晴 +5 位作者 陶梦珂 李苗苗 赵恒 胡功政 吴华 刘建华 《动物医学进展》 北大核心 2025年第1期55-61,共7页
为确定某规模化兔场仔兔呼吸道感染合并腹泻引起死亡的原因,无菌采集病兔气管、肺、肝组织进行病毒和细菌检测。通过细菌分离培养、革兰氏染色、生化鉴定、16S rRNA序列同源性比对分析,确定分离菌株种属。通过药物敏感性试验、耐药基因... 为确定某规模化兔场仔兔呼吸道感染合并腹泻引起死亡的原因,无菌采集病兔气管、肺、肝组织进行病毒和细菌检测。通过细菌分离培养、革兰氏染色、生化鉴定、16S rRNA序列同源性比对分析,确定分离菌株种属。通过药物敏感性试验、耐药基因检测及动物回归对分离菌株的耐药性和致病性进行分析。结果显示,病毒检测结果均为阴性;从同一只仔兔的肺脏、气管中分离得到2株肺炎克雷伯氏菌,分别将其命名为KF1、KQ2,从肝脏中分离得到1株大肠埃希氏菌并将其命名为EG3。药敏试验结果显示,菌株KF1、KQ2和EG3均对黏菌素和氨苄青霉素钠耐药,对阿米卡星和氟苯尼考敏感。3株菌均检出耐药基因mcr-1和bla TEM。动物致病性试验显示,KF1组小鼠5 h后死亡50%,24 h全部死亡;混合组小鼠12 h后全部死亡;KQ2和EG3组48 h全部死亡。以上研究表明,大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌的混合感染是引起仔兔死亡的主要原因,3株分离株单独及混合感染均能引起试验小鼠死亡。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯氏 大肠 分离鉴定 耐药基因
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湖北省某鸽场大肠埃希氏菌的分离鉴定与耐药性分析
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作者 王娟 卢琴 +3 位作者 张记高 程伊洛 张腾飞 刘静波 《动物医学进展》 北大核心 2025年第5期134-138,共5页
大肠杆菌病是危害鸽养殖业的重要细菌性传染病,然而相关的流行及耐药数据却相对较少。为研究湖北省鸽场大肠埃希氏菌的流行及耐药情况,采集了肉鸽屠宰后的肝、脾、肠内容物等285份,经伊红美蓝琼脂培养基分离培养,通过PCR鉴定,分离到了19... 大肠杆菌病是危害鸽养殖业的重要细菌性传染病,然而相关的流行及耐药数据却相对较少。为研究湖北省鸽场大肠埃希氏菌的流行及耐药情况,采集了肉鸽屠宰后的肝、脾、肠内容物等285份,经伊红美蓝琼脂培养基分离培养,通过PCR鉴定,分离到了199株鸽源大肠埃希氏菌,分离率为69.82%。经过双重PCR扩增对菌株进行系统进化群鉴定,筛选出高致病群菌株60株(B2群34株,D群26株),占分离株的30.15%。采用药敏纸片法对60株高致病群菌株进行了12种抗菌药物的耐药性分析,结果表明,这些菌株对林可霉素、氟苯尼考、四环素、氨苄西林、红霉素和甲氧苄氨嘧啶的耐药率高于95%,而对大观霉素、替加环素、头孢噻肟、环丙沙星、多黏菌素B和美罗培南等较为敏感。所有菌株均耐3种以上的抗菌药物,最多可耐9种抗菌药物,其中51.67%的菌株耐6种抗菌药物,占比最多。研究结果可为湖北省鸽场大肠杆菌病的预防与合理用药提供科学数据。 展开更多
关键词 大肠 分离鉴定 致病群 耐药性
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反季节雏鹅大肠埃希菌病的细菌分离鉴定、毒力基因与耐药性分析
5
作者 刘心怡 朱洁 +2 位作者 叶鹏飞 刘欣超 赵磊 《中国动物保健》 2025年第1期220-222,共3页
为鉴定安徽某鹅场反季节雏鹅发生早期浆膜炎的病原菌及分析其毒力基因和耐药性情况,本研究对病死雏鹅肝组织进行细菌分离培养,采用染色镜检、16Sr RNA测序鉴定、毒力基因检测及药物敏感试验开展细菌相关特性鉴定。本研究分离的致病性大... 为鉴定安徽某鹅场反季节雏鹅发生早期浆膜炎的病原菌及分析其毒力基因和耐药性情况,本研究对病死雏鹅肝组织进行细菌分离培养,采用染色镜检、16Sr RNA测序鉴定、毒力基因检测及药物敏感试验开展细菌相关特性鉴定。本研究分离的致病性大肠埃希菌携带多种毒力基因且具有广泛的耐药性,养殖反季节鹅应注重科学防控大肠埃希菌病。 展开更多
关键词 反季节 雏鹅 大肠 毒力基因 耐药性
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200味中药及复方对大肠埃希菌体外抑菌实验的研究
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作者 兰新财 陈欣 +4 位作者 缪雨臻 卢骏 赵丽丽 姚红健 叶菁 《中国兽药杂志》 2025年第2期23-31,共9页
为研究中药及其复方对大肠埃希菌的抑菌效果,优选常用200味中药,采用“中药管皿法”进行体外抑菌试验。结果表明:乌梅、木瓜、五倍子等16味中药对大肠埃希菌有明显的抑菌作用;在中兽医辨证论治方法和君臣佐使组方原则指导下,将这16味中... 为研究中药及其复方对大肠埃希菌的抑菌效果,优选常用200味中药,采用“中药管皿法”进行体外抑菌试验。结果表明:乌梅、木瓜、五倍子等16味中药对大肠埃希菌有明显的抑菌作用;在中兽医辨证论治方法和君臣佐使组方原则指导下,将这16味中药组成7个复方和3个成方制剂。进一步进行体外抑菌试验。结果显示复方A1、B1、A2、B2、J1抑菌效果显著。本研究为中兽药替抗产品开发提供依据。 展开更多
关键词 中药 复方 大肠 实验研究
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中草药对鸡大肠埃希菌疾病防治的研究进展
7
作者 郑茹 刘南 许国庆 《中国动物保健》 2025年第3期97-98,共2页
传统治疗鸡大肠埃希菌的方式以抗菌药物为主,长期大量使用抗菌药物会使其产生较强的抗药性,严重降低了抗菌药物的控制效果,而鸡、蛋制品中也会产生大量的药物残留,严重危害人体健康。利用中药防治大肠埃希菌,可防止产生抗药性,使畜产品... 传统治疗鸡大肠埃希菌的方式以抗菌药物为主,长期大量使用抗菌药物会使其产生较强的抗药性,严重降低了抗菌药物的控制效果,而鸡、蛋制品中也会产生大量的药物残留,严重危害人体健康。利用中药防治大肠埃希菌,可防止产生抗药性,使畜产品中无药残留。本文综述了近年来中药对鸡源大肠埃希菌疾病防治的研究进展。 展开更多
关键词 中草药 大肠疾病 防治 进展
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实时荧光定量PCR快速检测药品中大肠埃希菌
8
作者 李杰 张华 +3 位作者 林鹏 王家芳 肖艳霞 钱云开 《食品与药品》 2025年第2期126-131,共6页
目的 建立一种药品中大肠埃希菌的实时荧光定量PCR快速检测方法。方法 根据大肠埃希菌malB基因序列,设计通用引物和探针,优化扩增反应体系,进行实时荧光定量PCR扩增,当出现C_t值时,说明供试品中检出大肠埃希菌。结果 大肠埃希菌基因组DN... 目的 建立一种药品中大肠埃希菌的实时荧光定量PCR快速检测方法。方法 根据大肠埃希菌malB基因序列,设计通用引物和探针,优化扩增反应体系,进行实时荧光定量PCR扩增,当出现C_t值时,说明供试品中检出大肠埃希菌。结果 大肠埃希菌基因组DNA检测限可达10^(-3 )ng,药品中大肠埃希菌检测限达3 cfu/g(ml),仅需24 h即可完成检测,采用该方法检测20批药品,结果与药典方法一致。结论 方法检测特异性强、所需时间短、灵敏度高,可作为《中国药典》大肠埃希菌检查法的补充方法。 展开更多
关键词 中国药典 药品 大肠 实时荧光定量PCR 检测
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甘孜州白玉县马麝源大肠埃希菌的分离鉴定及耐药性分析
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作者 范斌 周贵凤 +2 位作者 肖启程 唐灿 陶明雪 《中国动物保健》 2025年第2期243-244,共2页
马麝是我国特有种,为了解野生马麝的肠道菌群,并对其耐药性特点进行检测分析,本试验采集甘孜州白玉县野外马麝粪便进行大肠埃希菌的分离鉴定,并获取了16株大肠埃希菌;药敏试验发现,菌株对诺氟沙星、庆大霉素、阿米卡星、多粘菌素B高度敏... 马麝是我国特有种,为了解野生马麝的肠道菌群,并对其耐药性特点进行检测分析,本试验采集甘孜州白玉县野外马麝粪便进行大肠埃希菌的分离鉴定,并获取了16株大肠埃希菌;药敏试验发现,菌株对诺氟沙星、庆大霉素、阿米卡星、多粘菌素B高度敏感,对头孢唑啉、复方新诺明、呋喃妥因低度敏感、对青霉素、氯霉素、四环素和红霉素有耐药性。 展开更多
关键词 大肠 分离鉴定 马麝 耐药性分析
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腹泻病例致泻性大肠埃希氏菌感染状况及耐药性分析
10
作者 李晶晶 崔玉娟 张莹 《食品安全导刊》 2025年第3期45-48,94,共5页
目的:分析2019—2021年延庆区腹泻病例致泻性大肠埃希氏菌感染状况和耐药性。方法:现收集2019年1月—2021年12月延庆区医院内收治的腹泻患者肛拭子标本和粪便标本,进行荧光定量PCR检测,鉴定标本中致泻性大肠埃希氏菌的分型,对致泻性大... 目的:分析2019—2021年延庆区腹泻病例致泻性大肠埃希氏菌感染状况和耐药性。方法:现收集2019年1月—2021年12月延庆区医院内收治的腹泻患者肛拭子标本和粪便标本,进行荧光定量PCR检测,鉴定标本中致泻性大肠埃希氏菌的分型,对致泻性大肠埃希氏菌的耐药性进行分析。结果:2019—2021年共计1112例样本,肠集聚性黏附性大肠埃希菌(Enteroaggregative Escherichia coli,EAEC)检出率为5.57%,肠道致病性大肠埃希菌(Enteropathogenic Escherichia coli,EPEC)检出率为1.80%、产肠毒素性大肠埃希菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)检出率为1.35%,肠道侵袭性大肠埃希菌(Enteroinvasive Escherichia coli,EIEC)检出率为0.27%,未检测出肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC);2019年6月检出率最高,2020年7月、8月检出率最高,2021年7月检出率最高;2019年36株致泻性大肠埃希氏菌(Diarrheagenic Escherichia coli,DEC)对磺胺异噁唑耐药率(91.7%)最高,2020年32株DEC对磺胺异噁唑的耐药率(100.0%)最高,2021年32株DEC对萘啶酸的耐药率(75.0%)最高。结论:2019—2021年延庆区腹泻病例致泻性大肠埃希氏菌感染状况基本稳定,且其耐药性方面获得了较好的控制,临床效果比较明显。 展开更多
关键词 腹泻病例 致泻性大肠 耐药性
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大肠埃希菌不耐热肠毒素研究进展 被引量:6
11
作者 张莹丹 徐维明 李健峰 《动物医学进展》 CSCD 2007年第2期85-88,共4页
大肠埃希菌不耐热肠毒素(LT)是产毒性大肠埃希菌产生的一种能导致人畜腹泻的毒素,由六聚体蛋白形成AB5型结构。A亚基具有ADP-核糖基转移酶活性,而B亚基为五聚体,主要与表达于真核细胞表面的神经节苷脂GM1结合。LT具有很强的免疫原性和... 大肠埃希菌不耐热肠毒素(LT)是产毒性大肠埃希菌产生的一种能导致人畜腹泻的毒素,由六聚体蛋白形成AB5型结构。A亚基具有ADP-核糖基转移酶活性,而B亚基为五聚体,主要与表达于真核细胞表面的神经节苷脂GM1结合。LT具有很强的免疫原性和黏膜免疫佐剂活性。为了将其毒性与佐剂活性分开,研究者构建了一系列无毒或减毒的突变体。证明突变体具有佐剂活性,并发现没有毒性的AB复合物以及酶活性在佐剂活性中发挥的作用是分开的。野生型LT、LT突变体以及B亚基与外源抗原共同免疫机体后,对机体免疫系统具有调节作用。 展开更多
关键词 大肠菌不耐热肠毒素 黏膜免疫佐剂 突变体 免疫反应
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产肠毒素大肠埃希菌STa-K99融合蛋白重组腺病毒载体的构建及表达 被引量:2
12
作者 邓光存 包少文 +3 位作者 杨继辉 曾瑾 李武 刘晓明 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第10期30-36,共7页
为构建产肠毒素大肠埃希菌(ETEC)STa-K99融合蛋白重组腺病毒载体Ad STa-K99,通过PCR技术分别克隆了STa及K99基因,并与腺病毒穿梭质粒连接构建了穿梭质粒pAd5 STa-K99,将pAd5STa-K99和骨架质粒(含GFP基因)分别用PacⅠ酶切线性化,利用Lipo... 为构建产肠毒素大肠埃希菌(ETEC)STa-K99融合蛋白重组腺病毒载体Ad STa-K99,通过PCR技术分别克隆了STa及K99基因,并与腺病毒穿梭质粒连接构建了穿梭质粒pAd5 STa-K99,将pAd5STa-K99和骨架质粒(含GFP基因)分别用PacⅠ酶切线性化,利用LipofectamineTM LTX&PLUS共转染293细胞进行同源重组包装重组腺病毒,通过PCR及Western blot对重组腺病毒进行鉴定。结果显示,重组腺病毒Ad5STa-K99构建正确并表达融合蛋白,且表达的融合蛋白能够被抗体所识别,为研制由ETEC引起的新生动物腹泻重组腺病毒载体疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 肠毒素大肠 耐热性肠毒素 黏附素 重组腺病毒载体
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鸡抗猪产肠毒素大肠埃希菌-沙门菌二联五价卵黄抗体的变化规律及喷干工艺的研究 被引量:1
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作者 程福亮 梁瑾 +4 位作者 陈甜甜 宿志瑞 范群平 聂兆晶 谷巍 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第3期80-84,共5页
为获得具有一定保护力的外源性抗体制剂,用于防治仔猪腹泻,利用产肠毒素大肠埃希菌(ETEC)标准菌株K88、K99、987P和导致仔猪副伤寒的2株沙门菌,制备产毒素大肠埃希菌-沙门菌二联五价的灭活苗,免疫接种待开产母鸡400羽,聚乙二醇沉淀法分... 为获得具有一定保护力的外源性抗体制剂,用于防治仔猪腹泻,利用产肠毒素大肠埃希菌(ETEC)标准菌株K88、K99、987P和导致仔猪副伤寒的2株沙门菌,制备产毒素大肠埃希菌-沙门菌二联五价的灭活苗,免疫接种待开产母鸡400羽,聚乙二醇沉淀法分离纯化卵黄抗体,然后采用直接试管凝集法检测不同时间的卵黄抗体(IgY)效价。将试验结束后无菌收集的全蛋液稀释过滤后,按照喷干设备进口温度165℃,出口温度85℃进行喷雾干燥,制备卵黄抗体粉,并对其进行表观性状及相关指标的测定。结果表明,免疫接种蛋鸡后,卵黄液中抗体IgY的效价呈现规律性变化,喷雾干燥获得的卵黄抗体粉表观性状较好,粗蛋白含量为12.6%,体外消化率高达95%,IgY的效价为1∶29。通过3次免疫接种获得了高免卵黄抗体,并进行了全蛋喷雾干燥工艺的摸索,制备出了效价较高的抗体制剂,为预防和治疗仔猪腹泻提供了一条途径。 展开更多
关键词 肠毒素大肠 沙门 卵黄抗体 变化规律 生产工艺
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大肠埃希菌热敏性肠毒素B亚基研究进展 被引量:3
14
作者 唐思静 刘惠莉 《动物医学进展》 CSCD 2008年第2期68-72,共5页
产肠毒素大肠埃希菌(EnterotoxigenicE.coil,ETEC)是引起幼畜、婴幼儿及旅游者腹泻的重要病原之一。ETEC产生两类肠毒素,一种是对热敏感的热敏性肠毒素(heat-labile enterotoxin,LT),另一种是对热不敏感的耐热性肠毒素(heat-stable ente... 产肠毒素大肠埃希菌(EnterotoxigenicE.coil,ETEC)是引起幼畜、婴幼儿及旅游者腹泻的重要病原之一。ETEC产生两类肠毒素,一种是对热敏感的热敏性肠毒素(heat-labile enterotoxin,LT),另一种是对热不敏感的耐热性肠毒素(heat-stable enterotoxin,ST)。LT不仅是ETEC主要的毒力因子,而且还是一种重要的黏膜佐剂,它由A、B亚基组成,由于LT A具有毒性作用,限制了LT作为黏膜免疫佐剂的应用;而LT B无毒且具有黏膜佐剂活性,使其成为备受关注的佐剂之一。近年来对LT B的结构、介导的免疫调节分子机制、突变体及其佐剂作用已进行了较为深入的研究,为充分利用LT B的黏膜免疫佐剂功能奠定了基础。 展开更多
关键词 大肠热敏性肠毒素B亚基 免疫机制 免疫原性 佐剂作用
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多重实时聚合酶链式反应法快速检测食品中的产志贺毒素大肠埃希氏菌
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作者 赵芳 牛娜 +4 位作者 刘莹 涂晓波 刘慧玲 金晓蕾 吕敬章 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第21期294-300,共7页
目的建立多重实时聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法快速检测食品中的产志贺毒素大肠埃希氏菌(Shiga toxin-producing Escherichiacoli,STEC)的方法。方法以产志贺毒素大肠埃希氏菌携带的毒力基因stx1、stx2和黏附基因ea... 目的建立多重实时聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法快速检测食品中的产志贺毒素大肠埃希氏菌(Shiga toxin-producing Escherichiacoli,STEC)的方法。方法以产志贺毒素大肠埃希氏菌携带的毒力基因stx1、stx2和黏附基因eae靶基因引物探针建立多重实时PCR体系,并采用原位冻干技术将PCR反应体系和阳性质控品进行了预先分装冻干,制成稳定、便捷的即用型反应体系,随后对方法的灵敏性、特异性和稳定性进行评价。结果所建立的多重实时PCR法检测eae、stx1、stx2基因的灵敏性为102 CFU/mL。与32种非STEC菌均无交叉反应。整体检测时长可控制在1 h以内,冻干体系可在常温条件下保存1年以上。结论本方法快速、简便,适用于测定食品中的STEC。 展开更多
关键词 快速检测 多重实时聚合酶链反应技术 产志贺毒素大肠 冻干
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肠毒性大肠埃希菌肠毒素LTa基因特异性EMA-PCR检测方法的建立
16
作者 赵素君 曹冶 +6 位作者 谢晶 李江凌 王秋实 叶勇刚 罗丹丹 叶健强 廖党金 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第11期8-11,共4页
由于传统PCR技术无法区分样品中的死细菌与活细菌,为避免因样品中含有死细菌而造成的假阳性检测结果,本研究根据肠毒性大肠埃希菌(ETEC)不耐热肠毒素LTa基因设计特异性引物,利用叠氮溴乙锭(EMA)处理菌液,沸水浴法制备细菌裂解液,优化PC... 由于传统PCR技术无法区分样品中的死细菌与活细菌,为避免因样品中含有死细菌而造成的假阳性检测结果,本研究根据肠毒性大肠埃希菌(ETEC)不耐热肠毒素LTa基因设计特异性引物,利用叠氮溴乙锭(EMA)处理菌液,沸水浴法制备细菌裂解液,优化PCR条件,建立一种检测肠毒性大肠埃希菌活菌肠毒素基因的EMA-PCR方法。肠毒性大肠埃希菌CVCC196、CVCC197、CVCC200均能扩增出大小为438bp的特异性条带,而其他对照菌株未扩增出条带。经EMA处理,除了完全死菌组外,含有10mL/L~1 000mL/L活菌的混合悬液均可扩增出目的片段。因此,成功建立了一种快速、有效的检测肠毒性大肠埃希菌活菌肠毒素基因的EMA-PCR方法,该方法较传统PCR大大提高了检测的准确性,灵敏度可达19cfu/mL。 展开更多
关键词 肠毒性大肠 耐热肠毒素基因 叠氮溴乙锭-聚合酶链反应 检测
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北京某医院感染性腹泻患者致泻性大肠埃希菌毒力和耐药特征分析 被引量:1
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作者 马思宇 马立艳 +3 位作者 罗虎 周妍妍 王雅轩 苏建荣 《临床检验杂志》 CAS 2024年第1期43-47,共5页
目的明确本院感染性腹泻患者致泻性大肠埃希菌毒力和耐药特征。方法采用VITEK MS微生物质谱检测系统初步鉴定,多重实时荧光PCR检测毒力基因,对本院感染性腹泻患者临床分离的致泻性大肠埃希菌(Diarrheagenic Escherichia coli,DEC)进行5... 目的明确本院感染性腹泻患者致泻性大肠埃希菌毒力和耐药特征。方法采用VITEK MS微生物质谱检测系统初步鉴定,多重实时荧光PCR检测毒力基因,对本院感染性腹泻患者临床分离的致泻性大肠埃希菌(Diarrheagenic Escherichia coli,DEC)进行5种型别鉴定。微量肉汤稀释法和E-test法药敏试验检测DEC菌株的耐药表型特征。二代测序及生物信息学分析其耐药分子特征。采用Fisher确切概率法进行统计学分析。结果本院DEC检出率为11.9%,其中EAEC占比37.5%,非典型EPEC占比34.38%,ETEC占比25.0%,EIEC占比3.12%,未检出EHEC菌株。32株DEC对氨苄西林、四环素、甲氨苄啶/磺胺异恶唑耐药率最高,分别为53.12%、43.75%和37.5%。ESBLs(+)株占比18.75%,其多重耐药菌株检出率为83.83%,显著高于ESBLs(-)菌株,差异有统计学意义(P=0.042)。32株DEC共有25个ST型,优势基因型为ST10共4株(12.5%),ST28、ST31和ST3153各2株(各占比6.25%),其他21个型别各1株菌(各占比3.13%)。EAEC中检出1株携带bla_(NDM-1)的耐碳青霉烯类菌株。结论我院感染性腹泻患者的DEC以aggR、pic、astA、eae 4种毒力基因较为常见,以EAEC、EPEC为主要型别,基因型别呈高度多态性,检出多重耐药菌株。 展开更多
关键词 致泻性大肠 毒力基因 耐药基因
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大肠埃希氏菌疫苗生产用菌种种子批的建立与鉴定
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作者 刘泽文 袁芳艳 +8 位作者 刘威 高婷 杨克礼 郭锐 李畅 吴琼 朱佳佳 田永祥 周丹娜 《动物医学进展》 北大核心 2024年第12期39-43,共5页
为了研制仔猪大肠杆菌病三价(K88+K99+987P)灭活疫苗,以大肠埃希氏菌生产菌种C83549(k88)第2代和C83644(k99)、C83710(987p)第3代基础种子作为原始种子,建立了用于仔猪大肠杆菌病疫苗生产的大肠埃希氏菌基础种子批,分别对种子批的F1、F5... 为了研制仔猪大肠杆菌病三价(K88+K99+987P)灭活疫苗,以大肠埃希氏菌生产菌种C83549(k88)第2代和C83644(k99)、C83710(987p)第3代基础种子作为原始种子,建立了用于仔猪大肠杆菌病疫苗生产的大肠埃希氏菌基础种子批,分别对种子批的F1、F5、F10、F13代进行了全面鉴定。结果表明,各代种子的培养特性、生化特性均符合大肠埃希氏菌特征,抗原结构分别为C83549(O149∶K88)、C83644(O68∶K99)和C83710(O9∶987P);各代次菌株的菌毛抗原RIHA单位≥800,菌种免疫原性鉴定合格;各菌株经口服途径灌服1.5×10^(10)CFU/头,可引起仔猪100%发病。因此,3个菌株均可用作仔猪大肠杆菌病三价(K88+K99+987P)灭活疫苗生产的菌种。 展开更多
关键词 大肠 种子批 建立 鉴定
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肠道集聚性大肠埃希氏菌标准物质的研制
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作者 马丽侠 胡雅琴 +6 位作者 蒋子敬 林华 叶德萍 易艳 汤江文 姜展樾 周李华 《中国测试》 北大核心 2024年第S2期116-122,共7页
研制了3种肠道集聚性大肠埃希氏菌质粒DNA标准物质,选取肠道集聚性大肠埃希氏菌中的毒力基因ast A、agg R、pic分别构建质粒DNA标准物质,采用数字PCR技术对质粒DNA进行均匀性评估及不同温度下(-20℃,4℃,25℃,37℃)的短期(14 d)和-20℃... 研制了3种肠道集聚性大肠埃希氏菌质粒DNA标准物质,选取肠道集聚性大肠埃希氏菌中的毒力基因ast A、agg R、pic分别构建质粒DNA标准物质,采用数字PCR技术对质粒DNA进行均匀性评估及不同温度下(-20℃,4℃,25℃,37℃)的短期(14 d)和-20℃长期(24个月)稳定性检验,联合10家实验室定值。结果显示,研制的致泻大肠埃希氏菌ast A、agg R、pic质粒DNA标准物质均匀性良好,在-20℃温度下可以储存24个月;定值结果:ast A拷贝数浓度为(2.29±0.36)×10^(7) copies/μL;agg R拷贝数浓度为(2.13±0.33)×10^(7) copies/μL;pic拷贝数浓度为(2.35±0.37)×10^(7) copies/μL。研制的标准物质适用于微生物肠道集聚性大肠埃希氏菌ast A、agg R、pic定量检测、方法评价和定性检测中的阳性对照。 展开更多
关键词 质粒DNA 标准物质 数字PCR 大肠
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生鲜牛乳中产肠毒素大肠埃希菌环介导等温扩增技术的建立与应用 被引量:3
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作者 林芳明 蔡其刚 +1 位作者 张红见 赵静 《动物医学进展》 北大核心 2019年第2期55-59,共5页
为了快速检测生鲜牛乳中的产肠毒素大肠埃希菌(enterotoxigenic E.coli,ETEC),防止食源性产肠毒素大肠埃希菌给人类造成的危害,建立快速检测不耐热型产肠毒素大肠埃希菌的环介导等温扩增方法(LAMP)。敏感性和特异性试验结果表明,该方法... 为了快速检测生鲜牛乳中的产肠毒素大肠埃希菌(enterotoxigenic E.coli,ETEC),防止食源性产肠毒素大肠埃希菌给人类造成的危害,建立快速检测不耐热型产肠毒素大肠埃希菌的环介导等温扩增方法(LAMP)。敏感性和特异性试验结果表明,该方法敏感性高,特异性强,能够从生鲜牛乳中检测到1pg产肠毒素大肠埃希菌DNA,与其他型大肠埃希菌及细菌不发生交叉反应。利用建立的LAMP技术对来自西宁市奶牛场及自由市场的21份生鲜牛乳样品进行检测,6份样品呈阳性,阳性检出率为28.6%,从分子水平为生鲜牛乳中产肠毒素大肠埃希菌的检测提供了一种快速、准确的手段,对保障生鲜牛乳的食品安全有重要意义。 展开更多
关键词 环介导等温扩增 肠毒素大肠 生鲜牛乳
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