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大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤病毒(WDSV)逆转录病毒周期蛋白(OrfA)相互作用蛋白的酵母双杂交筛选
被引量：
5
1
作者
徐坤
王亮亮
+3 位作者
张婷婷
周罡
张志强
张智英
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期267-275,共9页
大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤(WDS)在秋季发生春季萎缩的季节性生长特点与大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤病毒(WDSV)辅助基因的表达有关.其中辅助基因orfA的表达产物OrfA蛋白可能是1个潜在的肿瘤相关因子,OrfA与细胞周期蛋白cyclin A和cyclin D同源,也被称...
大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤(WDS)在秋季发生春季萎缩的季节性生长特点与大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤病毒(WDSV)辅助基因的表达有关.其中辅助基因orfA的表达产物OrfA蛋白可能是1个潜在的肿瘤相关因子,OrfA与细胞周期蛋白cyclin A和cyclin D同源,也被称为逆转录病毒周期蛋白(retroviral-cyclin).为了深入研究OrfA的作用和功能,我们构建了诱饵表达载体pGBKT7-orfA,采用酵母双杂交技术,从HeLa cDNA文库中筛选与其相互的蛋白因子.通过2轮高强度压力的筛选、β-半乳糖苷酶活性验证、回转验证以及测序分析,最终获得了1个与OrfA相互作用的转录因子E2F5.OrfA C端78个氨基酸的多肽或者缺失C端78个氨基酸的OrfA突变体均不能在酵母双杂交系统中与E2F5相互作用.这些发现为进一步研究OrfA在肿瘤萎缩中的功能奠定了基础.
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关键词
大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤病毒
逆转录
病毒
周期蛋白(OrfA)
酵母双杂交
E2F5转录因子
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职称材料
题名
大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤病毒(WDSV)逆转录病毒周期蛋白(OrfA)相互作用蛋白的酵母双杂交筛选
被引量：
5
1
作者
徐坤
王亮亮
张婷婷
周罡
张志强
张智英
机构
西北农林科技大学动物科技学院
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期267-275,共9页
基金
国家自然科学基金(No.30870119)资助项目~~
文摘
大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤(WDS)在秋季发生春季萎缩的季节性生长特点与大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤病毒(WDSV)辅助基因的表达有关.其中辅助基因orfA的表达产物OrfA蛋白可能是1个潜在的肿瘤相关因子,OrfA与细胞周期蛋白cyclin A和cyclin D同源,也被称为逆转录病毒周期蛋白(retroviral-cyclin).为了深入研究OrfA的作用和功能,我们构建了诱饵表达载体pGBKT7-orfA,采用酵母双杂交技术,从HeLa cDNA文库中筛选与其相互的蛋白因子.通过2轮高强度压力的筛选、β-半乳糖苷酶活性验证、回转验证以及测序分析,最终获得了1个与OrfA相互作用的转录因子E2F5.OrfA C端78个氨基酸的多肽或者缺失C端78个氨基酸的OrfA突变体均不能在酵母双杂交系统中与E2F5相互作用.这些发现为进一步研究OrfA在肿瘤萎缩中的功能奠定了基础.
关键词
大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤病毒
逆转录
病毒
周期蛋白(OrfA)
酵母双杂交
E2F5转录因子
Keywords
walleye dermal sarcoma virus（WDSV）
retroviral-cyclin（OrfA）
yeast two hybrid
E2F5 transcription factor
分类号
Q74 [生物学—分子生物学]
R730.2 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤病毒(WDSV)逆转录病毒周期蛋白(OrfA)相互作用蛋白的酵母双杂交筛选
徐坤
王亮亮
张婷婷
周罡
张志强
张智英
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
5
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